丁香茄乙酸乙酯部位防治酒精性胃溃疡的药效评价

向西; 郭辉; 龚曼; 张阳; 代丽萍; 许二平

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20230141

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

丁香茄乙酸乙酯部位防治酒精性胃溃疡的药效评价

药理 | 更新时间：2023-05-17

- 丁香茄乙酸乙酯部位防治酒精性胃溃疡的药效评价
  增强出版
- Efficacy Evaluation of Ethyl Acetate Fraction of Ipomoea muricatum in Prevention and Treatment of Alcoholic Gastric Ulcer
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第7期页码：105-114
- 作者机构：
  
  河南中医药大学中医药科学院，药学院，郑州 450046
- 作者简介：
  
  向西，在读硕士，从事方剂的配伍规律及其机制研究，E-mail：Anor-ing@hactcm.edu.cn
  代丽萍，教授，博士生导师，从事中药品质评价与开发，E-mail：liping_dai@hactcm.edu.cn
  许二平，教授，主任医师，博士生导师，从事经典名方的配伍规律及机制研究，E-mail：xuerping0371@163.com；
- 基金信息：
  
  河南省中医药文化与管理研究项目(TCM2021013);河南省中医药科学研究专项(20-21ZY1027);全国名老中医药专家传承工作室建设项目(国中医药人教函［2022］75号);河南省高校创新团队支持计划项目(23IRTSTHN028)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230141
  中图分类号： R2-0;R33;R289;R318.14;R57
- 收稿日期：2022-11-08，
  
  网络出版日期：2023-01-12，
  
  纸质出版日期：2023-04-05
- 稿件说明：
移动端阅览
向西,郭辉,龚曼等.丁香茄乙酸乙酯部位防治酒精性胃溃疡的药效评价[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(07):105-114.

XIANG Xi,GUO Hui,GONG Man,et al.Efficacy Evaluation of Ethyl Acetate Fraction of Ipomoea muricatum in Prevention and Treatment of Alcoholic Gastric Ulcer[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(07):105-114.
向西,郭辉,龚曼等.丁香茄乙酸乙酯部位防治酒精性胃溃疡的药效评价[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(07):105-114. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230141.

XIANG Xi,GUO Hui,GONG Man,et al.Efficacy Evaluation of Ethyl Acetate Fraction of Ipomoea muricatum in Prevention and Treatment of Alcoholic Gastric Ulcer[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(07):105-114. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230141.

摘要

目的

探究丁香茄乙酸乙酯部位（IM-EA）防治酒精性胃溃疡（GU）的可行性，并采用网络药理学结合动物实验探究其发挥疗效的作用机制。

方法

将40只SD大鼠适应性喂养7 d后随机分为空白组、模型组、雷尼替丁组（2.7 mg·kg

-1

）、IM-EA低（DL，30 mg·kg

-1

）和高（DH，60 mg·kg

-1

）剂量组。预防性给药1周后，采用盐酸无水乙醇（150 mmol·L

-1

）复制酒精性GU大鼠模型，采用苏木素-伊红（HE）染色、高碘酸-希夫染色（PAS）初步评估IM-EA防治GU的疗效。根据ADMET属性筛选IM-EA先导化合物，采用SwissTarget平台获取IM-EA先导化合物的潜在作用靶标；通过DisGeNET、OMIM和GeneCards数据库收集GU疾病相关靶标，与IM-EA潜在作用靶标相映射获取IM-EA防治GU潜在作用靶标。采用STRING数据库构建靶标蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络以筛选枢纽靶标，采用DAVID平台对交集靶标进行生物功能注释以探讨IM-EA防治GU的潜在作用机制，采用Autodock Vina软件进行计算机模拟初步验证。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-

（TNF-

）、白细胞介素-6（IL-6）含量和胃组织中前列腺素E

（PGE

）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、超氧化物歧化酶（SOD）含量，采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胃组织中丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的枢纽蛋白：Jun、细胞外调节蛋白激酶（ERK）和p38的相对表达量。

