三七皂苷通过抑制自噬减轻TGF-<italic style="font-style: italic">β</italic><sub>1</sub>诱导的肾小管上皮细胞损伤

毛稳; 夏琳颖; 刘贤莉; 潘丽萍; 杜月光

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221304

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三七皂苷通过抑制自噬减轻TGF-β₁诱导的肾小管上皮细胞损伤

药理 | 更新时间：2022-11-17

- 三七皂苷通过抑制自噬减轻TGF-β₁诱导的肾小管上皮细胞损伤
- Panax notoginseng Saponins Alleviate TGF-β₁-induced Renal Tubular Epithelial Cell Injury by Inhibiting Autophagy
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第20期页码：86-91
- 作者机构：
  
  1.浙江中医药大学基础医学院，杭州 310053
  2.浙江中医药大学生命科学学院，杭州 310053
- 作者简介：
  
  毛稳，在读硕士，从事肿瘤病理学研究，E-mail：maowen1231@126.com
  杜月光，博士，教授，硕士生导师，从事中医药防治糖尿病并发症的实验研究，E-mail：duyueguang@163.com
- 基金信息：
  
  浙江省中医药管理局项目(2020ZB063)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221304
  中图分类号： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- 收稿日期：2022-03-15，
  
  网络出版日期：2022-06-16，
  
  纸质出版日期：2022-10-20
- 稿件说明：
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毛稳,夏琳颖,刘贤莉等.三七皂苷通过抑制自噬减轻TGF-β₁诱导的肾小管上皮细胞损伤[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(20):86-91.

MAO Wen,XIA Linying,LIU Xianli,et al.Panax notoginseng Saponins Alleviate TGF-β₁-induced Renal Tubular Epithelial Cell Injury by Inhibiting Autophagy[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(20):86-91.
毛稳,夏琳颖,刘贤莉等.三七皂苷通过抑制自噬减轻TGF-β₁诱导的肾小管上皮细胞损伤[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(20):86-91. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221304.

MAO Wen,XIA Linying,LIU Xianli,et al.Panax notoginseng Saponins Alleviate TGF-β₁-induced Renal Tubular Epithelial Cell Injury by Inhibiting Autophagy[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(20):86-91. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221304.

摘要

目的

探讨三七皂苷（

Panax notoginseng

saponins，PNS）抗转化生长因子-

（TGF-

）诱导的肾小管上皮细胞损伤的作用及机制。

方法

培养NRK-52E肾小管上皮细胞，分为空白组、TGF-

组、TGF-

+12.5 mg·L

-1

PNS组、TGF-

+25 mg·L

-1

PNS组、TGF-

+50 mg·L

-1

PNS组，PNS干预48 h，收集细胞及上清，采用倒置显微镜观察细胞形态；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测上皮间质转化（EMT）相关蛋白、自噬相关蛋白表达；流式液相多重蛋白定量技术检测炎症因子含量；流式细胞术检测细胞凋亡率。

结果

与空白组比较，TGF-

诱导后细胞呈梭形改变且呈明显的EMT表现，即E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达明显下调（

0.05），

-平滑肌肌动蛋白（

-SMA）表达明显上调（

0.05），PNS处理后，大部分细胞形态趋向正常并逆转EMT的发生。同时，与空白组比较，TGF-

组肿瘤坏死因子-

（TNF-

）水平明显升高，IL-10水平下降，凋亡率增加（

0.05），PNS作用后，TNF-

水平下降，IL-10水平升高，细胞凋亡率明显下降（

0.05）。并且TGF-

能明显上调肾小管上皮细胞自噬相关蛋白Beclin1和自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ（LC3Ⅱ/Ⅰ）的表达（

0.05，

0.01），而PNS抑制其表达。

结论

PNS对TGF-

诱导的肾小管上皮细胞具有保护作用，其机制可能是通过抑制自噬来减轻炎症和凋亡，进而抵抗TGF-

诱导的损伤。

Abstract

Objective

To investigate the role and mechanism of

Panax notoginseng

saponins （PNS） in inhibiting transforming growth factor-

（TGF-

）-induced renal tubular epithelial cell injury.

Method

NRK-52E renal tubular epithelial cells were cultured and divided into control group， TGF-

group，TGF-

+12.5 mg·L

-1

PNS group，TGF-

+25 mg·L

-1

PNS group and TGF-

+50 mg·L

-1

PNS group. After 48 hours of PNS intervention， the cells and the supernatant were collected， and cell morphology was observed by inverted microscope. Western blot was used to detect the expression of epithelial-mesenchymal transition （EMT）-related proteins and autophagy-related proteins. Flow liquid chromatography for multiple protein quantification and flow cytometry were employed to determine the content of inflammatory factors and apoptosis rate， respectively.

