基于NLRP3炎症通路探讨健脾益肾化浊方对多囊卵巢综合征大鼠卵巢功能的影响

陈苗; 杜小利; 冯亚宏; 张晓静; 罗嘉琦; 王静; 南楠; 刘文钊; 邢莎莎; 田瑞莹; 杨丽; 孙苗; 何瑞; 陈冬梅; 马会明

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221942

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

基于NLRP3炎症通路探讨健脾益肾化浊方对多囊卵巢综合征大鼠卵巢功能的影响

药理 | 更新时间：2022-11-17

- 基于NLRP3炎症通路探讨健脾益肾化浊方对多囊卵巢综合征大鼠卵巢功能的影响
- Effect of Jianpi Yishen Huazhuo Prescription on Ovarian Function in Rats with Polycystic Ovary Syndrome Based on NLRP3 Inflammatory Pathway
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第20期页码：61-70
- 作者机构：
  
  1.宁夏医科大学，银川 750004
  2.宁夏医科大学宁夏区域高发病中西医结合防治研究重点实验室，生育力保持教育部重点实验室，实验动物中心，总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室，银川 750004
  3.宁夏中医医院暨中医研究院，银川 750004
- 作者简介：
  
  陈苗，在读硕士，从事中医药防治妇科疾病的研究，E-mail：CM_110326@163.com
  杜小利，硕士，教授，从事中医药治疗女性内分泌疾病的研究，E-mail：dxl_515@163.com； *
  马会明，博士，副教授，从事生殖损伤和康复治疗的研究，E-mail：mhm289@nxmu.edu.cn
- 基金信息：
  
  宁夏自然科学基金项目(2020AAC03430;2022AAC03216);国家自然科学基金项目(81660813);宁夏科技领军人才项目(2020GKLRLX11);宁夏药物研发创新团队项目(NXKJT2019012)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221942
  中图分类号： R2-0;R33;R289;R271.1
- 收稿日期：2022-05-04，
  
  网络出版日期：2022-08-04，
  
  纸质出版日期：2022-10-20
- 稿件说明：
移动端阅览
陈苗,杜小利,冯亚宏等.基于NLRP3炎症通路探讨健脾益肾化浊方对多囊卵巢综合征大鼠卵巢功能的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(20):61-70.

CHEN Miao,DU Xiaoli,FENG Yahong,et al.Effect of Jianpi Yishen Huazhuo Prescription on Ovarian Function in Rats with Polycystic Ovary Syndrome Based on NLRP3 Inflammatory Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(20):61-70.
陈苗,杜小利,冯亚宏等.基于NLRP3炎症通路探讨健脾益肾化浊方对多囊卵巢综合征大鼠卵巢功能的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(20):61-70. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221942.

CHEN Miao,DU Xiaoli,FENG Yahong,et al.Effect of Jianpi Yishen Huazhuo Prescription on Ovarian Function in Rats with Polycystic Ovary Syndrome Based on NLRP3 Inflammatory Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(20):61-70. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221942.

摘要

目的

探究健脾益肾化浊方（JPYSHZ）改善多囊卵巢综合征（PCOS）卵巢功能的作用机制。

方法

将70只SD雌性大鼠随机分为6组，空白组和模型组各15只，二甲双胍组（0.1 g·kg

-1

）、JPYSHZ低、中、高剂量组（1.275、2.55、5.10 g·kg

-1

）组各10只。空白组给予生理盐水（10 mL·kg

-1

）灌胃和普通饲料喂养，其余各组均采用来曲唑（1 mg·kg

-1

）灌胃联合高脂饲料喂养21 d构建PCOS模型，造模结束后，空白组和模型组给与等体积生理盐水灌胃，各药物组给予相应剂量的药物灌胃，共30 d。比较造模前与造模后大鼠体质量和空腹血糖（FPG）变化；苏木素-伊红（HE）染色观察各组大鼠卵巢组织形态学改变；酶联免疫吸附测定法（ELISA）监测大鼠血清促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成素（LH）、睾酮（T）、抗苗勒管激素（AMH）和雌二醇（E

