黄连解毒汤对ApoE<sup>-/-</sup>小鼠动脉粥样硬化的干预作用及其机制

王卓溪; 班纪芳; 李柔乐; 王铁风; 客蕊; 胡晓阳

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20222191

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黄连解毒汤对ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的干预作用及其机制

经典名方 | 更新时间：2022-09-30

- 黄连解毒汤对ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的干预作用及其机制
- Intervention of Huanglian Jiedutang on Atherosclerosis in ApoE^-/- Mice and Its Mechanism
- 中国实验方剂学杂志 2022年28卷第21期页码：23-31
- 作者机构：
  
  1.黑龙江中医药大学，哈尔滨 150040
  2.黑龙江中医药大学附属第一医院，哈尔滨 150040
- 作者简介：
  
  王卓溪，硕士，从事中医药防治心系疾病研究，E-mail：zgzyzz0919@163.com
  客蕊，博士，主任医师，博士生导师，从事中医药防治心系疾病研究，E-mail：wangzhuoxi0919@163.com；
  胡晓阳，教授，硕士生导师，从事方剂配伍规律研究，E-mail：psa1981@126.com
- 基金信息：
  
  黑龙江省应用技术研究与开发计划项目(GY2019YF0237);全国中医药创新青年人才培训项目(14061190007)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20222191
  中图分类号： R22;R242;R285.5;R2-031;R541.4
- 收稿日期：2021-05-09，
  
  网络出版日期：2022-03-22，
  
  纸质出版日期：2022-11-05
- 稿件说明：
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王卓溪,班纪芳,李柔乐等.黄连解毒汤对ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的干预作用及其机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(21):23-31.

WANG Zhuoxi,BAN Jifang,LI Roule,et al.Intervention of Huanglian Jiedutang on Atherosclerosis in ApoE^-/- Mice and Its Mechanism[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(21):23-31.
王卓溪,班纪芳,李柔乐等.黄连解毒汤对ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的干预作用及其机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(21):23-31. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20222191.

WANG Zhuoxi,BAN Jifang,LI Roule,et al.Intervention of Huanglian Jiedutang on Atherosclerosis in ApoE^-/- Mice and Its Mechanism[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(21):23-31. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20222191.

摘要

目的

研究黄连解毒汤对高脂饮食诱导的载脂蛋白E基因敲除（ApoE

-/-

）小鼠动脉粥样硬化的干预作用。

方法

高脂饮食建立ApoE

-/-

小鼠动脉粥样硬化模型，给予黄连解毒汤进行干预。通过苏木素-伊红（HE）染色观察动脉粥样硬化病变后主动脉病理形态变化；全自动生化分析仪检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平变化；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测主动脉沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）与核转录因子-

B（NF-

B）蛋白表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肝脏腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）与过氧化物酶体增殖物激活受体

（PPAR

） mRNA表达水平，检测主动脉组织肿瘤坏死因子-

（TNF-

）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1

（IL-1

）与NOD样受体热蛋白结构域3（NLRP3） mRNA表达水平。

结果

与正常组比较，模型组血管中有大量脂质积累，血清中TG、TC、LDL-C水平均显著升高（

0.01），HDL-C水平显著降低（

0.01）；主动脉SIRT1蛋白表达水平显著降低，NF-

B蛋白表达显著升高（

0.01）；主动脉TNF-

、IL-6、IL-1

、NLRP3 mRNA表达显著升高（

0.01）；肝脏AMPK与PPAR

mRNA表达显著降低（

0.01）。与模型组比较，黄连解毒汤可减少动脉粥样硬化模型小鼠主动脉脂质积累及炎症反应，降低TC、TG、LDL-C水平（

0.01），升高HDL-C水平（

0.01）；黄连解毒汤可显著升高ApoE

-/-

小鼠主动脉内SIRT1蛋白表达水平（

0.01），降低NF-

B蛋白表达水平（

0.05，

0.01）；黄连解毒汤可明显下调小鼠主动脉内TNF-

、IL-6、IL-1

mRNA表达水平（

0.05，

0.01）；黄连解毒汤可显著上调小鼠肝脏组织AMPK mRNA表达水平（

0.05，

0.01）。

结论

黄连解毒汤对ApoE

-/-

小鼠动脉粥样硬化主动脉斑块形成有一定的干预作用，其机制可能与降低血清TC、TG、LDL-C水平、升高HDL-C水平从而发挥降血脂作用，上调SIRT1蛋白、降低NF-

B蛋白、降低TNF-

、IL-6等炎症因子等保护血管免受炎症损伤及提高AMPK与PPAR

水平参与自噬与凋亡反应有关。

Abstract

Objective

To study the intervention of Huanglian Jiedutang on atherosclerosis （AS） in apolipoprotein E knockout （ApoE

-/-

） mice induced by the high-fat diet.

Method

The ApoE

-/-

mouse model of AS was induced by the high-fat diet， and Huanglian Jiedutang was used to intervene in the AS in the ApoE

-/-

mice. The pathological changes of aorta were observed by hematoxylin-eosin （HE） staining. The levels of serum total cholesterol （TC）， triglyceride （TG）， high-density lipoprotein cholesterol （HDL-C）， and low-density lipoprotein cholesterol （LDL-C） were detected by an automatic biochemical analyzer. The protein expression levels of sirtuin-1 （SIRT1） and nuclear factor-kappa B （NF-

B） were determined by Western blot assay， and the mRNA expression levels of adenosine 5'-monophosphate-activated protein kinase （AMPK）， peroxisome proliferators-activated receptors

（PPAR

）， tumor necrosis factor-

（TNF-

）， interleukin-6 （IL-6）， interleukin-1

（IL-1

）， and NOD-like receptor pyrin domain-containing 3 （NLRP3） were determined by real-time quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR）.

Result

As compared with the normal group， there was a large amount of lipid accumulation in the blood vessels of the model group. In the model group， the levels of serum TG， TC， and LDL-C were increased （

0.01）， and the level of HDL-C was decreased （

0.01）. The protein expression level of SIRT1 in the aorta was decreased， while that of NF-

B was increased in the model group （

0.01）. The mRNA expression levels of IL-6， TNF-

， and IL-1

were higher （

0.01）， while those of AMPK in the liver were lower in the model group （

0.01）. Compared with the model group， the Huanglian Jiedutang group reduced the lipid accumulation and inflammatory reaction in the aorta of mice with AS， reduced the levels of TC， TG， and LDL-C （

0.01）， and increased the level of HDL-C （

0.01）. Huanglian Jiedutang significantly increased the protein expression level of SIRT1 in the aorta of ApoE

-/-

mice （

0.01） and decreased the protein expression levels of NF-

B in the aorta （

0.05，

0.01）. Huanglian Jiedutang down-regulated the mRNA expression levels of TNF-

， IL-6， IL-1

， and NLRP3 in the aorta （

0.05，

0.01）， and up-regulated the mRNA expression levels of AMPK and PPAR

in the liver of ApoE

-/-

mice （

0.05，

0.01）.

Conclusion

Huanglian Jiedutang has a certain intervention effect on the formation of atherosclerotic aortic plaque in ApoE

-/-

mice. Its mechanism may be related to the decrease of serum TC， TG， and LDL-C levels， the increase of HDL-C levels， thus playing a role in lowering blood lipid， the increase of SIRT1 protein， the decrease of NF-

B protein， the decrease of inflammatory factors such as TNF-

and IL-6， which protects blood vessels from inflammatory injury， and the improvement of AMPK and PPAR

levels to participate in autophagy and apoptosis.

关键词

Keywords

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