补阳还五汤通过甲酰肽受体2减轻大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤

巫芳华; 刘玉莲; 高宇容; 杨开令; 刘微

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20211838

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

补阳还五汤通过甲酰肽受体2减轻大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤

经典名方 | 更新时间：2021-08-18

- 补阳还五汤通过甲酰肽受体2减轻大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤
- Buyang Huanwutang Alleviated Oxidative Stress Following Cerebral Ischemia/Reperfusion in Rats by Formyl Peptide Receptor 2
- 中国实验方剂学杂志 2021年27卷第18期页码：9-15
- 作者机构：
  
  广州中医药大学基础医学院，广州 510006
- 作者简介：
  
  巫芳华，在读硕士，从事中医药防治心脑血管疾病研究，Tel：020-39358028，E-mail：416985212@qq.com
  * 刘微，博士，教授，从事中医药防治心脑血管疾病研究，Tel：020-39358028，E-mail：weiliu1980@yahoo.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(81673772);广州中医药大学“青年英才培养工程”项目(QNYC20170102)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211838
  中图分类号： R2-0;R743.31;R33;R322.8
- 收稿日期：2021-06-12，
  
  网络出版日期：2021-07-27，
  
  纸质出版日期：2021-09-20
- 稿件说明：
移动端阅览
巫芳华,刘玉莲,高宇容等.补阳还五汤通过甲酰肽受体2减轻大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(18):9-15.

WU Fang-hua,LIU Yu-lian,GAO Yu-rong,et al.Buyang Huanwutang Alleviated Oxidative Stress Following Cerebral Ischemia/Reperfusion in Rats by Formyl Peptide Receptor 2[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(18):9-15.
巫芳华,刘玉莲,高宇容等.补阳还五汤通过甲酰肽受体2减轻大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(18):9-15. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211838.

WU Fang-hua,LIU Yu-lian,GAO Yu-rong,et al.Buyang Huanwutang Alleviated Oxidative Stress Following Cerebral Ischemia/Reperfusion in Rats by Formyl Peptide Receptor 2[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(18):9-15. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211838.

摘要

目的

探讨补阳还五汤通过甲酰肽受体2（FPR2）对脑缺血再灌注模型大鼠氧化应激反应的抑制作用及神经保护作用。

方法

将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组和补阳还五汤联合FPR2抑制剂（Boc-2）组，假手术组仅游离血管，不做插线处理。其他各组运用改良Longa法构建大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，缺血2 h后再灌注；再灌注后补阳还五汤组和补阳还五汤联合Boc-2组给予补阳还五汤（16 g·kg

-1

）灌胃，每日2次；补阳还五汤联合Boc-2组术前30 min腹腔注射Boc-2 （0.4 mg·kg

-1

）；假手术组与模型组给予等体积生理盐水。再灌注24 h后，退化神经元染色（FJC）观察FJC阳性细胞数目的变化；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测缺血侧脑组织凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2），Bcl-2相关X蛋白（Bax）和活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（cleaved Caspase-3）蛋白表达；生化试剂盒检测缺血侧脑组织中超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA），谷胱甘肽（GSH），一氧化氮（NO）水平；免疫荧光检测还原型辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶2（NOX2）平均荧光强度。

结果

与假手术组比较，模型组的FJC阳性细胞数目增加（

0.01），Bcl-2表达减少（

0.01），Bax和cleaved Caspase-3表达增加（

0.01），NO和MDA含量增加（

0.05，

0.01），GSH和SOD活性下降（

0.05，

0.01），NOX2表达增加（

0.01）；与模型组比较，补阳还五汤组FJC阳性细胞数目减少（

0.01），Bcl-2表达增加（

0.01），cleaved Caspase-3和Bax明显减少（

0.05，

0.01），NO和MDA减少（

0.05，

0.01），GSH和SOD增加（

0.01），NOX2表达减少（

0.01）。给予Boc-2后，补阳还五汤的作用部分被抑制。

结论

补阳还五汤可以减轻脑缺血再灌注大鼠氧化应激损伤，抑制细胞凋亡，其作用机制可能与FPR2调控NOX2的表达有关。

Abstract

Objective

To investigate the role of formyl peptide receptor 2 （FPR2） in the inhibitory effects of Buyang Huanwutang （BYHWT） on the oxidative stress and its protective effects on cerebral ischemia-reperfusion in rats.

