葛根汤颗粒对人冠状病毒229E寒湿疫毒袭肺证病证结合小鼠肺炎模型的治疗作用

耿子涵; 鲍岩岩; 包蕾; 赵荣华; 孙静; 时宇静; 郭姗姗; 陶夏莉; 高英杰; 崔晓兰

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20220358

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葛根汤颗粒对人冠状病毒229E寒湿疫毒袭肺证病证结合小鼠肺炎模型的治疗作用

药理 | 更新时间：2022-08-30

- 葛根汤颗粒对人冠状病毒229E寒湿疫毒袭肺证病证结合小鼠肺炎模型的治疗作用
- Therapeutic Effect of Gegentang Granules on Mouse Model with hCoV-229E Pneumonia and Hanshi Yidu Xifei Syndrome
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第19期页码：34-41
- 作者机构：
  
  1.中国中医科学院中药研究所，北京 100700
  2.瑞阳制药股份有限公司，山东淄博 256100
- 作者简介：
  
  耿子涵，博士，副研究员，从事免疫学及中药药理学研究，E-mail：zhgeng@icmm.ac.cn
  崔晓兰，博士，研究员，从事中药药理学研究，Tel：010-84252805，E-mail：cuixiaolan2812@126.com
- 基金信息：
  
  国家重点研发计划项目(2020YFE0205100)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220358
  中图分类号： R22;R28;R96;R563.1
- 收稿日期：2021-11-08，
  
  网络出版日期：2022-03-07，
  
  纸质出版日期：2022-10-05
- 稿件说明：
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耿子涵,鲍岩岩,包蕾等.葛根汤颗粒对人冠状病毒229E寒湿疫毒袭肺证病证结合小鼠肺炎模型的治疗作用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(19):34-41.

GENG Zihan,BAO Yanyan,BAO Lei,et al.Therapeutic Effect of Gegentang Granules on Mouse Model with hCoV-229E Pneumonia and Hanshi Yidu Xifei Syndrome[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(19):34-41.
耿子涵,鲍岩岩,包蕾等.葛根汤颗粒对人冠状病毒229E寒湿疫毒袭肺证病证结合小鼠肺炎模型的治疗作用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(19):34-41. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220358.

GENG Zihan,BAO Yanyan,BAO Lei,et al.Therapeutic Effect of Gegentang Granules on Mouse Model with hCoV-229E Pneumonia and Hanshi Yidu Xifei Syndrome[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(19):34-41. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220358.

摘要

目的

研究葛根汤颗粒对人冠状病毒229E（hCoV-229E）寒湿疫毒袭肺证病证结合肺炎小鼠的治疗作用。

方法

BALB/c小鼠分为正常组、感染组、寒湿组、模型组、磷酸氯喹组（0.18 g·kg

-1

）、干扰素

2b（IFN-

2b）组（1.83×10

U·kg

-1

）及葛根汤颗粒高、低剂量组（6.6、3.3 g·kg

-1

），每组10只，采用寒湿环境加hCoV-229E感染进行造模并给药。观察小鼠一般状态及肺指数，使用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肺组织病毒载量，用苏木素-伊红（HE）染色法评价肺组织病变，运用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清胃肠激素、肺组织炎性因子的水平，利用流式细胞术检测外周血淋巴细胞百分比。

结果

葛根汤颗粒能够明显缓解模型小鼠精神萎靡、四肢无力、大便黏腻等状态；葛根汤颗粒高剂量组能够明显降低模型小鼠的肺指数、组织病理学评分、血清胃动素水平（

0.05，

0.01）；与模型组比较，葛根汤颗粒高、低剂量组均可明显升高血清胃泌素水平（

0.05，

0.01），明显升高外周血CD4

、CD8

T淋巴细胞百分比（

0.05，

0.01），显著降低肺组织中肿瘤坏死因子-

（TNF-

）水平（

0.01），并使白细胞介素-6（IL-6）水平呈现降低趋势。

结论

葛根汤颗粒能够改善hCoV-229E寒湿疫毒袭肺证病证结合小鼠的一般体征，调节胃肠激素水平，降低肺指数和肺组织病理学评分，并可能通过抑制肺组织中炎性细胞因子、恢复外周血淋巴细胞百分比发挥免疫调节作用，从而对模型小鼠起到治疗作用。

Abstract

Objective

To determine the therapeutic effect of Gegentang granules on a disease-syndrome mouse model combining human coronavirus 229E （hCoV-229E） pneumonia with Hanshi Yidu Xifei syndrome

in vivo

Method

Mice were randomly divided into normal group， infection group， cold-dampness group， model group， chloroquine phosphate group （0.18 g·kg

-1

）， interferon-

2b （IFN-

2b） group （1.83×10

U·kg

-1

）， Gegentang granules high-dose and low-dose groups （6.6， 3.3 g·kg

-1

） with 10 mice in each group. Cold-dampness environment and hCoV-229E infection were used for modeling， and the general status and lung index of mice in each group were observed. The viral load in lung tissue was detected by real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR）， the pathological changes in lung tissue were evaluated by hematoxylin-eosin （HE） staining， the levels of serum gastrointestinal hormones and inflammatory factors in lung tissue were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and the percentage of peripheral blood lymphocytes was detected by flow cytometry.