）水平，并计算LH/FSH；免疫组化法和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠卵巢组织中核苷结合寡聚化域蛋白样受体3（NALP3）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、核转录因子-

B（NF-

B）、白细胞介素（IL）-1

、IL-18和IL-6）蛋白表达水平。

结果

与空白组比较，模型组大鼠卵巢中可见较多囊性扩张的大卵泡，未见优势卵泡、卵泡颗粒层减少且排列松散，黄体数量明显减少；血清T、LH、AMH和LH/FSH明显升高（

0.05，

0.01），FSH和E

明显降低（

0.05，

0.01）；卵巢组织中NALP3、ASC、Caspase-1、NF-

B、IL-1

、IL-18和IL-6蛋白相对表达量均明显升高（

0.05，

0.01）。与模型组比较，JPYSHZ各剂量组和二甲双胍组卵巢组织中可见各级生长卵泡和黄体，囊性扩张卵泡减少，卵泡颗粒层厚度增加，可见成熟卵泡，卵母细胞局部形态完整；血清T、LH、AMH和LH/FSH明显降低（

0.05，

0.01），E

和FSH明显升高（

0.05）；卵巢组织中NALP3、ASC、Caspase-1、NF-

B、IL-1

、IL-18和IL-6蛋白相对表达量明显下降（

0.05，

0.01）。

结论

JPYSHZ可通过抑制NLRP3炎症小体激活，减少卵巢组织中各炎性因子释放，调节内分泌水平，有效减轻PCOS炎症状态，发挥改善卵巢功能作用。

Abstract

Objective

To explore the mechanism of Jianpi Yishen Huazhuo prescription in the improvement of ovarian function in polycystic ovary syndrome （PCOS）.

Method

Seventy female SD rats in SPF grade were randomly divided into 6 groups， 15 in the blank group and 15 in the model group， 10 in the metformin group （0.1 g·kg

-1

·d

-1

）， and 10 in the low （1.275 g·kg

-1

·d

-1

）， medium （2.55 g·kg

-1

·d

-1

）， and high-dose （5.10 g·kg

-1

·d

-1

） Jianpi Yishen Huazhuo prescription groups. The blank group was given normal saline （10 mL·kg

-1

·d

-1

） by gavage and ordinary feed， and the other groups were given letrozole （1 mg·kg

-1

·d

-1

） by gavage combined with high-fat feed for 21 days to induce the model of PCOS. After modeling， the blank group and model group were given equal volume normal saline by gavage， and each drug group was given the corresponding dose of the drug by gavage for 30 days. The changes in body mass and fasting blood glucose （FPG） of rats before and after modeling were compared. Hematoxylin eosin （HE） staining was used to observe the morphological change in the ovaries of rats in each group. The serum levels of follicle stimulating hormone （FSH）， luteinizing hormone （LH）， testosterone （T）， anti-Mullerian hormone （AMH）， and estradiol （E

） were measured by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and the LH/FSH ratio was calculated. Immunohistochemical staining （IHC） and Western blot were used to detect the protein expression levels of nucleoside binding oligomerization domain protein like receptor 3 （NALP3）， apoptosis-associated speck-like protein （ASC）， cysteine protease-1 （Caspase-1）， nuclear transcription factor-

B （NF-

B）， interleukin-1

（IL-1

）， interleukin-18 （IL-18）， and interleukin-6 （IL-6） in the rat ovaries.

Result

As compared with the blank group， large follicles with polycystic expansion were found in the ovaries of the model group， no dominant follicles were found， the granular layer of follicles decreased and arranged loosely， and the number of corpus luteum decreased significantly. Serum T， LH， AMH and LH/FSH increased in the model group （

0.05，

0.01）， while FSH and E

decreased （

0.05，

0.01）. The relative protein expression levels of NALP3， ASC， Caspase-1， NF-

B， IL-1

β，

IL-18， and IL-6 increased （

0.05，

0.01） in the ovaries of the model group. Compared with the model group， the low， medium， and high-dose Jianpi Yishen Huazhuo prescription groups and the metformin group showed growing follicles and corpus luteum at all levels， the number of cystic expanding follicles decreased， the thickness of follicular granular layer increased， the number of follicular fluid increased， mature follicles were visible， and the local morphology of oocytes was complete. Serum T， LH， AMH， and LH/FSH in these groups decreased （

0.05，

0.01）， while E

and FSH increased （

0.05）. The relative protein expressions of NALP3， ASC， Caspase-1， NF-

B， IL-1

，

IL-18， and IL-6 in the ovaries of these groups decreased （

0.05，

0.01）. There was no significant difference among the treatment groups.

