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1.南阳农业职业学院,河南 南阳 473000
2.南阳市园林绿化管理局,河南 南阳 473002
3.北京中医药大学 东方医院,北京 100078
4.中国中医科学院 中药研究所,北京 100700
孙廷,硕士,教授,从事植物组织培养、园艺技术研究,E-mail:563294838@qq.com
胡如善,正高级讲师,从事植物组织培养、植物保护研究,E-mail:hurushan1958@sina.com
收稿日期:2022-03-25,
网络出版日期:2022-06-20,
纸质出版日期:2022-10-20
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孙廷,杨玉珍,胡述晓等.曲茎石斛及其近缘种的鉴别与质量评价[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(20):128-134.
SUN Ting,YANG Yuzhen,HU Shuxiao,et al.Identification and Quality Evaluation of Dendrobium flexicaule and Its Related Species[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(20):128-134.
孙廷,杨玉珍,胡述晓等.曲茎石斛及其近缘种的鉴别与质量评价[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(20):128-134. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220652.
SUN Ting,YANG Yuzhen,HU Shuxiao,et al.Identification and Quality Evaluation of Dendrobium flexicaule and Its Related Species[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(20):128-134. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220652.
目的
2
对曲茎石斛及其近缘种的药材进行鉴别,并分析其多糖成分、
D
-甘露糖含量的差异,为石斛药材的准确鉴定及其质量控制提供理论依据。
方法
2
采用DNA条形码和红外光谱技术对9份石斛药材(S1~S9)进行鉴定,并分别采用紫外分光光度法(UV)和高效液相色谱法(HPLC)对石斛多糖和
D
-甘露糖的含量进行测定,UV检测条件为488 nm;HPLC检测条件为流动相20 mmol·L
-1
乙酸铵溶液-乙腈(81.5∶18.5),检测波长250 nm。
结果
2
DNA条形码结果显示,样品S1~S3鉴定为金钗石斛;样品S4~S5鉴定为铁皮石斛;样品S6鉴定为霍山石斛;样品S7~S9鉴定为曲茎石斛。一维红外光谱显示,仅3份金钗石斛在波数1 570~1 467 cm
-1
处有稳定的特征峰,呈现“W”形,而在842~740 cm
-1
处无吸收峰;其余石斛则在842~740 cm
-1
处有稳定吸收峰。一阶导数光谱上在785 cm
-1
处,霍山石斛呈现“V”形,而其余石斛呈现“W”形;在1 110 cm
-1
处曲茎石斛具有稳定的特征峰。二阶导数光谱中在1 125 cm
-1
处,铁皮石斛呈现“M”形,其余石斛近似“W”形。含量测定结果显示,样品S1~S9的多糖质量分数依次为9.35%、9.12%、32.78%、49.38%、48.97%、32.48%、32.95%、39.41%和25.32%,
D
-甘露糖质量分数依次为1.39%、0.47%、13.57%、3.04%、33.85%、23.57%、16.64%、17.47%和19.49%。其中曲茎石斛具有着较高的多糖和
D
-甘露糖含量。
结论
2
DNA条形码和一阶、二阶导数红外光谱均可实现曲茎石斛及其近缘种的鉴别,且红外光谱鉴别方法价格低、操作简便;同时,曲茎石斛具有较高含量的多糖和
D
-甘露糖,可为快速鉴别曲茎石斛及其近缘种药材提供科学依据,并为曲茎石斛的质量控制和资源利用提供参考。
Objective
2
To identify
Dendrobium flexicaule
and its related species, and analyze the differences in polysaccharide composition and
D
-mannose content, so as to provide theoretical basis for the accurate identification and quality control of
Dendrobium
medicinal materials.
Method
2
Nine samples of
Dendrobium
(S1-S9) were identified by DNA barcoding and infrared spectroscopy, and the contents of polysaccharides and
D
-mannose were determined by ultraviolet spectrophotometry (UV) and high performance liquid chromatography (HPLC), respectively. UV detection condition was 488 nm, HPLC detection conditions were the mobile phase of 20 mmol·L
-1
ammonium acetate solution-acetonitrile (81.5∶18.5) and the detection wavelength at 250 nm.
Result
2
DNA barcoding results showed that samples S1-S3 were
D. nobil
e, samples S4-S5 were
D. officinale
, sample S6 was
D. huoshanense
, and S7-S9 were
D. flexicaule
. One-dimensional infrared spectroscopy showed that only
D. nobile
had stable characteristics at the wavenumber of 1 570-1 467 cm
-1
, showing a "W" shape, while no absorption peak was found at the wavenumber of 842-740 cm
-1
, but the other
Dendrobium
samples had stable absorption peaks at the wavenumber of 842-740 cm
-1
. In the first derivative spectrum, at the wavenumber of 785 cm
-1
,
D. huoshanense
presented a "V" shape, while the rest of
Dendrobium
presented a "W" shape. At the wavenumber of 1 110 cm
-1
,
D. flexicaule
had a stable characteristic peak. In the second derivative spectrum, at the wavenumber of 1 125 cm
-1
,
D. officinale
presented an "M" shape, and the rest of
Dendrobium
was approximately "W" shape. The results of determination showed that the contents of polysaccharides in samples S1-S9 were 9.35%, 9.12%, 32.78%, 49.38%, 48.97%, 32.48%, 32.95%, 39.41% and 25.32%, and their contents of
D
-mannose were 1.39%, 0.47%, 13.57%, 3.04%, 33.85%, 23.57%, 16.64%, 17.47% and 19.49%, respectively. Among them,
D. flexicaule
had high polysaccharide and
D
-mannose contents.
Conclusion
2
Both DNA barcoding and infrared spectroscopy can be used to identify
D. flexicaule
and its related species, and infrared spectroscopy is cost-effective and easy to operate. At the same time,
D. flexicaule
has high contents of polysaccharides and
D
-mannose, which can provide a scientific basis for rapid identification of
D. flexicaule
and its relatives, and provides a reference for its quality control, and resource development and utilization.
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