基于MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1通路探讨三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型的影响

陆慧敏; 孙文熙; 霍晨星; 陈宝艳

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20201966

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基于MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1通路探讨三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型的影响

药理 | 更新时间：2020-12-10

- 基于MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1通路探讨三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型的影响
- Effect of Panax Notoginseng Saponins on Breast Cancer Cell Line 4T1 in Tumor-bearing Mice Through MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1 Pathway
- 中国实验方剂学杂志 2020年26卷第24期页码：75-81
- 作者机构：
  
  1.广州中医药大学第一附属医院，广州 510405
  2.广州中医药大学针灸康复临床医学院，广州 510405
  3.广州中医药大学第一临床医学院，广州 510405
- 作者简介：
  
  * 陆慧敏，硕士，住院医师，从事中西医结合防治乳腺疾病研究，E-mail：248129295@qq.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(81603653)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20201966
  中图分类号： R22;R242;R2-031;R285.5
- 收稿日期：2019-12-31，
  
  网络出版日期：2020-07-23，
  
  纸质出版日期：2020-12-20
- 稿件说明：
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陆慧敏,孙文熙,霍晨星等.基于MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1通路探讨三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型的影响[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(24):75-81.

LU Hui-min,SUN Wen-xi,HUO Chen-xing,et al.Effect of Panax Notoginseng Saponins on Breast Cancer Cell Line 4T1 in Tumor-bearing Mice Through MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1 Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(24):75-81.
陆慧敏,孙文熙,霍晨星等.基于MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1通路探讨三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型的影响[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(24):75-81. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20201966.

LU Hui-min,SUN Wen-xi,HUO Chen-xing,et al.Effect of Panax Notoginseng Saponins on Breast Cancer Cell Line 4T1 in Tumor-bearing Mice Through MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1 Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(24):75-81. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20201966.

摘要

目的

通过研究三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠促分裂原激活的蛋白激酶的激酶1（MEKK1）/应激激活的蛋白激酶/细胞外信号调节的蛋白激酶（SAPK/Erk激酶，SEK1）/c-Jun氨基末端激酶1（JNK1）/激活蛋白-1（AP-1）通路的影响，探讨三七总皂苷抑制肿瘤的可能机制。

方法

建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型，将48只造模成功的小鼠随机分为三七总皂苷低、中、高剂量组（10，20，40 mg

-1

）和模型组，每组12只，三七总皂苷各剂量组腹腔注射剂量为10 mL

-1

，模型组给予相同剂量的生理盐水，连续给药28 d。给药结束后分离肿瘤组织、称质量、切片、匀浆等，采用脱氧核苷酸末端转移酶（TdT）介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）染色检测肿瘤细胞凋亡；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织MEKK1，SEK1，JNK1，AP-1 mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤组织MEKK1，SEK1，JNK1，AP-1蛋白表达。

结果

与模型组比较，三七总皂苷中、高剂量组的肿瘤质量明显下降（

0.05）；肿瘤细胞凋亡数量随三七总皂苷剂量的升高明显升高（

0.05）；三七总皂苷中、高剂量组肿瘤组织中MEKK1，SEK1，JNK1，AP-1 mRNA和蛋白表达明显升高（

0.05）。

结论

三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型具有抑制作用，其作用机制可能与激活MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1信号通路有关。

Abstract

Objective

To explore the potential mechanisms of Panax Notoginseng Saponins （PNS） on growth inhibition of breast cancer cell line 4T1 in tumor-bearing mice by investigating the mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1 （MEKK1）/stress activated protein kinase （SAPK）/extracellular regulated protein kinases （Erk） Kinase （SEK1）/c-Jun

-terminal kinase 1 （JNK1）/activator protein-1 （AP-1） signaling pathways.

Method

The 4T1 breast cancer mice model was established. Forty-eight mice with successful modeled and randomly divided into the low， medium and high-dose PNS groups （10， 20， 40 mg

-1

） and the model control group （12 mice in each group）. The PNS groups received intraperitoneal injection with dosage of 10 mL

-1

， while the controlled group was given the same dosage of saline. After administration with PNS for 28 days， tumor tissues were isolated， weighed， sliced and homogenized. Tumor cell apoptosis was detected by TdT mediated-dUTP nick end labeling （TUNEL） staining. The mRNA expressions of MEKK1， SEK1， JNK1 and AP-1 in tumor tissue were detected by Real-time polymerase chain reaction（Real-time PCR）. The protein expressions of MEKK1， SEK1， JNK1 and AP-1 in tumor tissue were detected by immunofluorescence staining and Western blot.

Result

Compared with model group， the tumor weights of medium-dose and high-dose PNS groups were decreased significantly （

0.05）. TUNEL staining showed that the number of apoptotic tumor cells increased with the rise of dosage of PNS （

0.05）. The medium-dose and high-dose PNS groups showed a significant increase in the mRNA expressions of MEKK1， SEK1， JNK1 and AP-1 as well as the protein expressions of MEKK1， SEK1， JNK1 and AP-1 in tumor tissues （

0.05）， with statistically significant differences （

0.05）.

Conclusion

PNS could inhibit the tumor growth of breast cancer cell line 4T1 in tumor-bearing mice， which may be related to the activation of MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1 signaling pathways.

关键词

Keywords

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