白皮杉醇对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468抗肿瘤作用及机制

王风仙; 叶诗华; 赵卓佳; 解伟; 王进

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20202422

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白皮杉醇对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468抗肿瘤作用及机制

药理 | 更新时间：2021-03-29

- 白皮杉醇对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468抗肿瘤作用及机制
- Anti-tumor Effect of Piceatannol on Triple Negative Breast Cancer Cell Line MDA-MB-468 and Its Mechanism
- 中国实验方剂学杂志 2021年27卷第7期页码：42-48
- 作者机构：
  
  1.上海中医药大学研究生院，上海 201203
  2.上海健康医学院药学院，上海 201318
- 作者简介：
  
  王风仙，在读硕士，从事抗肿瘤药物作用及机制研究，E-mail：15837460845@163.com
  * 解伟，博士，讲师，从事基因工程抗体与肿瘤免疫治疗研究，E-mail：xiew@sumhs.edu.cn；
  王进，博士，副教授，从事抗肿瘤药物筛选及作用机制研究，E-mail：wangj@sumhs.edu.cn
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(NSFC81703401)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20202422
  中图分类号： R22;R242;R2-031;R285.5
- 收稿日期：2020-08-03，
  
  网络出版日期：2020-09-24，
  
  纸质出版日期：2021-04-05
- 稿件说明：
移动端阅览
王风仙,叶诗华,赵卓佳等.白皮杉醇对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468抗肿瘤作用及机制[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(07):42-48.

WANG Feng-xian,YE Shi-hua,ZHAO Zhuo-jia,et al.Anti-tumor Effect of Piceatannol on Triple Negative Breast Cancer Cell Line MDA-MB-468 and Its Mechanism[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(07):42-48.
王风仙,叶诗华,赵卓佳等.白皮杉醇对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468抗肿瘤作用及机制[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(07):42-48. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202422.

WANG Feng-xian,YE Shi-hua,ZHAO Zhuo-jia,et al.Anti-tumor Effect of Piceatannol on Triple Negative Breast Cancer Cell Line MDA-MB-468 and Its Mechanism[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(07):42-48. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202422.

摘要

目的

考察白皮杉醇（PIC）对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-468增殖、凋亡及细胞周期的作用，并对其作用机制进行探讨。

方法

采用噻唑蓝（MTT）比色法考察PIC（0，2.5，5.0，10.0，20.0，40.0，80.0，160.0 μmol·L

-1

）对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞成活率的影响，并计算半抑制率（IC

）；采用碘化丙啶（PI）染色观察PIC（5.0，10.0，20.0 μmol·L

-1

）对MDA-MB-468细胞周期的影响；采用细胞凋亡检测（Annexin V-FITC/PI）双染法观察PIC（5.0，10.0，20.0 μmol·L

-1

）对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞的诱导凋亡作用；采用蛋白免疫印迹法（Western blot）观察不同浓度PIC（5.0，10.0，20.0 μmol·L

-1

）对MDA-MB-468细胞增殖、凋亡蛋白的影响，并用Western blot对分泌型糖蛋白Wnt/

-连环蛋白（Wnt/

-catenin）信号通路相关蛋白进行检测。

结果

MTT比色法结果显示，与空白组比较，PIC（5.0，10.0，20.0，40.0，80.0，160.0 μmol·L

-1

）可呈浓度依赖性地抑制MDA-MB-468细胞的增殖（

0.05，

0.01），IC

为（39.4±4.6）μmol·L

-1

；作用48 h，PIC（5.0，10.0，20.0 μmol·L

-1

）呈浓度依赖性地升高MDA-MB-468细胞处于细胞周期G

期细胞（

0.01）；呈浓度依赖性地诱导MDA-MB-468细胞凋亡（

0.01），其中，PIC（20.0 μmol·L

-1

）诱导细胞凋亡率为49.87%；PIC（10.0，20.0 μmol·L

-1

）可明显降低MDA-MB-468细胞中

-catenin及原癌基因（C-myc），黏附因子（CD44）蛋白的表达水平（

0.05，

0.01）；PIC（5.0，10.0，20.0 μmol·L

-1

）可显著抑制蛋白激酶B（Akt）磷酸化，p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）蛋白的磷酸化，B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的蛋白表达水平（

0.01）；增强半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3），Bcl-2相关X蛋白（Bax）和磷酸化

-catenin的蛋白表达（

0.01）。

结论

PIC可能通过抑制Wnt/

-catenin信号通路抑制MDA-MB-468细胞增殖，并将细胞周期阻滞在G

期，从而诱导其凋亡。

Abstract

Objective

To investigate the effect of piceatannol （PIC） on the proliferation， apoptosis and cell cycle of MDA-MB-468 triple negative breast cancer cells and its mechanism.

Method

The methylthiazolyldiphenyl-tetrazoliu bromide （MTT） colcorimetry method was used to investigate the effect of different concentrations of PIC （0， 2.5， 5.0， 10.0， 20.0， 40.0， 80.0， 160.0 μmol·L

-1

） on the cell viabilities of triple negative breast cancer MDA-MB-468 cells and calculate the half maximal inhibitory concentration （IC

） value， the effect of different concentrations of PIC （5.0， 10.0， 20.0 μmol·L

-1

） on the cell cycle of MDA-MB-468 were investigated by flow cytometry with propidium iodide （PI） staining. The apoptotic effect of PIC （5.0， 10.0， 20.0 μmol·L

-1

） on MDA-MB-468 cells in triple negative breast cancer was investigated by flow cytometry with cell apoptosis detection Annexin V-FITC and PI double staining. Western blot was used to investigate the effect of different concentrations of PIC （5.0， 10.0， 20.0 μmol·L

-1

） on the proliferation and apoptosis of MDA-MB-468 cells and detect the expressions of secreted glycoprotein Wnt/

-catenin pathway related proteins.

Result

MTT results showed that compared with the blank group， PIC could inhibit the proliferation of MDA-MB-468 cells in a concentration-dependent manner （

0.05，

0.01）， with IC

at（39.4±4.6）μmol·L

-1

. Compared with the blank group， PIC could increase the percentage of MDA-MB-468 cells in G

phase about cell cycle in a concentration-dependent manner （

0.01）. Compared with the blank group， 5.0， 10.0， 20.0 μmol·L

-1

PIC could induce apoptosis of MDA-MB-468 cells for 48 h（

0.01）， and the apoptosis rate of MDA-MB-468 cells reached 49.87% when treated with 20.0 μmol·L

-1

for 48 h. Compared with the blank group， PIC could significantly reduce the expressions of

-catenin， proto-oncogene （C-myc） and adhesion factor （CD44） proteins in MDA-MB-468 cells， significantly inhibit the phosphorylation of

protein kinase B （Akt） and p38 mitogen activated protein kinase （p38 MAPK） proteins and the protein expression of B lymphocyte tumor-2 （Bcl-2）， and enhance cysteine aspartic acid protease-3 （Caspase-3）， Bcl-2 related X protein （Bax） and phosphorylated

-catenin protein expression（

0.01）.

Conclusion

PIC may inhibit the proliferation of MDA-MB-468 cells by inhibiting the Wnt/

-catenin signaling pathway， block the cell cycle in G0/G1 phase， and induce its apoptosis.

关键词

Keywords

references

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