益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路的影响

贾评评; 宋纯东; 段凤阳; 王宁丽; 丁樱; 王耀献; 任献青; 翟文生

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221945

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益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路的影响

药理 | 更新时间：2022-12-08

- 益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路的影响
- Effect of Yiqi Yangyin Huoxue Prescription on NLRP3/Caspase-1/GSDMD Pyroptosis Pathway in Diabetic Kidney Disease Rats
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第1期页码：75-81
- 作者机构：
  
  1.河南中医药大学第一附属医院，儿科医学院，郑州 450000
  2.北京中医药大学，北京 100029
- 作者简介：
  
  贾评评，硕士，主治医师，从事中西医防治肾脏病的研究，E-mail：374751170@qq.com
  宋纯东，博士，主任医师，教授，博士生导师，从事肾小球疾病的中西医诊治机制研究，E-mail：scd670918@126.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(82074493);河南省自然科学基金项目(202300410266);河南省中医药学科领军人才项目(豫卫中医函（2021）8号);河南省卫生健康委员会中医药青苗人才项目(豫卫中医函［2021］16号)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221945
  中图分类号： R2-0;R33;R289;R587.1;R692
- 收稿日期：2022-05-20，
  
  网络出版日期：2022-08-05，
  
  纸质出版日期：2023-01-05
- 稿件说明：
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贾评评,宋纯东,段凤阳等.益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(01):75-81.

JIA Pingping,SONG Chundong,DUAN Fengyang,et al.Effect of Yiqi Yangyin Huoxue Prescription on NLRP3/Caspase-1/GSDMD Pyroptosis Pathway in Diabetic Kidney Disease Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(01):75-81.
贾评评,宋纯东,段凤阳等.益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(01):75-81. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221945.

JIA Pingping,SONG Chundong,DUAN Fengyang,et al.Effect of Yiqi Yangyin Huoxue Prescription on NLRP3/Caspase-1/GSDMD Pyroptosis Pathway in Diabetic Kidney Disease Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(01):75-81. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221945.

摘要

目的

基于NOD样受体蛋白3（NLRP3）/胱天蛋白酶-1（Caspase-1）/消皮素D（GSDMD）细胞焦亡通路，探讨益气养阴活血方防治糖尿病肾病（DKD）肾脏损伤的可能作用机制。

方法

随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只、造模组42只。造模组高糖高脂饮食6周后予一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导建立DKD大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、缬沙坦组（8.33 mg·kg

-1

）、益气养阴活血方低、高剂量组（11、22 g·kg

-1

）。连续灌胃6周后检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）及24 h尿蛋白定量（24 h-UTP）；苏木素-伊红（HE）染色观察肾组织病理形态学变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清白细胞介素-1

（IL-1

）、白细胞介素-18（IL-18）水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组大鼠肾组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白及其mRNA表达水平。

结果

与正常组比较，模型组大鼠FBG、CHO、TG、BUN、SCr、24 h-UTP及血清IL-1

、IL-18水平均显著升高（

0.01），肾组织病变程度严重，且肾组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白及其mRNA表达水平显著升高（

0.01）；与模型组比较，各药物组FBG、CHO、TG、BUN、SCr、24 h-UTP及血清IL-1

、IL-18水平均明显下降（

0.05，

0.01），肾组织病变程度得到改善，且肾组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白及其mRNA表达水平明显降低（

0.05，

0.01），以益气养阴活血方高剂量组效果最佳。

结论

益气养阴活血方可通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制细胞焦亡，缓解DKD大鼠炎症反应，减轻肾脏病理损伤。

Abstract

Objective

To explore the possible mechanism of Yiqi Yangyin Huoxue prescription in the prevention and treatment of kidney injury of diabetic kidney disease（DKD）rats based on NOD-like receptor protein 3（NLRP3）/cysteine protease-1（Caspase-1）/gasdermin D （GSDMD）pyroptosis pathway.

Method

Fifty male SD rats were randomly divided into normal group （

=8） and modeling group （

=42）. The modeling group was given a one-time intraperitoneal injection of streptozotocin （STZ） after high-sugar and high-fat diet for 6 weeks to induce the establishment of a DKD rat model. After successful modeling， the rats were randomly divided into model group， valsartan group （8.33 mg·kg

-1

）， and Yiqi Yangyin Huoxue prescription low-dose and high-dose group （11，22 g·kg

-1

）. After continuous gavage for 6 weeks， the fasting blood glucose （FBG）， total cholesterol （CHO）， triglyceride （TG）， blood urea nitrogen （BUN）， serum creatinine （SCr） and 24-hour urine protein quantification （24 h-UTP） were detected in each group of rats. Hematoxylin-eosin （HE） staining was used to observe the pathological changes of kidney tissue. Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was used to detect serum interleukin-1

（IL-1

） and interleukin-18 （IL-18） levels. The protein and mRNA expression levels of NLRP3/Caspase-1/GSDMD in kidney tissue of rats in each group were determined by Western blot and real-time quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR）.

Result

Compared with the conditions in normal group， the levels of FBG， CHO， TG， BUN， SCr， 24 h-UTP and serum IL-1

and IL-18 as well as the protein and mRNA expression levels of NLRP3/Caspase-1/GSDMD in kidney tissue in model group were increased （

0.01）， and the kidney tissue lesions were severe. Compared with the conditions in model group， the levels of FBG， CHO， TG， BUN， SCr， 24 h-UTP and serum IL-1

and IL-18 as well as the protein and mRNA expression levels of NLRP3/Caspase-1/GSDMD in kidney tissue in each intervention group were decreased （

0.05，

0.01）， and the degree of kidney tissue lesions was improved， with Yiqi Yangyin Huoxue prescription high-dose group showing the optimal effect.

Conclusion

Yiqi Yangyin Huoxue prescription could inhibit pyroptosis by regulating the NLRP3/Caspase-1/GSDMD pathway， and thus relieve the inflammatory response of DKD rats and alleviate the pathological damage of the kidneys.

关键词

Keywords

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