Result

Comparing with model group， Gegentang granules could significantly alleviate the physical signs of Hanshi Yidu Xifei syndrome， including listlessness， weakness of limbs， sticky stool， etc. Comparing with model group， Gegentang granules high-dose group significantly reduced lung index， histopathological score of interstitial lung and bronchus， and the level of serum motilin （

0.05，

0.01）， two doses of Gegentang granules could significantly increase the level of serum gastrin （

0.05，

0.01）， the percentage of CD4

， CD8

T lymphocytes in peripheral blood （

0.05，

0.01）， and the level of tumor necrosis factor-

（TNF-

） in lung tissue was significantly decreased （

0.01）， and the level of interleukin-6 （IL-6） showed decreasing tendency.

Conclusion

Gegentang granules has therapeutic effect on model mice. It can improve the appearance and behavior characterization， regulate the level of gastrointestinal hormones， decrease lung index and histopathological score， and possibly play an immunomodulatory role by inhibiting the expression of inflammatory cytokines in lung tissue and restoring the percentage of peripheral blood lymphocytes.

关键词

Keywords

references

张丽娜，曹玲 . 冠状病毒感染概况研究进展［J］. 中国实用儿科杂志， 2021 ， 36 （ 6 ）： 469 - 473 .

FUNK C J ， WANG J ， ITO Y ， et al . Infection of human alveolar macrophages by human coronavirus strain 229E ［J］. J Gen Virol ， 2012 ， 93 （Pt 3 ）： 494 - 503 .

钱艺，谢正德，任丽丽，等 . 2007—2015年北京地区儿童急性下呼吸道感染人冠状病毒检测及临床分析［J］. 中华儿科杂志， 2015 ， 53 （ 9 ）： 707 - 711 .

DE WIT E ， VAN DOREMALEN N ， FALZARANO D ， et al . SARS and MERS：Recent insights into emerging coronaviruses ［J］. Nat Rev Microbiol ， 2016 ， 14 （ 8 ）： 523 - 534 .

WIERSINGA W J ， RHODES A ， CHENG A C ， et al . Pathophysiology，transmission，diagnosis，and treatment of coronavirus disease 2019 （COVID-19）：A review ［J］. JAMA ， 2020 ， 324 （ 8 ）： 782 - 793 .

王永炎 . 流行性感冒与人感染禽流感诊疗及防控技术指南［M］. 北京：中国中医药出版社， 2013 .

巴元明，李晓东，闵晓俊，等 . 湖北省中医院新型冠状病毒肺炎中医药防治方案（第三版）［J］. 湖北中医杂志， 2020 ， 42 （ 2 ）： 7 - 8 .

国家卫生健康委员会，国家中医药管理局 . 新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第八版）［EB/OL］.（ 2020-08-19 ）［ 2022-11-08 ］. http：//www.nhc.gov.cn/cms-search/downFiles/a449a3e2e2c94d9a856d5faea2ff0f94.pdf http://www.nhc.gov.cn/cms-search/downFiles/a449a3e2e2c94d9a856d5faea2ff0f94.pdf .

常富业，王永炎 . 浅谈津络学说［J］. 北京中医药大学学报， 2022 ， 45 （ 1 ）： 11 - 14 .

刘渡舟，傅士垣 . 伤寒论诠解［M］. 天津：天津科学技术出版社， 1983 .

祝玉慧，田磊，徐宁 . 葛根汤颗粒合达菲胶囊治疗甲型H1N1流感38例［J］. 山东中医杂志， 2010 ， 29 （ 8 ）： 535 - 536 .

曾志安，蔡少娜，陈文艺，等 . 葛根汤颗粒治疗上呼吸道感染100例临床观察［J］. 内蒙古中医药， 2017 ， 36 （ 8 ）： 45 .

崔静，崔琪 . 葛根汤颗粒治疗小儿风寒感冒疗效观察［J］. 中西医结合心血管病电子杂志， 2019 ， 7 （ 1 ）： 168 .

