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C57BL/6小鼠对
Pb K173青蒿素敏感性不同虫株的耐受性对比探讨Resistance of C57BL/6 Mice to Different Artemisinin-sensitive Strains of
Pb K173- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第11期 页码：79-85
- 作者机构：
1.中国中医科学院 青蒿素研究中心，北京 100700
2.中国中医科学院 中药研究所，北京 100700
- 作者简介：
秦婷婷，硕士，从事中药及其方剂的作用原理及青蒿素类药物的作用机制研究，E-mail：qt17839918906@163.com
王华晶，博士，从事疟原虫青蒿素抗药性研究，E-mail：hjwang1991@icmm.ac.cn
李沧海，博士，副研究员，从事中药及其方剂的作用原理及青蒿素类药物的作用机制研究，E-mail：chli@icmm.ac.cn； *
- 基金信息：国家自然科学基金重点项目(81641002;82141001);国家“重大新药创制”科技重大专项(2017ZX09101002-002-005);中国中医科学院创新工程(CI2021A05109;CI2021A05106)
DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221106
中图分类号： R2-0;R22;R285.5;R33收稿日期：2021-12-17，
网络出版日期：2022-04-02，
纸质出版日期：2022-06-05
- 稿件说明：
移动端阅览
秦婷婷,李硕,崔钊等.C57BL/6小鼠对PbK173青蒿素敏感性不同虫株的耐受性对比探讨[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(11):79-85.
QIN Ting-ting,LI Shuo,CUI Zhao,et al.Resistance of C57BL/6 Mice to Different Artemisinin-sensitive Strains of PbK173[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(11):79-85.
秦婷婷,李硕,崔钊等.C57BL/6小鼠对PbK173青蒿素敏感性不同虫株的耐受性对比探讨[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(11):79-85. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221106.
QIN Ting-ting,LI Shuo,CUI Zhao,et al.Resistance of C57BL/6 Mice to Different Artemisinin-sensitive Strains of PbK173[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(11):79-85. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221106.
摘要
目的
2
比较C57BL/6小鼠对伯氏疟原虫K173（
Pb
K173）青蒿素敏感株与抗性株的耐受性及感染过程中的血液参数、脾脏系数、脾脏结构的差异，探究疟原虫对青蒿素产生耐药性是否会加重疟疾感染。
方法
2
Pb
K173青蒿素敏感株与抗性株进行平行实验，使用C57BL/6小鼠，根据体质量随机分为1个空白组、4个敏感株感染组与4个抗性株感染组，各感染组小鼠分别同时腹腔接种1×10
7
个敏感/抗性株的感染红细胞（iRBCs），测生存期组感染后每天记录小鼠的体质量及尾静脉采血涂片计算染虫率，其他感染组分别在感染后第2、5、9天采集小鼠外周血液、脾。检测各组小鼠外周血液参数、脾脏系数、脾脏病理切片及脾细胞。
结果
2
感染第1~3天，抗性株小鼠的染虫率分别为（0.4±0.0、0.8±0.1、1.9±0.4）%，一直较敏感株小鼠的染虫率（0.2±0.1、0.4±0.1、1.1±0.3）%高（
P
<
0.01）。在感染第4天及后期，两组的染虫率逐渐接近。敏感株小鼠生存期（20.5±1.2） d较抗性株小鼠的生存期（23.3±1.4） d短（
P
<
0.01）。感染第9天，敏感株小鼠血液中的白细胞计数（16.2±1.1×10
9
）个/L较抗性株小鼠（10.6×10
9
±1.8×10
9
）个/L高（
P
<
0.01）；流式细胞仪分析染虫小鼠脾细胞发现，敏感株染虫鼠在感染第9天的CD4
+
/CD8
+
值（3.6±0.4）较抗性株（2.3±0.2）小鼠高（
P
<
0.01）。C57BL/6染虫鼠的脾脏在感染期间会逐渐肿大，感染第9天，抗性株小鼠的脾脏系数（3.1±0.1）%较敏感株小鼠（2.7±0.2）%大（
P
<
0.01）。C57BL/6染虫鼠感染初期，脾脏红髓发生充血肿胀；感染第9天，脾脏边缘区消失，红髓与白髓的结构被破坏。
结论
2
不经药物治疗时，C57BL/6小鼠外周血液及脾脏的保护免疫反应对
Pb
K173青蒿素敏感株更敏感；采用鼠-鼠间血传、青蒿素剂量递增法培育的
Pb
K173青蒿素抗性株生长周期缩短，毒性降低。
Abstract
Objective
2
The tolerance of C57BL/6 mice to artemisinin-sensitive and -resistant strains of
Plasmodium berghei
（
Pb
） K173 and the differences in blood parameters， spleen coefficient and spleen structure during infection were compared to explore whether the artemisinin resistance of
Pb
would aggravate malaria infection.
