参白解毒方抑制HCT116细胞增殖的药效及机制

江东; 程海波; 沈卫星; 徐长亮; 谭佳妮; 赖岳阳; 孙东东; 李柳; 范旻旻; 余成涛; 肖君

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20220423

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参白解毒方抑制HCT116细胞增殖的药效及机制

药理 | 更新时间：2022-06-09

- 参白解毒方抑制HCT116细胞增殖的药效及机制
- Efficacy and Mechanism of Shenbai Jiedu Prescription Against Proliferation of HCT116 Cells
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第13期页码：34-41
- 作者机构：
  
  1.南京中医药大学第一临床医学院，南京 210023
  2.江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心，南京 210023
  3.南京中医药大学附属医院，江苏省中医院，南京 210004
- 作者简介：
  
  江东，硕士，从事中医学肿瘤方向研究，E-mail：jdio@163.com
  肖君，博士，主任中医师，从事消化道早癌中西医结合诊治研究，E-mail： cutujun@aliyun.com
- 基金信息：
  
  国家重点研发计划项目(2017YFC1700602);江苏高校优势学科建设工程资助项目
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220423
  中图分类号： R22;R242;R2-031;R285.5
- 收稿日期：2021-09-10，
  
  网络出版日期：2021-12-13，
  
  纸质出版日期：2022-07-05
- 稿件说明：
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江东,程海波,沈卫星等.参白解毒方抑制HCT116细胞增殖的药效及机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(13):34-41.

JIANG Dong,CHENG Haibo,SHEN Weixing,et al.Efficacy and Mechanism of Shenbai Jiedu Prescription Against Proliferation of HCT116 Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(13):34-41.
江东,程海波,沈卫星等.参白解毒方抑制HCT116细胞增殖的药效及机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(13):34-41. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220423.

JIANG Dong,CHENG Haibo,SHEN Weixing,et al.Efficacy and Mechanism of Shenbai Jiedu Prescription Against Proliferation of HCT116 Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(13):34-41. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220423.

摘要

目的

探讨参白解毒方（SBJDF）抑制结直肠癌（CRC）细胞HCT116增殖的药效及机制。

方法

利用参白解毒方（0、0.25、0.5、1、2、4 g·L

-1

）处理HCT116细胞48 h，噻唑蓝（MTT）比色法检测参白解毒方对HCT116细胞活力的影响，分别设置空白组、参白解毒方（1、2、4 g·L

-1

）组，倒置显微镜观察参白解毒方对HCT116细胞形态的影响，克隆形成实验观察参白解毒方对HCT116细胞增殖能力的影响，JC-1探针检测参白解毒方对HCT116细胞线粒体膜电位（Δ

m）的影响，流式细胞仪检测HCT116细胞周期分布和细胞凋亡率，蛋白免疫印迹法（Western blot）分析参白解毒方对细胞周期，抗凋亡以及核转录因子-

B（NF-

B）信号通路相关蛋白的影响。

结果

参白解毒方有效抑制HCT116细胞活力，引起细胞形态改变，呈浓度依赖性；与空白组比较，参白解毒方（1、2、4 g·L

-1

）组克隆形成率均明显下降（

0.05，

0.01），参白解毒方（2、4 g·L

-1

）组诱导HCT116细胞发生G

期阻滞（

0.05，

0.01）。与空白组比较，参白解毒方（1、2、4 g·L

-1

）组周期蛋白D

（CyclinD

）表达明显下降（

0.05，

0.01），参白解毒方（2、4 g·L

-1

）组细胞周期蛋白A

（CyclinA

），周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）蛋白表达明显下降（

0.05，

0.01），参白解毒方（4 g·L

-1

）组周期蛋白依赖性激酶1（CDK1）表达显著下降（

0.01）。与空白组比较，参白解毒方（2、4 g·L

-1

）组课诱导HCT116细胞凋亡，并下调抗凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关xl蛋白（Bcl-xl）表达（

