二十五味鬼臼丸通过Wnt/<italic style="font-style: italic">β</italic>-catenin信号通路改善去卵巢大鼠骨质疏松症

李沁园; 代冬芳; 吴佩锋; 申继强; 段方林; 余瑶; 李玉琴; 李长兴

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221606

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

二十五味鬼臼丸通过Wnt/β-catenin信号通路改善去卵巢大鼠骨质疏松症

经典名方 | 更新时间：2022-12-21

- 二十五味鬼臼丸通过Wnt/β-catenin信号通路改善去卵巢大鼠骨质疏松症
- Tibetan Medicine Ershiwuwei Guijiuwan Alleviates Osteoporosis in Ovariectomized Rats Through Wnt/β-catenin Signaling Pathway
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第2期页码：59-65
- 作者机构：
  
  1.青海大学医学部，西宁 810000
  2.青海省人民医院，西宁 810000
- 作者简介：
  
  李沁园，硕士，从事中藏药防治围绝经期综合症药理机制研究，E-mail：964711508@qq.com
  李长兴，博士，副教授，从事中藏药植物雌激素样作用机制研究，E-mail：lcx1535@163.com
- 基金信息：
  
  青海省科技厅项目(2018-ZJ-730);青海大学医学院中青年科研项目(2020-kyy-8);青海省卫生计划系统指导性计划课题(2020-wjzdx-08)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221606
  中图分类号： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- 收稿日期：2022-05-19，
  
  网络出版日期：2022-08-17，
  
  纸质出版日期：2023-01-20
- 稿件说明：
移动端阅览
李沁园,代冬芳,吴佩锋等.二十五味鬼臼丸通过Wnt/β-catenin信号通路改善去卵巢大鼠骨质疏松症[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(02):59-65.

LI Qinyuan,DAI Dongfang,WU Peifeng,et al.Tibetan Medicine Ershiwuwei Guijiuwan Alleviates Osteoporosis in Ovariectomized Rats Through Wnt/β-catenin Signaling Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(02):59-65.
李沁园,代冬芳,吴佩锋等.二十五味鬼臼丸通过Wnt/β-catenin信号通路改善去卵巢大鼠骨质疏松症[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(02):59-65. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221606.

LI Qinyuan,DAI Dongfang,WU Peifeng,et al.Tibetan Medicine Ershiwuwei Guijiuwan Alleviates Osteoporosis in Ovariectomized Rats Through Wnt/β-catenin Signaling Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(02):59-65. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221606.

摘要

目的

探讨藏族药二十五味鬼臼丸通过经典Wnt/

-连环蛋白（

-catenin）信号通路改善去卵巢大鼠的骨质疏松症的机制。

方法

将48只3月龄SD雌性大鼠随机分为模型组（OVX）、假手术组（Sham）、雌二醇组（E

）、二十五味鬼臼丸高、中、低剂量组，除假手术组大鼠摘取卵巢附近部分脂肪组织外，其余各组大鼠均摘取卵巢构建去卵巢骨质疏松大鼠模型。术后2周开始给药处理，雌二醇组给予戊酸雌二醇0.1 mg·kg

-1

，二十五味鬼臼丸组给予二十五味鬼臼丸高剂量800 mg·kg

-1

，中剂量400 mg·kg

-1

，低剂量200 mg·kg

-1

，模型组及假手术组给予同体积的生理盐水，连续灌胃12周，每日1次。取材后，苏木素-伊红（HE）染色法观察大鼠右侧股骨及腰椎的骨形态变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRAP5b）、Ⅰ型胶原C端肽（CTX-Ⅰ）、骨特异性碱性磷酸酶（BALP）、Ⅰ型前胶原氨基端原肽（PINP）、骨钙素（BGP）的水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测股骨中

-catenin、矮小相关转录因子2（Runx2） mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测

