秦艽、威灵仙组分配伍对类风湿关节炎模型大鼠血清炎症因子及踝关节NF-<italic style="font-style: italic">κ</italic>B、VEGF表达的影响

郭从嘉; 吴国泰; 高慧琴; 郑丽霞; 李飒; 王丽明; 郝倩莹

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20230441

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秦艽、威灵仙组分配伍对类风湿关节炎模型大鼠血清炎症因子及踝关节NF-κB、VEGF表达的影响

配伍 | 更新时间：2023-04-28

- 秦艽、威灵仙组分配伍对类风湿关节炎模型大鼠血清炎症因子及踝关节NF-κB、VEGF表达的影响
- Effect of Component Compatibility of Gentianae Macrophyllae Radix and Clematidis Radix et Rhizoma on Serum Inflammatory Factors and Expression of NF-κB and VEGF in Ankle Joint of Rats with Rheumatoid Arthritis
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第11期页码：53-63
- 作者机构：
  
  甘肃中医药大学药学院，兰州 730101
- 作者简介：
  
  郭从嘉，硕士，从事中药及复方临床应用研究，E-mail：bx17639856157@163.com
  高慧琴，教授，硕士生导师，从事中药基础理论及临床应用研究，E-mail：2739137732@qq.com
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金地区基金项目(81960725)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230441
  中图分类号： R2-0;R33;R289;R593.22
- 收稿日期：2023-01-12，
  
  网络出版日期：2023-03-15，
  
  纸质出版日期：2023-06-05
- 稿件说明：
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郭从嘉,吴国泰,高慧琴等.秦艽、威灵仙组分配伍对类风湿关节炎模型大鼠血清炎症因子及踝关节NF-κB、VEGF表达的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(11):53-63.

GUO Congjia,WU Guotai,GAO Huiqin,et al.Effect of Component Compatibility of Gentianae Macrophyllae Radix and Clematidis Radix et Rhizoma on Serum Inflammatory Factors and Expression of NF-κB and VEGF in Ankle Joint of Rats with Rheumatoid Arthritis[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(11):53-63.
郭从嘉,吴国泰,高慧琴等.秦艽、威灵仙组分配伍对类风湿关节炎模型大鼠血清炎症因子及踝关节NF-κB、VEGF表达的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(11):53-63. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230441.

GUO Congjia,WU Guotai,GAO Huiqin,et al.Effect of Component Compatibility of Gentianae Macrophyllae Radix and Clematidis Radix et Rhizoma on Serum Inflammatory Factors and Expression of NF-κB and VEGF in Ankle Joint of Rats with Rheumatoid Arthritis[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(11):53-63. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230441.

摘要

目的

探讨秦艽、威灵仙组分配伍对类风湿关节炎（RA）模型大鼠的抗炎效果及作用机制。

方法

选取5~6周龄SPF级SD大鼠72只，雌雄各半。除空白组外，均采用Ⅱ型胶原诱导法复制胶原诱导型关节炎大鼠模型（CIA）。将造模成功的64只大鼠按随机数字表法分为模型组、甲氨蝶呤组（0.375 mg·kg

-1

）、龙胆苦苷配伍木兰花碱组（150.454 1 mg·kg

-1

+5.061 8 mg·kg

-1

）、龙胆苦苷配伍灵仙新苷组（150.454 1 mg·kg

-1

+16.433 1 mg·kg

-1

）、獐牙菜苷配伍木兰花碱组（3.455 8 mg·kg

-1

+5.061 8 mg·kg

-1

）、獐牙菜苷配伍灵仙新苷组（3.455 8 mg·kg

-1

+16.433 1 mg·kg

-1

）、獐牙菜苦苷配伍木兰花碱组（9.303 2 mg·kg

-1

+5.061 8 mg·kg

-1

）、獐牙菜苦苷配伍灵仙新苷组（9.303 2 mg·kg

-1

+16.433 1 mg·kg

-1

），每组8只，共9组。各组分别给予相应药液或生理盐水灌胃，连续给药15 d。实验中观察并记录各组大鼠一般状态；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清肿瘤坏死因子-

（TNF-

）、白细胞介素-1

（IL-1

）、类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）、前列腺素E

（PGE

）、抗环瓜氨酸肽抗体（anti-CCP Ab）含量；苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠踝关节组织病理学变化；免疫组化法（IHC）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠踝关节核转录因子-

B（NF-

B）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白含量；实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测大鼠踝关节NF-

