加味升降散对膜性肾病大鼠Notch信号通路及足细胞凋亡的影响

高飞; 王泽泽; 杨冰; 杨凤文; 檀金川

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20202408

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加味升降散对膜性肾病大鼠Notch信号通路及足细胞凋亡的影响

经典名方 | 更新时间：2021-12-03

- 加味升降散对膜性肾病大鼠Notch信号通路及足细胞凋亡的影响
- Effect of Modified Shengjiangsan on Notch Signal Pathway and Podocyte Apoptosis in MN Rats
- 中国实验方剂学杂志 2021年27卷第4期页码：30-36
- 作者机构：
  
  1.河北中医学院，石家庄 050200
  2.河北省中医院，石家庄 050011
- 作者简介：
  
  高飞，在读博士，从事中西医结合肾病研究，E-mail：595363137@qq.com
  * 檀金川，教授，博士生导师，从事中西医结合肾病研究，E-mail：1955981973@qq.com
- 基金信息：
  
  河北省自然科学基金项目(2019423037);河北省中医药管理局项目(2018024)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20202408
  中图分类号： R2-0;R22;R285.5;R289
- 收稿日期：2020-09-21，
  
  网络出版日期：2020-11-06，
  
  纸质出版日期：2021-02-20
- 稿件说明：
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高飞,王泽泽,杨冰等.加味升降散对膜性肾病大鼠Notch信号通路及足细胞凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(04):30-36.

GAO Fei,WANG Ze-ze,YANG Bing,et al.Effect of Modified Shengjiangsan on Notch Signal Pathway and Podocyte Apoptosis in MN Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(04):30-36.
高飞,王泽泽,杨冰等.加味升降散对膜性肾病大鼠Notch信号通路及足细胞凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(04):30-36. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202408.

GAO Fei,WANG Ze-ze,YANG Bing,et al.Effect of Modified Shengjiangsan on Notch Signal Pathway and Podocyte Apoptosis in MN Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(04):30-36. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202408.

摘要

目的

通过研究加味升降散对膜性肾病（MN）模型大鼠Notch通路信号分子及下游凋亡相关基因的影响，探讨其抑制足细胞凋亡的分子机制。

方法

将大鼠随机分为正常组，模型组，加味升降散组和贝那普利组，每组10只。采用尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）建立MN大鼠模型，加味升降散组和贝那普利组分别以27.3，0.001 g·kg

-1

灌胃（

），正常组、模型组

等体积生理盐水，连续干预4周。采用双缩脲法检测大鼠24小时尿蛋白（UTP）水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和免疫组化（IHC）检测大鼠肾组织中足萼蛋白（Podocalyxin），足细胞裂孔膜蛋白（Nephrin），膜蛋白（Podocin），突触足蛋白（Synaptopodin）mRNA及蛋白表水平，原位末端标记法（TUNEL）检测大鼠肾组织细胞凋亡率，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肾组织中Notch1，Hes1，B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax），Bcl-2蛋白表达水平。

结果

与正常组比较，模型组大鼠UTP水平显著升高，肾组织细胞凋亡明显增多，足细胞标志蛋白Podocalyxin，Nephrin，Podocin，Synaptopodin mRNA和蛋白表达水平明显下降，Notch1，Hes1，Bax蛋白表达量明显增多，Bcl-2蛋白表达量明显减少（

0.05）；与模型组比较，加味升降散和贝那普利组大鼠UTP水平明显下降，肾组织细胞凋亡明显减少，足细胞标志蛋白Podocalyxin，Nephrin，Podocin，Synaptopodin mRNA和蛋白表达水平明显升高，Notch1，Hes1，Bax蛋白表达量明显减少，Bcl-2蛋白表达量明显升高（

0.05）。

结论

加味升降散可通过抑制Notch信号通路，减少大鼠肾组织足细胞凋亡，减轻MN大鼠肾损伤。

Abstract

Objective

The purpose of this article was to observe the effect of modified Shengjiangsan on podocyte apoptosis in membranous nephropathy （MN） rats， to explore the molecular mechanism of its treatment of MN and to provide experimental basis for its clinical application.

