基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性成分分析

王月; 刘晓谦; 梁曜华; 冯伟红; 李春; 王智民

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20211446

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基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性成分分析

药学基础 | 更新时间：2021-09-24

- 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性成分分析
- Anti-acetylcholinesterase Active Ingredients from Aconitum tanguticum by UPLC-Q-TOF-MS/MS
- 中国实验方剂学杂志 2021年27卷第20期页码：130-137
- 作者机构：
  
  1.广东药科大学，广州 510006
  2.中国中医科学院中药研究所，中药质量控制技术国家工程实验室，北京 100700
- 作者简介：
  
  王月，在读硕士，从事中药化学研究，E-mail：641198319@qq.com
  * 李春，研究员，从事中药化学研究，E-mail：cli@icmm.ac.cn； *
  王智民，研究员，从事中药化学研究，E-mail：zmwang@icmm.ac.cn
- 基金信息：
  
  中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ZXKT17039);北京市自然科学基金项目(7132152)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211446
  中图分类号： R22;Q55;R28;O657
- 收稿日期：2021-01-30，
  
  网络出版日期：2021-04-12，
  
  纸质出版日期：2021-10-20
- 稿件说明：
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王月,刘晓谦,梁曜华等.基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性成分分析[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(20):130-137.

WANG Yue,LIU Xiao-qian,LIANG Yao-hua,et al.Anti-acetylcholinesterase Active Ingredients from Aconitum tanguticum by UPLC-Q-TOF-MS/MS[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(20):130-137.
王月,刘晓谦,梁曜华等.基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性成分分析[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(20):130-137. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211446.

WANG Yue,LIU Xiao-qian,LIANG Yao-hua,et al.Anti-acetylcholinesterase Active Ingredients from Aconitum tanguticum by UPLC-Q-TOF-MS/MS[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(20):130-137. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211446.

摘要

目的

明确甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶的活性成分，为寻找新的抗阿尔茨海默病（AD）药物提供参考。

方法

采用改良的Ellman's法筛选甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性部位，超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）对活性部位的化学成分进行分析，色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C

色谱柱（2.1 mm×50 mm，1.7 μm），流动相选择乙腈（A）-0.4%氨水溶液（B）梯度洗脱，流速0.4 mL·min

-1

，柱温30 ℃。二氯甲烷萃取部位A相比例随时间变化为0~3 min，5%A；3~7 min，5%~20%A；7~11.5 min，20%~33%A；11.5~15.5 min，33%~50%A；15.5~20.5 min，50%~80%A；20.5~23 min，80%~85%A；23~25 min，85%~95%A。正丁醇萃取部位A相比例随时间变化为0~2 min，5%A；2~8 min，5%~20%A；8~11 min，20%~33%A；11~15 min，33%~95%A。质谱条件为电喷雾离子源，正离子全扫描模式采集数据，检测范围

100~1 500。

结果

甘青乌头醇提物的二氯甲烷萃取部位和正丁醇萃取部位对乙酰胆碱酯酶均有一定的抑制作用，二者的半数抑制浓度分别为（64±4.4），（85.7±3.8） mg·L

-1

。经UPLC-Q-TOF-MS/MS分析，从二氯甲烷萃取部位共推测出21个生物碱类成分，正丁醇萃取部位共推测出11个生物碱类成分；2个部位均含有的关附壬素为首次在甘青乌头中发现。

结论

二萜生物碱是甘青乌头抗乙酰胆碱酯酶活性的主要药效物质，值得深入挖掘。

Abstract

Objective

To identify the anti-acetylcholinesterase active ingredients in

Aconitum tanguticum

， so as to lay the foundation for finding new anti-Alzheimer's disease （AD） drugs.

Method

The anti-acetylcholinesterase active fractions of

A. tanguticum

were screened by the modified Ellman's method， and the chemical composition of the active fraction was analyzed by ultra-performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry （UPLC-Q-TOF-MS/MS）. The chromatographic separation was performed on an ACQUITY UPLC BEH C

column （2.1 mm×50 mm， 1.7 μm） with acetonitrile （A）-0.4% ammonia aqueous solution （B） as mobile phase for gradient elution， and the column temperature was set at 30 ℃ with the flow rate of 0.4 mL·min

-1

. Phase A of the dichloromethane fraction changed with time as follows：0-3 min， 5%A； 3-7 min， 5%-20%A； 7-11.5 min， 20%-33%A； 11.5-15.5 min， 33%-50%A； 15.5-20.5 min， 50%-80%A； 20.5-23 min， 80%-85%A； 23-25 min， 85%-95%A. Phase A of the

-butanol fraction changed with time as follows：0-2 min， 5%A； 2-8 min， 5%-20%A； 8-11 min， 20%-33%A； 11-15 min， 33%-95%A. Mass spectrometry was performed on electrospray ionization， data were collected in positive ion mode， and the detection range was

100-1 500.

Result

Both the dichloromethane and

-butanol fractions had a certain inhibitory effect on acetylcholinesterase， their half inhibitory concentration （IC

） values were （64±4.4） mg·L

-1

and （85.7±3.8） mg·L

-1

， respectively. By UPLC-Q-TOF-MS/MS analysis， a total of 21 alkaloids were identified from the dichloromethane fraction， and 11 alkaloids were identified from

-butanol fraction. Guan-fu base Ⅰ， found in both fractions， was first discovered in

A. tanguticum

Conclusion

Diterpene alkaloids are the main anti-acetylcholinesterase substances of

A. tanguticum

， which is worth further exploration.

关键词

Keywords

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