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亚抑菌浓度痰热清注射液抑制金黄色葡萄球菌
α -溶血素溶血活力Study on Sub-minimal Inhibitory Concentration of Tanreqing Injection in Inhibiting Hemolytic Activity of
Staphylococcus aureus α -hemolysin- 中国实验方剂学杂志 2021年27卷第9期 页码：86-93
- 作者机构：
1.湖北工业大学，武汉 430068
2.中国中医科学院 医学实验中心，北京 100700
3.吉林农业大学，长春 130118
- 作者简介：
童倩，在读硕士，从事中药抗菌机制研究，E-mail：bronze.tongqian@foxmail.com
马卓，博士，教授，从事药物制剂及中药研究，E-mail：mazhuo@mail.hbut.edu.cn
杨伟峰，博士，副研究员，从事中药抗菌机制研究，Tel：010-64789506，E-mail：452040236@qq.com
- 基金信息：上海凯宝药业院士工作站项目(HX2017001);“中医药现代化研究”重点专项(2019YFC1709305)
DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20210605
中图分类号： R2-0;R22;R285.5;R289;R33收稿日期：2020-12-15，
网络出版日期：2021-03-10，
纸质出版日期：2021-05-05
- 稿件说明：
移动端阅览
童倩,王毅,周金鹤等.亚抑菌浓度痰热清注射液抑制金黄色葡萄球菌α-溶血素溶血活力[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(09):86-93.
TONG Qian,WANG Yi,ZHOU Jin-he,et al.Study on Sub-minimal Inhibitory Concentration of Tanreqing Injection in Inhibiting Hemolytic Activity of Staphylococcus aureusα-hemolysin[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(09):86-93.
童倩,王毅,周金鹤等.亚抑菌浓度痰热清注射液抑制金黄色葡萄球菌α-溶血素溶血活力[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(09):86-93. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210605.
TONG Qian,WANG Yi,ZHOU Jin-he,et al.Study on Sub-minimal Inhibitory Concentration of Tanreqing Injection in Inhibiting Hemolytic Activity of Staphylococcus aureusα-hemolysin[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(09):86-93. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210605.
摘要
目的
2
研究痰热清注射液（TRQ）在亚抑菌浓度下是否抑制金黄色葡萄球菌
α
-溶血素的产生、释放，进而缓解感染过程中机体损伤，为更好地指导临床用药提供实验依据。
方法
2
微孔板法和时间-生长曲线首先测定TRQ对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）和对细菌生长的影响；而后不同亚抑菌浓度TRQ与细菌或细菌上清共培养，再与脱纤维兔血共孵育，检测TRQ对金黄色葡萄球菌
α
-溶血素的抑制和中和作用；细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测TRQ对金黄色葡萄球菌感染介导的人肺泡上皮细胞（A549）损伤的保护作用；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测亚抑菌浓度TRQ对金黄色葡萄球菌
α
-溶血素调控基因hla，agrA mRNA表达的影响。
结果
2
TRQ对金黄色葡萄球菌的MIC为1/8原液，亚抑菌浓度（1/64MIC~1/16MIC）TRQ不影响细菌生长；1/64MIC~1/16MIC浓度TRQ具有抑制和中和
α
-溶血素溶血活力的作用，且对金黄色葡萄球菌感染介导的A549细胞损伤具有保护作用；其对
α
-溶血素的抑制作用与抑制hla，agrA mRNA表达密切相关。
结论
2
亚抑菌浓度TRQ能抑制和中和金黄色葡萄球菌的
α
-溶血素溶血活力，对金黄色葡萄球菌感染介导的A549细胞损伤具有保护作用，其抑制
α
-溶血素的机制与干扰agr调控系统密切相关。
Abstract
Objective
2
To study whether Tanreqing injection （TRQ） can alleviate the body injury in the process of infection by inhibiting the production and release of
α
-hemolysin of
Staphylococcus aureus
under sub-minimal inhibitory concentration， and to provide experimental basis for better guidance of clinical medication.
Method
2
The effects of TRQ on the minimum inhibitory concentration （MIC） and bacterial growth of
S.aureus
were determined firstly by microplate method and time-growth curve. The different sub-minimal inhibitory concentrations of TRQ were co-cultured with bacteria or bacterial supernatants， and then co-incubated with defibrillated rabbit blood to detect the inhibitory and neutralizing effects of TRQ on
S.aureus
α
-hemolysin. Cell counting kit-8 （CCK-8） cell viability assay was used to detect the protective effect of TRQ on
S. aureus
-mediated damage to human alveolar epithelial cells （A549）. Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR） was used to detect the effect of sub-minimal inhibitory concentration of TRQ on the mRNA expression of
S.aureus
α
-hemolysin regulatory genes hla and agrA.
Result
2
The MIC of TRQ to
S.aureus
was 1/8 of the stock solution， and the sub-minimal inhibitory concentration （1/64MIC-1/16MIC） TRQ used in this study did not affect the growth of bacteria. 1/64MIC-1/16 MIC TRQ had the effect of inhibiting and neutralizing the hemolytic activity of
α
-hemolysin， with a protective effect on
S.aureus
supernatant-mediated A549 cell damage， and its inhibitory effect on
α
-hemolysin was closely related to the inhibition of hla and agrA mRNA expression.
Conclusion
2
The sub-minimal inhibitory concentration TRQ can inhibit and neutralize the hemolytic activity of
α
-hemolysin of
S.aureus
， with a protective effect on A549 cell damage mediated by
S.aureus
infection， and its mechanism of inhibiting
α
-hemolysin is closely related to the interference with agr regulatory system.
关键词
Keywords
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