Method
2
Pb
K173 artemisinin-sensitive and -resistant strains were tested in parallel. C57BL/6 mice were randomly divided into 1 control group， 4 artemisinin-sensitive strain groups and 4 artemisinin-resistant strain groups by body weight. Each infection group was simultaneously inoculated （
ip
） with 1×10
7
infected red blood cells （iRBCs） of sensitive/resistant strain. For the mice in the survival test group， the body weight was recorded every day post infection， and the tail vein blood smear was collected to calculate the
Pb
infection rate. In the other infection groups， peripheral blood and spleen were collected on 2， 5 and 9 d after infection. Peripheral blood parameters， spleen coefficient， pathological section of spleen and spleen cells were detected in each group.
Result
2
On 1-3 d after infection， the infection rate of the resistant strain （0.4±0.0， 0.8±0.1， 1.9±0.4）% was always higher than that of the sensitive strain （0.2±0.1， 0.4±0.1， 1.1±0.3）% （
P<
0.01）. From the 4
th
d of infection， the infection rate of the two groups gradually approached. The survival period of the sensitive strain group （20.5±1.2） d was shorter than that of the resistant strain group （23.3±1.4） d （
P<
0.01）. On the 9
th
d， the white blood cell count of the sensitive strain group （16.2±1.1）×10
9
cells/L was higher than that of the resistant strain group （10.6±1.8）×10
9
cells/L （
P<
0.01）. Flow cytometry analysis of spleen cells showed that the sensitive strain group （3.6±0.4） demonstrated a higher CD4
+
/CD8
+
value than the resistant strain group （2.3±0.2） on the 9
th
d （
P<
0.01）. The spleen of C57BL/6 infected mice was gradually enlarged during infection， and on the 9
th
d， the resistant strain group （3.1±0.1）% showed a higher spleen coefficient than the sensitive strain group （2.7±0.2）% （
P<
0.01）. In the early stage of C57BL/6 infected mice， the red pulp of spleen was hyperemic and swollen. On the 9
th
d， the marginal area of the spleen disappeared and the structure of the red and white pulp was destroyed.
Conclusion
2
Without drug treatment， the protective immune responses of peripheral blood and spleen of C57BL/6 mice were more sensitive to
Pb
K173 artemisinin-sensitive strain. The artemisinin-resistant strain of
Pb
K173 bred with mouse-to-mouse blood transmission and increased artemisinin dose exhibited shortened growth period and reduced toxicity.
关键词
Keywords
references
World Health Organization . World malaria report 2020 ［M］. Geneva ： WHO Press ， 2020 .
CAMPONOVO F ， BEVER C A ， GALACTIONOVA K ， et al . Incidence and admission rates for severe malaria and their impact on mortality in Africa ［J］. Malar J ， 2017 ， 16 （ 1 ）： 1 .
LALLOO D G ， SHINGADIA D ， BELL D J ， et al . PHE advisory committee on malaria prevention in UK travellers.UK malaria treatment guidelines 2016 ［J］. J Infect ， 2016 ， 72 （ 6 ）： 635 - 649 .
NOEDL H ， SE Y ， SCHAECHER K ， et al . Evidence of artemisinin-resistant malaria in western Cambodia ［J］. N Engl J Med ， 2008 ， 359 （ 24 ）： 2619 - 2620 .
DONDORP A M ， NOSTEN F ， YI P ， et al . Artemisinin resistance in Plasmodium falciparum malaria ［J］. N Engl J Med ， 2009 ， 361 （ 5 ）： 455 - 467 .
ASHLEY E A ， DHORDA M ， FAIRHURST R M ， et al . Spread of artemisinin resistance in Plasmodium falciparum malaria ［J］. N Engl J Med ， 2014 ， 371 （ 5 ）： 411 - 423 .
PHYO A P ， NKHOMA S ， STEPNIEWSKA K ， et al . Emergence of artemisinin-resistant malaria on the western border of Thailand：A longitudinal study ［J］. Lancet ， 2012 ， 379 （ 9830 ）： 1960 - 1966 .
WOODROW C J ， WHITE N J . The clinical impact of artemisinin resistance in Southeast Asia and the potential for future spread ［J］. FEMS Microbiol Rev ， 2017 ， 41 （ 1 ）： 34 - 48 .
牟畇珊 ， 李璐杰 ， 吴银娟 ， 等 . 疟原虫青蒿素耐药分子机制探索 ［J］. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ， 2018 ， 36 （ 6 ）： 636 - 642 .
MOK S ， ASHLEY E A ， FERREIRA P E ， et al . Drug resistance. Population transcriptomics of human malaria parasites reveals the mechanism of artemisinin resistance ［J］. Science ， 2015 ， 347 （ 6220 ）： 431 - 435 .
尚晓敏 ， 张青锋 . 恶性疟原虫青蒿素和哌喹耐药的流行现状及机制研究进展 ［J］. 第二军医大学学报 ， 2018 ， 39 （ 11 ）： 1249 - 1254 .
