大黄泄浊方对慢性肾衰竭大鼠炎症及SOCS3/TLR4通路的影响

辛鑫; 吴振华; 檀淼; 高飞; 杨凤文; 陈素枝; 张倩; 檀金川

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20222436

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大黄泄浊方对慢性肾衰竭大鼠炎症及SOCS3/TLR4通路的影响

药理 | 更新时间：2023-05-17

- 大黄泄浊方对慢性肾衰竭大鼠炎症及SOCS3/TLR4通路的影响
- Effect of Dahuang Xiezhuo Prescription on Inflammation and SOCS3/TLR4 Pathway in Rats with Chronic Renal Failure
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第7期页码：95-104
- 作者机构：
  
  1.河北中医学院，石家庄 050200
  2.河北省中医院，石家庄 050011
  3.河北医科大学第四医院，石家庄 050000
  4.北京中医药大学东直门医院，北京 100700
- 作者简介：
  
  辛鑫，在读硕士，从事中西医结合肾病研究，E-mail：811328233@qq.com
  檀金川，教授，博士生导师，从事中西医结合肾病研究，E-mail：2511271452@qq.com
- 基金信息：
  
  河北省中医药管理局科研计划项目(2021030)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20222436
  中图分类号： R2-0;R33;R289;R692
- 收稿日期：2022-06-28，
  
  网络出版日期：2022-11-17，
  
  纸质出版日期：2023-04-05
- 稿件说明：
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辛鑫,吴振华,檀淼等.大黄泄浊方对慢性肾衰竭大鼠炎症及SOCS3/TLR4通路的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(07):95-104.

XIN Xin,WU Zhenhua,TAN Miao,et al.Effect of Dahuang Xiezhuo Prescription on Inflammation and SOCS3/TLR4 Pathway in Rats with Chronic Renal Failure[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(07):95-104.
辛鑫,吴振华,檀淼等.大黄泄浊方对慢性肾衰竭大鼠炎症及SOCS3/TLR4通路的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(07):95-104. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20222436.

XIN Xin,WU Zhenhua,TAN Miao,et al.Effect of Dahuang Xiezhuo Prescription on Inflammation and SOCS3/TLR4 Pathway in Rats with Chronic Renal Failure[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(07):95-104. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20222436.

摘要

目的

观察大黄泄浊方对慢性肾衰竭（CRF）大鼠信号传导抑制因子3（SOCS3）/Toll样受体4（TLR4）通路的干预作用，探讨其减轻肾组织炎症反应的分子机制。

方法

取雄性SD大鼠90只，随机留取15只为假手术组，剩余75只为造模组，行5/6肾切除术复制CRF大鼠模型，模型复制成功后，随机分为模型组，大黄泄浊方低、中、高剂量（6.825、13.65、27.3 g·kg

-1

）组、尿毒清颗粒组（2.6 g·kg

-1

），分别予相应剂量的药物灌胃，连续灌胃8周

。

给药结束后，苏木素-伊红（HE）染色及马松（Masson）染色观察大鼠肾脏组织病理形态改变；检测大鼠血肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）、血尿酸（UA）水平；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-

（TNF-

）、C反应蛋白（CRP）含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肾组织中SOCS3和TLR4 mRNA的表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测信号传导抑制因子3（SOCS3）、TLR4、核转录因子-

