冰冻切片结合荧光成像技术对当归根中挥发油的定位分析

陈玉莹; 张咏梅; 王生艳; 冉贺亮; 田玺庆; 李欠; 邱黛玉

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20211750

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

冰冻切片结合荧光成像技术对当归根中挥发油的定位分析

药学基础 | 更新时间：2022-01-04

- 冰冻切片结合荧光成像技术对当归根中挥发油的定位分析
- Location Analysis of Volatile Oil in Angelicae Sinensis Radix by Frozen Section and Fluorescence Imaging
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第1期页码：182-188
- 作者机构：
  
  甘肃农业大学农学院，甘肃省干旱生境作物学重点实验室，兰州 730070
- 作者简介：
  
  陈玉莹，在读硕士，从事中药分析及质量评价研究，E-mail：1808789169@qq.com
  李欠，博士，副教授，从事中药分析及质量评价研究，Tel：0931-7631145，E-mail：liqian1984@gsau.edu.cn； *
  邱黛玉，博士，副教授，从事中药材栽培研究，E-mail：qiudy@gsau.edu.cn
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(31860102);甘肃农业大学盛彤笙科技创新基金项目(GSAU-STS-1737);甘肃农业大学人才引进专项(GSAU-RCZX201704)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211750
  中图分类号： R22;R931;R28;O657
- 收稿日期：2020-04-07，
  
  网络出版日期：2021-05-26，
  
  纸质出版日期：2022-01-05
- 稿件说明：
移动端阅览
陈玉莹,张咏梅,王生艳等.冰冻切片结合荧光成像技术对当归根中挥发油的定位分析[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(01):182-188.

CHEN Yu-ying,ZHANG Yong-mei,WANG Sheng-yan,et al.Location Analysis of Volatile Oil in Angelicae Sinensis Radix by Frozen Section and Fluorescence Imaging[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(01):182-188.
陈玉莹,张咏梅,王生艳等.冰冻切片结合荧光成像技术对当归根中挥发油的定位分析[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(01):182-188. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211750.

CHEN Yu-ying,ZHANG Yong-mei,WANG Sheng-yan,et al.Location Analysis of Volatile Oil in Angelicae Sinensis Radix by Frozen Section and Fluorescence Imaging[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(01):182-188. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211750.

摘要

目的

基于冰冻切片和荧光成像技术，建立一种简单、快捷、准确的当归根部挥发油定位方法，以揭示当归挥发油在根中的分布积累情况。

方法

以当归根为研究材料，通过比较不同冷冻保护剂对当归冰冻切片质量的影响，建立当归根部的最佳冰冻切片条件；根据挥发油损失情况及操作过程的复杂性比较苏丹Ⅲ化学染色法和荧光定位法定位当归挥发油的适宜性。

结果

建立了当归冰冻切片质量的评价新方法，通过评价方程发现当归归头、归身、归尾部位分别用20%甘油，15%甘油和20%蔗糖处理后，切片得分最高。当归根的栓内层与次生韧皮部油室、次生木质部油管中存在黄棕色油状物，可被苏丹Ⅲ染成橘红色或橘黄色，相同部位在荧光显微镜下存在绿色自发荧光。

结论

当归根部经过冷冻保护剂处理后可以得到较为完整的切片；挥发油存在于当归根的栓内层与次生韧皮部油室、次生木质部油管，可为其他植物中挥发油积累场所的观察提供借鉴。

Abstract

Objective

To establish a simple， fast and accurate method for locating the volatile oil in Angelicae Sinensis Radix based on frozen section and fluorescence imaging technology， and to reveal the distribution and accumulation of volatile oil in the roots of this herbal medicine.

Method

Angelicae Sinensis Radix was used as the research material， the best frozen section conditions for the research material were established by comparing the effects of different cryoprotectants on the quality of frozen sections of Angelicae Sinensis Radix. The suitability of Sudan Ⅲ chemical staining and fluorescence localization for positioning the volatile oil were compared according to the loss of volatile oil and the complexity of operation process.