Method

The MN rat model was established by injection of cationic bovine serum albumin into the tail vein of rats. The successfully modeled rats were then randomly divided into model group （equal volume of normal saline）， modified Shengjiangsan group （27.3 g·kg

-1

） and benazepril group （10 mg·kg

-1

）， with corresponding drug dosage once a day for 4 weeks of continuous intervention. After drug administration， the 24-hour urine protein （UTP） was detected. Real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR） and immunohistochemical （IHC） methods were used to detect Podocalyxin， Nephrin， Podocin， Synaptopodin mRNA and protein expression levels in rat kidney tissue. terninal-deoxynucleoitidyl transferase medsated nick and labeling （TUNEL） method was used to detect cell apoptosis rate in rat kidney tissue， and Western blot was used to detect Notch1， Hes1， B lymphoblastoma-2 （Bcl-2） associated X protein （Bax）， and Bcl-2 protein expression levels in rat kidney tissue.

Result

Compared with the normal group， UTP in the model group increased significantly， renal tissue cell apoptosis increased significantly， podocyte marker proteins podocalyxin， Nephrin， Podocin， Synaptopodin mRNA and protein expression levels decreased significantly， and Notch1， Hes1， Bax protein expression increased significantly， and Bcl-2 protein expression was significantly reduced（

0.05）. Compared with the model group， UTP levels in MN rats were significantly reduced in modified Shengjiangsan and benazepril groups， with reduced rate of renal cell apoptosis， increased mRNA and protein expression levels of podocalyxin， Nephrin， Podocin， and Synaptopodin in renal tissue， decreased Notch1， Hes1， Bax protein expression， and increased Bcl-2 protein expression（

0.05）.

Conclusion

Modified Shengjiangsan can inhibit the Notch signaling pathway， reduce the apoptosis of rat kidney tissue podocytes， and reduce the kidney injury of MN rats.

关键词

Keywords

references

XU X ， WANG G ， CHEN N ， et al . Long-term exposure to air pollution and increased risk of membranous nephropathy in China ［J］. J Am Soc Nephrol ， 2016 ， 27 （ 12 ）： 3739 - 3746 .

LU H ， LUO Y ， SU B ， et al . Wenyang lishui decoction ameliorates podocyte injury in membranous nephropathy rat and cell models by regulating p53 and Bcl-2 ［J］. Evid Based Complement Alternat Med ， 2020 ， doi： 10.1155/2020/6813760 http://dx.doi.org/10.1155/2020/6813760 .

LIU B ， LU R ， LI H ， et al . Zhen-wu-tang ameliorates membranous nephropathy rats through inhibiting NF-kappaB pathway and NLRP3 inflammasome ［J］. Phytomedicine ， 2019 ， 59 （ 59 ）： 1 - 12 .

PONTICELLI C . Membranous nephropathy ［J］. J Nephrol ， 2007 ， 20 （ 3 ）： 268 - 287 .

JIN L W ， PAN M ， YE H Y ， et al . Down-regulation of the long non-coding RNA XIST ameliorates podocyte apoptosis in membranous nephropathy via the miR-217-TLR4 pathway ［J］. Exp Physiol ， 2019 ， 104 （ 2 ）： 220 - 230 .

杜昕，刘明，檀金川 . 加味升降散治疗膜性肾病的临床观察［J］. 中国老年学杂志， 2019 ， 39 （ 10 ）： 2413 - 2415 .

BORDER W A ， WARD H J ， KAMIL E S ， et al . Induction of membranous nephropathy in rabbits by administration of an exogenous cationic antigen ［J］. J Clin Invest ， 1982 ， 69 （ 2 ）： 451 - 461 .

薛丕良，牛雯颖，李丽琦，等 . 雷公藤多苷联合小剂量激素治疗特发性膜性肾病的前瞻性对照研究［J］. 世界中医药， 2019 ， 14 （ 3 ）： 666 - 669 .

LANG R ， WANG X ， LIANG Y ， et al . Research progress in the treatment of idiopathic membranous nephropathy using traditional Chinese medicine ［J］. J Transl Int Med ， 2020 ， 8 （ 1 ）： 3 - 8 .

LI J ， LIU B ， XUE H ， et al . miR-217 is a useful diagnostic biomarker and regulates human podocyte cells apoptosis via targeting TNFSF11 in membranous nephropathy ［J］. Biomed Res Int ， 2017 ， 32 （ 14 ）： 1 - 9 .

