六味地黄丸通过RAGE/LRP1受体介导对SAMP8小鼠脑微血管的调节作用

贾亚泉; 宋军营; 袁永; 李俊霖; 丁蕊; 张振强

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20220804

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

六味地黄丸通过RAGE/LRP1受体介导对SAMP8小鼠脑微血管的调节作用

经典名方 | 更新时间：2022-07-14

- 六味地黄丸通过RAGE/LRP1受体介导对SAMP8小鼠脑微血管的调节作用
- Liuwei Dihuangwan Regulate Brain Microvessels in SAMP8 Mice Through RAGE/LRP1 Receptors
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第16期页码：9-18
- 作者机构：
  
  河南中医药大学中医药科学院，郑州 450046
- 作者简介：
  
  贾亚泉，硕士，实验师，从事中西医结合防治脑病基础与临床研究，E-mail：jiayaquan@126.com
  张振强，博士，教授，从事中西医结合防治脑病基础与临床研究，E-mail：zhang_zhenqiang@126.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金联合基金项目(U1504829);中原科技创新领军人才项目(204200510022);河南省高校科技创新团队支持计划项目(21IRTSTHN026);河南省中医药科学研究专项重点课题(2018ZY1009);河南中医药大学苗圃工程项目(MP2020-12)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220804
  中图分类号： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- 收稿日期：2021-12-15，
  
  网络出版日期：2022-02-11，
  
  纸质出版日期：2022-08-20
- 稿件说明：
移动端阅览
贾亚泉,宋军营,袁永等.六味地黄丸通过RAGE/LRP1受体介导对SAMP8小鼠脑微血管的调节作用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(16):9-18.

JIA Yaquan,SONG Junying,YUAN Yong,et al.Liuwei Dihuangwan Regulate Brain Microvessels in SAMP8 Mice Through RAGE/LRP1 Receptors[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(16):9-18.
贾亚泉,宋军营,袁永等.六味地黄丸通过RAGE/LRP1受体介导对SAMP8小鼠脑微血管的调节作用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(16):9-18. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220804.

JIA Yaquan,SONG Junying,YUAN Yong,et al.Liuwei Dihuangwan Regulate Brain Microvessels in SAMP8 Mice Through RAGE/LRP1 Receptors[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(16):9-18. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220804.

摘要

目的

探讨六味地黄丸对SAMP8小鼠神经血管单元损伤的保护作用。

方法

将75只6月龄SAMP8小鼠作为肾精不足证阿尔茨海默病（AD）动物模型，设模型组、盐酸多奈哌齐（0.747 mg·kg

-1

·d

-1

）组、六味地黄丸高、中、低剂量（2.700、1.350、0.675 g·kg

-1

·d

-1

）组，每组15只，以SAMR1小鼠15只作为正常组，连续给药2个月。采用Morris水迷宫检测小鼠空间记忆能力；苏木素-伊红（HE）观察脑组织海马和皮层病理变化；免疫组化（IHC）法检测脑组织海马和皮层中

淀粉样蛋白（A

）沉积情况及血管性血友病因子（vWF）和CD34表达情况；电镜观察脑微血管超微结构变化情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测脑组织海马和皮层中晚期糖基化终末产物受体（RAGE）、低密度脂蛋白相关蛋白1（LRP1）、血管内皮生长因子A（VEGF-A）和P-选择素（P-selection）蛋白表达水平。

结果

与正常组比较，模型组小鼠逃避潜伏期、游泳路程显著延长（

0.01），神经胶质细胞数量增多，神经细胞数量减少，脑微血管内皮细胞间隙紧密连接模糊或间隙变大，膜结构损伤较重，内皮细胞线粒体肿胀、膜破裂、嵴大部分溶解，海马和皮层组织中A

、vWF蛋白表达显著增加（

0.01），CD34蛋白表达明显降低（

0.05），皮层中RAGE和P-selection蛋白表达水平显著升高（

0.01），LRP1和VEGF-A蛋白表达水平显著下降（

0.01）；与模型组比较，六味地黄丸各剂量组小鼠逃避潜伏期、游泳路程均明显缩短（

0.05），皮层和海马中神经胶质细胞数量减少明显，皮层中微血管数量增多明显，微血管内皮细胞间隙紧密连接双层膜结构较清晰，线粒体数量增多、膜完整、线粒嵴恢复，海马和皮层中A

、vWF、RAGE和P-selection蛋白表达明显降低（

0.05），CD34、LRP1和VEGF-A蛋白表达明显升高（

0.05）。

结论

六味地黄丸能够通过RAGE/LRP1受体系统调节A

代谢，通过抑制vWF表达和增加VEGF-A和CD34促进脑微血管新生，改善SAMP8小鼠脑微血管损伤。

Abstract

Objective

To investigate the protective effect of Liuwei Dihuangwan on neurovascular injury in SAMP8 mice.