-catenin、Runx2和低密度脂蛋白受体相关蛋白-5（Lrp‐5）蛋白表达。

结果

与假手术组比较，模型组大鼠骨小梁紊乱且稀疏，骨小梁间连接较少，血清BALP、BGP、PINP水平显著下降（

0.01），CTX-Ⅰ、TRAP5b水平显著升高（

0.01）；股骨组织中

-catenin、Runx2 mRNA的表达水平下降（

0.01）；Lrp‐5、

‐catenin和Runx2的蛋白表达显著下降（

0.01）。与模型组比较，二十五味鬼臼丸高、中、低剂量组大鼠上述指标的异常改变得到不同程度的恢复（

0.05，

0.01）。

结论

藏族药二十五味鬼臼丸对于治疗去卵巢大鼠骨质疏松症具有较好的效果，其机制可能与Wnt/

-catenin信号通路有关，通过上调信号通路中成骨相关基因的表达影响骨代谢。

Abstract

Objective

To explore the mechanism of Tibetan medicine Ershiwuwei Guijiuwan against osteoporosis in ovariectomized rats through the classical Wnt/

-catenin signaling pathway.

Method

Forty-eight 3-month-old SD female rats were randomized into model group （equivalent volume of normal saline）， sham operation group （equivalent volume of normal saline）， estradiol group （0.1 mg·kg

-1

estradiol valerate）， and high-， medium-， low-dose Ershiwuwei Guijiuwan groups （800， 400， 200 mg·kg

-1

， respectively）. For the modeling， some adipose tissue near the ovaries was removed in the sham operation group， and ovaries were excised in other groups. Administration （

， once a day） started two weeks after the operation and lasted 12 weeks. After sampling， based on hematoxylin and eosin （HE） staining， the morphological changes of the right femur and lumbar spine of the rats were observed. The enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was performed to detect the serum levels of rat tartrate-resistant acid phosphatase 5b （TRAP5b）， collagen type Ⅰ C-terminal peptide （CTX-Ⅰ）， bone alkaline phosphatase （BALP）， amino-terminal propeptide of type Ⅰ procollagen （PINP）， and bone Gla-protein （BGP）. Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR） was performed to examine the mRNA expression of

-catenin and Runt-related transcription factor 2 （Runx2） in femur， and Western blot to detect the protein expression of

-catenin， Runx2， and low-density lipoprotein receptor-related protein-5 （Lrp-5）.

Result

Compared with the sham operation group， the model group showed disordered and sparse bone trabecula with fewer connections， decrease in serum levels of BALP， BGP， and PINP （

0.01）， increase in levels of CTX-Ⅰ and TRAP5b （

0.01）， reduction in mRNA expression of

-catenin and Runx2 in femoral tissue （

0.01） and protein expression of Lrp-5，

-catenin， and Runx2 （

0.01）. Compared with the model group， estradiol and each dose of Ershiwuwei Guijiuwan increased the volume of bone trabecula， made thebone trabecula closely arranged， reduced the loss of the trabecular meshwork， raised the serum levels of BALP and BGP （

0.01）， and lowered TRAP5b level （

0.01）. PINP level was significantly increased in the high-dose Ershiwuwei Guijiuwan group and estradiol group （

0.01） and CTX-Ⅰ level was significantly decreased in the high-dose Erwenwuwei Guijiuwan group and the estradiol group （

0.01） compared with those in the model group. The mRNA expression of

-catenin in femoral tissue and protein expression of Lrp-5 and

-catenin in estradiol group and three Ershiwuwei Guijiuwan groups were significantly increased （

0.05，

0.01）， and the levels of Runx2 mRNA and protein were significantly increased in the high-dose Ershiwuwei Guijiuwan group and the estradiol group （

0.01） compared with those in the model group.

Conclusion

Tibetan medicine Ershiwuwei Guijiuwan is effective for the osteoporosis in ovariectomized rats， which may be related to the classic Wnt/

-catenin signaling pathway. It affects bone metabolism by up-regulating the expression of osteogenesis-related genes in the signaling pathway.

关键词

Keywords

references

QASEEM A ， FORCIEA M A ， MCLEAN R M ， et al . Treatment of low bone density or osteoporosis to prevent fractures in men and women： A clinical practice guideline update from the american college of physicians ［J］. Ann Intern Med ， 2017 ， 166 （ 11 ）： 818 - 839 .

