基于“胞络系肾” “胎茎系脾”研究寿胎丸、举元煎逆转蜕膜自然流产病理环节的安胎差异网络机制

周航; 郑小艳; 王欢; 曾倩; 邓琳雯; 丁维俊

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221116

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

基于“胞络系肾” “胎茎系脾”研究寿胎丸、举元煎逆转蜕膜自然流产病理环节的安胎差异网络机制

数据挖掘 | 更新时间：2022-11-17

- 基于“胞络系肾” “胎茎系脾”研究寿胎丸、举元煎逆转蜕膜自然流产病理环节的安胎差异网络机制
  增强出版
- Difference in Network Mechanism of Shoutaiwan and Juyuanjian in Reversing Pathology of Decidua of Spontaneous Abortion Patients： Based on "Uterine Collaterals Connecting Kidney" and "Fetal Collaterals Connecting Spleen" Theory
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第20期页码：186-200
- 作者机构：
  
  1.成都中医药大学基础医学院，成都 611137
  2.成都中医药大学针灸推拿学院，成都 611137
  3.四川中医药高等专科学校，四川绵阳 621000
  4.成都中医药大学附属医院，成都 610072
- 作者简介：
  
  周航，在站博士后，助理研究员，E-mail：zh6463@cdu.tcm.cn
  邓琳雯，在读博士，副主任医师，硕士生导师，从事中医药防治不孕症的研究，E-mail：dlwen1982@163.com； *
  丁维俊，博士，教授，博士生导师，博士后合作导师，从事中医药防治代谢性疾病基础与应用研究，E-mail：dingweijun@cdutcm.edu.cn
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金面上项目(81973901);中国博士后科学基金面上项目(2021MD703798);四川省科技厅计划项目(2021YJ0257);成都中医药大学“杏林学者”学科人才科研提升计划项目（博士后专项）(0300058074);河北省邢台市科技计划项目(2019ZC142)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221116
  中图分类号： R285;R289;R22;R2-031;R33
- 收稿日期：2022-04-13，
  
  网络出版日期：2022-07-04，
  
  纸质出版日期：2022-10-20
- 稿件说明：
移动端阅览
周航,郑小艳,王欢等.基于“胞络系肾” “胎茎系脾”研究寿胎丸、举元煎逆转蜕膜自然流产病理环节的安胎差异网络机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(20):186-200.

ZHOU Hang,ZHENG Xiaoyan,WANG Huan,et al.Difference in Network Mechanism of Shoutaiwan and Juyuanjian in Reversing Pathology of Decidua of Spontaneous Abortion Patients： Based on "Uterine Collaterals Connecting Kidney" and "Fetal Collaterals Connecting Spleen" Theory[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(20):186-200.
周航,郑小艳,王欢等.基于“胞络系肾” “胎茎系脾”研究寿胎丸、举元煎逆转蜕膜自然流产病理环节的安胎差异网络机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(20):186-200. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221116.

ZHOU Hang,ZHENG Xiaoyan,WANG Huan,et al.Difference in Network Mechanism of Shoutaiwan and Juyuanjian in Reversing Pathology of Decidua of Spontaneous Abortion Patients： Based on "Uterine Collaterals Connecting Kidney" and "Fetal Collaterals Connecting Spleen" Theory[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(20):186-200. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221116.

摘要

目的

通过整合药理学方法研究补肾安胎法代表方寿胎丸、健脾安胎法代表方举元煎调控自然流产（SA）蜕膜病理环节靶点逆转妊娠结局的安胎机制差异，初步阐释“胞络系肾” “胎茎系脾”生殖理论科学内涵。

方法

运用GeneCards数据库筛选SA的调控靶点进行基因本体-生物学过程（GO-BP）富集分析，结合Cytoscape网络分析、文献引证筛选主要病理环节及核心靶点；利用高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）筛选并获取寿胎丸、举元煎的潜在活性成分，构建其调控差异网络预测；复制SA大鼠模型进行同单位寿胎丸、举元煎干预，采用苏木素-伊红（HE）染色、透射电镜（TEM）、酶联免疫吸附测定法（ELISA）、免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）等方法进行安胎病理调控机制验证。