Method

The Alzheimer's disease （AD） model with insufficiency of kidney essence was induced in 75 SAMP8 mice aging 6 months. The model mice were divided into model group， positive control group （donepezil hydrochloride， 0.747 mg·kg

-1

·d

-1

）， and high-， medium-， and low-dose Liuwei Dihuangwan groups （2.700， 1.350， 0.675 g·kg

-1

·d

-1

）， with 15 mice in each group. Fifteen SAMR1 mice were assigned to a normal control group. All mice were administered continuously for 2 months. The spatial memory of mice was tested by the Morris water maze. Hematoxylin-eosin （HE） staining was used to observe the pathological changes in the hippocampus and cortex of brain tissues. The immunohistochemical method （IHC） was used to detect the deposition of amyloid

-protein （A

） and the expression of von Willebrand factor （vWF） and CD34 in the hippocampus and cortex of brain tissues. Electron microscopy was used to observe the ultrastructural changes in cerebral microvessels. Western blot was used to detect the protein expression levels of the receptor of advanced glycation endproduct （RAGE）， low-density lipoprotein receptor-related protein 1 （LRP1）， vascular endothelial growth factor A （VEGF-A）， and P-selection in the hippocampus and cortex of brain tissues.

Result

Compared with the normal control group， the model group showed prolonged escape latency and swimming distance （

0.01）， increased number of glial cells， decreased number of nerve cells， blurred tight junctions or enlarged gap of the brain microvascular endothelial cells， severely injured membrane structure， swollen mitochondria of endothelial cells， ruptured membrane， massive dissolution in cristae， increased protein expression of A

and vWF in the hippocampus and cortex （

0.01）， reduced protein expression of CD34 （

0.05）， elevated protein expression of RAGE and P-selection in the cortex （

0.01）， and decreased protein expression level of LRP1 and VEGF-A （

0.01）. Compared with the model group， the Liuwei Dihuangwan groups showed shortened escape latency and swimming distance （

0.05）， reduced number of glial cells in the cortex and hippocampus， increased number of microvessels in the cortex， clear double-layer membrane structure in tight junctions between the microvascular endothelial cells， increased number of mitochondria with intact membrane and recovered mitochondrial cristae， decreased protein expression of A

， vWF， RAGE， and P-selection in the hippocampus and cortex （

0.05）， and increased protein expression of CD34， LRP1， and VEGF-A （

0.05）.

Conclusion

Liuwei Dihuangwan can regulate A

metabolism through the RAGE/LRP1 receptor system and promote cerebral microvascular angiogenesis by inhibiting vWF expression and increasing VEGF-A and CD34， thereby improving cerebral microvascular injury in SAMP8 mice.

关键词

Keywords

references

李凌杰，于晓琳，刘瑞田 . 胶质细胞介导的神经突触修剪在阿尔茨海默病中的作用［J］. 药学学报， 2021 ， 56 （ 2 ）： 383 - 390 .

WANG P ， SUI H J ， LI X J ， et al . Melatonin ameliorates microvessel abnormalities in the cerebral cortex and hippocampus in a rat model of Alzheimer's disease ［J］. Neural Regen Res ， 2021 ， 16 （ 4 ）： 787 - 794 .

世界中医药学会联合会，中华中医药学会 . 国际中医临床实践指南―阿尔茨海默病（2019-10-11）［J］. 世界中医药， 2021 ， 16 （ 8 ）： 1181 - 1187 .

MARTINEZ B ， PEPLOW P V . Amelioration of Alzheimer's disease pathology and cognitive deficits by immunomodulatory agents in animal models of Alzheimer's disease ［J］. Neural Regen Res ， 2019 ， 14 （ 7 ）： 1158 - 1176 .

SCHEFFER S ， HERMKENS D ， VAN DER WEERD L ， et al . Vascular hypothesis of alzheimer disease： Topical review of mouse models ［J］. Arterioscler Thromb Vasc Biol ， 2021 ， 41 （ 4 ）： 1265 - 1283 .

JU Y ， TAM K Y . Pathological mechanisms and therapeutic strategies for Alzheimer's disease ［J］. Neural Regen Res ， 2022 ， 17 （ 3 ）： 543 - 549 .

SUN B L ， CHEN Y ， FAN D Y ， et al . Critical thinking on amyloid-beta-targeted therapy： Challenges and perspectives ［J］. Sci China Life Sci ， 2021 ， 64 （ 6 ）： 926 - 937 .

杜娟，黄昶荃，何馥倩 . β 淀粉样蛋白清除的研究进展［J］. 中国老年学杂志， 2021 ， 41 （ 2 ）： 411 - 415 .

