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1.江西中医药大学,南昌 330004
2.中国中医科学院 中药研究所,北京 100700
3.天津中医药大学,天津 301617
4.北京城市学院,北京 100089
严林,在读硕士,从事中药制剂研究,E-mail:3104483640@qq.com
刘德文,副研究员,从事中药制剂研究,E-mail:dwliu@icmm.ac.cn; *
王锦玉,研究员,从事中药制剂研究,E-mail:jinyu024@163.com
收稿日期:2022-09-01,
网络出版日期:2022-10-26,
纸质出版日期:2022-12-20
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严林,欧则民,王艳静等.泽泻及其炮制品对肾阴虚水肿模型大鼠的作用机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(24):42-49.
YAN Lin,OU Zemin,WANG Yanjing,et al.Mechanism of Alismatis Rhizoma and Its Processed Product Against Edema of Kidney Yin Deficiency in Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(24):42-49.
严林,欧则民,王艳静等.泽泻及其炮制品对肾阴虚水肿模型大鼠的作用机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(24):42-49. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222280.
YAN Lin,OU Zemin,WANG Yanjing,et al.Mechanism of Alismatis Rhizoma and Its Processed Product Against Edema of Kidney Yin Deficiency in Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(24):42-49. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222280.
目的
2
通过研究泽泻及其炮制品对肾阴虚水肿模型大鼠的药效作用,探讨泽泻及其炮制品改善肾阴虚水肿的作用机制。
方法
2
将42只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药六味地黄丸组、泽泻低、高剂量组,盐泽泻低、高剂量组,每组6只。除正常组外,其余各组大鼠均通过尾静脉注射阿霉素和灌胃甲状腺素复制肾阴虚水肿模型,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,阳性药组给予六味地黄丸(1.4 g·kg
-1
),药物治疗组分别给予泽泻低、高剂量(1、4 g·kg
-1
),盐泽泻低、高剂量(1、4 g·kg
-1
),连续给药4周。末次给药后取大鼠肾脏,通过苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理变化,放射免疫法检测血清中三碘甲状腺原氨酸(T
3
)、甲状腺素(T
4
)、促卵泡生成激素(FSH)、睾酮(T)的含量,全自动生化分析仪测定血清中肌酐(CREA)、尿素(UREA)、胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)的含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中促性腺激素释放激素(GnRH),血浆中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)的含量,分别用免疫组织化学法和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾脏中水通道蛋白(AQP)-1、AQP-2的表达和mRNA的转录水平。
结果
2
与正常组比较,模型组大鼠体质量、尿量显著降低(
P
<
0.01),饮水量明显增加(
P
<
0.05),肾脏有大量炎症细胞浸润及纤维组织增生;T
3
、T
4
、cAMP/cGMP、CREA、FSH、AQP-1、AQP-2表达及转录水平显著上升(
P
<
0.01),CHOL、TG含量明显升高(
P
<
0.05),GnRH和T的含量显著降低(
P
<
0.01)。与模型组比较,泽泻和盐泽泻低、高剂量组体质量均有所增加,其中泽泻低剂量组和盐泽泻低剂量组显著增加(
P
<
0.01),各组大鼠尿量均有所增加,但差异无统计学意义,肾脏组织炎症细胞浸润减少;明显降低T
4
、cAMP/cGMP、UREA、CREA、FSH、CHOL、TG的含量(
P
<
0.05,
P
<
0.01),升高GnRH的水平(
P
<
0.01),其中泽泻高剂量组和盐泽泻低、高剂量组大鼠肾脏AQP-1、AQP-2 mRNA的转录水平显著下降(
P
<
0.01)。
结论
2
泽泻及其炮制品对肾阴虚水肿模型大鼠均有改善作用,其机制可能与下调AQP-1、AQP-2表达和纠正下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴紊乱有关。
Objective
2
To evaluate the pharmacological effect of Alismatis Rhizoma (AR) and its processed product on rats with edema of kidney Yin deficiency and explore the mechanism.