B（NF-

B）、髓样分化因子88（MyD88）蛋白的表达；免疫组化法检测NF-

B、MyD88、NOD样受体蛋白3（NLRP3）、黑色素瘤缺乏因子2（AIM2）蛋白的表达。

结果

与假手术组比较，模型组大鼠肾组织发生明显的炎症反应，血SCr、BUN、UTP、IL-6、TNF-

、CRP水平明显升高（

0.05），肾组织中SOCS3蛋白及SOCS3 mRNA含量明显下调，TLR4、NF-

B、MyD88、NLRP3、AIM2蛋白及TLR4 mRNA含量均明显升高（

0.05）；与模型组比较，大黄泄浊方和尿毒清颗粒可明显减轻肾组织中的炎症反应，降低血SCr、BUN、UTP、IL-6、TNF-

、CRP的表达水平（

0.05），肾组织中SOCS3蛋白及SOCS3 mRNA含量显著上升，TLR4、NF-

B、MyD88、NLRP3、AIM2蛋白及TLR4 mRNA含量均明显下降（

0.05）。

结论

大黄泄浊方可减少炎症因子的释放和表达，抑制炎症反应，改善肾功能，其机制可能与调控SOCS3/TLR4信号通路有关。

Abstract

Objective

To observe the intervention effect of Dahuang Xiezhuo prescription （DHXZ） on inflammation and suppressor of cytokine signaling 3 （SOCS3）/Toll-like receptor 4 （TLR4） pathway in rats with chronic renal failure （CRF）， and to explore its molecular mechanism in alleviating renal inflammatory response.

Method

The 90 male SD rats， 15 were randomly selected as sham group， and the remaining 75 were used as modeling group to replicate CRF rat model by 5/6 nephrectomy. After successful modeling， the rats were randomly divided into model group， DHXZ low-， medium-， high-dose groups （6.825， 13.65， 27.3 g·kg

-1

） and Niaoduqing Granules group （2.6 g·kg

-1

）. The drug intervention groups received corresponding drugs by gavage for 8 consecutive weeks. After administration， hematoxylin-eosin （HE） staining and Masson staining were used to observe the morphological changes of rat renal tissue， and blood creatinine （SCr）， blood urea nitrogen （BUN） and blood uric acid （UA） were tested. Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was performed to detect the serum contents of interleukin-6 （IL-6）， tumor necrosis factor-

（TNF-

） and C-reactive protein （CRP）. The mRNA expressions of SOCS3 and TLR4 in renal tissue were detected by Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR）， and the protein expressions of SOCS3， TLR4， nuclear transcription factor （NF-

B） and myeloid differentiation factor （MyD88） were detected by Western blot. Immunohistochemistry was used to determine the protein expressions of NF-

B， MyD88， NOD-like receptor protein 3 （NLRP3） and melanoma deficiency factor 2 （AIM2）.

Result

Compared with the sham group， the model group had a significant inflammatory response in renal tissue， and an increase in blood SCr， BUN， UTP， IL-6， TNF-

and CRP （

0.05）. The protein and mRNA expressions of SOCS3 in renal tissue of rats in the model group were lower while the protein expressions of TLR4， NF-

B， MyD88， NLRP3 and AIM2 and the mRNA expression of TLR4 were higher than those in the sham group （

0.05）. Compared with the model group， DHXZ and Niaoduqing granules groups presented markedly reduced inflammatory response in renal tissue and decreased blood SCr， BUN， UTP， IL-6， TNF-

and CRP （

0.05）. Additionally， DHXZ and Niaoduqing granules up-regulated the protein and mRNA expressions of SOCS3 in renal tissue while down-regulated the protein expressions of TLR4， NF-

B， MyD88， NLRP3 and AIM2 and the mRNA expression of TLR4 （

0.05）.

Conclusion

DHXZ can reduce the release and expression of inflammatory factors， inhibit the inflammatory response and improve renal function， and the mechanism may be related to the regulation of SOCS3/TLR4 signaling pathway.

关键词

Keywords

references

慢性肾衰竭临床特征及误诊疾病［J］. 临床误诊误治， 2020 ， 33 （ 10 ）： 2 .

GUO H Y ， ZHANG L Y . Resveratrol provides benefits in mice with type Ⅱ diabetes induced chronic renal fail—ure through AMPK signaling pathway ［J］. Exp Ther Med ， 2018 ， 16 ： 333 .

郑晓佳，陈苹苹，刘阳，等 . 加味当归芍药散对慢性萎缩性胃炎大鼠SOCS3/TLR4信号通路的影响［J］. 中国中药杂志， 2022 ， 47 （ 15 ）： 4128 - 4135 .