结果

动物实验结果表明，与空白组比较，模型组大鼠胃组织损伤明显，胃黏液分泌显著减少。与模型组比较，各给药组大鼠胃组织溃疡面积均显著减小（

0.01），胃组织病理学状态和胃黏液分泌得到改善，IM-EA防治GU确有疗效。经ADMET性质筛选获得16个IM-EA先导化合物，映射257个IM-EA防治GU潜在作用靶标，肿瘤坏死因子（TNF）、蛋白激酶B1（Akt1）、细胞肿瘤抗原p53（TP53）、表皮生长因子受体（EGFR）和ERK等靶标为PPI网络的枢纽节点。生物功能注释和分子对接结果提示MAPK信号通路可能在IM-EA防治GU的过程中起关键作用，与VEGF信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/Akt信号通路和NF-

B信号通路在抗炎、抗氧化和损伤修复等方面协同生效。药理实验进一步验证发现，与空白组比较，模型组大鼠血清中IL-6含量极显著升高（

0.01），TNF-

具升高趋势；模型组大鼠胃组织中MMP-9含量极显著升高（

0.01），SOD含量明显降低（

0.05）。与模型组比较，IM-EA各给药组血清中TNF-

、IL-6含量、胃组织中MMP-9、PGE

含量均极显著降低（

0.01），胃组织中SOD含量极显著升高（

0.01）。与空白组比较，模型组大鼠胃组织中磷酸化（p）-p38、p-Jun、p-ERK显著上调（

0.01），p38、Jun显著上调（

0.01）；与模型组比较，IM-EA给药组胃组织中p-p38、p-Jun、p-ERK、p38则显著下调（

0.01），Jun、ERK相对表达量明显上调（

0.05）。

结论

丁香茄乙酸乙酯部位有较好的防治酒精性胃损伤的功效，可能通过MAPK通路介导抗炎、抗氧化和损伤修复等机制发挥作用。

Abstract

Objective

To investigate the feasibility of ethyl acetate fraction of

Ipomoea muricatum

（IM-EA） in the prevention and treatment of alcoholic gastric ulcer （GU） and explore its mechanism of action based on network pharmacology and experimental verification.

Method

Forty SD rats were randomly divided into a control group， a model group， a ranitidine group （2.7 mg·kg

-1

）， and low- and high-dose IM-EA groups （30，60 mg·kg

-1

） after adaptive feeding for 7 days. The GU model was replicated by hydrochloric acid in absolute ethanol （150 mmol·L

-1

） in rats after prophylactic administration for one week. Hematoxylin-eosin （HE） staining and periodic acid-Schiff （PAS） staining were used to preliminarily evaluate the efficacy of IM-EA in the prevention and treatment of GU. Lead compounds of IM-EA were screened out by ADMET， and the SwissTarget platform was used to identify the potential targets for these compounds. GU-related targets were collected through DisGeNET， OMIM， and GeneCards databases， which were mapped to potential IM-EA targets to obtain the potential targets of IM-EA against GU. The STRING database was used to construct the protein-protein interaction （PPI） network to screen the hub targets， and the DAVID platform was used to annotate the biological functions of common targets to explore the underlying mechanism of IM-EA against GU. Autodock Vina software was used for the preliminary verification of the computer simulation. The serum levels of tumor necrosis factor （TNF）-

and interleukin （IL）-6 and the content of prostaglandin E

（PGE

）， matrix metalloproteinase-9 （MMP-9）， and superoxide dismutase （SOD） in the gastric tissues were determined by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. The relative expression levels of core proteins in the mitogen-activated protein kinase （MAPK） signaling pathway， such as Jun oncoprotein， extracellular signal-regulated kinase （ERK）， and p38， in the gastric tissues were detected by Western blot.