Update on artemisinin and ACT resistance-September 2015 ［D/OL］ . World Health Organization ［20 January 2016］ .
WHITE N J . Malaria parasite clearance ［J］. Malar J ， 2017 ， 16 （ 1 ）： 88 .
王华晶 ， 姜廷良 ， 李沧海 . 青蒿素耐药与脾脏清除疟原虫机制研究进展 ［J］. 中国药理学通报 ， 2021 ， 37 （ 2 ）： 149 - 155 .
代勇 ， 杨叶鹏 ， 孙雪英 ， 等 . 伯氏疟原虫青蒿素抗性系鼠疟模型的建立 ［J］. 中药药理与临床 ， 2017 ， 33 （ 5 ）： 204 - 205 .
WANG H J ， LI S ， CUI Z ， et al . Analysis of spleen histopathology， spleno cyte composition and haematological parameters in four strains of mice infected with Plasmodium berghei K173 ［J］. Malar J ， 2021 ， doi： 10.1101/2021.01.22.427878 http://dx.doi.org/10.1101/2021.01.22.427878 .
张杰森 ， 张梦欣 ， 韩孟伊 ， 等 . 伯氏疟原虫对小鼠脾B细胞和自然杀伤细胞及其表面分子的影响 ［J］. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志 ， 2020 ， 38 （ 2 ）： 255 - 258 .
BHAT S ， ALVA J ， MURALIDHARA K ， et al . Malaria and the heart ［J］. BMJ Case Rep ， 2012 ， doi： 10.1136/bcr-2012-007275 http://dx.doi.org/10.1136/bcr-2012-007275 .
涂玥 ， 倪光夏 ， 万毅刚 ， 等 . 经典名方及其有效成分调节免疫衰老的作用机制研究进展 ［J］. 中国实验方剂学杂志 ， 2021 ， 27 （ 18 ）： 190 - 197 .
KOLACZKOWSKA E ， KUBES P . Neutrophil recruitment and function in health and inflammation ［J］. Nat Rev Immunol ， 2013 ， 13 （ 3 ）： 159 - 175 .
TECCHIO C ， CASSATELLA M A . Neutrophil-derived chemokines on the road to immunity ［J］. Semin Immunol ， 2016 ， 28 （ 2 ）： 119 - 128 .
SÜSS G ， EICHMANN K ， KURY E ， et al . Roles of CD4 - and CD8 - bearing T lymphocytes in the immune response to the erythrocytic stages of Plasmodium chabaudi ［J］. Infect Immun ， 1988 ， 56 （ 12 ）： 3081 - 3088 .
PODOBA J E ， STEVENSON M M . CD4 + and CD8 + T lymphocytes both contribute to acquired immunity to blood-stage Plasmodium chabaudi AS ［J］. Infect Immun ， 1991 ， 59 （ 1 ）： 51 - 58 .
ENGWERDA C ， BELNOUE E ， GRÜNER A C ， et al . Experimental models of cerebral malaria ［J］. Curr Top Microbiol Immunol ， 2005 ， 297 ： 103 - 143 .
LI C ， SANNI L A ， OMER F ， et al . Pathology of Plasmodium chabaudi chabaudi infection and mortality in interleukin-10-deficient mice are ameliorated by anti-tumor necrosis factor alpha and exacerbated by anti-transforming growth factor beta antibodies ［J］. Infect Immun ， 2003 ， 71 （ 9 ）： 4850 - 4856 .
LI C ， CORRALIZA I ， LANGHORNE J . A defect in interleukin-10 leads to enhanced malarial disease in Plasmodium chabaudi chabaudi infection in mice ［J］. Infect Immun ， 1999 ， 67 （ 9 ）： 4435 - 4442 .
NAGATA S . Mutations in the Fas antigen gene in lpr mice ［J］. Semin Immunol ， 1994 ， 6 （ 1 ）： 3 - 8 .
HANAYAMA R ， TANAKA M ， MIYASAKA K ， et al . Autoimmune disease and impaired uptake of apoptotic cells in MFG-E8-deficient mice ［J］. Science ， 2004 ， 304 （ 5674 ）： 1147 - 1150 .
MUXEL S M ， FREITAS DO ROSÁRIO A P ， ZAGO C A ， et al . The spleen CD4 + T cell response to blood-stage Plasmodium chabaudi malaria develops in two phases characterized by different properties ［J］. PLoS One ， 2011 ， 6 （ 7 ）： e22434 .
GROBUSCH M P ， KREMSNER P G . Uncomplicated malaria ［J］. Curr Top Microbiol Immunol ， 2005 ， 295 ： 83 - 104 .
GROOM A C ， SCHMIDT E E ， MACDONALD I C . Microcirculatory pathways and blood flow in spleen： New insights from washout kinetics， corrosion casts， and quantitative intravital videomicroscopy ［J］. Scanning Microsc ， 1991 ， 5 （ 1 ）： 159 - 173 .
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