肖俊，胡艳萍，图露霞，等 . TLR4、SOCS3、miR-203在IgA肾病鼠肾组织中的表达变化及意义［J］. 广东医学， 2019 ， 40 （ 5 ）： 631 - 634 .

邹涵，黄志敏，唐宇，等 . 三七注射液对慢性肾衰竭大鼠肠道失调信号通路及肠道菌群结构的影响［J］. 时珍国医国药， 2021 ， 32 （ 2 ）： 269 - 272 .

曹雯萱，辛鑫，檀淼，等 . 大黄泄浊方调控ROS/TXNIP/NLRP3通路对5/6肾切除大鼠肾间质纤维化的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 21 ）： 81 - 89 .

张欣欣，辛鑫，吴振华，等 . 大黄泄浊方对5/6肾切除大鼠肾组织中内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP表达的影响［J］. 河北中医药学报， 2021 ， 36 （ 6 ）： 1 - 4 .

陶新磊，刘丹华，田旭，等 . 黄芪多糖诱导SOCS3表达对鸡巨噬细胞炎症反应的抑制作用［J］. 中国畜牧兽医， 2021 ， 48 （ 11 ）： 4284 - 4291 .

徐郁琴，丁艳平，刘淑宁，等 . 黄芪甲苷通过Toll样受体4/核因子 κ B通路介导辐射所致肾损伤的防护作用［J］. 解剖学报， 2021 ， 52 （ 4 ）： 621 - 627 .

赵大鹏，刘一灵，薛晓颖，等 . 论大黄在慢性肾衰竭中应用［J］. 辽宁中医药大学学报， 2022 ， 24 （ 1 ）： 13 - 17 .

张喜奎，王巧花，王旭丽，等 . 桃核承气汤对慢性肾衰竭大鼠的调控机制研究［J］. 亚太传统医药， 2021 ， 17 （ 11 ）： 36 - 40 .

余柯娜，麻志恒，钟利平，等 . SD大鼠与C57小鼠5/6肾切除慢性肾功能衰竭模型的比较［J］. 中国比较医学杂志， 2015 ， 25 （ 8 ）： 48 - 53 .

梁亮，王圣志，何学红 . 参芪泄浊饮对腺嘌呤致慢性肾衰大鼠模型肾组织细胞外基质表达影响［J］. 辽宁中医药大学学报， 2015 ， 17 （ 1 ）： 27 - 29 .

LI H ， FENG Y ， SUN W ， et al . Antioxidation，anti-inflammation and anti-fibrosis effect of phosphorylated polysaccharides from Pleurotus djamor mycelia on adenine-induced chronic renal failure mice ［J］. Int J Biol Macromol ， 2021 ， 170 ： 652 - 663 .

李秀文，李达丽 . 木犀草素对慢性肾衰竭大鼠的保护作用［J］. 中医药导报， 2021 ， 27 （ 3 ）： 36 - 39 .

杨梦，胡思远，李琳，等 . 基于“虚气留滞”理论探讨慢性肾衰竭“微炎症状态”的病机及中药防治进展［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 16 ）： 229 - 236 .

陈紫薇，陈明，何凯杰，等 . 5/6肾脏切除动物疾病模型的中医证候探索及扶正化瘀降浊通络方证测验［J］. 中国中医基础医学杂志， 2021 ， 7 （ 4 ）： 1 - 6 .

LAVETI D ， KUMAR M ， HEMALATHA R ， et al . Anti-inflammatory treatments for chronic diseases：A review ［J］. Inflamm Allergy Drug Targets ， 2013 ， 12 （ 5 ）： 349 - 361 .

黄玉红，王洁 . 慢性肾脏病所致微炎症状态的研究进展［J］. 右江民族医学院学报， 2021 ， 43 （ 1 ）： 128 - 133 .

高飞，王泽泽，杨冰，等 . 基于TLR4/NF- κ B信号通路探讨加味升降散对膜性肾病大鼠肾组织纤维化的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2021 ， 27 （ 6 ）： 47 - 54 .

