淫羊藿苷通过Akt /GSK3<italic style="font-style: italic">β</italic>/CDK通路抑制CLC5肝癌细胞增殖

毕瑜婷; 花东明; 林佳成; 游丽萍; 郑超; 邬海龙; 孙学华

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221024

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淫羊藿苷通过Akt /GSK3β/CDK通路抑制CLC5肝癌细胞增殖

药理 | 更新时间：2022-05-18

- 淫羊藿苷通过Akt /GSK3β/CDK通路抑制CLC5肝癌细胞增殖
  增强出版
- Icariin Inhibits Proliferation of CLC5 Hepatoma Cells via Akt/GSK3β/CDK Pathway
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第12期页码：96-102
- 作者机构：
  
  1.上海中医药大学附属曙光医院，上海 201203
  2.上海健康医学院，上海 201318
- 作者简介：
  
  毕瑜婷，硕士，从事慢性肝病的临床及基础研究，E-mail：Biyutingbb@163.com
  孙学华，博士，主任医师，博士生导师，从事慢性肝病的临床及基础研究，E-mail：13585769286@163.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(82074336;81904164)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221024
  中图分类号： R22;R242;R2-031;R285.5
- 收稿日期：2021-12-17，
  
  网络出版日期：2022-03-29，
  
  纸质出版日期：2022-06-20
- 稿件说明：
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毕瑜婷,花东明,林佳成等.淫羊藿苷通过Akt /GSK3β/CDK通路抑制CLC5肝癌细胞增殖[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(12):96-102.

BI Yu-ting,HUA Dong-ming,LIN Jia-cheng,et al.Icariin Inhibits Proliferation of CLC5 Hepatoma Cells via Akt/GSK3β/CDK Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(12):96-102.
毕瑜婷,花东明,林佳成等.淫羊藿苷通过Akt /GSK3β/CDK通路抑制CLC5肝癌细胞增殖[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(12):96-102. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221024.

BI Yu-ting,HUA Dong-ming,LIN Jia-cheng,et al.Icariin Inhibits Proliferation of CLC5 Hepatoma Cells via Akt/GSK3β/CDK Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(12):96-102. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221024.

摘要

目的

研究淫羊藿苷对肝细胞癌细胞CLC5增殖能力的影响及其可能的机制。

方法

通过网络药理学筛选淫羊藿苷作用靶点，构建靶点网络及构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，预测淫羊藿苷可能作用靶点及相关通路；使用梯度浓度（0、6.25、12.5、25、50 μmol·L

-1

）淫羊藿苷刺激肝细胞癌CLC5细胞，通过细胞活性及增殖检测（CCK-8）法检测淫羊藿苷对CLC5细胞活力的影响；使用不同浓度（0、25、50 μmol·L

-1

）淫羊藿苷处理肝细胞癌CLC5细胞，通过Edu-488及克隆形成实验（Clone Forming）检测淫羊藿苷对CLC5细胞增殖的影响；使用不同浓度淫羊藿苷分别刺激CLC5细胞不同时间，通过蛋白免疫印迹法（Western blot）验证淫羊藿苷对蛋白激酶B（Akt）/糖原合成酶激酶3

（GSK3

）/细胞周期依赖激酶（CDK）通路蛋白表达水平的影响情况。

结果

网络药理学分析发现淫羊藿苷作用于肝细胞癌的机制与阻滞细胞周期抑制肿瘤细胞增殖有关；CCK-8法结果表明，与空白组比较，淫羊藿苷组CLC5细胞活力显著下降（

0.01），呈时间-浓度依赖性；与空白组比较，淫羊藿苷组Edu-488阳性率及克隆形成菌落数量明显减少（

0.05，

0.01）；与空白组比较，淫羊藿苷组p-Akt、p-GSK3

、CDK4、细胞周期蛋白D

（CyclinD

）的蛋白表达水平明显下降（

0.05，

0.01）。

结论

淫羊藿苷可抑制阻滞肝细胞癌细胞周期，抑制肝细胞癌增殖，作用机制可能与抑制Akt/GSK3

/CDK通路有关。

Abstract

Objective

To study the effect of icariin on the proliferative capacity of hepatocellular carcinoma cell line CLC5 and the underlying mechanism.

Method

The targets of icariin were screened out by network pharmacology， and the target network and protein-protein interaction （PPI） network were constructed to predict the possible targets and pathways of icariin. CCK-8 assay was employed to explore the effects of different concentrations （0， 6.25， 12.5， 25， 50 μmol·L

-1

） of icariin on the viability of CLC5 cells. Further， CLC5 cells were treated with 0， 25， 50 μmol·L

-1

icariin， and the effect of icariin on CLC5 cell proliferation was examined by Edu-488 assay and clone formation assay （CFA）. Western blot was employed to measure the expression levels of proteins in the protein kinase B （Akt）/glycogen synthase kinase 3

（GSK3

）/cell cycle-dependent kinase （CDK） pathway in the CLC5 cells exposed to different concentrations of icariin.

Result

Network pharmacological analysis revealed that icariin may inhibit the hepatocellular carcinoma via cell cycle arrest and inhibition of tumor cell proliferation. Compared with the blank group， icariin decreased the viability of CLC5 cells in a time- and concentration-dependent manner （

0.01） and reduced the positive rate of Edu-488 and the colonies in CFA （

0.05，

0.01）. Moreover， icariin down-regulated the protein levels of p-Akt， p-GSK3

， CDK4， and CyclinD

（

0.05，

0.01）.

Conclusion

Icariin may block cell cycle to suppress the proliferation of CLC5 cells via inhibiting the Akt/GSK3

/CDK pathway.

