药食两用物质效用成分对人孕烷X受体的激活效应及细胞增殖抑制筛选

张祖奇; 张光晨; 阮盼盼; 林毅; 谭洪玲; 肖成荣; 马增春; 王宇光; 高月

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20220821

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

药食两用物质效用成分对人孕烷X受体的激活效应及细胞增殖抑制筛选

药理 | 更新时间：2022-06-09

- 药食两用物质效用成分对人孕烷X受体的激活效应及细胞增殖抑制筛选
- Activating Effect of Effective Components in Medicinal and Edible Substances on Human Pregnane X Receptor and Cytotoxicity Screening
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第13期页码：42-51
- 作者机构：
  
  1.江西中医药大学，南昌 330004
  2.军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所，北京 100850
- 作者简介：
  
  张祖奇，在读硕士，从事药理学研究，E-mail：zz15797752707@163.com
  王宇光，博士，副研究员，从事中药药理毒理研究，E-mail：wangyg@bmi.ac.cn； *
  高月，博士，研究员，博士生导师，从事中药药理毒理研究，E-mail：gaoyue@bmi.ac.cn
- 基金信息：
  
  国家重点研发计划项目(2019YFC1604901)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220821
  中图分类号： R22;R242;R2-031;R285.5
- 收稿日期：2021-11-18，
  
  网络出版日期：2022-02-09，
  
  纸质出版日期：2022-07-05
- 稿件说明：
移动端阅览
张祖奇,张光晨,阮盼盼等.药食两用物质效用成分对人孕烷X受体的激活效应及细胞增殖抑制筛选[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(13):42-51.

ZHANG Zuqi,ZHANG Guangchen,RUAN Panpan,et al.Activating Effect of Effective Components in Medicinal and Edible Substances on Human Pregnane X Receptor and Cytotoxicity Screening[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(13):42-51.
张祖奇,张光晨,阮盼盼等.药食两用物质效用成分对人孕烷X受体的激活效应及细胞增殖抑制筛选[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(13):42-51. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220821.

ZHANG Zuqi,ZHANG Guangchen,RUAN Panpan,et al.Activating Effect of Effective Components in Medicinal and Edible Substances on Human Pregnane X Receptor and Cytotoxicity Screening[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(13):42-51. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220821.

摘要

目的

探讨药食两用物质甘草（甘草苷、甘草酸）、鱼腥草（槲皮素、鱼腥草素）、夏枯草（迷迭香酸）、决明子（橙黄决明素）、茯苓（茯苓酸）、百合（百合皂苷、秋水仙碱）、枸杞子（枸杞多糖）7种药食两用物质中10种效用成分对人孕烷X受体（PXR）的激活效应并筛选其潜在的毒性成分。

方法

利用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法考察了甘草苷、甘草酸、槲皮素、鱼腥草素、迷迭香酸、橙黄决明素、茯苓酸、秋水仙碱（10、20、50 μmol·L

-1

）、百合皂苷、枸杞多糖（10、20、50 mg·L

-1

）10种成分对正常的人肝细胞（L02）增殖抑制的影响；通过生化分析仪检测药物处理后对L02细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放的影响；Hoechst 33342染色考察了10种效用成分对L02细胞凋亡的影响；利用分泌型荧光素酶报告基因系统，将PXR表达载体和含细胞色素P450 3A4（CYP3A4）转录调控区的报告基因载体共转染L02细胞，10 μmol·L

-1

利福平（RIF）为阳性对照，用甘草苷、甘草酸、槲皮素、鱼腥草素、迷迭香酸、橙黄决明素、茯苓酸、秋水仙碱（5、10、20 μmol·L

-1

）和百合皂苷、枸杞多糖（5、10、20 mg·L

-1

）10种成分分别处理24 h，进行荧光素酶活性检测。

结果

与空白组比较，秋水仙碱、百合皂苷、槲皮素会导致细胞活力呈浓度依赖性降低（

0.05，

0.01），槲皮素、迷迭香酸、甘草酸、秋水仙碱、橙黄决明素、茯苓酸可以增加L02细胞中LDH的释放率（

0.05，

0.01），迷迭香酸、甘草苷、枸杞多糖处理后部分细胞的高亮浓染细胞核的比例逐渐上升（

0.05，

0.01）；pcDNA3.1-PXR与pGLuc-CYP3A4共转染L02细胞时，与空白组比较，橙黄决明素、茯苓酸对PXR有激活效应（

0.05），甘草苷、甘草酸对PXR有抑制效应（

0.05）。

结论

在长期服用药食两用物质时，应注意其对药物代谢酶的影响及可能产生的相互作用，提高药食两用物质的安全性。

Abstract

Objective

To explore the activating effects of ten important effective components in seven medicinal and edible substances on human pregnane X receptor （PXR）， including Glycyrrhizae Radix et Rhizoma （liquiritin and glycyrrhizic acid）， Houttuyniae Herba （quercetin and houttuyfonate）， Prunellae Spica （rosmarinic acid）， Cassiae Semen （aurantio-obtusin）， Poria （pachymic acid）， Lilii Bulbus （