Result

A new method for evaluating the quality of frozen sections of Angelicae Sinensis Radix was established. According to the evaluation equation， it was found that the highest score was obtained when the head， body and tail positions of Angelicae Sinensis Radix were treated with 20% glycerol， 15% glycerol and 20% sucrose， respectively. There was yellowish-brown oily substance in the oil chambers of phelloderm and secondary phloem， and oil canal of the secondary xylem of Angelicae Sinensis Radix， which could be stained orange red or orange yellow by Sudan Ⅲ， and there was green spontaneous fluorescence in the same part under the fluorescence microscope.

Conclusion

The relatively complete section of Angelicae Sinensis Radix can be obtained after being treated with cryoprotectant. The volatile oil exists in the oil chambers of phelloderm and secondary phloem， and oil canal of the secondary xylem of Angelicae Sinensis Radix. This study can provide reference for observation of the accumulation sites of volatile oil in other plants.

关键词

Keywords

references

国家药典委员会 . 中华人民共和国药典：一部［M］北京：中国医药科技出版社， 2020 ： 139 .

荔淑楠，王引权，王富胜，等 . 基于UPLC-Q-TOF-MS技术的不同品种当归代谢组学分析［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 8 ）： 138 - 147 .

严维花，曹虹虹，郭爽，等 . 基于实时荧光定量PCR技术的当归不同炮制品中金黄色葡萄球菌含量测定方法的开发及比较［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 23 ）： 137 - 144 .

王华，孙娜 . 当归的有效化学成分及药理作用研究进展分析［J］. 山东化工， 2017 ， 46 （ 18 ）： 59 - 60 .

李曦，张丽宏，王晓晓，等 . 当归化学成分及药理作用研究进展［J］. 中药材， 2013 ， 36 （ 6 ）： 1023 - 1028 .

赵静，夏晓培 . 当归的化学成分及药理作用研究现状［J］. 临床合理用药杂志， 2020 ， 13 （ 6 ）： 172 - 174 .

姚楠，王志旺，付晓艳，等 . 当归挥发油及其苯酞类成分对平滑肌作用的研究进展［J］. 中国现代应用药学， 2019 ， 36 （ 21 ）： 2738 - 2742 .

高东菊，鲍文敏，陈岳，等 . 黄瓜果瘤石蜡切片制片技术［J］. 分子植物育种， 2020 ， 18 （ 21 ）： 7143 - 7148 .

何卓航，陈红，汤丽云，等 . 阳春砂小花假合蕊柱的形成过程［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 9 ）： 176 - 183 .

邓绮雯，刘志霞，张强，等 . 水稻叶片徒手切片的荧光显微镜观察［J］. 仲恺农业工程学院学报， 2020 ， 33 （ 1 ）： 24 - 27 .

胡基华，李晶，张淑梅，等 . 半薄切片技术实践探讨［J］. 黑龙江科学， 2014 ， 5 （ 10 ）： 44 - 45 .

杨传红，赖晃文，唐庚云 . 超薄切片技术的质量控制［J］. 临床与实验病理学杂志， 2001 ， 17 （ 5 ）： 441 - 442 .

陈晓鹭，刘立伟，杨全，等 . 利用冰冻切片法观察艾纳香叶显微结构［J］. 热带作物学报， 2016 ， 37 （ 6 ）： 1086 - 1091 .

李建霞，张出兰，夏晓飞，等 . 植物冰冻切片条件的优化及其与石蜡切片在组织化学应用中的比较［J］. 植物学报， 2013 ， 48 （ 6 ）： 643 - 650 .

谢佩松，徐中根，韦存虚 . 冰冻切片技术在植物显微结构和组织化学中的应用［J］. 生物学杂志， 2009 ， 26 （ 3 ）： 72 - 74 .

李儒海，强胜 . 杂草果实的冰冻切片技术［J］. 植物学报， 2010 ， 45 （ 6 ）： 739 - 743 .

刘雪辉，张世鑫，杨鹏，等 . 一种用于观察木薯显微结构的冰冻切片技术［J］. 热带生物学报， 2014 ， 5 （ 1 ）： 67 - 72 .

于湘华，刘超，柏晨，等 . 光片荧光显微成像技术及应用进展［J］. 激光与光电子学进展， 2020 ， 57 （ 10 ）： 9 - 23 .

卢劲竹，蒋焕煜，崔笛 . 荧光成像技术在植物病害检测的应用研究进展［J］. 农业机械学报， 2014 ， 45 （ 4 ）： 244 - 252 .

