芪玉三龙方抑制A549肺癌细胞对miRNA21“成瘾”的机制

张星星; 高雅婷; 王小乐; 杨勤军; 刘桐; 童佳兵; 李泽庚

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20211193

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

芪玉三龙方抑制A549肺癌细胞对miRNA21“成瘾”的机制

药理 | 更新时间：2021-05-17

- 芪玉三龙方抑制A549肺癌细胞对miRNA21“成瘾”的机制
- Mechanism of Qiyu Sanlong Prescription in Inhibiting "Addiction" of Lung Cancer A549 Cells to miRNA21
- 中国实验方剂学杂志 2021年27卷第11期页码：35-41
- 作者机构：
  
  1.安徽中医药大学第一附属医院，安徽省教育厅中医药防治肺系重大疾病重点实验室，安徽省中医药科学院中医呼吸病防治研究所，合肥 230031
  2.安徽中医药大学，合肥 230012
- 作者简介：
  
  张星星，博士，主治医师，从事中医药防治肺病研究，E-mail：415377615@qq.com
  李泽庚，教授，主任医师，博士生导师，从事中医药防治肺病研究，Tel：0551-62850171，E-mail：Li6609@126.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金面上项目(81874431);国家自然科学基金青年科学基金项目(81804039);安徽省自然科学基金青年项目(1808085QH256)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211193
  中图分类号： R2-0;R22;R285.5;R289
- 收稿日期：2020-12-15，
  
  网络出版日期：2021-03-29，
  
  纸质出版日期：2021-06-05
- 稿件说明：
移动端阅览
张星星,高雅婷,王小乐等.芪玉三龙方抑制A549肺癌细胞对miRNA21“成瘾”的机制[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(11):35-41.

ZHANG Xing-xing,GAO Ya-ting,WANG Xiao-le,et al.Mechanism of Qiyu Sanlong Prescription in Inhibiting "Addiction" of Lung Cancer A549 Cells to miRNA21[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(11):35-41.
张星星,高雅婷,王小乐等.芪玉三龙方抑制A549肺癌细胞对miRNA21“成瘾”的机制[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(11):35-41. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211193.

ZHANG Xing-xing,GAO Ya-ting,WANG Xiao-le,et al.Mechanism of Qiyu Sanlong Prescription in Inhibiting "Addiction" of Lung Cancer A549 Cells to miRNA21[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(11):35-41. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211193.

摘要

目的

探讨芪玉三龙方（QYSL）抑制A549肺癌细胞对微小RNA21（miRNA21）“成瘾”的分子机制。

方法

选择人A549肺癌细胞，常规传代培养，分别设置为空白组，空白血清组，含药血清组，干扰小RNA（siRNA）组。制备QYSL含药血清，以前期研究筛选的最佳药物浓度和作用时间进行干预。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测及实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR） miRNA21及其靶向信号通路第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）/磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）相关分子的蛋白及mRNA的表达。

结果

与空白血清组比较，含药血清组和siRNA组的miRNA21 mRNA表达显著降低，PTEN mRNA的表达显著升高，差异具有统计学意义（

0.01）。与空白血清组比较，含药血清组和siRNA组的PI3K，雷帕霉素靶蛋白（mTOR） mRNA表达显著降低，差异具有统计学意义（

0.01），但含药血清组蛋白激酶B（Akt） mRNA的表达无明显差异。与空白血清组比较，含药血清组和siRNA组的PTEN蛋白表达明显升高，差异具有统计学意义（

0.05）；含药血清组磷酸化蛋白激酶B（p-Akt），磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达明显降低（

0.05），总蛋白Akt，mTOR表达无明显降低，PI3K蛋白的表达降低，但差异无统计学意义。

结论

QYSL可抑制miRNA21的转录，使PTEN表达有所上升，下调PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子表达，从而温和抑制肺癌细胞对致癌基因的“成瘾”现象，阻断肺癌细胞增殖。

Abstract

Objective

To investigate the molecular mechanism of Qiyu Sanlong prescription （QYSL） in inhibiting the "addiction" of lung cancer A549 cells to miRNA21.