耿子涵，包蕾，郭姗姗，等 . 人冠状病毒229E寒湿疫毒袭肺证病证结合小鼠模型的建立及评价［J］. 中国比较医学杂志， 2022 ， 32 （ 1 ）： 3 - 12，67 .

赵荣华，孙静，时宇静，等 . 宣肺化痰法对冠状病毒肺炎寒湿疫毒袭肺小鼠病证结合模型的干预作用［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 11 ）： 21 - 27 .

郭姗姗，李丹，时宇静，等 . 基于冠状病毒肺炎寒湿疫毒袭肺证病证结合模型的金柴抗病毒胶囊疗效评价［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 13 ）： 1 - 7 .

赵荣华，孙静，郭姗姗，等 . 体外培育牛黄对人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证小鼠病证结合模型的效用特点［J］. 中国实验方剂学杂志， 2021 ， 27 （ 2 ）： 66 - 73 .

SZAPIEL S V ， ELSON N A ， FULMER J D ， et al . Bleomycin-induced interstitial pulmonary disease in the nude，athymic mouse ［J］. Am Rev Respir Dis ， 1979 ， 120 （ 4 ）： 893 - 899 .

VILLAMIL-GÓMEZ W E ， SÁNCHEZ Á ， GELIS L ， et al . Fatal human coronavirus 229E （HCoV-229E） and RSV-related pneumonia in an AIDS patient from Colombia ［J］. Travel Med Infect Dis ， 2020 ， 36 ： 101573 .

VASSILARA F ， SPYRIDAKI A ， POTHITOS G ， et al . A rare case of human coronavirus 229E associated with acute respiratory distress syndrome in a healthy adult ［J］. Case Rep Infect Dis ， 2018 ， 2018 ： 6796839 .

薛蓓云，李小荣，黄煌 . 葛根类方探析［J］. 上海中医药杂志， 2017 ， 51 （ 3 ）： 28 - 30 .

黄炳添 . 基于属性偏序结构图原理-李赛美运用葛根汤类方辨治经验整理［D］. 广州：广州中医药大学， 2015 .

陈嘉文 . 葛根汤运用规律探究［D］. 广州：广州中医药大学， 2013 .

DELOOSE E ， VERBEURE W ， DEPOORTERE I ， et al . Motilin：From gastric motility stimulation to hunger signalling ［J］. Nat Rev Endocrinol ， 2019 ， 15 （ 4 ）： 238 - 250 .

LINDSTRÖM E ， CHEN D ， NORLÉN P ， et al . Control of gastric acid secretion：The gastrin-ECL cell-parietal cell axis ［J］. Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol ， 2001 ， 128 （ 3 ）： 505 - 514 .

章敏，陈刚，张六通，等 . 六淫湿邪动物模型研究［J］. 湖北中医杂志， 2007 ， 29 （ 9 ）： 5 - 7 .

张弦，庞浩龙，贡联兵，等 . 葛根汤颗粒的临床应用评价［J］. 中国医院用药评价与分析， 2013 ， 13 （ 10 ）： 869 - 871 .

GENG Z K ， LI Y Q ， CUI Q H ， et al . Exploration of the mechanisms of Gegen decoction against influenza A virus infection ［J］. Chin J Nat Med ， 2019 ， 17 （ 9 ）： 650 - 662 .

MESEL-LEMOINE M ， MILLET J ， VIDALAIN P O ， et al . A human coronavirus responsible for the common cold massively kills dendritic cells but not monocytes ［J］. J Virol ， 2012 ， 86 （ 14 ）： 7577 - 7587 .

WHERRY E J ， AHMED R . Memory CD8 T-cell differentiation during viral infection ［J］. J Virol ， 2004 ， 78 （ 11 ）： 5535 - 5545 .

MELENOTTE C ， SILVIN A ， GOUBET A G ， et al . Immune responses during COVID-19 infection ［J］. Oncoimmunology ， 2020 ， 9 （ 1 ）： 1807836 .

CHEN N S ， ZHOU M ， DONG X ， et al . Epidemiological and clinical characteristics of 99 cases of 2019 novel coronavirus pneumonia in Wuhan，China：A descriptive study ［J］. Lancet ， 2020 ， 395 （ 10223 ）： 507 - 513 .

BAHL K ， KIM S K ， CALCAGNO C ， et al . IFN-induced attrition of CD8 T cells in the presence or absence of cognate antigen during the early stages of viral infections ［J］. J Immunol ， 2006 ， 176 （ 7 ）： 4284 - 4295 .

高鹏 . 寒湿外邪对上呼吸道感染小鼠免疫功能影响的实验研究［D］. 哈尔滨：黑龙江中医药大学， 2011 .

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