基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对<sup>60</sup>Co-<italic style="font-style: italic">γ</italic>射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用

赵粉琴; 安明霞; 丁晓南; 刘洁颖; 赵艳; 谢知慧; 李淑萍

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221894

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对⁶⁰Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用

经典名方 | 更新时间：2022-08-11

- 基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对⁶⁰Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用
- Protection of Zuoguiwan Against Apoptosis of Follicles in Rats Injured by ⁶⁰Co-γ Rays： Based on PI3K/Akt/mTOR Signaling Pathway
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第18期页码：12-19
- 作者机构：
  
  1.甘肃中医药大学，兰州 730000
  2.甘肃省人民医院，兰州 730000
- 作者简介：
  
  赵粉琴，硕士，副教授，从事中西医防治妇科内分泌疾病研究，E-mail：zfqlzh@163.com
  李淑萍，博士，主任医师，从事肿瘤放射治疗学研究，E-mail：13321203330@189.cn
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(81760806);2019年甘肃省中医药管理局项目(GZK-2019-28);甘肃省教育厅甘肃省高等学校创新能力提升项目(2019B-103)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221894
  中图分类号： R285.5;R966;R711.5
- 收稿日期：2021-09-18，
  
  网络出版日期：2022-03-22，
  
  纸质出版日期：2022-09-20
- 稿件说明：
移动端阅览
赵粉琴,安明霞,丁晓南等.基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对⁶⁰Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(18):12-19.

ZHAO Fenqin,AN Mingxia,DING Xiaonan,et al.Protection of Zuoguiwan Against Apoptosis of Follicles in Rats Injured by ⁶⁰Co-γ Rays： Based on PI3K/Akt/mTOR Signaling Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(18):12-19.
赵粉琴,安明霞,丁晓南等.基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对⁶⁰Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(18):12-19. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221894.

ZHAO Fenqin,AN Mingxia,DING Xiaonan,et al.Protection of Zuoguiwan Against Apoptosis of Follicles in Rats Injured by ⁶⁰Co-γ Rays： Based on PI3K/Akt/mTOR Signaling Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(18):12-19. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221894.

摘要

目的

以磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路为靶点，探讨左归丸对

Co-

射线早衰大鼠的保护作用。

方法

采用

Co-

射线一次性照射（6.0 Gy，LD

）性成熟雌性SD大鼠60只，随机分成模型组、补佳乐组（0.18 g·kg

-1

·d

-1

）、补佳乐（0.09 g·kg

-1

·d

-1

）+左归丸高剂量（23.625 g·kg

-1

·d

-1

）组、左归丸高剂量（23.625 g·kg

-1

·d

-1

）组、左归丸中剂量（9.45 g·kg

-1

·d

-1

）组和左归丸低剂量（4.725 g·kg

-1

·d

-1

）组，每日1次，治疗21 d，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清［卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）和雌二醇（E

）］，苏木素-伊红（HE）染色观察卵巢的组织形态变化，原位末端标记法（TUNEL）检测颗粒细胞凋亡率，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢组织磷酸化（p）-PI3K、p-Akt、p

mTOR和B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白表达结果。

结果

与正常组比较，模型组大鼠血清FSH显著上升（

0.01），E

明显下降（

0.05），卵巢早期卵泡和黄体数量减少（

0.01）；颗粒细胞凋亡率显著增加（

0.01）；卵巢组织p-PI3K、p-Akt、p

mTOR和Bcl-2蛋白表达明显下降，Bax蛋白表达显著增加（

0.01）；与模型组比较，各给药组干预后卵巢内早期卵泡数量增加，颗粒细胞凋亡率降低，p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达有增加趋势，Bax蛋白表达有下降趋势，尤以补佳乐+左归丸高剂量组差异均具有统计学意义（

0.05，

0.01）。

结论

左归丸对辐射损伤卵巢的保护作用机制可能是通过活化卵巢组织PI3K/Akt/mTOR蛋白表达，增加Bcl-2蛋白量和抑制Bax蛋白表达。

Abstract

Objective

To investigate the protective effect of Zuoguiwan against

Co-

ray-induced premature aging of rats based on the phosphatidylinositol-3-kinases/protein kinase B/mammalian target of rapamycin （PI3K/Akt/mTOR） signaling pathway.

Method

Sixty sexually mature female SD rats were irradiated with

Co-

rays （6.0 Gy， LD

） for 24 h at one time. Then they were randomized into model group， Bujiale group （0.18 g·kg

-1

·d

-1

）， Bujiale （0.09 g·kg

-1

·d

-1

） + high-dose Zuoguiwan group （23.625 g·kg

-1

·d

-1

）， high-dose Zuoguiwan group （23.625 g·kg

-1

·d

-1

）， medium-dose Zuoguiwan group （9.45 g·kg

-1

·d

-1

）， and low-dose Zuoguiwan group （4.725 g·kg

-1

·d

-1

）. The administration （once a day） lasted 21 days. Serum indexes ［follicle-stimulating hormone （FSH）， luteinizing hormone （LH）， and estradiol （E

）］ of rats were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and morphological changes of ovarian tissues were observed based on hematoxylin and eosin （HE） staining. The apoptosis rate of granulosa cells was detected by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling （TUNEL） and the protein expression of phosphorylated （p）-PI3K， p-Akt， p-mTOR， B-cell lymphoma-2 （Bcl-2）， and Bcl-2-associated X protein （Bax） in ovarian tissues by Western blot.