Method
2
A total of 42 male SPF SD rats were randomized into normal group (equivalent volume of distilled water), model group (equivalent volume of distilled water), positive medicine Liuwei Diguangwan group (1.4 g·kg
-1
), low- and high-dose AR groups (1, 4 g·kg
-1
, respectively), and low- and high-dose salt-processed AR (SAR) groups (1, 4 g·kg
-1
, respectively), with six rats in each group. Adriamycin (tail vein injection) and thyroxine (gavage) were used to induce edema of kidney Yin deficiency in rats except the normal group. The administration lasted 4 weeks for all the groups. After the last administration, histopathological changes of rat kidneys were observed based on hematoxylin-eosin (HE) staining. Serum content of triiodothyronine (T
3
), thyroxine (T
4
), follicle-stimulating hormone (FSH), and testosterone (T) was determined by radioimmunoassay, and serum content of creatinine (CREA), urea (UREA),cholesterol (CHOL) and triglyceride (TG) by automatic biochemical analyser. The levels of gonadotropin-releasing hormone (GnRH), cyclic adenosine monophosphate (cAMP), and cyclic guanosine monophosphate (cGMP) in plasma were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and the expression of aquaporin(AQP)-1 and AQP-2 and the transcription of mRNA in kidney were measured by immunohistochemistry and real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction (Real-time PCR), respectively.
Result
2
Compared with normal group, the rats in model group showed decrease in body mass and urine volume (
P
<
0.01), increase in water consumption (
P
<
0.05), infiltration of a large number of inflammatory cells and fibrous tissue proliferation in the kidney, rise of the expression and transcript levels of T
3
, T
4
, cAMP/cGMP, CREA, FSH, AQP-1, and AQP-2 (
P
<
0.01), the contents of CHOL and TG were significantly increased (
P
<
0.05), and reduction in the levels of GnRH and T (
P
<
0.01). Body mass increased in both the low- and high- dose groups of AR and SAR compared with that in model group, with significant differences between the low-dose AR group and the low-dose SAR group (
P
<
0.01). Moreover, compared with model group, low- and high-dose AR and SAR insignificantly increased the urine volume of rats, reduced the inflammatory cells in kidney tissues, significantly decreased the levels of T
4
, cAMP/cGMP, UREA, CREA, FSH, CHOL and TG in serum (
P
<
0.05,
P
<
0.01), and elevated the level of GnRH (
P
<
0.01), high-dose AR, low- and high-dose SAR significantly lowered the transcription levels of AQP-1 and AQP-2 mRNA in the kidneys of rats (
P
<
0.01).
Conclusion
2
Both AR and SAR alleviated the edema of kidney Yin deficiency in rats by down-regulating the expression of AQP-1 and AQP-2 and correcting the hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis disorder.
李霄 . 基于肾阳(阴)虚水肿模型的五种利水消肿中药及其性味拆分组分的归经研究 [D]. 哈尔滨 : 黑龙江中医药大学 , 2018 .
夏祖生 , 任雪迪 , 毛永炎 . 实脾饮合五苓散加减治疗肾性水肿的疗效及安全性观察 [J]. 湖北中医杂志 , 2022 , 44 ( 6 ): 39 - 41 .
谌贻璞 , 陈洪宇 , 刘宝利 , 等 . 肾性水肿的中西医结合诊断与治疗 [J]. 中国中西医结合肾病杂志 , 2020 , 21 ( 9 ): 843 - 846 .
顾云龙 , 李兆健 . 泽泻功用的本草考证及现代研究进展 [J]. 中医药导报 , 2021 , 27 ( 11 ): 137 - 141 .
吴珍 . 23-乙酰泽泻醇B对肥胖模型小鼠糖脂代谢紊乱及肠道菌群的研究 [D]. 广州 : 广东药科大学 , 2021 .
XU X M , LI L S , ZHANG Y M , et al . Zhang Hypolipidemic effects of Alismatis Rhizoma decoction on the lipid profile in hyperlipidemia rats by RNA-sequencing [J]. J Chin Pharm Sci , 2021 , 30 ( 5 ): 409 - 420 .
黄小强 , 李宣宣 , 吴水生 , 等 . 泽泻三萜对小鼠急性肺损伤的保护作用 [J]. 中成药 , 2022 , 44 ( 9 ): 2979 - 2984 .
严林 , 李新健 , 张冰冰 , 等 . 泽泻汤的研究现状 [J]. 中国实验方剂学杂志 , 2021 , 27 ( 16 ): 191 - 197 .
LEE M J , JUNG H K , LEE K H , et al . A 90-day repeated oral dose toxicity study of Alismatis Rhizoma aqueous extract in rats [J]. Toxicol Res , 2019 , 35 ( 2 ): 191 - 200 .
严桂杰 , 蓝梦柳 , 丘建芳 , 等 . 泽泻炮制前后化学成分及其利尿作用研究 [J]. 中国中医药信息杂志 , 2020 , 27 ( 4 ): 59 - 65 .