结果

细胞黏附、炎症反应、细胞死亡、血管生成的调控失常是SA核心病理环节；分别获取寿胎丸潜在特异活性成分13个及举元煎活性成分14个，预测调控网络提示寿胎丸与举元煎的潜在活性成分均能调控血管内皮生长因子（VEGF）、白细胞介素（IL）-2、雌激素受体（ESR）-1、基质金属蛋白酶（MMP）-9等靶点从而调控SA病理环节；实验研究提示寿胎丸和举元煎可显著提高SA大鼠妊娠率、蜕膜细胞完整率及血供、有效控制细胞凋亡形态及雌激素（E

）、孕激素（P）及其受体表达，下调SA大鼠蜕膜组织MMP-2、MMP-9、IL-2、IL-6表达，同时上调抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）及IL-4表达。寿胎丸可显著上调VEGF表达，举元煎可显著下调E-钙黏蛋白（E-Cad）表达。

结论

寿胎丸、举元煎均可通过调控SA核心病理过程以安胎，同条件干预下寿胎丸总体疗效优于举元煎，寿胎丸在调控血管生成途径优于举元煎，举元煎在细胞黏附途径优于寿胎丸，该结论可部分阐释 “同病异治”生物学基础，为安胎中药质量标志物（Q-marker）识别、进一步方-证代谢组研究提供客观数据参考。

Abstract

Objective

To explore difference in the mechanism of Shoutaiwan， a representative kidney-tonifying and abortion-preventing formula， and Juyuanjian， a typical spleen-invigorating and abortion-preventing formula in reversing the pathology of decidua of spontaneous abortion （SA） patients and to expound the connotation of "uterine collaterals connecting kidney" and "fetal collaterals connecting spleen" theory.

Method

The targets of SA were retrieved from GeneCards， followed by gene ontology-biological process （GO-BP） annotation. Based on Cytoscape and previous research， the main processes and core targets were screened out. High-performance liquid chromatography-mass spectrometry （HPLC-MS） was used to identify the potential active components of Shoutaiwan and Juyuanjian and the regulatory networks were constructed. SA was induced in rats and the model rats were treated with Shoutaiwan and Juyuanjian at the same unit. Hematoxylin and eosin （HE） staining， transmission electron microscopy （TEM）， enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， immunohistochemistry （IHC）， immunofluorescence （IF）， and other methods were employed to verify the mechanisms against miscarriage.

Result

The dysregulation of cell adhesion， inflammatory response， cell death， and angiogenesis was the core pathological process of SA. A total of 13 potential specific active components of Shoutaiwan and 14 active components of Juyuanjian were screened out. The regulatory networks showed that the potential active components of the two prescriptions modulated vascular endothelial growth factor （VEGF）， interleukin （IL）-2， estrogen receptor （ESR）-1， matrix metalloproteinase-9 （MMP-9）， and other targets to regulate the pathological process of SA. The two can significantly improve the pregnancy rate and the integrity rate and blood supply of decidua cells， control the apoptosis morphology and the expression of estrogen （E

）， progesterone （P）， and its receptor， and down-regulate the expression of MMP-2， MMP-9， IL-2， and IL-6 in decidua tissue of SA rats. At the same time， they up-regulated the expression of anti-apoptotic protein B-cell lymphoma-2 （Bcl-2） and IL-4. Shoutaiwan significantly up-regulated the expression of VEGF， and Juyuanjian significantly down-regulated the expression of E-cadherin （E-Cad）.