Result

As revealed by the results of animal experiments， compared with the control group， the model group showed significantly damaged gastric tissues and reduced secretion of gastric mucus. Compared with the model group， the groups with drug intervention showed reduced ulcer areas in the gastric tissues （

0.01） and improved gastric histopathological status and gastric mucus secretion， suggesting that IM-EA was effective in the prevention and treatment of GU. Sixteen lead compounds of IM-EA were screened out by ADMET， and 257 potential targets of IM-EA against GU were obtained. The hub nodes in the PPI network included targets of TNF-

， protein kinase B1 （Akt1）， tumor protein 53 （TP53）， epidermal growth factor receptor （EGFR）， and ERK. Biological functional annotation and molecular docking results suggested that the MAPK signaling pathway potentially played a key role in the prevention and treatment of GU by IM-EA， which was synergistic with the vascular endothelial growth factor （VEGF） signaling pathway， phosphoinositide 3-kinase （PI3K）/Akt signaling pathway， and nuclear factor （NF）-

B signaling pathway in anti-inflammation， anti-oxidation， and damage repair. The pharmacological experiment results showed that compared with the control group， the model group showed increased serum IL-6 content （

0.01）， an increasing trend of TNF-

content， increased MMP-9 content in the gastric tissues （

0.01）， and decreased SOD content （

0.05）. Compared with the model group， the IM-EA groups showed decreased TNF-

and IL-6 levels in the serum and PGE

and MMP-9 levels in the gastric tissues （

0.01）， and increased SOD content in the gastric tissues （

0.01）. Compared with the control group， the model group showed up-regulated expression of p-p38， p-Jun， and p-ERK in the gastric tissues （

0.01） and up-regulated p38 and Jun （

0.01）. Compared with the model group， the IM-EA groups showed down-regulated p-p38， p-Jun， p-ERK， and p38 in the gastric tissues （

0.01） and up-regulated relative expression of Jun and ERK （

0.05）.

Conclusion

IM-EA has a remarkable effect in the prevention and treatment of alcoholic gastric injury， which may be achieved through the mechanisms of anti-inflammation， anti-oxidation， and wound repair mediated by the MAPK signaling pathway.

关键词

Keywords

references

LANAS A ， CHAN F K L . Peptic ulcer disease ［J］. Lancet ， 2017 ， 390 （ 10094 ）： 613 - 624 .

LI Z ， ZOU D ， MA X ， et al . Epidemiology of peptic ulcer disease：Endoscopic results of the systematic investigation of gastrointestinal disease in China ［J］. Am J Gastroenterol ， 2010 ， 105 （ 12 ）： 2570 - 2577 .

LAU J Y ， SUNG J ， HILL C ， et al . Systematic review of the epidemiology of complicated peptic ulcer disease：Incidence，recurrence，risk factors and mortality ［J］. Digestion ， 2011 ， 84 （ 2 ）： 102 - 113 .

FORD A C ， DELANEY B C ， FORMAN D ， et al . Eradication therapy in Helicobacter pylori positive peptic ulcer disease：Systematic review and economic analysis ［J］. Am J Gastroenterol ， 2004 ， 99 （ 9 ）： 1833 - 1855 .

LUO J ， NORDENVALL C ， NYREN O ， et al . The risk of pancreatic cancer in patients with gastric or duodenal ulcer disease ［J］. Int J Cancer ， 2007 ， 120 （ 2 ）： 368 - 372 .

EISNER F ， HERMANN D ， BAJAEIFER K ， et al . Gastric ulcer complications after the introduction of proton pump inhibitors into clinical routine：20-year experience ［J］. Visc Med ， 2017 ， 33 （ 3 ）： 221 - 226 .

BI W P ， MAN H B ， MAN M Q ， et al . Efficacy and safety of herbal medicines in treating gastric ulcer：A review ［J］. World J Gastroenterol ， 2014 ， 20 （ 45 ）： 17020 - 17028 .