BARRIONUEVO P ， KAPOOR E ， ASI N ， et al . Efficacy of pharmacological therapies for the prevention of fractures in postmenopausal women： A network Meta-analysis ［J］. J Clin Endocrinol Metab ， 2019 ， 104 （ 5 ）： 1623 - 1630 .

ZHU S Y ， DENG Y ， WANG Y F ， et al . Bone protection for early menopausal women in China： Standard or half-dose estrogen with progestin？ A one-year prospective randomized trail ［J］. Gynecol Endocrinol ， 2019 ， 35 （ 2 ）： 165 - 169 .

BOWRING C E ， FRANCIS R M . National osteoporosis society's position statement on hormone replacement therapy in the prevention and treatment of osteoporosis ［J］. Menopause Int ， 2011 ， 17 （ 2 ）： 63 - 65 .

LACROIX A Z ， POWLES T ， OSBORNE C K ， et al . Breast cancer incidence in the randomized PEARL trial of lasofoxifene in postmenopausal osteoporotic women ［J］. J Natl Cancer Inst ， 2010 ， 102 （ 22 ）： 1706 - 1715 .

MOSCA L ， GRADY D ， BARRETT-CONNOR E ， et al . Effect of raloxifene on stroke and venous thromboembolism according to subgroups in postmenopausal women at increased risk of coronary heart disease ［J］. Stroke ， 2009 ， 40 （ 1 ）： 147 - 155 .

ABDI F ， ALIMORADI Z ， HAQI P ， et al . Effects of phytoestrogens on bone mineral density during the menopause transition： A systematic review of randomized， controlled trials ［J］. Climacteric ， 2016 ， 19 （ 6 ）： 535 - 545 .

达娃卓玛，尼玛潘多，次旦多吉 . HPLC法测定藏药二十五味鬼臼丸中鬼臼毒素的含量［J］. 药物分析杂志， 2016 ， 36 （ 8 ）： 1482 - 1486 .

李亚芳 . 藏药二十五味鬼臼丸治疗慢性盆腔炎的临床观察［J］. 中国民族医药杂志， 2020 ， 26 （ 6 ）： 19 - 21 .

吉毛才让 . 藏药二十五味鬼臼丸治疗盆腔静脉瘀血症的临床疗效观察［J］. 中国民族医药杂志， 2019 ， 25 （ 5 ）： 14 - 15 .

李淑桢，王琦，李沁园，等 . 基于下丘脑-垂体-卵巢轴探讨藏药二十五味鬼臼丸对绝经后骨质疏松症大鼠的干预作用［J］. 中草药， 2021 ， 52 （ 20 ）： 6282 - 6290 .

施新猷 . 现代医学实验动物学［M］. 北京：人民军医出版社， 2000 ： 333 - 335 .

MONTALVANY-ANTONUCCI C C ， ZICKER M C ， MACARI S ， et al . High-refined carbohydrate diet promotes detrimental effects on alveolar bone and femur microarchitecture ［J］. Arch Oral Biol ， 2018 ， 86 ： 101 - 107 .

DONG C ， FANG Y ， SHI J ， et al . Experimental study on prevention and treatment of postmenopausal osteoporosis by antioxidant stress of mongolian medicine blue thorn regulating foxo/wnt/ β -catenin pathway ［J］. Panminerva Med ， 2021 ， doi： 10.23736/S0031-0808.21.04476-1 http://dx.doi.org/10.23736/S0031-0808.21.04476-1 .

肖菲，高毅，师伟，等 . 绝经后骨质疏松症中医证型与握力的研究［J］. 中国骨质疏松杂志， 2021 ， 27 （ 2 ）： 167 - 171 .

石敏，赵继荣，薛旭，等 . 基于“脾主肉、肾主骨”理论探讨绝经后骨质疏松症的OPG/RANK/RANKL信号调控机制［J］. 中国骨质疏松杂志， 2019 ， 25 （ 9 ）： 1336 - 1339，1356 .

郭登海，才让措 . 藏药“二十五味鬼臼丸”方解浅述［J］. 中医杂志， 2010 ， 51 （ S2 ）： 145 - 146 .

马凤林，赵金凤，陈辅英，等 . 藏药二十五味鬼臼丸临床疗效观察［J］. 中国民族医药杂志， 2008 ， 14 （ 6 ）： 22 - 23 .