Result

Compared with the conditions in the control group， after TGF-

induction， the cells showed a spindle-shaped change and the expression of E-cadherin was down-regulated （

0.05）， while the expression of

-smooth muscle actin （

-SMA） was up-regulated （

0.05）. After PNS treatment， most of the cells tended to be normal and reversed the occurrence of EMT. In addition， compared with the conditions in the control group， the level of TNF-

was increased while that of IL-10 was decreased， with elevated apoptosis rate （

0.05） in the TGF-

group. After PNS treatment， the level of TNF-

was lowered while that of IL-10 was boosted with the increase of the dose， with reduced apoptosis rate （

0.05）. Moreover， after TGF-

induction， the expression of autophagy-related proteins Beclin 1 and LC3Ⅱ/Ⅰ in renal tubular epithelial cells were up-regulated， while PNS inhibited their expression（

0.05，

0.01）.

Conclusion

PNS had a protective effect on TGF-

-induced renal tubular epithelial cells， and the mechanism might be that it reduced inflammation and apoptosis by inhibiting autophagy， thus alleviating TGF-

-induced injury.

关键词

Keywords

references

PROVENZANO M ， COPPOLINO G ， DE NICOLA L ， et al . Unraveling cardiovascular risk in renal patients： A new take on old tale ［J］. Front Cell Dev Biol ， 2019 ， 7 ： 314 .

MIHAI S ， CODRICI E ， POPESCU I D ， et al . Inflammation-related mechanisms in chronic kidney disease prediction， progression， and outcome ［J］. J Immunol Res ， 2018 ， 2018 ： 2180373 .

HIGGINS S P ， TANG Y ， HIGGINS C E ， et al . TGF- β 1 /p53 signaling in renal fibrogenesis ［J］. Cell Signal ， 2018 ， 43 ： 1 - 10 .

PANIZO S ， MARTÍNEZ-ARIAS L ， ALONSO-MONTES C ， et al . Fibrosis in chronic kidney disease： Pathogenesis and consequences ［J］. Int J Mol Sci ， 2021 ， doi： 10.3390/ijms22010408 http://dx.doi.org/10.3390/ijms22010408 .

ISAKA Y . Targeting TGF- β signaling in kidney fibrosis ［J］. Int J Mol Sci ， 2018 ， doi： 10.3390/ijms19092532 http://dx.doi.org/10.3390/ijms19092532 .

GU Y Y ， LIU X S ， HUANG X R ， et al . Diverse role of TGF- β in kidney disease ［J］. Front Cell Dev Biol ， 2020 ， 8 ： 123 .

ZHANG Y ， ALEXANDER P B ， WANG X F . TGF- β family signaling in the control of cell proliferation and survival ［J］. Cold Spring Harb Perspect Biol ， 2017 ， 9 （ 4 ）： a022145 .

TANG C ， LIVINGSTON M J ， LIU Z ， et al . Autophagy in kidney homeostasis and disease ［J］. Nat Rev Nephrol ， 2020 ， 16 （ 9 ）： 489 - 508 .

HE C ， KLIONSKY D J . Regulation mechanisms and signaling pathways of autophagy ［J］. Annu Rev Genet ， 2009 ， 43 ： 67 - 93 .

PERIYASAMY-THANDAVAN S ， JIANG M ， SCHOENLEIN P ， et al . Autophagy： Molecular machinery， regulation， and implications for renal pathophysiology ［J］. Am J Physiol Renal Physiol ， 2009 ， 297 （ 2 ）： F244 - F256 .

DU Y G ， WANG L P ， QIAN J W ， et al . Panax notoginseng saponins protect kidney from diabetes by up-regulating silent information regulator 1 and activating antioxidant proteins in rats ［J］. Chin J Integr Med ， 2016 ， 22 （ 12 ）： 910 - 917 .

潘晶，章科娜，柴可夫，等 . 基于SIRT1/TGF- β 1 /Smad通路研究三七皂苷对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞EMT的影响［J］. 浙江中医药大学学报， 2018 ， 42 （ 4 ）： 259 - 265，282 .

LIANG X ， YANG Y ， HUANG Z ， et al . Panax notoginseng saponins mitigate cisplatin induced nephrotoxicity by inducing mitophagy via HIF-1 α ［J］. Oncotarget ， 2017 ， 8 （ 61 ）： 102989 - 103003 .

LIU Y . Cellular and molecular mechanisms of renal fibrosis ［J］. Nat Rev Nephrol ， 2011 ， 7 （ 12 ）： 684 - 696 .

