滋肾活血方对2-VO模型大鼠海马CA1区线粒体自噬的调节及神经元再生的影响

赵梓婷; 伍大华; 张秀丽; 谢乐; 刘桐赫; 曾珊珊; 施佳仪; 姚婷; 谢瑶; 李映辰

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221504

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滋肾活血方对2-VO模型大鼠海马CA1区线粒体自噬的调节及神经元再生的影响

药理 | 更新时间：2022-11-17

- 滋肾活血方对2-VO模型大鼠海马CA1区线粒体自噬的调节及神经元再生的影响
- Effect of Zishen Huoxue Prescription on Regulation of Mitophagy and Neurogenesis in Hippocampal CA1 Region of Vascular Dementia Rats
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第20期页码：45-52
- 作者机构：
  
  1.湖南中医药大学，长沙 410208
  2.湖南省中医药研究院附属医院，长沙 410006
  3.湖南中医药大学科技创新中心，长沙 410208
- 作者简介：
  
  赵梓婷，在读硕士，从事中医药防治脑病研究，E-mail：1447671882@qq.com
  伍大华，主任医师，博士生导师，从事中医药防治脑病研究，E-mail：893049352@qq.com； *
  张秀丽，副研究员，硕士生导师，从事脑病发病机制及中医药防治研究，E-mail：103022926@qq.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金面上项目(81874462);湖南省重点研发计划项目(2020SK2123);湖南省教育厅优秀青年基金项目(19B426)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221504
  中图分类号： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- 收稿日期：2022-04-21，
  
  网络出版日期：2022-07-20，
  
  纸质出版日期：2022-10-20
- 稿件说明：
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赵梓婷,伍大华,张秀丽等.滋肾活血方对2-VO模型大鼠海马CA1区线粒体自噬的调节及神经元再生的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(20):45-52.

ZHAO Ziting,WU Dahua,ZHANG Xiuli,et al.Effect of Zishen Huoxue Prescription on Regulation of Mitophagy and Neurogenesis in Hippocampal CA1 Region of Vascular Dementia Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(20):45-52.
赵梓婷,伍大华,张秀丽等.滋肾活血方对2-VO模型大鼠海马CA1区线粒体自噬的调节及神经元再生的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(20):45-52. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221504.

ZHAO Ziting,WU Dahua,ZHANG Xiuli,et al.Effect of Zishen Huoxue Prescription on Regulation of Mitophagy and Neurogenesis in Hippocampal CA1 Region of Vascular Dementia Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(20):45-52. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221504.

摘要

目的

探讨滋肾活血方通过调节线粒体自噬促进双侧颈总动脉永久性结扎（2-VO）模型大鼠海马CA1区神经元新生的作用机制。

方法

2-VO法建立血管性痴呆大鼠模型，随机将60只SD大鼠分为假手术组、2-VO模型组、盐酸多奈哌齐组、滋肾活血方低、中、高剂量组（8.9、17.8、35.6 g·kg

-1

）。Morris水迷宫实验检测各组逃避潜伏期、跨越平台次数；透射电镜观察海马CA1区线粒体自噬情况；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测海马CA1区PTEN诱导激酶1（Pink1）、帕金蛋白（Parkin） mRNA的表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马CA1区线粒体自噬信号通路相关蛋白Parkin、抗增殖蛋白2（PHB2）、线粒体融合蛋白2（Mfn2）、动力学相关蛋白1（Drp1）蛋白的表达；Brdu法检测CA1区神经元再生情况。

结果

与假手术组比较，2-VO模型组大鼠学习、空间记忆能力明显下降（

0.05），海马CA1区见线粒体结构受损，自噬溶酶体形成，Parkin、Pink1 mRNA及Parkin、PHB2、Drp1蛋白明显上调（

0.05），Mfn2蛋白表达量明显降低（

0.05），海马CA1区神经元新生明显减少（

0.05）。与模型组比较，滋肾活血方干预后可明显提高2-VO模型大鼠的学习、空间记忆能力（

0.05），增加海马CA1区自噬小体数量并改善线粒体结构，进一步上调海马CA1区Parkin、Pink1 mRNA及Parkin、PHB2、Drp1蛋白表达（

0.05，

0.01），下调Mfn2蛋白表达（

0.05，

0.01），增加海马CA1区神经元新生数量（

0.05，

0.01）。

结论

滋肾活血方对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元新生的促进作用与Pink1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬有关。

Abstract

Objective

To investigate the effect of Zishen Huoxue prescription on promoting neurogenesis in hippocampal CA1 region of vascular dementia （VD） rats by regulating mitophagy.

Method

The 2-VO method was used to establish the VD rat model and 60 SD rats were randomly divided into sham operation group， model group， donepezil hydrochloride group， and Zishen Huoxue prescription low-dose（8.9 g·kg

-1

）， medium-dose（17.8 g·kg

-1

） and high-dose（35.6 g·kg

-1

） groups. Morris water maze test was performed to detect the escape latency and the number of crossing platform in each group. The expression of phosphatase and tensin homology-induced kinase 1 （PINK1） and Parkinson protein （Parkin） mRNA in hippocampal CA1 region was detected by Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction（Real-time PCR）. Western blot was used to determine the expression of mitochondrial autophagy signaling pathway-related proteins Parkin， prohibitin 2 （PHB2）， mitofusin 2 （Mfn2） and dynamin-related protein 1 （Drp1） in hippocampal CA1 region. The neurogenesis in hippocampal CA1 region was tested by Brdu method.

Result

Compared with the conditions in the sham operation group， the learning and spatial memory abilities of the model group were decreased （

0.05）， with damaged mitochondrial structure and autolysosome formation in the hippocampal CA1 region. The expressions of Parkin， Pink1 mRNA and Parkin， PHB2， and Drp1 proteins were up-regulated （

0.05）， while the expression of Mfn2 protein and the neuronal regeneration in hippocampal CA1 region were reduced （

0.05，

0.05）. Compared with the conditions in the model group， Zishen Huoxue prescription enhanced the learning and spatial memory abilities of VD rats （

0.05）， increased the number of autophagosomes in hippocampal CA1 region and improved the mitochondrial structure. The expression of Parkin， Pink1 mRNA and Parkin， PHB2， and Drp1 proteins in hippocampal CA1 region was up-regulated （

0.05，

0.01）while the expression of Mfn2 protein was down-regulated（

0.05，

0.01）. The number of new neurons in hippocampal CA1 region was also increased（

0.05，

0.01）.

Conclusion

The promoting effect of Zishen Huoxue prescription on the neurogenesis in hippocampal CA1 region of VD rats was related to the mitophagy mediated by Pink1/Parkin signaling pathway.

关键词

Keywords

references

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