Conclusion

By inhibiting the activation of NLRP3 inflammasome， Jianpi Yishen Huazhuo prescription reduces the release of NALP3， ASC， Caspase-1， NF-

B， IL-18， IL-1

， and IL-6 inflammatory factors in ovarian tissues， regulates endocrine level， and effectively reduces PCOS inflammatory statu， so as to play a role in improving ovarian function.

关键词

Keywords

references

高晴，鱼文欢，何佳静，等 . 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体在PCOS中的研究进展［J］. 生殖医学杂志， 2022 ， 31 （ 3 ）： 420 - 424 .

刘敏，朱鸿秋，李印，等 . 桂枝茯苓丸调节PI3K/Akt/mTOR通路对PCOS-IR大鼠排卵障碍的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2021 ， 27 （ 6 ）： 7 - 14 .

刘志勤，刘黎敏，陈青青 . 全程健康教育对多囊卵巢综合征患者自我管理能力及妊娠结局的影响［J］. 中国健康心理学杂志， 2022 ， 30 （ 7 ）： 1003 - 1007 .

张杏，连方 . 炎症细胞因子白介素-6、肿瘤坏死因子- α 、转化生长因子- β 1 在多囊卵巢综合征中作用机制及临床意义的研究进展［J］. 中国性科学， 2022 ， 31 （ 1 ）： 47 - 50 .

吕镁，徐泽均，孙任任，等 . 高雄激素相关的慢性炎症与多囊卵巢综合征的研究进展［J］. 生物化学与生物物理进展， 2022 ， 49 （ 4 ）： 767 - 774 .

ROSTAMTABAR M ， ESMAEILZADEH S ， TOURANI M ， et al . Pathophysiological roles of chronic low-grade inflammation mediators in polycystic ovary syndrome ［J］. J Cell Physiol ， 2021 ， 236 （ 2 ）： 824 - 838 .

冯晓玲，姜天悦，张杨 . NLRP3炎性小体与妊娠相关疾病［J］. 华中科技大学学报：医学版， 2021 ， 50 （ 4 ）： 528 - 532，554 .

HERMAN R ， JENSTERLE M ， JANEŽ A ， et al . Genetic variability in antioxidative and inflammatory pathways modifies the risk for PCOS and influences metabolic profile of the syndrome ［J］. Metabolites ， 2020 ， 10 （ 11 ）： 439 .

翟勇聪，刘景楠，韩涛 . 中医治疗多囊卵巢综合征临床研究进展［J］. 甘肃科技， 2021 ， 37 （ 23 ）： 129 - 133 .

冯亚宏，张晓静，杜翠忠 . 健脾益肾化浊方治疗肥胖型多囊卵巢综合征60例临床观察［J］. 母婴世界， 2021 ， 1 ： 100 .

徐海燕，杜青，徐琳本，等 . 两种肥胖型多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗大鼠模型的构建及评价［J］. 中国实验动物学报， 2021 ， 29 （ 5 ）： 644 - 650 .

李晓，胡亦明，韦春昕，等 . 基于Wnt/ β -catenin信号通路探讨黑逍遥散对AD模型大鼠神经炎症的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 11 ）： 33 - 41 .

温利丹，赵双俏，冯磊，等 . 从“脾肾两虚，痰瘀互结”论肥胖型多囊卵巢综合征的辨治［J］. 世界中西医结合杂志， 2022 ， 17 （ 2 ）： 412 - 415 .