白岩松，池军，张玲霞，等 . 丁香茄叶乙酸乙酯部位化学成分及抗炎活性研究［J］. 天然产物研究与开发， 2021 ， 33 （ 12 ）： 2011 - 2018 .

刘雅琳，龚曼，苏成福，等 . 丁香茄生物碱对人非小细胞肺癌体外作用及其机制研究［J］. 时珍国医国药， 2019 ， 30 （ 7 ）： 1602 - 1604 .

DAINA A ， MICHIELIN O ， ZOETE V . Swiss Target Prediction：Updated data and new features for efficient prediction of protein targets of small molecules ［J］. Nucleic Acids Res ， 2019 ， 47 （ W1 ）： 357 - 364 .

PINERO J ， BRAVO À ， QUERALT N ， et al . DisGeNET：A comprehensive platform integrating information on human disease-associated genes and variants ［J］. Nucleic Acids Res ， 2017 ， 45 （ D1 ）： 833 - 839 .

AMBERGER J S ， HAMOSH A . Searching Online Mendelian Inheritance in Man （OMIM）：A knowledgebase of human genes and genetic phenotypes ［J］. Curr Protoc Bioinformatics ， 2017 ， doi： 10.1002/cpbi.27 http://dx.doi.org/10.1002/cpbi.27 .

SAFRAN M ， DALAH I ， ALEXANDER J ， et al . GeneCards Version 3：The human gene integrator ［J］. Database （Oxford）， 2010 ， doi： 10.1093/database/baq020 http://dx.doi.org/10.1093/database/baq020 .

SOUDY M ， ANWAR A M ， AHMED E A ， et al . UniprotR：Retrieving and visualizing protein sequence and functional information from Universal Protein Resource （UniProt knowledgebase）［J］. J Proteomics ， 2020 ， doi： 10.1016/j.jprot.2019.103613 http://dx.doi.org/10.1016/j.jprot.2019.103613 .

SZKLARCZYK D ， GABLE A L ， LYON D ， et al . STRING v11：Protein-protein association networks with increased coverage，supporting functional discovery in genome-wide experimental datasets ［J］. Nucleic Acids Res ， 2019 ， 47 （ D1 ）： 607 - 613 .

OTASEK D ， MORRIS J H ， BOUCAS J ， et al . Cytoscape automation：Empowering workflow-based network analysis ［J］. Genome Biol ， 2019 ， 20 （ 1 ）： 185 .

TANG Y ， LI M ， WANG J ， et al . CytoNCA：A cytoscape plugin for centrality analysis and evaluation of protein interaction networks ［J］. Biosystems ， 2015 ， doi： 10.1016/j.biosystems http://dx.doi.org/10.1016/j.biosystems .

SHERMAN B T ， HAO M ， QIU J ， et al . DAVID：A web server for functional enrichment analysis and functional annotation of gene lists （2021 update）［J］. Nucleic Acids Res ， 2022 ， 50 （ W1 ）： 216 - 221 .

KANEHISA M ， SATO Y . KEGG Mapper for inferring cellular functions from protein sequences ［J］. Protein Sci ， 2020 ， 29 （ 1 ）： 28 - 35 .

FERMI G ， PERUTZ M F ， SHAANAN B ， et al . The crystal structure of human deoxyhaemoglobin at 1.74 A resolution ［J］. J Mol Biol ， 1984 ， 175 （ 2 ）： 159 - 174 .

TROTT O ， OLSON A J . AutoDock Vina：Improving the speed and accuracy of docking with a new scoring function，efficient optimization，and multithreading ［J］. J Comput Chem ， 2010 ， 31 （ 2 ）： 455 - 461 .

HSIN K Y ， GHOSH S ， KITANO H . Combining machine learning systems and multiple docking simulation packages to improve docking prediction reliability for network pharmacology ［J］. PLoS One ， 2013 ， 8 （ 12 ）： e83922 .