0.05，

0.01），降低HCT116细胞线粒体膜电位；与空白组比较，参白解毒方（2、4 g·L

-1

）组可下调NF-

B信号通路相关蛋白I

B激酶

α（

IKK

）、NF-

B抑制蛋白

（I

）、磷酸化p65蛋白（p-p65）的表达（

0.05，

0.01）。

结论

参白解毒方有效抑制HCT116细胞增殖，其机制可能通过抑制HCT116细胞NF-

B信号通路的激活，引起细胞周期阻滞，诱导细胞凋亡。

Abstract

Objective

To investigate the mechanism by which Shenbai Jiedu prescription （SBJDF） inhibits the proliferation of colorectal cancer （CRC） HCT116 cells.

Method

After 48 h treatment of HCT116 cells with SBJDF （0， 0.25， 0.5， 1， 2， 4 g·L

-1

）， the viability of HCT116 cells were determined by methyl thiazolyl tetrazolium （MTT） colorimetry. Following the classification of cells into blank control group and SBJDF （1， 2， 4 g·L

-1

） groups， the effect of SBJDF on HCT116 cell morphology was observed under an inverted microscope. The effects of SBJDF on the proliferation of HCT116 cells and mitochondrial membrane potential （Δ

m） were detected by colony formation assay and JC-1 probe， respectively. The flow cytometry was then performed for determining cell cycle distribution and apoptosis. The effects of SBJDF on cell cycle-， apoptosis-， and nuclear factor kappa-B （NF-

B） signaling pathway-related proteins were determined by Western blot.

Result

SBJDF effectively inhibited the vitality of HCT116 cells and changed their morphology in a concentration-dependent manner. Compared with the blank control group， SBJDF at 1， 2， 4 g·L

-1

significantly reduced cell colony formation （

0.05，

0.01），and SBJDF at 2 and 4 g·L

-1

arrested the HCT116 cell cycle at G

phase （

0.05，

0.01）. Compared with the blank control group， SBJDF at 1， 2， 4 g·L

-1

remarkably down-regulated the protein expression of CyclinD

（

0.05，

0.01）. SBJDF at 2 and 4 g·L

-1

lowered the CyclinA

and cyclin-dependent kinase 4 （CDK4）（

0.05，

0.01）. SBJDF at 4 g·L

-1

reduced the cyclin-dependent kinase 1 （CDK1）（

0.01）. Compared with the blank control group， SBJDF at 2 and 4 g·L

-1

induced HCT116 cell apoptosis， down-regulated the protein expression of anti-apoptosis-related proteins Bcl-2 and Bcl-xl as well as the NF-

B signaling pathway-related proteins I

B kinase

（IKK

），inhibitor

of NF-

B （I

），and phospho-NF-

B p65 （p-p65）（

0.05，

0.01）， and diminished the mitochondrial membrane potential of HCT116 cells.

Conclusion

SBJDF inhibits the proliferation of HCT116 cells， which may be related to its inhibition of the activation of NF-

B signaling pathway and the induction of cell cycle arrest and apoptosis.

关键词

Keywords

references

KUIPERS E J ， GRADY W M ， LIEBERMAN D ， et al . Colorectal cancer ［J］. Nat Rev Dis Primers ， 2015 ， doi： 10.1038/nrdp.2015.65 http://dx.doi.org/10.1038/nrdp.2015.65 .

DEKKER E ， TANIS P J ， VLEUGELS J L A ， et al . Colorectal cancer ［J］. Lancet ， 2019 ， 394 （ 10207 ）： 1467 - 1480 .

SUN D ， CAO M ， LI H ， et al . Cancer burden and trends in China： A review and comparison with Japan and South Korea ［J］. Chin J Cancer Res ， 2020 ， 32 （ 2 ）： 129 - 139 .

LICHTENSTERN C R ， NGU R K ， SHALAPOUR S ， et al . Immunotherapy， inflammation and colorectal cancer ［J］. Cells ， 2020 ， doi： 10.3390/cells9030618 http://dx.doi.org/10.3390/cells9030618 .