Method

The human lung cancer A549 cells were routinely passaged and divided into the blank group， blank serum group， QYSL-containing serum group， and siRNA group. The prepared QYSL-containing serum was used for intervention， with the optimal concentration and action time determined in previous studies. The protein and mRNA expression levels of miRNA21 and related molecules in its target phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10 （PTEN）/phosphatidylinositol 3-kinase （PI3K） signaling pathway were detected by real-time polymerase chain reaction （Real-time PCR） and Western blot assay.

Result

The comparison with the blank serum group revealed that the mRNA expression levels of miRNA21 in the QYSL-containing serum group and the siRNA group were decreased， while the PTEN mRNA expression in the QYSL-containing serum group was increased， showing significant differences （

0.01）. Compared with the blank serum， the QYSL-containing serum and siRNA significantly down-regulated PI3K and mammalian target of rapamycin （mTOR） mRNA expression （

0.01）， whereas the QYSL-containing serum did not change the mRNA expression of protein kinase B （Akt）. The protein expression levels of PTEN in the QYSL-containing serum group and the siRNA group were obviously elevated in contrast to that in the blank serum group （

0.05）. Meanwhile， the protein expression levels of phosphorylated Akt （p-Akt） and phosphorylated mTOR （p-mTOR） evidently declined in the QYSL-containing serum group （

0.05）， but there was no significant reduction in total Akt and mTOR protein expression. The PI3K protein expression was slightly down-regulated， with no statistical significance.

Conclusion

QYSL inhibits the transcription of miRNA21， increases the expression of PTEN， and reduces the expression of key molecules in PI3K/Akt/mTOR signaling pathway， thus mildly inhibiting the "addiction" of lung cancer cells to oncogenes and blocking their proliferation.

关键词

Keywords

references

NASIM F ， SABATH B F ， EAPEN G A . Lung cancer ［J］. Med Clin North Am ， 2019 ， 103 （ 3 ）： 463 - 473 .

BRAY F ， FERLAY J ， SOERJOMATARAM I ， et al . Global cancer statistics 2018：GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries ［J］. CA Cancer J Clin ， 2020 ， 70 （ 4 ）： 313 .

RODRIGUEZ-CANALES J ， PARRA-CUENTAS E ， WISTUBA I I . Diagnosis and molecular classification of lung cancer ［J］. Cancer Treat Res ， 2016 ， 170 ： 25 - 46 .

MEDINA P P ， NOLDE M ， SLACK F J . OncomiR addiction in an in vivo model of microRNA-21-induced pre-B-cell lymphoma ［J］. Nature ， 2010 ， 467 （ 7311 ）： 86 - 90 .

SUN J ， LI T ， ZHAO Y ， et al . USP10 inhibits lung cancer cell growth and invasion by upregulating PTEN ［J］. Mol Cell Biochem ， 2018 ， 441 （ 1/2 ）： 1 - 7 .

LIU Z L ， WANG H ， LIU J ， et al . MicroRNA-21 （miR-21） expression promotes growth，metastasis，and chemo-or radioresistance in non-small cell lung cancer cells by targeting PTEN ［J］. Mol Cell Biochem ， 2013 ， 372 （ 1/2 ）： 35 - 45 .

XU F ， NA L ， LI Y ， et al . Roles of the PI3K/AKT/mTOR signalling pathways in neurodegenerative diseases and tumours ［J］. Cell Biosci ， 2020 ， 10 ： 54 .

PÉREZ-RAMÍREZ C ， CAÑADAS-GARRE M ， MOLINA M Á ， et al . PTEN and PI3K/AKT in non-small-cell lung cancer ［J］. Pharmacogenomics ， 2015 ， 16 （ 16 ）： 1843 - 1862 .

童佳兵，高雅婷，范春雷，等 . 芪玉三龙汤治疗中晚期非小细胞肺癌临床观察［J］. 新中医， 2018 ， 50 （ 4 ）： 146 - 150 .