Conclusion

Both Shoutaiwan and Juyuanjian regulate the core pathological process of SA to prevent miscarriage. At the same unit， Shoutaiwan is overall superior to Juyuanjian. Shoutaiwan is better than Juyuanjian in regulating angiogenesis and Juyuanjian is superior to Shoutaiwan in regulating cell adhesion. This conclusion can partly explain the biological basis of "treating the same disease with different methods"， and provide objective data reference for the identification of quality marker （Q-marker） of anti-miscarriage Chinese medicine and further study of formula-syndrome metabolome.

关键词

Keywords

references

《自然流产诊治中国专家共识》编写组 . 自然流产诊治中国专家共识（2020年版）［J］. 中国实用妇科与产科杂志， 2020 ， 36 （ 11 ）： 1082 - 1090 .

RAI R ， REGAN L . Recurrent miscarriage ［J］. Lancet ， 2006 ， 368 （ 9535 ）： 601 - 611 .

谈勇 . 中医妇科学［M］. 北京：中国中医药出版社， 2016 ： 154

CHAN D ， CHEUNG K W ， KO J ， et al . Use of oral progestogen in women with threatened miscarriage in the first trimester：A randomized double-blind controlled trial ［J］. Hum Reprod ， 2021 ， 36 （ 3 ）： 587 - 595 .

刘燕，曹秋雨，邵芷若，等 . 寿胎丸化裁联合西药治疗复发性流产Meta分析［J］. 新中医， 2020 ， 52 （ 2 ）： 10 - 14 .

曾倩，尤昭玲，章刚，等 . 衷中参西论尤氏种子安胎法［J］. 中华中医药杂志， 2016 ， 31 （ 1 ）： 147 - 149 .

张佳缘，夏宛廷，黄金珠，等 . 674例早期先兆流产患者孕产史中医证型与疗效及安胎切入时机的相关性研究［J］. 时珍国医国药， 2019 ， 30 （ 10 ）： 2452 - 2454 .

ZENG P ， YI Y ， SU H F ， et al . Key phytochemicals and biological functions of chuanxiong rhizoma against ischemic stroke：A network pharmacology and experimental assessment ［J］. Front Pharmacol ， 2021 ， 12 ： 758049 .

李垚，陈学进 . 医学实验动物学［M］. 上海：上海交通大学出版社， 2021 ： 135 - 138 .

FISHILEVICH S ， NUDEL R ， RAPPAPORT N ， et al . GeneHancer： Genome-wide integration of enhancers and target genes in GeneCards ［J］. Database （Oxford）， 2017 ， doi： 10.1093/database/bax028 http://dx.doi.org/10.1093/database/bax028 .

范芳芳，张雯，余羊羊，等 . 基于网络药理学的藏药红景天功效关联性质量标志物预测分析［J］. 中草药， 2021 ， 52 （ 22 ）： 6911 - 6922 .

LIPINSKI C A . Rule of five in 2015 and beyond： Target and ligand structural limitations， ligand chemistry structure and drug discovery project decisions ［J］. Adv Drug Deliv Rev ， 2016 ， 101 ： 34 - 41 .

邹剑芬，冉添福，高愉婷，等 . 泰山磐石散对流产模型大鼠母胎界面NF- κ B、IL-1 β 、TNF- α 表达情况的影响［J］. 中医药临床杂志， 2021 ， 33 （ 7 ）： 1303 - 1307 .

马丽亚，张大伟，张颖，等 . 庞氏安胎汤对先兆流产大鼠血清免疫因子及激素水平的影响［J］. 中医杂志， 2019 ， 60 （ 2 ）： 159 - 162 .

赖裕玲，张莹轩，曾丽华，等 . 减味寿胎丸对流产模型大鼠子宫蜕膜脂质过氧化及铁死亡蛋白表达的影响［J］. 中医杂志， 2021 ， 62 （ 21 ）： 1917 - 1922，1929 .

严莉，郭珮，周航，等 . 基于Ang/Tie-2信号通路研究补肾活血方导法调控大鼠种植窗期子宫组织血管生成的助孕机制［J］. 世界科学技术—中医药现代化， 2020 ， 22 （ 6 ）： 1862 - 1870 .