KE Y ， DU C ， WANG X ， et al . Indoxyl sulfate induces platelet hyperactivity and contributes to chronic kidney diseaseassociated thrombosis in mice ［J］. Blood ， 2017 ， 129 （ 19 ）： 2667 - 2679 .

王冬梅，张振宇 . 慢性肾功能衰竭患者血清TNF- α 、CRP、IL-6水平的检验及临床意义分析［J］. 中国医学创新， 2021 ， 18 （ 31 ）： 163 - 166 .

沈金峰，胡良伟，胡芳，等 . 大蒜素抑制慢性肾衰竭大鼠炎症反应［J］. 广州中医药大学学报， 2022 ， 39 （ 2 ）： 375 - 381 .

刘晶，唐晓红，李孜 . C反应蛋白与肾脏疾病发病机制的研究进展［J］. 中国中西医结合肾病杂志， 2019 ， 20 （ 9 ）： 837 - 839 .

刘洋，于洋，周南，等 . 鞣花酸抑制TLR4/NF- κ B/MyD88信号通路减轻炎症反应改善肾缺血再灌注大鼠肾损伤［J］. 解剖科学进展， 2020 ， 26 （ 6 ）： 713 - 717 .

杨少华，代晓燕，周秋根 . 进展性肾病大鼠模型肾皮质能量代谢的变化及其机制［J］. 中华肾脏病杂志， 2019 ， 35 （ 5 ）： 373 - 380 .

杨柳易，王琛，王蒙，等 . 肾衰Ⅱ号方对慢性肾功能衰竭大鼠糖酵解限速酶HK2及PKM2表达的影响［J］. 中华中医药杂志， 2020 ， 35 （ 11 ）： 5807 - 5811 .

谢姗，徐兴欣 . PKM2调控的巨噬细胞糖酵解在糖尿病肾病炎症中的作用［J］. 第三军医大学学报， 2020 ， 42 （ 24 ）： 2394 - 2402 .

武勇，张敏敏 . 黑色素瘤缺乏因子2炎症小体在肾脏疾病中的研究进展［J］. 中华肾脏病杂志， 2020 ， 36 （ 6 ）： 492 - 496 .

KOMADA T ， CHUNG H ， LAU A ， et al . Macrophage uptake of necrotic cell DNA activates the AIM2 inflammasome to regulate a proinflammatory phenotype in CKD ［J］. J Am Soc Nephrol ， 2018 ， 29 （ 4 ）： 1165 - 1181 .

刘宇翔，刘文媛，胡雅玲，等 . 益肾胶囊对高糖环境下小鼠足细胞SOCS3、p-JAK2和p-STAT3表达的影响［J］. 中国中西医结合肾病杂志， 2019 ， 20 （ 10 ）： 854 - 858 .

ZHU G Q ， JEON S H ， LEE K W ， et al . Electric stimulation hyperthermia relieves inflammation via the suppressor of cytokine signaling 3-Toll like receptor 4 pathway in a prostatitis rat model ［J］. World J Mens Health ， 2020 ， 38 （ 3 ）： 359 .

HILBERATH J N ， CARLO T ， PFEFFER M A ， et al . Resolution of Toll-like receptor 4-mediated acute lung injury is linked to eicosanoids and suppressor of cytokine signaling 3 ［J］. FASEB J ， 2011 ， 25 （ 6 ）： 1827 - 1835 .

潘琳娜，樊萍，刘海云，等 . SOCS3在脂多糖诱导体外氧糖剥夺大脑皮层细胞药理性预适应中的作用［J］. 华中科技大学学报：医学版， 2020 ， 49 （ 5 ）： 550 - 555 .

唐小玲 . 基于JAK/STAT/SOCS信号通路研究芪石肾舒胶囊对糖尿病肾病大鼠的作用及机制［D］. 泸州：西南医科大学， 2020 .

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