张星星，童佳兵，杨程，等 . 芪玉三龙汤平衡肺癌小鼠Th1/Th2漂移相关机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2016 ， 22 （ 11 ）： 131 - 136 .

童佳兵，张星星，李泽庚 . 芪玉三龙汤调节microRNA21及PTEN的表达抑制肺癌肿瘤生长［J］. 中华中医药杂志， 2016 ， 31 （ 5 ）： 1585 - 1589 .

高雅婷，王心恒，王小乐，等 . 芪玉三龙汤调节mTOR/Beclin1/LC3信号轴相关分子的表达诱导肺癌A549细胞自噬［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， doi： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202225 http://dx.doi.org/10.13422/j.cnki.syfjx.20202225 .

张星星，李泽庚 . 芪玉三龙汤对荷瘤小鼠肿瘤组织PI3K/Akt/mTOR通路分子表达的影响［J］. 中华中医药杂志， 2017 ， 32 （ 12 ）： 5358 - 5361 .

程建超，童佳兵，朱洁，等 . 芪玉三龙汤调节Beclin1，Atg5，LC3B表达以抑制肺癌肿瘤生长机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 9 ）： 29 - 35 .

LI Y ， YIN Z ， FAN J ， et al . The roles of exosomal miRNAs and lncRNAs in lung diseases ［J］. Signal Transduct Target Ther ， 2019 ， 4 ： 47 .

SALIMINEJAD K ， KHORRAM K H R ， SOLEYMANI FARD S ， et al . An overview of microRNAs：biology，functions，therapeutics，and analysis methods ［J］. J Cell Physiol ， 2019 ， 234 （ 5 ）： 5451 - 5465 .

LAN H ， LU H ， WANG X ， et al . MicroRNAs as potential biomarkers in cancer：opportunities and challenges ［J］. Biomed Res Int ， 2015 ， 2015 ： 125094 .

QADIR M I ， FAHEEM A . miRNA：a diagnostic and therapeutic tool for pancreatic cancer ［J］. Crit Rev Eukaryot Gene Expr ， 2017 ， 27 （ 3 ）： 197 - 204 .

SANDIFORD O A ， MOORE C A ， DU J ， et al . Human aging and cancer： role of miRNA in tumor microenvironment ［J］. Adv Exp Med Biol ， 2018 ， 1056 ： 137 - 152 .

LI J ， YEN C ， LIAW D ， et al . PTEN，a putative protein tyrosine phosphatase gene mutated in human brain，breast，and prostate cancer ［J］. Science ， 1997 ， 275 （ 5308 ）： 1943 - 1947 .

TEWARI D ， PATNI P ， BISHAYEE A ， et al . Natural products targeting the PI3K-Akt-mTOR signaling pathway in cancer： a novel therapeutic strategy ［J］. Semin Cancer Biol ， 2019 ， doi： 10.1016/j.semcancer http://dx.doi.org/10.1016/j.semcancer .

DUAN Y ， HAYBAECK J ， YANG Z . Therapeutic potential of PI3K/Akt/mTOR pathway in gastrointestinal stromal tumors：rationale and progress ［J］. Cancers（Basel）， 2020 ， 12 （ 10 ）： 2972 .

ROBBINS H L ， HAGUE A . The PI3K/Akt pathway in tumors of endocrine tissues ［J］. Front Endocrinol （Lausanne）， 2015 ， 6 ： 188 .

SONG G ， OUYANG G ， BAO S . The activation of Akt/PKB signaling pathway and cell survival ［J］. J Cell Mol Med ， 2005 ， 9 （ 1 ）： 59 - 71 .

XIA P ， XU X Y . PI3K/Akt/mTOR signaling pathway in cancer stem cells：from basic research to clinical application ［J］. Am J Cancer Res ， 2015 ， 5 （ 5 ）： 1602 - 1609 .

PAPA A ， PANDOLFI P P . The PTEN-PI3K axis in cancer ［J］. Biomolecules ， 2019 ， 9 （ 4 ）： 153 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

暂无数据