杨春荣 . 补肾安胎冲剂对大鼠骨髓来源EPCs细胞增殖、迁移和分化的影响及其治疗肾虚型早期先兆流产的临床观察［D］. 合肥：安徽中医药大学， 2021 .

ZHENG X ， SUN Y ， ZHANG H ， et al . Prospective study evaluating the effect of mifepristone on E-cadherin expression in villi in early pregnancy ［J］. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol ， 2015 ， 194 ： 115 - 118 .

ELSALAM S A ， MANSOR A E ， SARHAN M H ， et al . Evaluation of Apoptosis， proliferation， and adhesion molecule expression in trophoblastic tissue of women with recurrent spontaneous abortion and infected with toxoplasma gondii ［J］. Int J Gynecol Pathol ， 2021 ， 40 （ 2 ）： 124 - 133 .

李晶晶 . Talin1/miR-1285-3p/PIPK1信号轴通过PI3K/Akt通路调控子宫内膜粘附作用的分子机制研究［D］. 南宁：广西医科大学， 2019 .

BLOIS S M ， FREITAG N ， TIRADO-GONZáLEZ I ， et al . NK cell-derived IL-10 is critical for DC-NK cell dialogue at the maternal-fetal interface ［J］. Sci Rep ， 2017 ， 7 （ 1 ）： 2189 .

FEDORKA C E ， SCOGGIN K E ， EL-SHEIKH ALI H ， et al . Interleukin-6 pathobiology in equine placental infection ［J］. Am J Reprod Immunol ， 2021 ， 85 （ 5 ）： e13363 .

LÖB S ， OCHMANN B ， MA Z ， et al . The role of Interleukin-18 in recurrent early pregnancy loss ［J］. J Reprod Immunol ， 2021 ， 148 ： 103432 .

SU Y ， XU J ， GAO R ， et al . The Circ-CYP24A1-miR-224-PRLR axis impairs cell proliferation and apoptosis in recurrent miscarriage ［J］. Front Physiol ， 2022 ， 13 ： 778116 .

DEFTEREOU T E ， TSOLOU A ， LIBERIS A ， et al . Differential apoptotic activity in trophoblast of spontaneous abortions and normal pregnancies ［J］. Folia Histochem Cytobiol ， 2022 ， 60 （ 1 ）： 24 - 30 .

WANG S ， ZHU X ， XU Y ， et al . Programmed cell death-1 （PD-1） and T-cell immunoglobulin mucin-3 （Tim-3） regulate CD4 + T cells to induce Type 2 helper T cell （Th2） bias at the maternal-fetal interface ［J］. Hum Reprod ， 2016 ， 31 （ 4 ）： 700 - 711 .

王媛中，李元琪，李伟莉 . 母胎界面血管生成调控因子与复发性流产的研究［J］. 长春中医药大学学报， 2017 ， 33 （ 6 ）： 979 - 983 .

JING G ， YAO J ， DANG Y ， et al . The role of β -HCG and VEGF-MEK/ERK signaling pathway in villi angiogenesis in patients with missed abortion ［J］. Placenta ， 2021 ， 103 ： 16 - 23 .

ZHI Z ， YANG W ， LIU L ， et al . Early missed abortion is associated with villous angiogenesis via the HIF-1 α /VEGF signaling pathway ［J］. Arch Gynecol Obstet ， 2018 ， 298 （ 3 ）： 537 - 543 .

WEI C Y ， LI M Q ， ZHU X Y ， et al . Immune status of decidual macrophages is dependent on the CCL2/CCR2/JAK2 pathway during early pregnancy ［J］. Am J Reprod Immunol ， 2021 ， 86 （ 5 ）： e13480 .

YANG D ， DAI F ， YUAN M ， et al . Role of transforming growth factor- β 1 in regulating fetal-maternal immune tolerance in normal and pathological pregnancy ［J］. Front Immunol ， 2021 ， 12 ： 689181 .