YU G ， WANG L G ， HAN Y ， et al . ClusterProfiler：An R package for comparing biological themes among gene clusters ［J］. OMICS ， 2012 ， 16 （ 5 ）： 284 - 287 .

HOSSEN M J ， CHOU J Y ， LI S M ， et al . An ethanol extract of the rhizome of atractylodes chinensis exerts anti-gastritis activities and inhibits Akt/NF- κ B signaling ［J］. J Ethnopharmacol ， 2019 ， doi： 10.1016/j.jep.2018.09.015 http://dx.doi.org/10.1016/j.jep.2018.09.015 .

魏伟，物希美，李元健 . 药理实验方法学［M］. 4版 . 北京：人民卫生出版社， 2010 ： 1113 - 1114 .

崔兵迪，郭辉，龚曼，等 . 基于Akt/NF- κ B信号通路探讨牛蒡根水提物对盐酸/乙醇诱导的急性胃溃疡大鼠的保护作用［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 29 （ 2 ）： 1 - 9 .

杨伟平，吴文乔，邹宗楷，等 . 改良PAS染色法在冷冻切片中的应用［J］. 临床与实验病理学杂志， 2018 ， 34 （ 3 ）： 343 - 344 .

SASAKI T ， IRIE-SASAKI J ， JONES R G ， et al . Function of PI3Kgamma in thymocyte development，T cell activation，and neutrophil migration ［J］. Science ， 2000 ， 287 （ 5455 ）： 1040 - 1046 .

FORLI S ， HUEY R ， PIQUE M E ， et al . Computational protein-ligand docking and virtual drug screening with the AutoDock suite ［J］. Nat Protoc ， 2016 ， 11 （ 5 ）： 905 - 919 .

SUMBUL S ， AHMAD M A ， MOHD A ， et al . Role of phenolic compounds in peptic ulcer：An overview ［J］. J Pharm Bioallied Sci ， 2011 ， 3 （ 3 ）： 361 - 367 .

DENG W ， JIN L ， ZHUO H ， et al . Alcohol consumption and risk of stomach cancer：A meta-analysis ［J］. Chem Biol Interact ， 2021 ， 336 （ 3 ）： 2709 - 2797 .

BUJANDA L . The effects of alcohol consumption upon the gastrointestinal tract ［J］. Am J Gastroenterol ， 2000 ， 95 （ 12 ）： 3374 - 3382 .

MUTOH H ， HIRAISHI H ， OTA S ， et al . Role of oxygen radicals in ethanol-induced damage to cultured gastric mucosal cells ［J］. Am J Physiol ， 1990 ， 258 （ 4 Pt 1 ）： 603 - 609 .

TURNER M D ， NEDJAI B ， HURST T ， et al . Cytokines and chemokines：At the crossroads of cell signalling and inflammatory disease ［J］. Biochim Biophys Acta ， 2014 ， 1843 （ 11 ）： 2563 - 2582 .

HOU R C ， WU C C ， HUANG J R ， et al . Oxidative toxicity in BV-2 microglia cells：sesamolin neuroprotection of H 2 O 2 injury involving activation of p38 mitogen-activated protein kinase ［J］. Ann N Y Acad Sci ， 2005 ， doi： 10.1196/annals.1338.050 http://dx.doi.org/10.1196/annals.1338.050 .

GUYTON K Z ， LIU Y ， GOROSPE M ， et al . Activation of mitogen-activated protein kinase by H 2 O 2 role in cell survival following oxidant injury ［J］. J Biol Chem ， 1996 ， 271 （ 8 ）： 4138 - 4142 .

SZELENYI I ， BRUNE K . Possible role of oxygen free radicals in ethanol-induced gastric mucosal damage in rats ［J］. Dig Dis Sci ， 1988 ， 33 （ 7 ）： 865 - 871 .

