三物白散含药血清通过TGF-<italic style="font-style: italic">β</italic>/Smad通路抑制TGF-<italic style="font-style: italic">β</italic><sub>1</sub>诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化

王莉兰; 徐中驰; 凌云; 冯慧; 周西彬; 周春祥

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221226

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三物白散含药血清通过TGF-β/Smad通路抑制TGF-β₁诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化

药理 | 更新时间：2022-09-30

- 三物白散含药血清通过TGF-β/Smad通路抑制TGF-β₁诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化
- Sanwubai San Inhibits TGF-β₁ Induced Epithelial Mesenchymal Transition of Human Gastric Cancer SGC-7901 Cells Through TGF-β/ Smad Pathway
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第21期页码：66-73
- 作者机构：
  
  1.南京中医药大学中医学院·中西医结合学院，中医热病实验室，南京 210023
  2.南京中医药大学第一临床医学院，南京 210023
  3.中国人民解放军第二军医大学，上海 200433
  4.南京明基医院，南京 210023
- 作者简介：
  
  王莉兰，硕士，从事伤寒论方药抗肿瘤抗炎免疫研究，E-mail：1292451174@qq.com
  周春祥，博士，教授，从事伤寒论方药抗肿瘤抗炎免疫研究，E-mail：chunxiangzhou@njucm.edu.cn
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(81774021;82074504);江苏高校优势学科建设工程（中西医结合）项目
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221226
  中图分类号： R22;R242;R2-031;R285.5
- 收稿日期：2021-11-24，
  
  网络出版日期：2022-04-19，
  
  纸质出版日期：2022-11-05
- 稿件说明：
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王莉兰,徐中驰,凌云等.三物白散含药血清通过TGF-β/Smad通路抑制TGF-β₁诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(21):66-73.

WANG Lilan,XU Zhongchi,LING Yun,et al.Sanwubai San Inhibits TGF-β₁ Induced Epithelial Mesenchymal Transition of Human Gastric Cancer SGC-7901 Cells Through TGF-β/ Smad Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(21):66-73.
王莉兰,徐中驰,凌云等.三物白散含药血清通过TGF-β/Smad通路抑制TGF-β₁诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(21):66-73. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221226.

WANG Lilan,XU Zhongchi,LING Yun,et al.Sanwubai San Inhibits TGF-β₁ Induced Epithelial Mesenchymal Transition of Human Gastric Cancer SGC-7901 Cells Through TGF-β/ Smad Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(21):66-73. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221226.

摘要

目的

基于转化生长因子-

/Smad（TGF-

/Smad）信号通路，体外研究三物白散含药血清对TGF-

诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化（EMT）的影响及其机制。

方法

SPF级3月龄雄性SD大鼠28只，随机分为空白组及三物白散低、中、高剂量组，每组7只，三物白散低、中、高剂量组分别按0.031 25、0.062 5、0.125 g·kg

-1

·d

-1

的剂量灌胃，空白组以等体积超纯水灌胃。每日1次，连续7 d。末次给药后45 min经腹主动脉取含药血清；细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测三物白散高剂量组含药血清对SGC-7901细胞活性的影响；镜下观察经TGF-

和三物白散含药血清处理后的细胞形态变化；细胞划痕实验和Transwell实验分别检测经TGF-

诱导和三物白散低、中、高剂量组含药血清处理后SGC-7901细胞的迁移率和侵袭率；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞E-钙黏蛋白（E-cadherin）、Snail、TGF-

、Smad3、磷酸化（p）-Smad3、Smad7蛋白的表达。

结果

与空白组比较，10%、15%、20%三物白散高剂量组含药血清可呈浓度-时间依赖性抑制SGC-7901细胞活性；与空白组比较，模型组细胞失去梭形形态，多数细胞变圆、变长；与模型组比较，各药物组细胞伪足减少，细胞变小且形态恢复正常；与空白组比较，模型组细胞迁移和侵袭能力增强（