张君臣，徐武华 . LRP1调控A β 代谢的机制及其对AD防治研究的启示［J］. 中华神经医学杂志， 2019 ， 18 （ 12 ）： 1289 - 1293 .

CAI Z ， LIU N ， WANG C ， et al . Role of RAGE in Alzheimer's disease ［J］. Cell Mol Neurobiol ， 2016 ， 36 ： 483 - 495 .

WAN W ， CHEN H ， LI Y . The potential mechanisms of A β -receptor for advanced glycation end-products interaction disrupting tight junctions of the blood-brain barrier in Alzheimer's disease ［J］. Int J Neurosci ， 2014 ， 124 （ 2 ）： 75 - 81 .

KVARTSBERG H ， DUITS F H ， INGELSSON M ， et al . Cerebrospinal fluid levels of the synaptic protein neurogranin correlates with cognitive decline in prodromal Alzheimer's disease ［J］. Alzheimers Dement ， 2015 ， 11 （ 10 ）： 1180 - 1190 .

AGRAWAL S ， ABUD E M ， SNIGDHA S ， et al . IgM response against amyloid-beta in aging： A potential peripheral protective mechanism ［J］. Alzheimers Res Ther ， 2018 ， 10 （ 1 ）： 81 .

FLEMMIG J ， ZÁMOCKÝ M ， ALIA A . Amyloid β and free heme： Bloody new insights into the pathogenesis of Alzheimer's disease ［J］. Neural Regen Res ， 2018 ， 13 （ 7 ）： 1170 - 1174 .

FULOP T ， WITKOWSKI J M ， BOURGADE K ， et al . Can an infection hypothesis explain the beta amyloid hypothesis of alzheimer's disease？［J］. Front Aging Neurosci ， 2018 ， 10 ： 224 .

MANTLE J L ， LEE K H . A differentiating neural stem cell-derived astrocytic population mitigates the inflammatory effects of TNF- α and IL-6 in an iPSC-based blood-brain barrier model ［J］. Neurobiol Dis ， 2018 ， 119 ： 113 - 120 .

OH S ， SON M ， CHOI J ， et al . sRAGE prolonged stem cell survival and suppressed RAGE-related inflammatory cell and T lymphocyte accumulations in an Alzheimer's disease model ［J］. Biochem Biophys Res Commun ， 2018 ， 495 （ 1 ）： 807 - 813 .

LO E H ， DALKARA T ， MOSKOWITZ M A . Mechanisms， challenges and opportunities in stroke ［J］. Nat Rev Neurosci ， 2003 ， 4 （ 5 ）： 399 - 415 .

宋军营，袁永，王丛笑，等 . 六味地黄丸含药血清对 β -淀粉样蛋白损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的保护作用研究［J］. 中国全科医学， 2017 ， 20 （ 30 ）： 3763 - 3769 .

韩诚，张俊龙 . 从“肾脑相关”论衰老学习记忆功能障碍［J］. 中华中医药杂志， 2020 ， 35 （ 10 ）： 5112 - 5116 .

HU Q ， YU B ， CHEN Q ， et al . Effect of Linguizhugan decoction on neuroinflammation and expression disorder of the amyloid β ‑related transporters RAGE and LRP‑1 in a rat model of Alzheimer's disease ［J］. Mol Med Rep ， 2018 ， 17 （ 1 ）： 827 - 834 .

GRIÑÁN-FERRÉ C ， CORPAS R ， PUIGORIOL-ILLAMOLA D ， et al . Understanding epigenetics in the neurodegeneration of Alzheimer's disease：SAMP8 mouse model ［J］. J Alzheimers Dis ， 2018 ， 62 （ 3 ）： 943 - 963 .

普元柱，苏灿 . 灯盏细辛及其活性成分防治阿尔茨海默病的药理作用研究进展［J］. 中国中药杂志， 2020 ， 45 （ 23 ）： 5650 - 5657 .

赵玉晓，戈利生，赵丽莉，等 . 电针联合音乐疗法对轻中度阿尔茨海默病患者认知功能和日常生活活动能力的影响［J］. 世界中医药， 2020 ， 15 （ 13 ）： 1998 - 2001 .

高爱社，杨洒，张振强，等 . 丹蒌片对A β 1-40 致脑微血管内皮细胞损伤保护作用的机制研究［J］. 中药新药与临床药理， 2021 ， 32 （ 2 ）： 234 - 239 .

潘晓东，陈晓春 . 非酶糖化、晚期糖基化终产物与阿尔茨海默病［J］. 国际神经病学神经外科学杂志， 2005 ， 32 （ 4 ）： 334 - 337 .