ALI A T ， AL-SWAYEH O A ， AL-RASHED R S ， et al . Role of oxygen-derived free radicals on gastric mucosal injury induced by ischemia-reperfusion ［J］. Saudi J Gastroenterol ， 1996 ， 2 （ 1 ）： 19 - 28 .

刘舒毓，王秋月，刘树民 . 黄芪赤风汤对脑梗死大鼠模型的治疗作用及对脑组织ZO-1、Claudin-5、P-gp、MRP1蛋白表达的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 6 ）： 26 - 33 .

HOEK R M ， RUULS S R ， MURPHY C A ， et al . Down-regulation of the macrophage lineage through interaction with OX2 （CD200）［J］. Science ， 2000 ， 290 （ 5497 ）： 1768 - 1771 .

HULL J ， ACKERMAN H ， ISLES K ， et al . Unusual haplotypic structure of IL-8，a susceptibility locus for a common respiratory virus ［J］. Am J Hum Genet ， 2001 ， 69 （ 2 ）： 413 - 419 .

O'BANION M K ， WINN V D ， YOUNG D A . cDNA cloning and functional activity of a glucocorticoid-regulated inflammatory cyclooxygenase ［J］. Proc Natl Acad Sci U S A ， 1992 ， 89 （ 11 ）： 4888 - 4892 .

KOMATSU N ， KAJIYA M ， MORIMOTO S ， et al . Cox2-mediated PGE2 production via p38/JNK-c-fos signaling inhibits cell apoptosis in 3D floating culture clumps of mesenchymal stem cell/extracellular matrix complexes ［J］. Biochem Biophys Res Commun ， 2020 ， 530 （ 2 ）： 448 - 454 .

TAMAZATO L M ， MAGALHÃES M ， REINA J ， et al . EGFR signaling regulates maspin/serpinB5 phosphorylation and nuclear localization in mammary epithelial cells ［J］. PLoS One ， 2016 ， 11 （ 7 ）： e0159856 .

KAWANAKA H ， TOMIKAWA M ， JONES M K ， et al . Portal hypertensive gastric mucosa has reduced activation of MAP kinase （ERK2） in response to alcohol injury：A key to impaired healing？［J］. FASEB J ， 2001 ， 15 （ 3 ）： 574 - 576 .

KAWANAKA H ， TOMIKAWA M ， JONES M K ， et al . Defective mitogen-activated protein kinase （ERK2） signaling in gastric mucosa of portal hypertensive rats：Potential therapeutic implications ［J］. Hepatology ， 2001 ， 34 （ 5 ）： 990 - 999 .

LIU J ， HAN Q ， PENG T ， et al . The oncogene c-Jun impedes somatic cell reprogramming ［J］. Nat Cell Biol ， 2015 ， 17 （ 7 ）： 856 - 867 .

SHEN J N ， XU L X ， SHAN L ， et al . Neuroprotection of （+）-2-（1-hydroxyl-4-oxocyclohexyl） ethyl caffeate against hydrogen peroxide and lipopolysaccharide induced injury via modulating arachidonic acid network and p38 MAPK signaling ［J］. Curr Alzheimer Res ， 2015 ， 12 （ 9 ）： 892 - 902 .

郑凯露，唐梅，邓海东，等 . 咖啡酸苯乙酯衍生物PEC01抗小鼠G422神经胶质瘤药效学作用及其机制［J］. 药学学报， 2022 ， 57 （ 4 ）： 1063 - 1072 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

基于入血成分探讨铁皮石斛防治非酒精性脂肪性肝病的作用机制

基于蛋白质组学和网络药理学探讨小儿化痰止咳颗粒治疗过敏性咳嗽的作用机制

探讨开心散改善阿尔茨海默病的作用机制

基于网络药理学和实验验证探讨阿里红治疗阿尔茨海默病的作用机制

芪苓温肾消囊方化学成分及其治疗多囊卵巢综合征的作用机制分析