0.01）；与模型组比较，三物白散中、高剂量组处理SGC-7901细胞24 h后能显著抑制其迁移能力（

0.01）；三物白散低、中、高剂量组处理SGC-7901细胞48 h后均能显著抑制其迁移能力（

0.01）；与模型组比较，三物白散低、中、高组剂量组均能显著抑制其侵袭能力（

0.01）；与空白组比较，模型组E-cadherin及Smad7蛋白的表达水平显著降低（

0.01），Snail、p-Smad3、TGF-

蛋白的表达水平显著升高（

0.01），Smad3总蛋白水平不变；与模型组比较，三物白散高剂量组E-cadherin蛋白显著增加（

0.01）、三物白散中剂量组有明显上升（

0.05）；Smad7蛋白三物白散中、高剂量组表达水平显著增加（

0.01）；三物白散中、高剂量组Snail蛋白表达水平显著降低（

0.01）；三物白散低、中、高组TGF-

、p-Smad3蛋白表达水平均显著降低（

0.01）。三物白散含药血清可以有效地逆转TGF-

诱导的人胃癌SGC-7901细胞EMT，并可能通过TGF-

/Smad信号通路发挥作用。

结论

三物白散能抑制TGF-

诱导的SGC-7901细胞EMT的发生，其机制可能与调控TGF-

/Smad信号通路有关。

Abstract

Objective

To study the effect of serum containing Sanwubai San on TGF-

induced epithelial mesenchymal transition （EMT） of human gastric cancer SGC-7901 cells and its mechanism

in vitro

based on transforming growth factor-

/Smad（TGF-

/Smad）signaling pathway.

Method

Twenty-eight male SD rats （SPF grade， three months） were randomly divided into blank group and Sanwubai low （0.031 25 g·kg

-1

·d

-1

，

）， medium （0.062 5 g·kg

-1

·d

-1

，

） and high （0.125 g·kg

-1

·d

-1

，

） dose groups， seven in each group. The blank group was given the same volume of ultrapure water （

）. The gavage was performed once a day for seven consecutive days. The serum containing the drug was taken from the abdominal aorta 45 min after the last administration. Cell counting kit-8 （CCK-8） method was used to detect the effect of serum in Sanwubai San high dose group on the activity of SGC-7901 cells. Changes of cell morphology after treatment with TGF-

and serum containing Sanwubai San were observed by microscopy， and the migration rate and invasion rate of the SGC-7901 cells were detected by cell scratch assay and transwell assay， respectively. Western blot was used to detect the expression of E-cadherin， snail， TGF-

， Smad3， p-Smad3 and Smad7 proteins.

Result

Compared with the blank group， 10%， 15% and 20% high-dose Sanwubai San inhibited the activity of SGC-7901 cells in a concentration and time dependent manner. Compared with the conditions in the blank group， the cells in the model group lost spindle shape， and most cells became round and long. Compared with the model group， the Sanwubai San groups had decreased pseudopodia and small cells with the morphology returning to normal. Compared with the conditions in the blank group， enhanced ability of cell migration and invasion （

0.01）， lowered expression of E-cadherin and Smad7 （

0.01）， and increased expression of Snail， p-Smad3 and TGF-

（

0.01） were found in the model group， with the total protein level of Smad3 remaining unchanged. Compared with the conditions in the model group， the cell migration ability was inhibited in the Sanwubai San high and medium dose groups （

0.01） after 24 h， and the ability was inhibited in all three Sanwubai San groups after 48 h （

0.01）， while the invasion ability was enhanced. In addition， the Sanwubai San high and medium dose groups had elevated expression of E-cadherin （

0.01） and Smad7 （

0.01）， and decreased expression of Snail （

0.01）， and the expression of TGF-

and

p-Smad3 was down-regulated in the three Sanwubai San groups （

0.01）.

Conclusion

Sanwubai San could inhibit TGF-

induced EMT in SGC-7901 cells， and its mechanism might be related to the regulation of TGF-

/Smad signaling pathway.

关键词

Keywords

references

CHAFFER C L ， WEINBERG R A . A perspective on cancer cell metastasis ［J］. Science ， 2011 ， 331 （ 6024 ）： 1559 - 1564 .

LIU C ， HE X ， LIU X ， et al . RPS15A promotes gastric cancer progression via activation of the Akt/IKK- β /NF- κ B signalling pathway ［J］. J Cell Mol Med ， 2019 ， 23 （ 3 ）： 2207 - 2218 .

HE Z ， DONG W ， LI Q ， et al . Sauchinone prevents TGF- β -induced EMT and metastasis in gastric cancer cells ［J］. Biomed Pharmacother ， 2018 ， doi： 10.1016/j.biopha.2018.02.121 http://dx.doi.org/10.1016/j.biopha.2018.02.121 .

MITTAL V . Epithelial mesenchymal transition in tumor metastasis ［J］. Annu Rev Pathol ， 2018 ， doi： 10.1 146/annurev-pathol-020117-043854 http://dx.doi.org/10.1146/annurev-pathol-020117-043854 .

