五子衍宗丸中所含药物盐制后组方对大鼠生精细胞凋亡的影响

廖宇娇; 张希; 敖明月; 胡昌江; 陈志敏; 许润春

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20210946

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五子衍宗丸中所含药物盐制后组方对大鼠生精细胞凋亡的影响

经典名方 | 更新时间：2021-04-20

- 五子衍宗丸中所含药物盐制后组方对大鼠生精细胞凋亡的影响
- Effect of Herbal Medicines in Wuzi Yanzong Wan Processed with Salt-water on Apoptosis of Spermatogenic Cells in Rats
- 中国实验方剂学杂志 2021年27卷第10期页码：1-7
- 作者机构：
  
  成都中医药大学药学院，成都 611137
- 作者简介：
  
  廖宇娇，在读硕士，从事中药药剂学研究，E-mail：602843904@qq.com
  陈志敏，博士，讲师，从事中药炮制研究，E-mail：chenzhimin@cdutcm.edu.cn
  许润春，博士，副教授，从事中药炮制研究，E-mail：309786953@qq.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(81773899);成都中医药大学杏林学者学科人才科研提升计划项目(BSH20191026);成都中医药大学西南特色中药资源国家重点实验室开放研究基金项目(2020BSH012)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20210946
  中图分类号： R28;R943.1;Q2;Q657
- 收稿日期：2020-12-31，
  
  网络出版日期：2021-02-09，
  
  纸质出版日期：2021-05-20
- 稿件说明：
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廖宇娇,张希,敖明月等.五子衍宗丸中所含药物盐制后组方对大鼠生精细胞凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(10):1-7.

LIAO Yu-jiao,ZHANG Xi,AO Ming-yue,et al.Effect of Herbal Medicines in Wuzi Yanzong Wan Processed with Salt-water on Apoptosis of Spermatogenic Cells in Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(10):1-7.
廖宇娇,张希,敖明月等.五子衍宗丸中所含药物盐制后组方对大鼠生精细胞凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(10):1-7. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210946.

LIAO Yu-jiao,ZHANG Xi,AO Ming-yue,et al.Effect of Herbal Medicines in Wuzi Yanzong Wan Processed with Salt-water on Apoptosis of Spermatogenic Cells in Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(10):1-7. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210946.

摘要

目的

观察由不同炮制品组方的五子衍宗丸对肾精亏虚大鼠生精细胞凋亡的影响，探讨其对生精细胞的保护作用。

方法

将SD大鼠随机分成空白组、模型组、全生品组、药典组、盐制组，每组8只。通过给予雷公藤多苷片复制肾精亏虚模型（剂量20 mg·kg

-1

），利用流式细胞术（FCM）分析睾丸中生精细胞凋亡情况，运用免疫组化（IHC）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测睾丸中B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达水平。采用高效液相色谱法（HPLC）比较由不同炮制品组方的五子衍宗丸中8个成分（绿原酸、鞣花酸、金丝桃苷、异槲皮苷、毛蕊花糖苷、紫云英苷、山柰酚、五味子醇甲）的含量，流动相乙腈（A）-0.4%磷酸水溶液（B）梯度洗脱（0~5 min，5%~15%A；5~10 min，15%~17%A；10~25 min，17%A；25~35 min，17%~26%A，35~60 min，26%~56%A），检测波长254 nm。

结果

与模型组比较，各给药组对生精细胞总凋亡率，Bcl-2和Bax表达均有改善作用，且药典组与盐制组有显著作用（

0.01）；同时，药典组与盐制组的改善作用明显优于全生品组（

0.05）。药物炮制后组方的五子衍宗丸中绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷、毛蕊花糖苷含量增加；盐制组鞣花酸含量增加，但药典组鞣花酸含量减少；盐制组样品中毛蕊花糖苷、紫云英苷、山柰酚、五味子醇甲的含量高于药典组样品。

结论

五子衍宗丸可能通过抑制Bax和促进Bcl-2的蛋白表达来减少大鼠睾丸中生精细胞的凋亡，发挥其补肾益精作用；组方药物炮制后抗生精细胞凋亡作用增强可能与炮制后化学成分含量的变化有关。

Abstract

Objective

To observe the effect of Wuzi Yanzong Wan made of different processed products on the apoptosis of spermatogenic cells in rats with kidney essence deficiency， and explore its protective effect on spermatogenic cells.

Method

SD rats were randomly divided into the blank group， model group， whole raw product group， pharmacopoeia group and salt-processed product group， with 8 rats in each group. The kidney essence deficiency model was replicated by giving tripterygium glycoside tablets （the dose of 20 mg·kg

-1

）. The flow cytometry （FCM） was used to analysis the apoptosis of spermatogenic cells in testis， the immunohistochemistry （IHC） and Western blot were used to detect the expression levels of B-cell lymphoma-2 （Bcl-2） and Bcl-2 associated X protein （Bax） in the testis. High performance liquid chromatography （HPLC） was used to compare the contents of eight components （chlorogenic acid， ellagic acid， hyperoside， isoquercitrin， verbascoside， astragalin， kaempferol and schisandrin） in Wuzi Yanzong Wan made of different processed products， the mobile phase was composed of acetonitrile （A）-0.4% phosphoric acid aqueous solution （B） for gradient elution （0-5 min， 5%-15%A； 5-10 min， 15%-17%A； 10-25 min， 17%A； 25-35 min， 17%-26%A； 35-60 min， 26%-56%A）， the detection wavelength was set at 254 nm.

Result

Compared with the model group， the total apoptosis rate of spermatogenic cells， protein expression of Bax and Bcl-2 in each administration group were improved. Among them， the pharmacopoeia group and salt-processed product group had significant effects （

0.01）， and the improvement effect of the pharmacopoeia group and salt-processed product group was significantly better than that of the whole raw product group （

0.05）. The contents of chlorogenic acid， hyperoside， isoquercitrin and verbascoside in Wuzi Yanzong Wan were increased after the herbal medicines being processed with salt-water. The content of ellagic acid in the salt-processed product group increased， while it decreased in the pharmacopoeia group. The contents of verbascoside， astragalin， kaempferol and schisandrin in samples from the salt-processed product group were greater than those in samples from the pharmacopoeia group.

Conclusion

Wuzi Yanzong Wan may reduce the apoptosis of spermatogenic cells in rat testis by inhibiting the expression of Bax and promoting the expression of Bcl-2， and exert its effect of nourishing kidney and enriching essence. The enhanced anti-spermatogenic effect of Wuzi Yanzong Wan after processing may be related to the changes in chemical composition content after processing.

关键词

Keywords

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