贞芪扶正颗粒HPLC指纹图谱与其增强免疫功能的谱效关系分析

姜文月; 韩淑丽; 唐明哲; 赵贵芳; 高陆; 缪经纬; 李鹏东

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20211853

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贞芪扶正颗粒HPLC指纹图谱与其增强免疫功能的谱效关系分析

药学基础 | 更新时间：2023-05-17

- 贞芪扶正颗粒HPLC指纹图谱与其增强免疫功能的谱效关系分析
- Spectrum-effect Relationship Analysis Between HPLC Fingerprint and Immunomodulatory Activity of Zhenqi Fuzheng Granules
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第8期页码：123-130
- 作者机构：
  
  1.广州医科大学附属第六医院，清远市人民医院，广东清远 511518
  2.吉林省现代中药工程研究中心有限公司，长春 130012
- 作者简介：
  
  姜文月，博士，高级工程师，从事中药物质基础及作用机制研究，E-mail：jiangwenyue1987@126.com
  李鹏东，在读博士，助理研究员，从事干细胞及中药研究，E-mail：lipengdongwww@163.com
- 基金信息：
  
  国家中药标准化项目(ZYBZH-C-JL-26);吉林省科技发展计划项目(YYZX201503)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211853
  中图分类号： R22;R28;R9;O657
- 收稿日期：2021-05-09，
  
  网络出版日期：2021-08-06，
  
  纸质出版日期：2022-04-20
- 稿件说明：
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姜文月,韩淑丽,唐明哲等.贞芪扶正颗粒HPLC指纹图谱与其增强免疫功能的谱效关系分析[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(08):123-130.

JIANG Wen-yue,HAN Shu-li,TANG Ming-zhe,et al.Spectrum-effect Relationship Analysis Between HPLC Fingerprint and Immunomodulatory Activity of Zhenqi Fuzheng Granules[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(08):123-130.
姜文月,韩淑丽,唐明哲等.贞芪扶正颗粒HPLC指纹图谱与其增强免疫功能的谱效关系分析[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(08):123-130. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211853.

JIANG Wen-yue,HAN Shu-li,TANG Ming-zhe,et al.Spectrum-effect Relationship Analysis Between HPLC Fingerprint and Immunomodulatory Activity of Zhenqi Fuzheng Granules[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(08):123-130. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211853.

摘要

目的

通过谱效相关性分析探究贞芪扶正颗粒增强免疫功能的药效物质成分，为提升其质量标准提供实验依据。

方法

收集6个厂家18批贞芪扶正颗粒产品，采用高效液相色谱法（HPLC）建立其指纹图谱，流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~15 min，5%A；15~23 min，5%~8%A；23~30 min，8%~11%A；30~45 min，11%~18%A；45~60 min，18%~21%A；60~67 min，21%~23%A；67~90 min，23%~37%A），检测波长220 nm，通过相似度分析及层次聚类分析评价不同厂家产品的质量差异性，采用环磷酰胺诱导小鼠免疫低下模型考察不同厂家产品的免疫增强药效，采用Spearman双变量相关性分析进行指纹图谱与免疫增强功能的谱效学研究，利用高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS

）对谱效相关色谱峰进行鉴定，采用电喷雾离子源，正、负离子模式，扫描范围

100~1 500。

结果

建立了贞芪扶正颗粒的HPLC指纹图谱，确定了20个共有峰。质量分析及药效考察结果显示，不同厂家产品共有峰峰面积及药效作用差异明显；谱效相关性分析结果显示，指纹谱图中的12个色谱峰与该制剂具有免疫增强功能呈明显正相关，鉴定了其中8个色谱峰，分别为2号峰（红景天苷）、5号峰（松果菊苷）、6号峰（毛蕊异黄酮葡萄糖苷）、7号峰（特女贞苷异构体）、9号峰（异女贞苷）、11号峰（毛蕊异黄酮）、14号峰（女贞苷G

或oleonuezhenide）和18号峰（刺芒柄花素）。

结论

不同厂家生产的贞芪扶正颗粒产品质量及药效存在一定差异，通过谱效相关性分析阐明了该制剂具有免疫增强功能的主要药效物质基础，可为其质量标准提升提供有益借鉴。

Abstract

Objective

To explore the pharmacodynamic ingredients of Zhenqi Fuzheng granules （ZFG） for immunomodulatory through spectrum-effect relationship analysis， which provides experimental basis for improving the quality standard of ZFG.

Method

Eighteen batches of ZFG from six manufacturers were collected for analysis. The fingerprints were established by high performance liquid chromatography （HPLC）. Acetonitrile （A）-0.1% formic acid aqueous solution （B） were adopted as the mobile phase with gradient elution （0-15 min， 5%A； 15-23 min， 5%-8%A； 23-30 min， 8%-11%A； 30-45 min， 11%-18%A； 45-60 min， 18%-21%A； 60-67 min， 21%-23%A； 67-90 min， 23%-37%A）， the detection wavelength was 220 nm. Chemometric analysis such as similarity analysis and hierarchical cluster analysis （HCA） were subsequently used to analyze the similarities and chemical differences among these samples. A cyclophosphamide-induced immunodeficiency mouse model was used to evaluate the immune-enhancing effects of the products from different manufacturers. The spectrum-effect relationship between HPLC fingerprints and the immunomodulatory effects

was examined using

Spearman bivariate correlation analysis. HPLC coupled with mass spectrometry （HPLC-MS

） was used to identify the spectrum-effect related peaks with electrospray ionization， positive and negative ion modes， and scanning range of

100-1 500.

Result

The HPLC fingerprint of ZFG was established， and twenty peaks with good resolution were selected as common peaks. The results of quality analysis and pharmacodynamic test showed there were significant differences in both ingredients content and immune-enhancing effects of ZFG from different manufacturers. Through spectrum-effect relationship study， twelve peaks were screened as bioactive ingredients peaks. Thereafter， eight peaks among them were subsequently identified by HPLC-MS

They were salidroside （peak 2）， echinacoside （peak 5）， calycosin-7-glucoside （peak 6）， isomer of specnuezhenide （peak 7）， isonuezhenide （peak 9）， calycosin （peak 11）， nuezhenide G

or oleonuezhenide （peak 14）， and formononetin （peak 18）， respectively.

Conclusion

There are differences in quality and efficacy of ZFG produced by different manufacturers. Through spectrum-effect relationship analysis， the medicinal ingredients of ZFG for immune-enhancing effects are screened， which can provide reference for the improvement of its quality standard.

关键词

Keywords

references

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