Method

Forty-eight male SD rats were randomly divided into sham group， model group， BYHWT group and BYHWT combined with FPR2 inhibitor （Boc-2） group. In the sham group， only the vessels were isolated. In other groups， the middle cerebral artery occlusion （MCAO） model was constructed using the modified Longa method and reperfused after 2 h of ischemia. BYHWT （16 g·kg

-1

） was given by gavaged twice daily after reperfusion in BYHWT group and BYHWT+Boc-2 group. Boc-2 （0.4 mg·kg

-1

） was injected intraperitoneally 30 min before surgery. Equal volume of saline were given instead in sham and model group. After 24 h of reperfusion， Fluoro-Jade C （FJC） staining was performed to observe the changes in the number of FJC-positive cells. Western blot was performed to detect the expression of apoptosis-related B-cell lymphoma-2 (Bcl-2)， Bcl-2 associated X (Bax)， and cleaved aspartic acid cysteine proteolytic enzyme-3（Caspase-3）. Besides， superoxide dismutase （SOD）， malondialdehyde （MDA）， glutathione （GSH）， and nitric oxide （NO） was measured. The mean fluorescence intensity of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate Ⅱ（NADPH） oxidase 2 （NOX2） was examined by immunofluorescence.

Result

Compared with sham group， the model group showed increased number of FJC-positive cells （

0.01）， decreased Bcl-2 expression （

0.01）， increased Bax and cleaved Caspase-3 expression （

0.01）， increased NO and MDA content （

0.05，

0.01）， decreased GSH and SOD activities （

0.05，

0.01）， and increased NOX2 expression （

0.01）. Compared with model group， there were decreased FJC-positive cells （

0.01）， up-regulated Bcl-2 expression （

0.01） with down-regulated cleaved Caspase-3 and Bax （

0.05，

0.01）， decreased NO and MDA （

0.05，

0.01） with increased GSH and SOD （

0.01）， and decreased NOX2 expression （

0.01） in the BYHWT group. All the above effects were partially blocked by Boc-2.

Conclusion

BYHWT can reduce oxidative stress injury and inhibit apoptosis in cerebral ischemia/reperfusion rats， which may be related with the down-regulation of NOX2 expression by FPR2.

关键词

Keywords

references

ALLEN C ， BAYRAKTUTAN U . Oxidative stress and its role in the pathogenesis of ischaemic stroke ［J］. Int J Stroke ， 2009 ， 4 （ 6 ）： 461 - 470 .

MOZAFFARIAN D ， BENJAMIN E ， GO A ， et al . Heart disease and stroke statistics-2015 update：a report from the American Heart Association ［J］. Circulation ， 2015 ， 131 ： 434 - 441 .

丁彩娟，江勤，王鑫，等 . 补阳还五汤有效部位对动物全脑缺血损伤的保护作用及抗氧化与凋亡机制［J］. 中药药理与临床， 2017 ， 33 （ 4 ）： 2 - 7 .

BISICCHIA E ， SASSO V ， CANTANZARO G ， et al . Resolvin D1 halts remote neuroinflammation and improves functional recovery after focal brain damage via ALX/FPR2 receptor-regulated microRNAs ［J］. Mol Neurobiol ， 2018 ， 55 （ 8 ）： 6894 - 6905 .

VITAL S ， BECKER F ， HOLLOWAY P ， et al . Formyl-peptide receptor 2/3/lipoxin A4 receptor regulates neutrophil-platelet aggregation and attenuates cerebral inflammation：impact for therapy in cardiovascular disease ［J］. Circulation ， 2016 ， 133 （ 22 ）： 2169 - 2179 .

LONGA E ， WEINSTEIN P ， CARLSON S . Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats ［J］. Stroke ， 1989 ， 20 （ 1 ）： 84 - 91 .

徐淑云，卞如濂，陈修 . 药理实验方法学［M］. 3版 . 北京：人民卫生出版社， 2001 ： 202 - 203 .

杨开令，周颖，闫福曼，等 . 补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠恢复期突触可塑性的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 1 ）： 43 - 49 .