GLORIA-BOTTINI F ， NICOTRA M ， LUCARINI N ， et al . Phosphotyrosine-protein-phosphatases and human reproduction：An association between low molecular weight acid phosphatase （ACP1） and spontaneous abortion ［J］. Dis Markers ， 1996 ， 12 （ 4 ）： 261 - 269 .

LÖB S ， AMANN N ， KUHN C ， et al . Interleukin-1 beta is significantly upregulated in the decidua of spontaneous and recurrent miscarriage placentas ［J］. J Reprod Immunol ， 2021 ， 144 ： 103283 .

HUANG Z ， DU G ， HUANG X ， et al . The enhancer RNA lnc-SLC4A1-1 epigenetically regulates unexplained recurrent pregnancy loss （URPL） by activating CXCL8 and NF- κ B pathway ［J］. E Bio Med ， 2018 ， 38 ： 162 - 170 .

PENG Y ， YIN S ， WANG M . Significance of the ratio interferon- γ /interleukin-4 in early diagnosis and immune mechanism of unexplained recurrent spontaneous abortion ［J］. Int J Gynaecol Obstet ， 2021 ， 154 （ 1 ）： 39 - 43 .

STAUN R E ， GOLMAN S ， GABARIN D ， et al . Expression of matrix metalloproteinase-2 and 9 and their tissue inhibitors in pituitary adenomas ［J］. Chin J Practical Nervous Dis ， 2007 .

VERMA P ， VERMA R ， NAIR R R ， et al . Altered crosstalk of estradiol and progesterone with Myeloid-derived suppressor cells and Th1/Th2 cytokines in early miscarriage is associated with early breakdown of maternal-fetal tolerance ［J］. Am J Reprod Immunol ， 2019 ， 81 （ 2 ）： e13081 .

PAPÚCHOVÁ H ， MEISSNER T B ， LI Q ， et al . The dual role of HLA-C in tolerance and immunity at the maternal-fetal interface ［J］. Front Immunol ， 2019 ， 10 ： 2730 .

GÜCER F ， BALKANLI-KAPLAN P ， YÜKSEL M ， et al . Maternal serum levels of tumor necrosis factor-alpha and interleukin-2 receptor in threatened abortion：A comparison with normal and pathologic pregnancies ［J］. Fertil Steril ， 2001 ， 76 （ 4 ）： 707 - 711 .

ZENCLUSSEN A C ， JOACHIM R ， HAGEN E ， et al . Heme oxygenase is downregulated in stress-triggered and interleukin-12-mediated murine abortion ［J］. Scand J Immunol ， 2002 ， 55 （ 6 ）： 560 - 569 .

QIN S ， ZHANG Y ， ZHANG J ， et al . SPRY4 regulates trophoblast proliferation and apoptosis via regulating IFN- γ -induced STAT1 expression and activation in recurrent miscarriage ［J］. Am J Reprod Immunol ， 2020 ， 83 （ 6 ）： e13234 .

YILMAZ F ， MICILI S C ， ERBIL G . The role of FGF-4 and FGFR-2 on preimplantation embryo development in experimental maternal diabetes ［J］. Gynecol Endocrinol ， 2022 ， 38 （ 3 ）： 248 - 252 .

MAS A E ， DUBANCHET S ， BATAILLE N ， et al . IL-23，IL-27 and TWEAK：Potential regulators in a murine abortion system？［J］. J Reproductive Immunol ， 2006 ， 71 （ 2 ）： 156 - 156 .

IBRAHIM M I ， RAMY A R ， ABDELHAMID A S ， et al . Maternal serum amyloid A level as a novel marker of primary unexplained recurrent early pregnancy loss ［J］. Int J Gynaecol Obstet ， 2017 ， 136 （ 3 ）： 298 - 303 .

文乐兮，尤昭玲 . 尤昭玲中医安胎思路的构想与实践［J］. 中国中医基础医学杂志， 2015 ， 21 （ 4 ）： 398 - 399，415 .