张丁阳，解紫从，华茜 . 补肾益智方药治疗阿尔茨海默病疗效的系统评价与Meta分析［J］. 世界中医药， 2021 ， 16 （ 13 ）： 1990 - 1997 .

丛潇，王友政，张文生 . 晚期糖基化终末产物受体与阿尔茨海默病［J］. 中国老年学杂志， 2010 ， 30 （ 12 ）： 1759 - 1761 .

LI Y ， ZHOU S ， LI J ， et al . Quercetin protects human brain microvascular endothelial cells from fibrillar β -amyloid1-40-induced toxicity ［J］. Acta Pharm Sin B ， 2015 ， 5 （ 1 ）： 47 - 54 .

张誉丹，毛剑琴，袁林，等 . 固本健脑液对阿尔兹海默症大鼠生物钟基因Clock、Bmal1及海马A β 的影响［J］. 世界中医药， 2020 ， 15 （ 23 ）： 3634 - 3638，3645 .

TóBON-VELASCO J C ， CUEVAS E ， TORRES-RAMOS M A . Receptor for AGEs （RAGE） as mediator of NF- κ B pathway activation in neuroinflammation and oxidative stress ［J］. CNS Neurol Disord Drug Targets ， 2014 ， 13 （ 9 ）： 1615 - 1626 .

GOVINDPANI K ， VINNAKOTA C ， WALDVOGEL H J ， et al . Vascular dysfunction in Alzheimer's disease： A biomarker of disease progression and a potential therapeutic target ［J］. Neural Regen Res ， 2020 ， 15 （ 6 ）： 1030 - 1032 .

KONG C ， XIE H ， GAO Z ， et al . Binding between prion protein and A β oligomers contributes to the pathogenesis of Alzheimer's disease ［J］. Virol Sin ， 2019 ， 34 （ 5 ）： 475 - 488 .

罗虹，刘博文，杨慧，等 . 基于网络药理学及活性成分测定的六味地黄系列制剂质量研究［J］. 中草药， 2020 ， 51 （ 21 ）： 5462 - 5477 .

王铷，贾亚泉，宋军营，等 . 基于网络药理学的六味地黄汤治疗痴呆机制研究［J］. 河南大学学报：医学版， 2021 ， 40 （ 2 ）： 84 - 92 .

FREYSSIN A ， PAGE G ， FAUCONNEAU B ， et al . Natural stilbenes effects in animal models of Alzheimer's disease ［J］. Neural Regen Res ， 2020 ， 15 （ 5 ）： 843 - 849 .

SUDHAKAR V ， RICHARDSON R M . Gene therapy for neurodegenerative diseases ［J］. Neurotherapeutics ， 2019 ， 16 （ 1 ）： 166 - 175 .

林华伟，柳维林，王志福，等 . 小胶质细胞膜受体在阿尔茨海默病中的作用［J］. 中国康复理论与实践， 2020 ， 26 （ 1 ）： 62 - 66 .

董一峰，狄婷婷，徐树雷，等 . 不同浓度A β 25-35 对小胶质细胞上RAGE/NF- κ B信号通路的影响［J］. 中国老年学杂志， 2019 ， 39 （ 14 ）： 3501 - 3505 .

YANG S P ， BAE D G ， KANG H J ， et al . Co-accumulation of vascular endothelial growth factor with beta-amyloid in the brain of patients with Alzheimer's disease ［J］. Neurobiol Aging ， 2004 ， 25 （ 3 ）： 283 - 290 .

王丛笑，宋军营，张振强 . VEGF在阿尔茨海默病中相关作用机制的研究［J］. 中医学报， 2015 （ 1 ）： 109 - 113 .

岳孟孟，李雪莹，赵迎春，等 . P-选择素及P-选择素糖蛋白配体-1基因多态性与缺血性脑血管病关系的研究进展［J］. 医学综述， 2019 ， 25 （ 24 ）： 4919 - 4923 .

杨婷，张莉君，黄睿，等 . 中药活性成分调控血管新生的研究进展［J］. 药学学报， 2020 ， 55 （ 9 ）： 1995 - 2007 .

张语澎，王欢，薛文池，等 . 氧化应激-炎症-血栓之恶性交互网络研究新进展［J］. 沈阳药科大学学报， 2021 ， 38 （ 9 ）： 983 - 994 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

基于巨噬细胞吞噬功能探讨六味地黄丸、二至丸、左归丸预防乳腺癌发生的机制

六味地黄丸定量分析方法和评价体系的建立

六味地黄丸对秀丽隐杆线虫AD模型线粒体损伤的保护作用

当归芍药散调控泛素-蛋白酶体途径改善SAMP8小鼠认知能力的作用及其机制

六味地黄丸通过PI3K/Akt/FoxO3a通路调控自噬对SAMP8小鼠记忆功能的影响