酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠中枢下丘脑线粒体损伤及细胞凋亡的影响

杨忞旻; 刘鑫; 游秋云; 张舜波

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20211304

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酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠中枢下丘脑线粒体损伤及细胞凋亡的影响

酸枣仁汤治疗老年慢性睡眠剥夺大鼠的研究专题 | 更新时间：2021-07-20

- 酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠中枢下丘脑线粒体损伤及细胞凋亡的影响
- Effect of Suanzaoren Tang on Mitochondrial Damage and Apoptosis in Hypothalamus of Elderly Rats with Chronic Rapid Eye Movement Sleep Deprivation
- 中国实验方剂学杂志 2021年27卷第16期页码：47-52
- 作者机构：
  
  湖北中医药大学，武汉 430065
- 作者简介：
  
  杨忞旻，在读硕士，从事药学相关研究，E-mail：2794215262@qq.com
  * 张舜波，讲师，从事中药学研究和新药开发，E-mail：693757317@qq.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(81473560)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211304
  中图分类号： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- 收稿日期：2021-02-16，
  
  网络出版日期：2021-05-20，
  
  纸质出版日期：2021-08-20
- 稿件说明：
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杨忞旻,刘鑫,游秋云等.酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠中枢下丘脑线粒体损伤及细胞凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(16):47-52.

YANG Min-min,LIU Xin,YOU Qiu-yun,et al.Effect of Suanzaoren Tang on Mitochondrial Damage and Apoptosis in Hypothalamus of Elderly Rats with Chronic Rapid Eye Movement Sleep Deprivation[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(16):47-52.
杨忞旻,刘鑫,游秋云等.酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠中枢下丘脑线粒体损伤及细胞凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(16):47-52. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211304.

YANG Min-min,LIU Xin,YOU Qiu-yun,et al.Effect of Suanzaoren Tang on Mitochondrial Damage and Apoptosis in Hypothalamus of Elderly Rats with Chronic Rapid Eye Movement Sleep Deprivation[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(16):47-52. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211304.

摘要

目的

探讨酸枣仁汤对线粒体介导的神经细胞凋亡的影响。

方法

将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、舒乐安定组（0.18 mg·kg

-1

·d

-1

），酸枣仁汤低、高剂量组（6.48，12.96 g·kg

-1

·d

-1

），除正常组外，其余各组均皮下注射

-半乳糖，于末次给药后进行多平台水环境睡眠剥夺，造模结束后各组开始灌胃给药，连续给药7 d。采用透射电镜观察中枢下丘脑线粒体形态，采用分光光度法检测检测中枢下丘脑中Na

-K

-三磷酸腺苷（ATP）酶，Ca

-Mg

-ATP酶活性，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测中枢下丘脑细胞色素C（Cyt C），B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2），Bcl-2相关X蛋白（Bax）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）蛋白表达水平的改变。

结果

正常组线粒体未见明显病理改变，大小适中，形态多呈椭圆或梭形，嵴排列较整齐。与正常组比较，模型组线粒体形态异常，线粒体发生明显肿胀并且伴有空泡化，出现了“髓鞘样”，嵴发生断裂且数量减少；与模型组比较，舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组线粒体损伤减轻，空泡化现象减少，部分嵴断裂，并未出现明显肿胀，其中酸枣仁汤高剂量组改善较为明显。与正常组比较，模型组Na

-K

-ATP，Ca

-Mg

-ATP酶活性显著降低（

0.01），Bcl-2蛋白表达水平显著降低（

0.01），Cyt C，Bax，Caspase-3蛋白表达水平显著升高（

0.01）；与模型组比较，舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组Na

-K

-ATP，Ca

-Mg

-ATP酶活性均显著升高（

0.01），舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组Bcl-2蛋白表达水平显著升高（

0.01），Cyt C，Bax，Caspase-3蛋白表达水平明显降低（

0.05，

0.01），酸枣仁汤低剂量组Na

-K

-ATP酶活性显著升高（

0.01），Bcl-2蛋白表达水平明显升高（

0.05），Bax蛋白表达水平明显降低（

0.05）。

结论

酸枣仁汤可以改善下丘脑神经细胞线粒体功能，抑制神经细胞凋亡。

Abstract

Objective

To investigate the effect of Suanzaoren Tang on mitochondria-mediated neuronal apoptosis.

Method

Fifty male Wistar rats were randomly divided into the control group， model group， estazolam group （0.18 mg·kg

-1

·d

-1

）， and low- （6.48 g·kg

-1

·d

-1

） and high-dose （12.96 g·kg

-1

·d

-1

） Suanzaoren Tang groups. Rats in all groups except for the control group received subcutaneous injection of

-galactose and then were deprived of sleep using the multiple platform method after the last administration. Following successful modeling， the rats in each group were treated with intragastric administration of the corresponding drugs for seven consecutive days. The morphology of mitochondria in hypothalamus was observed under a transmission electron microscope. The activities of Na

-K

-ATPase and Ca

-Mg

-ATPase in hypothalamus were detected by spectrophotometry. Western blotting was conducted to determine the protein expression levels of cytochrome C （Cyt C）， B cell lymphoma-2 （Bcl-2）， Bcl-2 associated X protein （Bax） and cysteinyl aspartate-specific protease-3 （Caspase-3） in hypothalamus.

Result

In the control group， there was no obvious pathological change in mitochondria， which were moderate in size and oval or spindle in shape， with the cristae arranged orderly. Compared with the control group， the model group exhibited abnormal mitochondrial morphology， manifested as obvious swelling， vacuolation， myelin figures， and cristae rupture and reduction. The comparison with the model group revealed that both the estazolam group and high-dose Suanzaoren Tang group alleviated the mitochondrial damage and reduced the vacuolation and swelling. Only some cristae rupture was present. The improvements were more obvious in the high-dose Suanzaoren Tang group. Compared with the control group， the activities of Na

-K

-ATPase and Ca

-Mg

-ATPase and the Bcl-2 protein expression in the model group were significantly decreased （

0.01）， whereas the protein expression levels of Cyt C， Bax， and Caspase-3 were significantly increased （

0.01）. Compared with the model group， the activities of Na

-K

-ATPase and Ca

-Mg

-ATPase and the Bcl-2 protein expression in the estazolam group and the high-dose Suanzaoren Tang group were significantly elevated （

0.01）， while the protein expression levels of Cyt C， Bax， and Caspase-3 were significantly lowered （

0.05，

0.01）. The activity of Na

-K

-ATPase and the Bcl-2 protein expression in the low-dose Suanzaoren Tang group were increased significantly （

0.01）， but the Bax protein expression was down-regulated （

0.05）.

Conclusion

Suanzaoren Tang is able to improve the mitochondrial function of hypothalamic nerve cells and inhibit their apoptosis.

关键词

Keywords

references

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