Result

Compared with normal group， model group demonstrated increase in serum FSH （

0.01）， decrease in E

（

0.05）， and reduction of follicles and luteum in early ovary （

0.01）. Moreover， the elevation of apoptosis rate of granulosa cells （

0.01）， down-regulation of p-PI3K， p-Akt， p-mTOR， and Bcl-2 in ovarian tissue， and increase in expression of Bax were also observed in the model group as compared with the normal group （

0.01）. In comparison with the model group， the administration groups showed rise of the number of early ovarian follicles， decrease in the apoptosis rate of granulosa cells， increase in the expression of p

PI3K， p

Akt， p

mTOR， and Bcl-2， and down-regulation of Bax， particularly the Bujiale + high-dose Zuoguiwan group（

0.05，

0.01）.

Conclusion

Zuoguiwan protects radiation-damaged ovary by activating the expression of PI3K/Akt/mTOR protein in ovarian tissue， increasing Bcl-2， and inhibiting the expression of Bax.

关键词

Keywords

references

QUAN N ， HARRIS L R ， HALDER R ， et al . Differential sensitivity of inbred mouse strains to ovarian damage in response to low-dose total body irradiation ［J］. Biol Reprod ， 2020 ， 102 （ 1 ）： 133 - 144 .

于海月，葛常辉，冯宝民 . miRNA调控辐射损伤相关信号通路研究［J］. 中国生物化学与分子生物学报， 2020 ， 36 （ 6 ）： 634 - 639 .

HAN S S ， KIM Y H ， LEE S H ， et al . Underuse of ovarian transposition in reproductive-aged cancer patients treated by primary or adjuvant pelvic irradiation ［J］. J Obstet Gynaecol Res ， 2011 ， 37 （ 7 ）： 825 - 829 .

HADDAD Y H ， SAID R S ， KAMEL R ， et al . Phytoestrogen genistein hinders ovarian oxidative damage and apoptotic cell death-induced by ionizing radiation： co-operative role of ER- β ， TGF- β ， and FOXL-2 ［J］. Sci Rep ， 2020 ， 10 （ 1 ）： 13551 .

WAYNE C M ， FAN H Y ， CHENG X ， et al . Follicle-stimulating hormone induces multiple signaling cascades： evidence that activation of Rous sarcoma oncogene， RAS， and the epidermal growth factor receptor are critical for granulosa cell differentiation ［J］. Mol Endocrinol ， 2007 ， 21 （ 8 ）： 1940 - 1957 .

曹婉宁，董晓英 . mTOR通路参与卵泡生长发育相关机制的研究进展［J］. 生殖医学杂志， 2016 ， 25 （ 5 ）： 469 - 472 .

董晓英，冯逊逊，郑秀蕊，等 . 毓麟珠对早发性卵巢功能不全模型小鼠卵巢形态、卵泡发育及mTOR信号通路的影响［J］. 中国中医药信息杂志， 2018 ， 25 （ 10 ）： 49 - 53 .

杨静，梁嘉丽 . PI3K/Akt信号通路与卵巢早衰相关性的研究进展［J］. 现代妇产科进展， 2016 ， 25 （ 2 ）： 156 - 158 .

朱小丹，董若曦，陈燕，等 . 基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨白藜芦醇改善大鼠化疗性卵巢损伤的机制［J］. 医学研究杂志， 2020 ， 49 （ 2 ）： 5，77 - 80 .

赵新永，孙岩，赵鸿森，等 . 左归丸对自然衰老小鼠卵母细胞线粒体功能的改善作用［J］. 中药新药与临床药理， 2020 ， 31 （ 8 ）： 924 - 929 .

段恒，周滢 . 左归丸对大鼠卵泡发育与卵巢血管生成的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2012 ， 18 （ 9 ）： 206 - 209 .

吴小燕，崔晓萍，范美玲，等 . 左归丸治疗卵巢早衰临床及实验研究进展［J］. 中医学报， 2020 ， 35 （ 3 ）： 568 - 572 .

阳松威，孙晓峰，贺又舜，等 . 左归丸对化疗致卵巢早衰小鼠卵巢功能的影响［J］. 中成药， 2016 ， 38 （ 4 ）： 717 - 722 .

赵粉琴，王馨怡，李娜娜，等 . 左归丸含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞Smad4及周期蛋白Cyclin A表达的影响［J］. 中国中医药科技， 2018 ， 25 （ 2 ）： 180 - 183 .