Lilium brownii

saponin and colchicine）， and Lycii Fructus （

Lycium barbarum

polysaccharide） and screen potentially toxic components.

Method

Cell counting kit-8 （CCK-8） assay was used to investigate the cytotoxic effect of liquiritin， glycyrrhizic acid， quercetin， houttuyfonate， rosmarinic acid， pachymic acid， aurantio-obtusin， and colchicine （10， 20， and 50 μmol·L

-1

）， and

L. brownii

saponin and

L. barbarum

polysaccharide （10， 20， and 50 mg·L

-1

） on normal human hepatocyte cell line （L02）. The release of lactate dehydrogenase （LDH） in L02 cells after drug treatments was detected by the biochemical analyzer. The apoptosis induced by ten effective components was explored by Hoechst 33342 staining. The secreted luciferase reporter system was used to co-transfect the PXR expression vector and reporter gene vector containing cytochrome P450 3A4 （CYP3A4） transcriptional regulatory region into L02 cells， with 10 μmol·L

-1

rifampicin （RIF） as a positive control. After treated with liquiritin， glycyrrhizic acid， quercetin， houttuyfonate， rosmarinic acid， aurantio-obtusin， pachymic acid， and colchicine （5， 10， and 20 μmol·L

-1

） and

L. brownii

saponin and

L. barbarum

polysaccharide （5， 10， and 20 mg·L

-1

） for 24 h， the cells were tested for secreted luciferase activity.

Result

Compared with the control group， colchicine，

L. brownii

saponin， and quercetin decreased the cell viability （

0.05，

0.01）. Compared with the control group， quercetin， rosmarinic acid， glycyrrhizic acid， colchicine， aurantio-obtusin， and pachymic acid increased the release rate of LDH in L02 cells （

0.05，

0.01）. The proportion of hyperchromatic nuclei increased gradually after rosmarinic acid， liquiritin， and

L. barbarum

polysaccharide treatments as compared with the control group （

0.05，

0.01）. In terms of co-transfection of pcDNA3.1-PXR and pGLuc-CYP3A4 into L02 cells， compared with the control group， aurantio-obtusin and pachymic acid showed activating effects on PXR （

0.05）， whereas liquiritin and glycyrrhizic acid showed inhibitory effects （

0.05）.

Conclusion

The findings suggest that when medicinal and edible substances are taken for a long time， attention should be paid to their influence on drug-metabolizing enzymes and possible interactions， so as to improve their safety.

关键词

Keywords

references

云无心 . 食、药、药食两用，区别在哪里［J］. 生命与灾害， 2016 （ 12 ）： 38 - 39 .

单峰，黄璐琦，郭娟，等 . 药食同源的历史和发展概况［J］. 生命科学， 2015 ， 27 （ 8 ）： 1061 - 1069 .

黄娜娜，郭欣，蔡涛涛，等 . 决明子不同提取物单次给药对小鼠肝、肾“量-时-毒”关系研究［J］. 中国药物警戒， 2017 ， 14 （ 10 ）： 594 - 598 .

邹义英，李军生 . 决明子类保健食品的潜在安全风险分析［J］. 食品科技， 2009 ， 34 （ 5 ）： 295 - 297 .

JANG H S ， ROH S Y ， JEONG E H ， et al . Ginkgotoxin induced seizure caused by vitamin B6 deficiency ［J］. J.Epilepsy Res ， 2015 ， 5 （ 2 ）： 104 - 6 .

周冠强，李元峰，张肇勋 . 鱼腥草注射液致过敏反应63例文献分析［J］. 中国药房， 2013 ， 24 （ 36 ）： 3436 - 3439 .

石镇港，姜德建 . 药食同源中药安全性研究进展［J］. 湖南中医药大学学报， 2020 ， 40 （ 6 ）： 772 - 777 .

汪美汐，王宇光，高月等 . 何首乌中大黄素对L02肝细胞CYP亚酶表达及细胞毒性的影响［J］. 中国药理学通报， 2016 ， 32 （ 11 ）： 1543 - 1548 .

