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1.广州中医药大学,广州 510405
2.广州中医药大学 第一附属医院,广州 510405
钱凯,博士,住院医师,从事中医临床基础及风湿病研究,E-mail:13724051203@163.com
* 林昌松,硕士,主任医师,博士生导师,从事风湿病中医药研究,E-mail:13802772276@ 163.com
收稿日期:2021-04-14,
网络出版日期:2021-07-29,
纸质出版日期:2021-10-20
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钱凯,曾丽盈,郑雪霞等.基于VEGF通路探讨断藤益母汤抑制胶原诱导型关节炎小鼠血管翳形成的作用[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(20):63-71.
QIAN Kai,ZENG Li-ying,ZHENG Xue-xia,et al.Inhibitory Effect of Duanteng Yimu Decoction on Pannus Formation in Mice with Collagen-induced Arthritis Based on VEGF Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(20):63-71.
钱凯,曾丽盈,郑雪霞等.基于VEGF通路探讨断藤益母汤抑制胶原诱导型关节炎小鼠血管翳形成的作用[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(20):63-71. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211707.
QIAN Kai,ZENG Li-ying,ZHENG Xue-xia,et al.Inhibitory Effect of Duanteng Yimu Decoction on Pannus Formation in Mice with Collagen-induced Arthritis Based on VEGF Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(20):63-71. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211707.
目的
2
探讨断藤益母汤抑制胶原诱导型关节炎(CIA)小鼠血管翳形成的机制。
方法
2
SPF级DBA/1雄性小鼠24只,随机分为4组,分别是空白组(NC组),模型组(CIA组),甲氨蝶呤组(MTX组),断藤益母汤组(DTYM组),每组6只。除正常组外,其余组小鼠进行造模。二次免疫起,给予灌胃等体积溶媒,MTX(1 mg·kg
-1
)和DTYM(15.4 g·kg
-1
),给药35 d。观察小鼠一般情况、关节炎指数;取材后进行膝、踝关节微型计算机断层摄影(micro CT)扫描,苏木素-伊红(HE)和番红-固绿染色观察病理改变,免疫组化检测血小板-内皮细胞黏附分子-1(CD31),血管内皮生长因子-
α
(VEGF-
α
),血管内皮生长因子受体2(VEGFR2),磷酸化(p)-VEGFR2的表达。
结果
2
与NC组比较,CIA组小鼠踝关节红肿明显,关节炎指数评分显著上升(
P
<
0.05,
P
<
0.01),膝、踝关节关节面明显破损,软骨厚度降低,膝、踝关节micro CT骨破坏评分明显升高(
P
<
0.01),滑膜中CD31,VEGF-
α
,VEGFR2,p-VEGFR2积分吸光度显著升高(
P
<
0.01);与CIA组比较,DTYM组踝关节红肿程度明显减轻,给药3周后小鼠关节炎指数评分明显下降(
P
<
0.05,
P
<
0.01),膝、踝关节关节面更完整,软骨厚度增加,膝、踝关节micro CT骨破坏评分均明显降低(
P
<
0.05,
P
<
0.01),滑膜中CD31,VEGF-
α
,VEGFR2,p-VEGFR2积分吸光度显著降低(
P
<
0.01)。
结论
2
断藤益母汤可能是通过调控VEGF通路抑制CIA小鼠血管翳的形成。
Objective
2
To investigate the mechanism of Duanteng Yimu decoction (DTYM) in the inhibition of pannus formation in collagen-induced arthritis (CIA) mice.
Method
2
Twenty-four SPF-grade DBA/1 male mice were randomly divided into the following four groups: a blank group (NC group), a model group (CIA group), a methotrexate group (MTX group), and a DTYM group, with six mice in each group. The mice, except for those in the NC group, were modeled. From the second immunization, the medium, MTX (1 mg·kg
-1
), and DTYM (15.4 g·kg
-1
) were administered at an equal volume by gavage for 35 days. Mice were observed for general condition and the arthritis index. The knee and ankle joints were scanned by microcomputed tomography (micro CT). Hematoxylin-eosin (HE) and safranin O/fast green staining were performed to observe pathological changes. Immunohistochemistry was performed to detect the expression of platelet/endothelial cell adhesion molecule-1 (CD31), vascular endothelial growth factor-
α
(VEGF-
α
), vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR2), and phosphorylated(p)-VEGFR2.
Result
2
Compared with the NC group, the CIA group showed red and swollen ankle joints, increased arthritis index scores (
P
<
0.05,
P
<
0.01), manifest injury in the knee and ankle joints, reduced cartilage thickness, elevated Micro CT bone destruction scores of knee and ankle joints (
P
<
0.01), and up-regulated absorbance values of synovial CD31, VEGF-
α
, VEGFR2, and p-VEGFR2 (
P
<
0.01). Compared with the CIA group, the DTYM group showed relieved ankle joint redness and swelling, reduced arthritis index scores of mice three weeks after administration (
P
<
0.05,
P
<
0.01), intact joint surfaces of the knee and ankle joints, thickened cartilage, declining Micro CT bone destruction scores in both the knee and ankle joints (
P
<
0.05,
P
<
0.01), and lowered absorbance values of CD31, VEGF-
α
, VEGFR2, and p-VEGFR2 in the synovium (
P
<
0.01).
Conclusion
2
DTYM can inhibit the pannus formation in CIA mice presumedly by regulating the VEGF pathway.
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