LU W ， GONG S ， LI J ， et al . Clinicopathological features and prognosis in patients with idiopathic membranous nephropathy with hypertension ［J］. Exp Ther Med ， 2020 ， 19 （ 4 ）： 2615 - 2621 .

FLOEGE J ， BARBOUR S J ， CATTRAN D C ， et al . Management and treatment of glomerular diseases （part 1）：conclusions from a kidney disease： Improving Global Outcomes （KDIGO） Controversies Conference ［J］. Kidney Int ， 2019 ， 95 （ 2 ）： 268 - 280 .

王涛，檀金川 . 檀金川论治特发性膜性肾病经验［J］. 中国中医药信息杂志， 2017 ， 24 （ 10 ）： 105 - 108 .

陈文军，檀金川，陈素枝，等 . 加味升降散治疗原发性膜性肾病临床研究［J］. 河北中医药学报， 2016 ， 31 （ 1 ）： 44 - 47 .

项协隆，邵思思，陈宇，等 . 黄芪甲苷对被动型Heymann肾炎大鼠PERK通路的影响［J］. 新中医， 2018 ， 50 （ 4 ）： 10 - 14 .

赵锦，陈玮，魏杰，等 . 淫羊藿苷对糖尿病肾病大鼠肾功能的保护作用及相关机制［J］. 免疫学杂志， 2020 ， 36 （ 1 ）： 74 - 79 .

屠秋娣 . 自噬在特发性膜性肾病中的作用及姜黄素的体外干预研究［C］// 中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会，重庆： 2018 .

ROZA M ， JALAL E ， HOUMAN K ， et al . Immune system-mediated cellular and molecular mechanisms in idiopathic membranous nephropathy pathogenesis and possible therapeutic targets ［J］. Elsevier Inc ， 2019 ， 19 （ 9 ）： 1 - 33 .

JIN J ， HU K ， YE M ， et al . Rapamycin reduces podocyte apoptosis and is involved in autophagy and mTOR/ P70S6K/4EBP1 signaling ［J］. Cell Physiol Biochem ， 2018 ， 48 （ 2 ）： 765 - 772 .

SALEEM M A ， O'HARE M J ， REISER J ， et al . A conditionally immortalized human podocyte cell line demonstrating nephrin and podocin expression ［J］. J Am Soc Nephrol ， 2002 ， 13 （ 3 ）： 630 - 638 .

AKANKWASA G ， JIANHUA L ， GUIXUE C ， et al . Urine markers of podocyte dysfunction： a review of podocalyxin and nephrin in selected glomerular diseases ［J］. Biomark Med ， 2018 ， 12 （ 8 ）： 927 - 935 .

GUI D ， GUO Y ， WANG F ， et al . Astragaloside Ⅳ，a novel antioxidant，prevents glucose-induced podocyte apoptosis in vitro and in vivo ［J］. PLoS One ， 2012 ， 7 （ 6 ）： 1 - 11 .

高飞，王泽泽，杨冰，等 . 加味升降散对膜性肾病大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路及自噬的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 20 ）： 25 - 31 .

辛高杰，付建华，韩笑，等 . 丹酚酸B调控NIX介导的线粒体自噬保护H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤［J］. 中国中药杂志， 2020 ， 45 （ 12 ）： 2960 - 2965 .

饶江燕，王倩，王钰淳，等 . β -石竹烯通过激活自噬减轻小鼠脑缺血/再灌注损伤的研究［J］. 中国中药杂志， 2020 ， 45 （ 4 ）： 932 - 936 .

陈生晓，林晓明，甘艳，等 . 膜性肾病组织中足细胞自噬体数量、自噬相关蛋白表达变化及其意义［J］. 山东医药， 2019 ， 59 （ 8 ）： 73 - 75 .

雷静，何平 . 膜性肾病足细胞损伤机制及治疗进展［J］. 中国医师进修杂志， 2019 ， 42 （ 6 ）： 567 - 572 .

EMPITU M A ， KADARISWANTININGSIH I N ， AIZAWA M ， et al . MAGI-2 and scaffold proteins in glomerulopathy ［J］. Am J Physiol Renal Physiol ， 2018 ， 315 （ 5 ）： 1336 - 1344 .

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