SINGH M ， YELLE N ， VENUGOPAL C ， et al . EMT： Mechanisms and therapeutic implications ［J］. Pharmacol Ther ， 2018 ， doi： 10.1016/j.pharmthera.2017.08.009 http://dx.doi.org/10.1016/j.pharmthera.2017.08.009

张仲景 . 伤寒论［M］. 北京：中医古籍出版社， 2018 ： 460 .

濮文渊，孙松娴，凌云，等 . 《伤寒论》三物白散抗肿瘤作用研究进展［J］. 中华中医药杂志， 2017 ， 32 （ 1 ）： 225 - 227 .

徐力，王明艳，周春祥，等 . 三物白散加味方影响胃癌相关基因表达的实验研究［J］. 南京中医药大学学报：自然科学版， 2002 ， 44 （ 3 ）： 158 - 160 .

徐力，王明艳，许冬青，等 . 三物白散加味方诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究［J］. 四川中医， 2005 ， 24 （ 12 ）： 29 - 31 .

王明艳，徐力，周春祥，等 . 加味三物白散诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡及对细胞周期影响的研究［J］. 中医药学刊， 2002 ， 21 （ 4 ）： 445 - 446 .

梁巍，孙文广，姜佳佳，等 . TGF- β 1 诱导人胃腺癌SGC-7901细胞建立EMT模型［J］. 医学研究杂志， 2014 ， 43 （ 6 ）： 37 - 41 .

李素素 . 三物白散通过调节肠道菌群介导肝癌免疫应答的机制研究［D］. 南京：南京中医药大学， 2020 .

张彩灵 . 苦参素对TGF- β 1 诱导的人肝癌HepG2细胞的生物学特性、上皮间质转化的影响及其机制研究［D］. 百色：右江民族医学院， 2021 .

国家药典委员会 . 中华人民共和国药典：一部［M］. 北京：中国医药科技出版社， 2019 ： 361 .

MACHLOWSKA J ， BAJ J ， SITARZ M ， et al . Gastric cancer： Epidemiology， risk factors， classification， genomic characteristics and treatment strategies ［J］. Int J Mol Sci ， 2020 ， 21 （ 11 ）： 4012 .

YUE B ， SONG C ， YANG L ， et al . METTL3-mediated N6-methyladenosine modification is critical for epithelial - mesenchymal transition and metastasis of gastric cancer ［J］. Mol Cancer ， 2019 ， 18 （ 1 ）： 142 .

XU J ， LIU D ， NIU H ， et al . Resveratrol reverses Doxorubicin resistance by inhibiting epithelial-mesenchymal transition （EMT） through modulating PTEN/Akt signaling pathway in gastric cancer ［J］. J Exp Clin Cancer Res ， 2017 ， 36 （ 1 ）： 19 .

TIAN S ， PENG P ， LI J ， et al . SERPINH1 regulates EMT and gastric cancer metastasis via the Wnt/ β -catenin signaling pathway ［J］. Aging ， 2020 ， 12 （ 4 ）： 3574 - 3593 .

LI S ， CONG X ， GAO H ， et al . Tumor-associated neutrophils induce EMT by IL-17a to promote migration and invasion in gastric cancer cells ［J］. J Exp Clin Cancer Res ， 2019 ， 38 （ 1 ）： 6 .

ZHANG H ， LIU L ， WANG Y ， et al . KLF8 involves in TGF-beta-induced EMT and promotes invasion and migration in gastric cancer cells ［J］. J Cancer Res Clin Oncol ， 2013 ， 139 （ 6 ）： 1033 - 1042 .

周春祥 . 对祛邪抗肿瘤方药扶正作用研究的思考［J］. 江苏中医， 2001 ， 46 （ 6 ）： 4 - 6 .

DE S G ， LUCAS S . Targeting immunosuppression by TGF- β 1 for cancer immunotherapy ［J］. Biochem Pharmacol ， 2021 ， doi： 10.1016/j.bcp.2021.114697 http://dx.doi.org/10.1016/j.bcp.2021.114697 .

刘镕，赵琴平，董惠芬，等 . TGF- β 信号传导通路及其生物学功能［J］. 中国病原生物学杂志， 2014 ， 9 （ 1 ）： 77 - 83 .

陈春苗，张国哲，刘平平，等 . 小檗碱通过TGF- β /Smad通路抑制TGF- β 1 诱导的人肝癌HepG2细胞上皮间质转化的研究［J］. 中国药理学通报， 2020 ， 36 （ 2 ）： 261 - 267 .

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DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221226

摘要

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Sanwubai San Inhibits TGF-β₁ Induced Epithelial Mesenchymal Transition of Human Gastric Cancer SGC-7901 Cells Through TGF-β/ Smad Pathway