孙畅，潘紫萌，李婧，等 . 不同代谢状态和肥胖对多囊卵巢综合征患者性激素水平及中医体质、证型分布的影响［J］. 上海中医药杂志， 2022 ， 56 （ 1 ）： 28 - 33 .

丁彧涵，冉颖卓 . 从虚、痰、瘀辨治肥胖型多囊卵巢综合征经验［J］. 中华中医药杂志， 2020 ， 35 （ 9 ）： 4493 - 4495 .

吴晓贞，何嘉仑，曾蕾，等 . 基于TLR-4/NF- κ B信号通路探讨苍附导痰汤对痰湿型多囊卵巢综合征大鼠的治疗作用［J］. 中药新药与临床药理， 2022 ， 33 （ 3 ）： 307 - 312 .

王婧，李小花，方捷 . 加味二仙汤联合二甲双胍对胰岛素抵抗型多囊卵巢综合征患者月经情况的影响［J］. 四川中医， 2021 ， 39 （ 5 ）： 151 - 154 .

孙博洋，韩世愈 . 慢性低度炎症与多囊卵巢综合征关系的研究进展［J］. 中国优生与遗传杂志， 2022 ， 30 （ 1 ）： 161 - 164 .

ENGIN A . The pathogenesis of obesity-associated adipose tissue inflammation ［J］. Adv Exp Med Biol ， 2017 ， 960 ： 221 - 245 .

ZHUANG Z ， PAN X ， ZHAO K ， et al . The effect of interleukin-6 （IL-6）， interleukin-11 （IL-11）， signal transducer and activator of transcription 3 （STAT3）， and Akt signaling on adipocyte proliferation in a rat model of polycystic ovary syndrome ［J］. Med Sci Monit ， 2019 ， 26 （ 25 ）： 7218 - 7227 .

POPOVIC M ， SARTORIUS G ， CHRIST-CRAIN M . Chronic low-grade inflammation in polycystic ovary syndrome：Is there a （patho）-physiological role for interleukin-1？［J］. Semin Immunopathol ， 2019 ， 41 （ 4 ）： 447 - 459 .

WANG D ， WENG Y ， ZHANG Y ， et al . Exposure to hyperandrogen drives ovarian dysfunction and fibrosis by activating the NLRP3 inflammasome in mice ［J］. Sci Total Environ ， 2020 ， doi： 10.1016/j.scitotenv.2020.141049 http://dx.doi.org/10.1016/j.scitotenv.2020.141049 .

潘敏丹，孙忻 . 多囊卵巢综合征的慢性炎症机制及其研究进展［J］. 生殖医学杂志， 2021 ， 30 （ 8 ）： 1118 - 1121 .

王维斌，黄娜，张萍，等 . 解郁化痰法对多囊卵巢综合征大鼠肝脏组织IRS-1及IRS-2表达的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 2 ）： 45 - 51 .

孙子懿，雷梦云，刘聪，等 . 多囊卵巢综合征与单核细胞及炎性细胞因子的关系［J］. 中国医科大学学报， 2018 ， 47 （ 12 ）： 1128 - 1132 .

王景尚，尹晓丹，何军琴，等 . 来曲唑联合高糖高脂饮食构建多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗大鼠模型研究［J］. 首都医科大学学报， 2021 ， 42 （ 3 ）： 436 - 442 .

KRISHNAN A ， MUTHUSAMI S . Hormonal alterations in PCOS and its influence on bone metabolism ［J］. J Endocrinol ， 2017 ， 232 （ 2 ）： R99 - R113 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

补肾调肝周期疗法及组方通过miR-140-5P/VEGF通路改善多囊卵巢综合征大鼠“着床窗口期”子宫内膜容受性机制

归肾丸加味调控AMPK/Akt/Nrf2通路改善多囊卵巢综合征大鼠糖脂代谢及氧化应激的机制

基于MAPK/NF-κB通路探讨归肾丸加味对多囊卵巢综合征大鼠炎症的影响

基于JNK/c-Myc/p53信号通路探讨酸枣仁汤对抑郁模型大鼠的干预作用

多囊卵巢综合征相关信号通路及其中医药调控研究进展