ZHANG Y ， DAI Y ， RAMAN A ， et al . Overexpression of TGF- β 1 induces renal fibrosis and accelerates the decline in kidney function in polycystic kidney disease ［J］. Am J Physiol Renal Physiol ， 2020 ， 319 （ 6 ）： F1135 - F1148 .

WANG Y ， CHEN L ， WANG K ， et al . Suppression of TRPM2 reduces renal fibrosis and inflammation through blocking TGF- β 1 -regulated JNK activation ［J］. Biomed Pharmacother ， 2019 ， 120 ： 109556 .

SCHIFFER M ， BITZER M ， ROBERTS I S ， et al . Apoptosis in podocytes induced by TGF-beta and Smad7 ［J］. J Clin Invest ， 2001 ， 108 （ 6 ）： 807 - 816 .

WANG D T ， HUANG R H ， CHENG X ， et al . Tanshinone Ⅱ A attenuates renal fibrosis and inflammation via altering expression of TGF- β /Smad and NF- κ B signaling pathway in 5/6 nephrectomized rats ［J］. Int Immunopharmacol ， 2015 ， 26 （ 1 ）： 4 - 12 .

SCHUSTER N ， KRIEGLSTEIN K . Mechanisms of TGF-beta-mediated apoptosis ［J］. Cell Tissue Res ， 2002 ， 307 （ 1 ）： 1 - 14 .

MIYAJIMA A ， CHEN J ， LAWRENCE C ， et al . Antibody to transforming growth factor-beta ameliorates tubular apoptosis in unilateral ureteral obstruction ［J］. Kidney Int ， 2000 ， 58 （ 6 ）： 2301 - 2313 .

李娜，王风云，高小玲，等 . 中药三七防治肾纤维化的研究进展［J］. 中成药， 2020 ， 42 （ 11 ）： 2974 - 2978 .

龚铭炯，白俊其，徐文，等 . 基于网络药理学及分子对接研究三七总皂苷治疗肾纤维化的作用机制［J/OL］. 世界中医药： 1 - 11 ［ 2022-08-18 ］. http：//kns.cnki.net/kcms/detail/11.5529.R.20211229. 2045.008.html http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.5529.R.20211229.2045.008.html .

LIU X ， HUANG Z ， ZOU X ， et al . Panax notoginseng saponins attenuates cisplatin-induced nephrotoxicity via inhibiting the mitochondrial pathway of apoptosis ［J］. Int J Clin Exp Pathol ， 2014 ， 7 （ 12 ）： 8391 - 8400 .

KIM K H ， LEE M S . Autophagy-a key player in cellular and body metabolism ［J］. Nat Rev Endocrinol ， 2014 ， 10 （ 6 ）： 322 - 337 .

DING Y ， CHOI M E . Regulation of autophagy by TGF- β ： Emerging role in kidney fibrosis ［J］. Semin Nephrol ， 2014 ， 34 （ 1 ）： 62 - 71 .

刘兴梅，张莹莹，王圆圆，等 . 糖尿病小鼠肾组织中Notch1通过Akt/mTOR通路抑制自噬促进肾小管间质纤维化［J］. 中国病理生理杂志， 2019 ， 35 （ 12 ）： 2169 - 2174 .

KOESTERS R ， KAISSLING B ， LEHIR M ， et al . Tubular overexpression of transforming growth factor-beta1 induces autophagy and fibrosis but not mesenchymal transition of renal epithelial cells ［J］. Am J Pathol ， 2010 ， 177 （ 2 ）： 632 - 643 .

LIVINGSTON M J ， DING H F ， HUANG S ， et al . Persistent activation of autophagy in kidney tubular cells promotes renal interstitial fibrosis during unilateral ureteral obstruction ［J］. Autophagy ， 2016 ， 12 （ 6 ）： 976 - 998 .

KIM S I ， NA H J ， DING Y ， et al . Autophagy promotes intracellular degradation of type Ⅰ collagen induced by transforming growth factor （TGF）- β 1 ［J］. J Biol Chem ， 2012 ， 287 （ 15 ）： 11677 - 11688 .

ROSENFELDT M T ， NIXON C ， LIU E ， et al . Analysis of macroautophagy by immunohistochemistry ［J］. Autophagy ， 2012 ， 8 （ 6 ）： 963 - 969 .

LI L ， WANG Z V ， HILL J A ， et al . New autophagy reporter mice reveal dynamics of proximal tubular autophagy ［J］. J Am Soc Nephrol ， 2014 ， 25 （ 2 ）： 305 - 315 .

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DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221304

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Panax notoginseng Saponins Alleviate TGF-β₁-induced Renal Tubular Epithelial Cell Injury by Inhibiting Autophagy