曾春晖 , 杨柯 , 刘海燕 , 等 . 不同产地泽泻盐炙前后成分差异及利尿作用的研究 [J]. 中国实验方剂学杂志 , 2012 , 18 ( 2 ): 148 - 152 .
伍小燕 , 陈朝 , 张国伟 . 泽泻水提物对正常大鼠利尿活性及肾脏髓质AQP2作用研究 [J]. 实用临床医药杂志 , 2010 , 14 ( 21 ): 5 - 7 .
唐桂毅 , 温和 , 王晶晶 , 等 . 阿霉素肾病大鼠模型的评价研究 [J]. 药物评价研究 , 2020 , 43 ( 1 ): 66 - 71 .
李爱平 , 张王宁 , 秦雪梅 . 阿霉素肾病大鼠模型的优化 [J]. 中草药 , 2018 , 49 ( 1 ): 151 - 159 .
徐叔云 . 药理实验方法学 [M]. 北京 : 人民卫生出版社 , 2002 .
李琳 , 蒋亚超 , 蒋佳岑 , 等 . 基于“利水消肿”功效考察麻黄水煎液对肾性水肿病症结合模型的影响 [J]. 中药药理与临床 , 2019 , 35 ( 4 ): 130 - 133 .
牛艳 , 吴广操 , 郭月婷 , 等 . 桑白皮水煎总提物及拆分组分对肾阴虚水肿模型大鼠的影响 [J]. 中华中医药学刊 , 2019 , 37 ( 1 ): 145 - 150 .
潘向军 , 楼百层 , 朱延涛 . 肾阴虚模型制备方法及肾阴虚证研究进展 [J]. 新中医 , 2019 , 51 ( 3 ): 23 - 27 .
刘运华 , 赵宗江 . 肾阴虚证动物模型造模方法及相关指标 [C]//中国中西医结合学会实验医学专业委员会. 第十四次中国中西医结合实验医学学术研讨会论文汇编 . 北京 : 中国中西医结合学会 , 2017 : 336 - 341 .
周宁 , 郑晓珂 , 王秋红 , 等 . 葶苈子对肾阴虚水肿模型干预作用的代谢组学研究 [J]. 中药材 , 2017 , 40 ( 9 ): 2166 - 2171 .
张子怡 , 陈宝军 , 张英杰 , 等 . 肾阳虚、肾阴虚证大鼠模型的建立与稳定性观察 [J]. 福建中医药 , 2015 , 46 ( 1 ): 51 - 54 .
李培雄 , 石咏军 . 慢性肾脏病患者晨尿白蛋白/肌酐比值与尿蛋白定量、定性的相关性分析 [J]. 医学理论与实践 , 2022 , 35 ( 12 ): 1997 - 2001 .
张水检 , 周琰 , 邵文琦 , 等 . 半定量干化学法检测尿白蛋白/肌酐比值的临床应用价值 [J]. 检验医学 , 2022 , 37 ( 5 ): 463 - 465 .
李阳 , 高明松 , 祝炼 , 等 . 夏枯草颗粒联合泼尼松治疗亚急性甲状腺炎疗效及对血清T3、T4及TSH水平的影响 [J]. 中华中医药学刊 , 2020 , 38 ( 11 ): 225 - 228 .
欧阳林旗 , 蒋司晨 , 陈镇 , 等 . 乌药挥发油对寒凝气滞血瘀证大鼠血液流变学及NO-s GC-c GMP信号通路的影响 [J]. 中草药 , 2022 , 53 ( 15 ): 4730 - 4737 .
朱璐璐 . 尿微量白蛋白与尿肌酐比值尿微量白蛋白及尿 β 2-微球蛋白诊断妊娠期糖尿病孕妇早期肾损伤的价值分析 [J]. 中国妇幼保健 , 2022 , 37 ( 11 ): 1963 - 1965 .
刘彦宏 , 武凤 , 于修芳 , 等 . 杜仲提取物通过HPG轴对APP/PS1小鼠学习认知功能的影响 [J]. 中药材 , 2022 , doi: 10.13863/j.issn1001-4454.2022.08.033 http://dx.doi.org/10.13863/j.issn1001-4454.2022.08.033 .
宋纯东 , 宋丹 , 贾评评 , 等 . 真武汤和越婢汤对阿霉素肾病大鼠AQP1/AQP2的影响 [J]. 中国中医基础医学杂志 , 2020 , 26 ( 3 ): 334 - 337 .
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