柳红芳 . 中药对放射损伤治疗作用的实验与临床研究［J］. 中华放射医学与防护杂志， 1996 （ 1 ）： 61 - 62 .

郜然然，周慧，吴也可，等 . 中医药通过mTOR途径调节细胞凋亡与自噬的研究进展［J］. 中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 （ 4 ）： 218 - 224 .

EL-HAYEK S ， YANG Q ， ABBASSI L ， et al . Mammalian oocytes locally remodel follicular architecture to provide the foundation for germline-soma communication ［J］. Curr Biol ， 2018 ， 28 （ 7 ）： 1124 - 1131 .

张馨怡，谭季春 . 多囊卵巢综合征中卵巢颗粒细胞的研究进展［J］. 中国实用妇科与产科杂志， 2019 ， 35 （ 1 ）： 134 - 136 .

LIU J ， WU D C ， QU L H ， et al . The role of mTOR in ovarian Neoplasms， polycystic ovary syndrome， and ovarian aging ［J］. Clin Anat ， 2018 ， 31 （ 6 ）： 891 - 898 .

杨晓葵，宋蕊，王树玉 . FSH和GDF-9对大鼠颗粒细胞蛋白激酶B表达的影响［J］. 中国优生与遗传杂志， 2010 ， 18 （ 3 ）： 37 - 38 .

RAN S Y ， YU Q ， CHEN Y ， et al . Prevention of postmenopausal osteoporosis in Chinese women： A 5-year， double-blind， randomized， parallel placebo-controlled study ［J］. Climacteric ， 2017 ， 20 （ 4 ）： 391 - 396 .

LIU F ， TAN F ， TONG W ， et al . Effect of Zuoguiwan on osteoporosis in ovariectomized rats through RANKL/OPG pathway mediated by β 2AR ［J］. Biomed Pharmacother ， 2018 ， 103 ： 1052 - 1060 .

李娇娇，焦亚飞，石德顺 . PI3K/Akt信号通路对卵泡发育和卵母细胞成熟作用的研究进展［J］. 中国畜牧杂志， 2021 ， 57 （ 8 ）： 33 - 37 .

零小妹，张绪慧，杨晶晶，等 . 哈蟆油通过激活PI3K/Akt/NF- κ B途径保护氧化应激损伤的大鼠卵巢颗粒细胞［J］. 天然产物研究与开发， 2017 ， 29 （ 6 ）： 941 - 946 .

吴倩，秦佳佳，杨静，等 . 左归丸联合干细胞治疗对化疗后卵巢早衰大鼠的影响［J］. 中国中西医结合杂志， 2017 ， 37 （ 11 ）： 1361 - 1366 .

李耀洋，尚立芝，孙河龙，等 . 左归丸对去势骨质疏松模型大鼠Wnt/ β -catenin信号通路的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2021 ， 27 （ 6 ）： 15 - 22 .

ZHANG F ， FENG F ， YANG P ， et al . Four-and-a-half-LIM protein 1 down-regulates estrogen receptor α activity through repression of Akt phosphorylation in human breast cancer cell ［J］. Int J Biochem Cell Biol ， 2012 ， 44 （ 2 ）： 320 - 326 .

孔文娟，苏先芝，刘一斐，等 . 加减归肾丸对卵巢储备功能减退模型小鼠卵巢组织PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响［J］. 中医杂志， 2020 ， 61 （ 12 ）： 1085 - 1089 .

姚建平，李琳，牛巧能，等 . 左归丸对自然衰老大鼠海马乙酰胆碱含量及学习记忆功能的影响［J］. 中成药， 2018 ， 40 （ 1 ）： 181 - 183 .

詹青，管强，余敏，等 . 左归丸对慢性脑缺血大鼠模型氧化应激损伤的保护作用及其机制［J］. 中华实验外科杂志， 2013 ， 30 （ 9 ）： 1856 - 1858 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

基于细胞间连接探讨左归丸对先天肾虚仔鼠皮肤屏障发育的影响

基于巨噬细胞吞噬功能探讨六味地黄丸、二至丸、左归丸预防乳腺癌发生的机制

左归丸通过调控p38 MAPK/ERK信号通路抑制乳腺癌诱导的破骨细胞活化及机制

左归丸干预子代先天精亏进展及其“补益先天”探讨

基于TLR4/NF-κB p65信号通路研究左归丸防治产前应激子代大鼠卵巢储备功能下降的分子机制

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对60Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用

Protection of Zuoguiwan Against Apoptosis of Follicles in Rats Injured by 60Co-γ Rays： Based on PI3K/Akt/mTOR Signaling Pathway

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221894

摘要

Abstract

关键词

Keywords

references

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对⁶⁰Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用

Protection of Zuoguiwan Against Apoptosis of Follicles in Rats Injured by ⁶⁰Co-γ Rays： Based on PI3K/Akt/mTOR Signaling Pathway