张照研，王宇光，高月，等 . 何首乌中THSG和蒽醌类成分对人孕烷X受体介导的CYP3A4的调控作用［J］. 中国中药杂志， 2017 ， 42 （ 24 ）： 4827 - 4833 .

苟小军，高珊珊，曹健美 . 孕烷X受体在肝病中的研究进展［J］. 医学综述， 2020 ， 26 （ 7 ）： 1269 - 1272 .

ZHOU S F . Drug behaves substrates inhibitors and inducers of human cytochrome P450 3A4 ［J］. Curr Drug Metab 2008 ， 9 （ 4 ）： 310 - 322 .

李晗，张广平，叶祖光，等 . 基于药物代谢酶CYP3A4的乌头碱配伍人参皂苷、甘草苷的减毒机制研究［J］. 药物评价研究， 2020 ， 43 （ 2 ）： 199 - 205 .

涂江华 . 甘草酸对CYP450酶的影响及其机制研究［D］. 长沙：中南大学， 2010 .

叶林虎，闫明珠，常琪，等 . 槲皮素及其糖苷类化合物对P450酶活性的体外抑制作用［J］. 中国药学杂志， 2014 ， 49 （ 12 ）： 1051 - 1055 .

何亚磊，蔡叶锐，魏引，等 . 基于NF -κ B通路研究槲皮素对心肌缺血再灌注损伤大鼠的影响［J］. 中医学报， 2021 ， 36 （ 7 ）： 1491 - 1496 .

钟兆银，黄锁义 . 鱼腥草提取物鱼腥草素对肿瘤细胞抑制作用［J］. 广东化工， 2019 ， 46 （ 16 ）： 27 - 28 .

熊锋，李毅成，林春博，等 . 橙黄决明素对脂多糖诱导的大鼠软骨细胞的抗炎和软骨保护作用［J］. 广西医科大学学报， 2020 ， 37 （ 4 ）： 645 - 651 .

刘云帆，杜月梅，刘晓艺，等 . 枸杞多糖对顺铂诱导小鼠睾丸支持细胞凋亡的影响［J］. 中国临床药理学与治疗学， 2021 ， 26 （ 6 ）： 624 - 630 .

罗飞，张明辉，陈立珂，等 . 迷迭香酸抑制NLRP3炎性小体的活化对创伤性颅脑损伤大鼠脑组织损伤和海马区神经元凋亡的影响［J］. 免疫学杂志， 2021 ， 37 （ 7 ）： 568 - 574 .

王佳，梁葵香，刘艳妮，等 . 茯苓酸通过上调miR-133a影响子宫肌瘤细胞增殖凋亡及表皮生长因子的水平［J］. 中国免疫学杂志， 2020 ， 36 （ 9 ）： 1069 - 1074 .

陈千，熊富良，张雪琼，等 . 甘草苷对感染后咳嗽（肺阴虚证）小鼠的止咳作用机制及抗氧化作用的研究［J］. 华中师范大学学报：自然科学版， 2020 ， 54 （ 5 ）： 841 - 848，873 .

路凯，白宁，陈方，等 . 甘草酸治疗对骨癌痛小鼠痛行为及脊髓炎症反应的影响［J］. 现代肿瘤医学， 2021 ， 29 （ 13 ）： 2249 - 2253 .

张维西，朱峰，胡瑞，等 . 百合总皂苷的现代研究进展［J］. 河北北方学院学报：自然科学版， 2017 ， 33 （ 6 ）： 42 - 43，46 .

申利红，李雅 . 秋水仙碱的研究与应用进展［J］. 中国农学通报， 2009 ， 25 （ 21 ）： 185 - 187 .

唐雪阳，谢果珍，周融融，等 . 药食同源的发展与应用概况［J］. 中国现代中药， 2020 ， 22 （ 9 ）： 1428 - 1433 .

石镇港，姜德建 . 药食同源中药安全性研究进展［J］. 湖南中医药大学学报， 2020 ， 40 （ 6 ）： 772 - 777 .

黄娜娜，郭欣，蔡涛涛，等 . 决明子不同提取物单次给药对小鼠肝、肾“量-时-毒”关系研究［J］. 中国药物警戒， 2017 ， 14 （ 10 ）： 594 - 598 .

高芃，隋海霞，刘海波，等 . 决明子乙醇提取物的亚慢性毒性研究［J］. 中国食品卫生杂志， 2004 （ 5 ）： 410 - 415 .

杨仓良 . 毒药本草［M］. 北京：中国中医药出版社， 1998 ： 189-190， 217-221， 842-849 .