SłUPSKI W ， JAWIEŃ P ， NOWAK B . Botanicals in postmenopausal osteoporosis ［J］. Nutrients ， 2021 ， 13 （ 5 ）： 1609 .

NAKAMURA T ， SUMI K ， TSUJI E ， et al . Novel polychrome staining distinguishing osteochondral tissue and bone cells in decalcified paraffin sections ［J］. Cell Tissue Res ， 2021 ， 385 （ 3 ）： 727 - 737 .

ZHAO Y ， XU Y ， ZHENG H ， et al . QingYan formula extracts protect against postmenopausal osteoporosis in ovariectomized rat model via active ER-dependent MEK/ERK and PI3K/Akt signal pathways ［J］. J Ethnopharmacol ， 2021 ， 268 ： 113644 .

KOOK S H ， HEO J S ， LEE J C . Crucial roles of canonical Runx2-dependent pathway on Wnt1-induced osteoblastic differentiation of human periodontal ligament fibroblasts ［J］. Mol Cell Biochem ， 2015 ， 402 （ 1/2 ）： 213 - 223 .

ZHOU X ， ZHANG Z ， FENG J Q ， et al . Multiple functions of Osterix are required for bone growth and homeostasis in postnatal mice ［J］. Proc Natl Acad Sci USA ， 2010 ， 107 （ 29 ）： 12919 - 12924 .

MATTIA L ， DAVIS S ， MARK-WAGSTAFF C ， et al . Utility of PINP to monitor osteoporosis treatment in primary care， the POSE study （PINP and Osteoporosis in Sheffield Evaluation）［J］. Bone ， 2022 ， 158 ： 116347 .

YANG L ， YANG J ， PAN T ， et al . Liraglutide increases bone formation and inhibits bone resorption in rats with glucocorticoid-induced osteoporosis ［J］. J Endocrinol Invest ， 2019 ， 42 （ 9 ）： 1125 - 1131 .

XIA H ， LIU J ， YANG W ， et al . Integrated strategy of network pharmacological prediction and experimental validation elucidate possible mechanism of Bu-Yang herbs in treating postmenopausal osteoporosis via ESR1 ［J］. Front Pharmacol ， 2021 ， 12 ： 654714 .

ZHENG H L ， XU W N ， ZHOU W S ， et al . Beraprost ameliorates postmenopausal osteoporosis by regulating Nedd4-induced Runx2 ubiquitination ［J］. Cell Death Dis ， 2021 ， 12 （ 5 ）： 497 .

TAKEBE H ， SHALEHIN N ， HOSOYA A ， et al . Sonic hedgehog regulates bone fracture healing ［J］. Int J Mol Sci ， 2020 ， 21 （ 2 ）： 677 .

LAUTERLEIN J L ， GOSSIEL F ， WEIGL M ， et al . Development of the bone phenotype and microRNA profile in adults with low-density lipoprotein receptor-related protein 5-high bone mass （LRP5-HBM） disease ［J］. JBMR Plus ， 2021 ， 5 （ 9 ）： e10534 .

LIU J ， DENG X ， LIANG X ， et al . The phytoestrogen glabrene prevents osteoporosis in ovariectomized rats through upregulation of the canonical Wnt/ β -catenin signaling pathway ［J］. J Biochem Mol Toxicol ， 2021 ， 35 （ 2 ）： e22653 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

中药靶向Wnt信号通路防治结直肠癌研究进展

中药调控Wnt/β-catenin信号通路干预前列腺癌的研究进展

中药调控Wnt/β-catenin信号通路干预乳腺癌的研究进展

基于Wnt/β-catenin信号通路靶向的中药有效成分及中药复方防治乳腺癌特点分析

异鼠李素抗骨质疏松作用的研究进展

二十五味鬼臼丸通过Wnt/β-catenin信号通路改善去卵巢大鼠骨质疏松症

Tibetan Medicine Ershiwuwei Guijiuwan Alleviates Osteoporosis in Ovariectomized Rats Through Wnt/β-catenin Signaling Pathway

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221606

摘要

Abstract

关键词

Keywords

references