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1.大理大学,云南 大理 671003
2.中国中医科学院 中药研究所,北京 100700
3.中国医学科学院 北京协和医学院 医学信息研究所,北京 100020
黄贻杰,硕士,从事中药资源学研究,E-mail:17671741073@163.com
董林林,博士,副研究员,从事中药资源学研究,Tel:010-57203877,E-mail:lldong@icmm.ac.cn
收稿日期:2021-09-08,
网络出版日期:2021-11-03,
纸质出版日期:2022-01-20
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黄贻杰,董林林,尉广飞等.抗人参根腐病生防菌剂的研发与评价[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(02):182-190.
HUANG Yi-jie,DONG Lin-lin,WEI Guang-fei,et al.Development and Evaluation of Biocontrol Agents Against Panax ginseng Root Rot[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(02):182-190.
黄贻杰,董林林,尉广飞等.抗人参根腐病生防菌剂的研发与评价[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(02):182-190. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211516.
HUANG Yi-jie,DONG Lin-lin,WEI Guang-fei,et al.Development and Evaluation of Biocontrol Agents Against Panax ginseng Root Rot[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(02):182-190. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211516.
目的
2
研发安全有效的抗人参根腐病微生物菌剂。
方法
2
平板对峙试验筛选三七内生菌,形态学及分子生物鉴定拮抗菌株,单因素试验优选菌株发酵条件,响应面法优化微生物菌剂的载体及助剂配比制定生产工艺,通过对峙及盆栽试验验证菌剂验证防治效果。
结果
2
平板对峙试验筛选出一株具有显著抗根腐病的菌株
Fusarium pseudoanthophilum
,其抑菌率为53.33%。单因素试验结果表明
F. pseudoanthophilum
的发酵条件为发酵时间60 h,培养温度26 ℃,最适摇瓶发酵转速120 r∙min
-1
,pH 6.5。响应面优化试验结果表明,草炭60.00 g,羧甲基纤维素钠3.50 g,海藻酸钠4.76 g时,活菌数达到最大为5.23×10
9
cfu∙g
-1
,载体及助剂对活菌数的影响程度为草炭
>
羧甲基纤维素钠
>
海藻酸钠。菌剂对峙试验结果表明,菌剂质量浓度
>
1.00 g∙L
-1
时,对根腐病原菌尖孢镰刀菌具有显著的抑制作用且抑菌率
>
42.3%。盆栽试验结果表明,生防菌剂接种28 d后,显著降低了人参幼苗根腐病的发病率(66.99%)和病情指数(61.69%),且显著促进了人参幼苗的叶长(33.04%)和鲜重(34.48%)。
结论
2
F. pseudoanthophilum
菌剂具有较好的根腐病防治效果,值得进一步开发与利用。
Objective
2
To develop safe and effective microbial agents against
Panax ginseng
root rot.
Method
2
P. notoginseng
endophytes were screened in plate confrontation tests, followed by morphological and molecular biological identification of antagonistic strains, optimization of strain fermentation conditions in a single factor test, and determination of optimal carriers and auxiliary agents of the microbial agent and their ratio using response surface methodology for formulating the production process. The prevention and control effects of the microbial agent were verified in the confrontation and pot culture experiments.
Result
2
The plate confrontation test yielded a strain named
Fusarium pseudoanthophilum
with significant resistance to root rot, and its antibacterial rate was 53.33%. According to the single factor test, the fermentation conditions of
F. pseudoanthophilum
were determined to be fermentation time 60 h, fermentation temperature 26 ℃, speed 120 r·min
-1
, and pH 6.5. The response surface optimization results showed that the number of viable bacteria reached the maximum (5.23×10
9
cfu·g
-1
) when the peat was 60.00 g, sodium carboxymethylcellulose 3.50 g, and sodium alginate 4.76 g. The influences of carriers and auxiliary agents on the number of viable bacteria were sorted by degree in a descending order as follows: peat
>
sodium carboxymethylcellulose
>
sodium alginate. The confrontation test results showed that when the microbial agent concentration was greater than 1.00 g·L
-1
, it had a significant inhibitory effect on the root rot pathogen
F. oxysporum
and the inhibitory rate was more than 42.3%. As demonstrated by the pot culture experiment, the inoculation of biocontrol agent for 28 d significantly reduced the incidence (66.99%) of root rot in
P. ginseng
seedlings and disease index (61.69%) and increased their leaf length (33.04%) and fresh weight (34.48%).
Conclusion
2
F. pseudoanthophilum
inoculant is efficient in preventing and controlling the root rot, making it worthy of further development and utilization.
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