丁涛 . 中草药不良反应及防治［M］. 北京：中国中医药出版社， 1992 ： 105 .

孙新明，肖莺，周剑莉，等 . 甘草对雄性小鼠睾丸生殖毒性的影响［J］. 中国老年学杂志， 2015 ， 35 （ 13 ）： 3507 - 3510 .

程艳芹，王英姿，李明春 . 甘草5种方法提取液主要药效学及急性毒性比较［J］. 中国医院药学杂志， 2013 ， 33 （ 6 ）： 435 - 439 .

林夏静，郑景陆 . 从中医角度看药食同源之百合［J］. 光明中医， 2008 （ 4 ）： 512 - 513 .

姚霞，许利嘉，肖伟，等 . 枸杞子的安全性问题探讨［J］. 时珍国医国药， 2011 ， 22 （ 12 ）： 2971 - 2972 .

杨亚丽，孙景，李涛，等 . 云茯苓中重金属含量测定及安全性评价［J］. 中药材， 2016 ， 39 （ 6 ）： 1343 - 1346 .

谢瑞芳，周昕 . 中药对细胞色素P450代谢影响的研究进展［J］. 中国临床药理学与治疗学， 2009 ， 14 （ 6 ）： 697 - 701 .

ZhANG Z ， REN S ， TANG X ， et al . Human PXR-mediated transcriptional activation of CYP3A4 by 'Fuzi' extracts . Toxicol Mech Methods ， 2019 ， 29 （ 3 ）： 155 - 164 .

张照研，王宇光，高月，等 . 何首乌6种成分对人孕烷X受体介导的CYP3A4的调控作用［J］. 中国中药杂志， 2018 ， 43 （ 20 ）： 4104 - 4110 .

DRESSER G K ， SPENCE J D ， BAILEY D G . Pharmacokinetic and pharmacodynamic consequences and clinical relevance of cytochrome P450 3A4 inhibition ［J］. Clin Pharmacokinet ， 2000 ， 38 （ 1 ）： 41 - 57 .

DAI D ， TANG J ， ROSE R ， et al . Identification of variants of CYP3A4 and characterization of their abilities to metabolize testosterone and chlorpyrifos ［J］. J Pharmacol Exp Ther ， 2001 ， 299 （ 3 ）： 825 - 831 .

国家药典委员会 . 中华人民共和国药典［M］. 北京：中国医药科技出版社， 2020 ： 1088 .

王莲，袁艺 . 不同产地鱼腥草中绿原酸、槲皮素含量测定［J］. 药物分析杂志， 2008 ， 28 （ 7 ）： 1081 - 1083 .

薛青松 . 鱼腥草挥发油的研究进展［J］. 中国药业， 2014 ， 23 （ 4 ）： 15 - 18 .

徐德宏，谭朝阳，杨勇，等 . 茯苓功效成分茯苓酸的研究进展［J］. 食品科学， 2022 ： 1 - 18 .

杨郑州，韦敏珍，谢晓娜 . 不同品种百合中皂苷和多糖的含量测定［J］. 轻工科技， 2017 ， 33 （ 8 ）： 41 - 42 .

刘鹏，林志健，张冰 . 百合的化学成分及药理作用研究进展［J］. 中国实验方剂学杂志， 2017 ， 23 （ 23 ）： 201 - 211 .

张爱杰，刘羽康，司端运 . 甘草苷体内暴露特征及体外跨膜转运机制研究［J］. 中草药， 2021 ， 52 （ 7 ）： 2053 - 2061 .

杨飞，吴德康，卞勇，等 . 葛根芩连汤中葛根素、黄芩苷、小檗碱与甘草酸组合在大鼠体内代谢产物研究［J］. 中国实验方剂学杂志， 2013 ， 19 （ 9 ）： 164 - 168 .

许春莲 . 长期灌胃槲皮素后小鼠血液与组织内槲皮素及异鼠李素形式代谢产物分布［D］. 南昌：南昌大学， 2015 .

张晶 . 连钱草活性多糖结构及迷迭香酸的代谢研究［D］. 南昌：江西中医药大学， 2020 .

戴迎春，邓楠，刘文 . 橙黄决明素在正常大鼠体内的药动学［J］. 中国医院药学杂志， 2015 ， 35 （ 14 ）： 1271 - 1274 .

宋玮，郑伟，马百平，等 . 中药皂苷类成分的体内代谢研究进展［J］. 药学学报， 2018 ， 53 （ 10 ）： 1609 - 1619 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

暂无数据