CAI Y Q ， ZHENG Z J ， GAO P ， et al . Laparoscopic duodenum-preserving total pancreatic head resection using real-time indocyanine green fluorescence imaging ［J］. Surg Endosc ， 2021 ， 35 （ 3 ）： 1355 - 1361 .

HU Z ， HIDALGO G ， HOUSTON P L ， et al . Determination of spatial distributions of zinc and active biomass in microbial biofilms by two-photon laser scanning microscopy ［J］. Appl Environ Microbiol ， 2005 ， 71 （ 7 ）： 4014 - 4021 .

隋媛媛，于海业，张蕾，等 . 基于叶绿素荧光光谱分析的黄瓜霜霉病害预测模型［J］. 光谱学与光谱分析， 2011 ， 31 （ 11 ）： 2987 - 2990 .

郑艳，徐珞珊，王峥涛，等 . 香豆素类成分在球花石斛 Dendrobium thyrsiflorum 叶和根中的分布与动态变化［J］. 中国中药杂志， 2009 ， 34 （ 9 ）： 1071 - 1074 .

朱成章，张维胜，杜斌斌，等 . 达芬奇手术系统荧光成像技术在结直肠外科手术中的应用进展［J］. 机器人外科学杂志， 2020 ， 1 （ 5 ）： 332 - 337 .

兰志琼，卢先明，陈继兰，等 . 白芷根中香豆素类成分的组织化学定位研究［J］. 中国医药导报， 2011 ， 8 （ 36 ）： 66 - 68 .

李静，魏玉海，秦雪梅，等 . 基于NMR代谢组学技术的当归不同部位化学成分比较［J］. 中草药， 2017 ， 48 （ 7 ）： 1409 - 1415 .

刘剑锋，阎秀峰，程云清，等 . 冰冻切片技术在高山红景天细胞学研究中的应用［J］. 东北林业大学学报， 2006 ， 34 （ 4 ）： 110 ， 119 .

焦石，段玉玺，孙华，等 . 大豆根部冰冻切片最佳方法试验［J］. 湖北农业科学， 2009 ， 48 （ 4 ）： 806 - 808 .

陆叶，席梦利，郑佳，等 . 杨树和杉木茎段组织的冰冻切片技术研究［J］. 南京林业大学学报：自然科学版， 2009 ， 33 （ 6 ）： 44 - 48 .

穆靖，袁强，吴秀菊 . 北细辛（ Asarum heterotropoides ）营养器官的形态结构及其挥发油的组织化学定位［J］. 东北农业大学学报， 2009 ， 40 （ 2 ）： 51 - 56 .

李建霞，张出兰，夏晓飞，等 . 植物冰冻切片条件的优化及其与石蜡切片在组织化学应用中的比较［J］. 植物学报， 2013 ， 48 （ 6 ）： 643 - 650 .

蒋素华，梁芳，张燕，等 . 冰冻切片技术在铁皮石斛显微结构上的应用［J］. 植物研究， 2019 ， 39 （ 4 ）： 613 - 618 .

兰志琼，谢晓芳，艾青青，等 . 基于高内涵细胞分析技术的川白芷香豆素类成分的定位及定量研究［J］. 时珍国医国药， 2016 ， 27 （ 11 ）： 2599 - 2601 .

陈莹，惠楠，童珍珍 . 白芷营养器官形态结构及其挥发油的组织化学定位［J］. 时珍国医国药， 2014 ， 25 （ 9 ）： 2162 - 2164 .

张莹，陈建伟，徐建亚 . 明党参中香豆素成分的组织定位、分布和荧光相对定量研究［J］. 时珍国医国药， 2011 ， 22 （ 3 ）： 625 - 627 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

多伞阿魏的冰冻切片方法建立及挥发油、香豆素类成分组织化学定位分析

不同炮制条件对厚朴刺激性影响的GC-MS分析

乌药挥发油通过AMPK/mTOR信号通路诱导胃癌AGS细胞凋亡和自噬

麸炒茅苍术及其不同物化形式标准汤剂中挥发油的量质传递规律分析

夏枯草种子与奇亚籽、兰香子的性状、膨胀度和化学组成比较