MORSE M A ， HOCHSTER H ， BENSON A . Perspectives on treatment of metastatic colorectal cancer with immune checkpoint inhibitor therapy ［J］. Oncologist ， 2020 ， 25 （ 1 ）： 33 - 45 .

AIELLO P ， SHARGHI M ， MANSOURKHANI S M ， et al . Medicinal plants in the prevention and treatment of colon cancer ［J］. Oxid Med Cell Longev ， 2019 ， doi： 10.1155/2019/2075614 http://dx.doi.org/10.1155/2019/2075614 .

LI W ， LI C ， ZHENG H ， et al . Therapeutic targets of traditional Chinese medicine for colorectal cancer ［J］. J Tradit Chin Med ， 2016 ， 36 （ 2 ）： 243 - 9 .

王菁雯，沈克平，胡兵 . 中医药对大肠癌信号通路的调控作用［J］中国实验方剂学杂志， 2018 ， 24 （ 1 ）： 227 - 234 .

程海波，吴勉华 . 周仲瑛教授“癌毒”学术思想探析［J］中华中医药杂志， 2010 ， 25 （ 6 ）： 866 - 869 .

ZHANG X ， XU L ， YANG T . miR-31 modulates liver cancer HepG2 cell apoptosis and invasion via ROCK1/F-actin pathways ［J］. Onco Targets Therapy ， 2020 ， doi： 10.2147/OTT.S227467 http://dx.doi.org/10.2147/OTT.S227467 .

程海波，李柳，吴勉华，等 . 癌毒病机理论辨治肠癌探讨［J］时珍国医国药， 2017 ， 28 （ 10 ）： 2487 - 2488 .

QIE S ， DIEHL J A . CyclinD1， cancer progression， and opportunities in cancer treatment ［J］. J Mol Med （Berl）， 2016 ， 94 （ 12 ）： 1313 - 1326 .

SEO Y S ， KANG O H ， KONG R ， et al . Polygalacin D induces apoptosis and cell cycle arrest via the PI3K/Akt pathway in non-small cell lung cancer ［J］. Oncol Rep ， 2018 ， 39 （ 4 ）： 1702 - 1710 .

XIA P ， LIU Y ， CHEN J ， et al . Cell cycle proteins as key regulators of postmitotic cell death ［J］. Yale J Biol Med ， 2019 ， 92 （ 4 ）： 641 - 650 .

张媛媛，陈烨韬，石孟琼，等 . 珠子参皂苷对人胃癌细胞HGC-27的抑制作用及机制研究［J］中药药理与临床， 2021 ， doi： 10.13412/j.cnki.zyyl.20210707.005 http://dx.doi.org/10.13412/j.cnki.zyyl.20210707.005 .

GIRIDHARAN S ， SRINIVASAN M . Mechanisms of NF- κ B p65 and strategies for therapeutic manipulation ［J］. J Inflam Res ， 2018 ， doi： 10.2147/JIR.S140188 http://dx.doi.org/10.2147/JIR.S140188 .

LIU T ， ZHANG L ， JOO D ， et al . NF- κ B signaling in inflammation ［J］. Signal transduction and targeted therapy ， 2017 ， doi： 10.1038/sigtrans.2017.23 http://dx.doi.org/10.1038/sigtrans.2017.23 .

BUHRMANN C ， SHAYAN P ， BANIK K ， et al . Targeting NF- κ B signaling by calebin A， a compound of turmeric， in multicellular tumor microenvironment： Potential role of apoptosis induction in CRC cells ［J］. Biomedicines ， 2020 ， 8 （ 8 ）： 236 .

GE Q L ， LIU S H ， AI Z H ， et al . RelB/NF- κ B links cell cycle transition and apoptosis to endometrioid adenocarcinoma tumorigenesis ［J］. Cell Death Dis ， 2016 ， 7 （ 10 ）： e2402 - e2402 .

ZHOU X ， KE C ， LV Y ， et al . Asiaticoside suppresses cell proliferation by inhibiting the NF‑ κ B signaling pathway in colorectal cancer ［J］. Inter J Mol Med ， 2020 ， 46 （ 4 ）： 1525 - 1537 .

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