ROSSI S ， DI F ， GESUALDO C ， et al . Interplay between intravitreal RvD 1 and local endogenous sirtuin-1 in the protection from endotoxin-induced uveitis in rats ［J］. Mediators Inflamm ， 2015 ， 2015 ： 126408 .

刘芳，刘青萍，王宇红，等 . 补阳还五汤及其精简方抗脑缺血损伤功效比较［J］. 中国中医药信息杂志， 2014 ， 21 （ 9 ）： 46 - 49 .

WANG H ， LIOU K ， WANG Y ， et al . Deciphering the neuroprotective mechanisms of Bu-yang Huan-wu decoction by an integrative neurofunctional and genomic approach in ischemic stroke mice ［J］. J Ethnopharmacol ， 2011 ， 138 （ 1 ）： 22 - 33 .

龚弟鸿 . 补阳还五汤含药血清对神经元OGD损伤后凋亡和凋亡相关蛋白的影响［D］. 成都：成都中医药大学， 2020 .

SHEN J ， ZHU Y ， HUANG K ， et al . Buyang Huanwutang attenuates H 2 O 2 -induced apoptosis by inhibiting reactive oxygen species-mediated mitochondrial dysfunction pathway in human umbilical vein endothelial cells ［J］. BMC Complement Altern Med ， 2016 ， 16 ： 154 .

BATHINA S ， DAS U . Resolvin D 1 decreases severity of streptozotocin-induced type 1 diabetes mellitus by enhancing BDNF levels，reducing oxidative stress，and suppressing inflammation ［J］. Int J Mol Sci ， 2021 ， 22 （ 4 ）： 1516 .

LI J ， DENG X ， BAI T ， et al . Resolvin D 1 mitigates non-alcoholic steatohepatitis by suppressing the TLR4-MyD88-mediated NF- κ B and MAPK pathways and activating the Nrf2 pathway in mice ［J］. Int Immunopharmacol ， 2020 ， 88 ： 106961 .

MUKHERJEE P ， MARCHESELLI V ， SERHAN C ， et al . Neuroprotectin D 1 ：a docosahexaenoic acid-derived docosatriene protects human retinal pigment epithelial cells from oxidative stress ［J］. Proc Natl Acad Sci U S A ， 2004 ， 101 （ 22 ）： 8491 - 8496 .

钟芳芳，吴承龙，孙新芳，等 . 补阳还五汤联合依达拉奉对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响［J］. 中国老年学杂志， 2017 ， 37 （ 21 ）： 5251 - 5253 .

张运克，魏明，宰军华 . 补阳还五汤及拆方对脑缺血再灌注模型血清、脑组织的SOD、MDA及NO含量影响［J］. 中药新药与临床药理， 2003 ， 14 （ 6 ）： 366 - 369 .

YANG L ， GUAN G ， LEI L ， et al . Oxidative and endoplasmic reticulum stresses are involved in palmitic acid-induced H9c2 cell apoptosis ［J］. Biosci Rep ， 2019 ， doi： 10.1042/BSR20190225 http://dx.doi.org/10.1042/BSR20190225 .

CATTANEO F ， RUSSO R ， CASTALDO M ， et al . Phosphoproteomic analysis sheds light on intracellular signaling cascades triggered by formyl-peptide receptor 2 ［J］. Sci Rep ， 2019 ， 9 （ 1 ）： 17894 .

DIEKMANN D ， ABO A ， JOHNSTON C ， et al . Interaction of Rac with p67phox and regulation of phagocytic NADPH oxidase activity ［J］. Science ， 1994 ， 265 （ 5171 ）： 531 - 533 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

黑逍遥散级联调控氧化应激和细胞凋亡对阿尔茨海默病大鼠的神经保护作用

基于GPX4-ACSL4轴探讨补阳还五汤抑制铁死亡促进脊髓损伤后神经功能恢复的作用机制

苓桂术甘汤对心梗后慢性心衰大鼠线粒体分裂-融合及Sirt3/AMPK信号通路的影响

补阳还五汤对糖尿病肾病小鼠铁死亡的影响

基于AMPK/Sirt1信号通路探讨身痛逐瘀汤含药血清对膝骨性关节炎大鼠软骨细胞的保护作用