楼倩颖，曹程，王青青，等 . 开心散与生脉散抗阿尔茨海默症“同病异治”作用机制网络药理学分析与中枢神经免疫调控效用验证［J］. 世界科学技术—中医药现代化， 2022 ， 24 （ 1 ）： 98 - 112 .

陈健，陈启龙 . 网络药理学在中医药研究中的现状及思考［J］. 上海中医药大学学报， 2021 ， 35 （ 5 ）： 1 - 6，13 .

宁艳，罗颂平，梁国珍 . 补肾健脾中药复方对肾虚黄体抑制妊娠大鼠流产模型的实验研究［J］. 中国医药学报， 2000 ， 15 （ 6 ）： 28 - 30 .

辛明蔚，何军琴 . 从"胞络者系于肾"探讨温肾养血法提高子宫内膜容受性［J］. 现代中西医结合杂志， 2018 ， 27 （ 20 ）： 2203 - 2205 .

方毅，张沁舒，陈蓉 . 胞络之理论探析［J］. 中国中医基础医学杂志， 2012 ， 18 （ 1 ）： 28 ， 32 .

刘昌孝，陈士林，肖小河，等 . 中药质量标志物（Q-Marker）：中药产品质量控制的新概念［J］. 中草药， 2016 ， 47 （ 9 ）： 1443 - 1457 .

许海玉，侯文彬，李珂，等 . 基于整合药理学的中药质量标志物发现与应用［J］. 中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 （ 6 ）： 1 - 8 .

李兵，韩飞，王忠，等 . 多组学网络背景下方剂临床价值的考量［J］. 中国中药杂志， 2017 ， 42 （ 5 ）： 848 - 851 .

沈自尹，蔡定芳，张玲娟，等 . 补肾和健脾对免疫系统不同作用方式的研究［J］. 中国中西医结合杂志， 1997 （ 6 ）： 351 - 353 .

曹璐靖，詹淑玉，姬翔宇，等 . 近五年中药提取物多成分药代动力学研究进展［J］. 中国中药杂志， 2021 ， 46 （ 13 ）： 3270 - 3287 .

ZHU D ， ZOU H ， LIU J ， et al . Inhibition of HMGB1 ameliorates the maternal-fetal interface destruction in unexplained recurrent spontaneous abortion by suppressing pyroptosis activation ［J］. Front Immunol ， 2021 ， 12 ： 782792 .

ZHOU H ， YANG Y ， DENG L ， et al . A potential mechanism of kidney-tonifying herbs treating unexplained recurrent spontaneous abortion： Clinical evidence from the homogeneity of embryo implantation and tumor invasion ［J］. Front Pharmacol ， 2021 ， 12 ： 775245 .

WANG Y ， KANNEGANTI T D . From pyroptosis， apoptosis and necroptosis to PANoptosis：A mechanistic compendium of programmed cell death pathways ［J］. Comput Struct Biotechnol J ， 2021 ， 19 ： 4641 - 4657 .

刘思鸿，赵汉青，高宏杰，等 . 一种基于中医"君臣佐使"理论的加权网络模块划分优化方法［J］. 中国中药杂志， 2021 ， 46 （ 22 ）： 5936 - 5943 .

DU L ， DENG W ， ZENG S ， et al . Single-cell transcriptome analysis reveals defective decidua stromal niche attributes to recurrent spontaneous abortion ［J］. Cell Prolif ， 2021 ， 54 （ 11 ）： e13125 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

寿胎丸治疗复发性流产的作用机制研究进展

“病-证-治”结合自然流产模型研究进展及在单细胞多模态组学的应用趋势

茯苓鲨烯环氧酶基因克隆与表达分析

当归香豆酸-3-羟化酶基因ASC3H的克隆及表达模式与阿魏酸含量相关性分析

寿胎丸通过调控Nrf2信号通路减轻人绒毛膜滋养层细胞的氧化损伤治疗复发性流产