关键词

Keywords

references

GAETANO B ， SHIRIN D ， ANNALISA A ， et al . The immune system in hepatocellular carcinoma and potential new immunothera peutic strategies ［J］. Biomed Res Int ， 2016 ， doi： 10.1155/2016/2514067 http://dx.doi.org/10.1155/2016/2514067 .

CHEN W Q ， ZHOU R S ， BAADE P D ， et al . Cancer statistics in China， 2015 ［J］. CA ， 2016 ， 66 （ 2 ）： 115 - 132 .

BRUNO S ， PABLO S ， SANDRA H ， et al . Advances in immunotherapy for hepatocellular carcinoma ［J］. Nat Rev Gastroenterol Hepatol ， 2021 ， 18 （ 8 ）： 525 - 543 .

杨婉婷，侯恩存 . 原发性肝癌治疗的研究进展［J］. 现代肿瘤医学， 2016 ， 24 （ 21 ）： 3495 - 3499 .

贺珊，廖长秀 . 中药治疗肝癌机制的研究进展［J］. 中成药， 2017 ， 39 （ 1 ）： 155 - 160 .

何丽君，江金井，陈豪，等 . 淫羊藿药理作用和临床应用的研究进展［J］. 中医临床研究， 2020 ， 12 （ 2 ）： 17 - 20 .

HUI L T ， KOK G C ， PRIYIA P ， et al . Anti-cancer properties of the naturally occurring aphrodisiacs： Icariin and its derivatives ［J］. Front Pharmacol ， 2016 ， 7 ： 191 - 209 .

贾方，王秋月，李雪，等 . 淫羊藿苷抗肿瘤的免疫调节作用研究进展［J］. 辽宁中医杂志， 2020 ， 47 （ 9 ）： 195 - 198 .

张蕾，乔大伟，董小耘，等 . 淫羊藿苷对结肠癌增殖、侵袭抑制作用及机制研究［J］. 扬州大学学报：农业与生命科学版， 2019 ， 40 （ 3 ）： 81 - 85 .

陈素华，马天江，张智慧，等 . 羊藿苷通过下调转移相关蛋白2抑制MGC803细胞的增殖、迁移和侵袭［J］. 基础医学与临床， 2019 ， 39 （ 11 ）： 1587 - 1591 .

李灿烨，张嘉嘉，庞裕昌，等 . β -环糊精淫羊藿苷包合物对肝癌细胞体外增殖能力的影响［J］. 生物化工， 2021 ， 7 （ 1 ）： 87 - 92 .

丛文铭 . 肝癌复发转移的分子机制与病理学评估策略［J］. 中华肝脏病杂志， 2016 ， 24 （ 5 ）： 324 - 326 .

武正山，刘一纬，吴晓峰 . 肝癌组织CCR1表达与患者预后的关系［J］. 南京医科大学学报：自然科学版， 2019 ， 39 （ 12 ）： 1737 - 1740，1746 .

赵文静，王历，王芝兰，等 . 淫羊藿的药理作用及临床应用研究进展［J］. 中医药信息， 2016 ， 33 （ 2 ）： 105 - 108 .

杨丽红，肖波，侯丽霞，等 . 淫羊藿苷调节细胞增殖作用的研究进展［J］. 医学信息， 2019 ， 32 （ 1 ）： 33 - 36 .

YS S ， ZX F ， SE X ， et al . Icariin promotes mouse hair follicle growth by increasing insulin-like growth factor 1 expression in dermal papillary cells ［J］. Clin Exp Dermatol ， 2017 ， 42 （ 3 ）： 287 - 294 .

WANG Z M ， SONG N ， REN Y L . Anti-proliferative and cytoskeleton-disruptive effects of icariin on HepG2 cells ［J］. Mol Med Rep ， 2015 ， 12 （ 5 ）： 6815 - 6820 .

LI W ， WANG M ， WANG L ， et al . Icariin synergizes with arsenic trioxide to suppress human hepatocellular carcinoma ［J］. Cell Biochem Biophys ， 2014 ， 68 （ 2 ）： 427 - 436 .

LI Y ， QUAN J ， CHEN F ， et al . MiR-31-5p acts as a tumor suppressor in renal cell carcinoma by targeting cyclin-dependent kinase 1 （CDK1）［J］. Biomed Pharmacother ， 2019 ， doi： 10.1016/j.biopha.2018.12.102 http://dx.doi.org/10.1016/j.biopha.2018.12.102 .

MALUMBRES M ， BARBACID M . Cell cycle， CDKs and cancer： a changing paradigm ［J］. Nat Rev Cancer ， 2009 ， 9 （ 3 ）： 153 - 166 .

YIXUAN L ， LIRONG P ， EDWARD S . Histone deacetylase 10 regulates the cell cycle G 2 /M phase transition via a novel Let-7-HMGA2-CyclinA 2 pathway ［J］. Mol Cell Biol ， 2015 ， 35 （ 20 ）： 3547 - 3565 .

ZHU L ， SHEN X B ， YUAN P C ， et al . Arctigenin inhibits proliferation of ER-positive breast cancer cells through cell cycle arrest mediated by GSK3-dependent CyclinD 1 degradation ［J］. Life Sci ， 2020 ， doi： 10.1016/j.lfs.2020.117983 http://dx.doi.org/10.1016/j.lfs.2020.117983 .

谢新胜 . 过表达IC53d通过激活Akt/GSK3 β /CyclinD 1 信号通路促进胃癌细胞的增殖［D］. 福州：福建医科大学， 2019 .

ZHOU C ， DU J ， ZHAO L ， et al . GLI1 reduces drug sensitivity by regulating cell cycle through PI3K/Akt/GSK3/CDK pathway in acute myeloid leukemia ［J］. Cell Death Dis ， 2021 ， 12 （ 3 ）： 231 .

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