B、VEGF的mRNA表达。

结果

与空白组比较，模型组大鼠一般状态较差，足跖肿胀显著；血清CRP、anti-CCP Ab、IL-1

含量显著升高（

0.01）；踝关节组织结构破坏严重；踝关节NF-

B、VEGF蛋白及mRNA表达显著上调（

0.01）。与模型组比较，各给药组大鼠一般状态明显改善；血清TNF-

α、

IL-1

、RF、CRP、PGE

及anti-CCP Ab的含量均不同程度降低，其中龙胆苦苷配伍灵仙新苷降低TNF-

与IL-1

、龙胆苦苷配伍木兰花碱降低RF与CRP、獐牙菜苦苷配伍木兰花碱降低PGE

、獐牙菜苷配伍灵仙新苷降低anti-CCP Ab的效果优于其他组分配伍；踝关节组织病理变化均有不同程度改善；踝关节NF-

B、VEGF蛋白及mRNA表达明显下调（

0.05，

0.01），其中獐牙菜苦苷配伍灵仙新苷下调蛋白及mRNA表达作用最为显著。

结论

秦艽、威灵仙组分配伍对RA模型大鼠能起到良好的治疗作用，二药组分配伍具有多途径、多靶点协同增效的作用，其中龙胆苦苷配伍木兰花碱、龙胆苦苷配伍灵仙新苷、獐牙菜苷配伍灵仙新苷、獐牙菜苦苷配伍木兰花碱及獐牙菜苦苷配伍灵仙新苷5种组分配伍模式具有潜在优势。其作用机制可能是通过降低炎性因子分泌及抑制NF-

B、VEGF蛋白和mRNA的异常表达而发挥作用。

Abstract

Objective

To investigate the anti-inflammatory effect of the component compatibility of Gentianae Macrophyllae Radix and Clematidis Radix et Rhizoma on the rat model of rheumatoid arthritis （RA） and the mechanism.

Method

Seventy-two SPF-grade SD rats （male and female） aged 5 to 6 weeks were selected. Except the blank group， the rat model of collagen-induced arthritis （CIA） was replicated by the type Ⅱ collagen induction method. The 64 rats after successfully modeling were randomly divided into model group， methotrexate group （0.375 mg·kg

-1

）， gentianoside with magnoflorine group （150.454 1 mg·kg

-1

+5.061 8 mg·kg

-1

）， gentianoside with clematichinenoside AR group （150.454 1 mg·kg

-1

+16.433 1 mg·kg

-1

）， sweroside with magnoflorine group （3.455 8 mg·kg

-1

+5.061 8 mg·kg

-1

）， sweroside with clematichinenoside AR group （3.455 8 mg·kg

-1

+16.433 1 mg·kg

-1

）， swertiamarin with magnoflorine group （9.303 2 mg·kg

-1

+5.061 8 mg·kg

-1

）， and swertiamarin with clematichinenoside AR group （9.303 2 mg·kg

-1

+16.433 1 mg·kg

-1

）， with 8 rats in each group. Each group was given the corresponding medicinal solution or normal saline by gavage for 15 d. During the experiment， the general status， of rats in each group were observed and recorded. Tumor necrosis factor-

（TNF-

）， interleukin-1

（IL-1

）， rheumatoid factor （RF）， C reactive protein （CRP）， prostaglandin E

（PGE

）， and anti-cyclic peptide containing citrulline antibody （anti-CCP Ab） in the serum of rats were measured by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. The histopathological changes in rat ankle joints were observed by hematoxylin-eosin （HE） staining. Immunohistochemistry （IHC） and Western blot were used to detect the protein expression of nuclear factor-

B （NF-

B） and vascular endothelial growth factor （VEGF） in rat ankle joints. Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR） was used to detect the mRNA expression of NF-

B and VEGF in rat ankle joints.

Result

Compared with those in the blank group， rats in the model group were in poor general conditions with significant foot-plantar swelling， and the content of CRP， anti-CCP Ab， and IL-1

in the rat serum was significantly increased （

0.01）. In the model group， the tissue structure of the ankle joint was severely damaged， and the protein and mRNA expression of NF-

B and VEGF in the rat ankle joints were significantly up-regulated （

0.01）. As compared with the model group， the general status of rats in each administration group was significantly improved. The levels of serum TNF-

， IL-1

， RF， CRP， PGE

， and anti-CCP Ab were reduced to different degrees in these administration groups， among which the effects of the gentianoside with clematichinenoside AR group on down-regulating serum TNF-

and IL-1

， the gentianoside with magnoflorine group on down-regulating serum RF and CRP， the sweroside with magnoflorine group on down-regulating serum PGE

， and the swertiamarin with clematichinenoside AR group on lowering serum anti-CCP Ab were better than those of administration groups. The histopathological changes in the ankle joint were improved to different degrees. The protein and mRNA expression of NF-

B and VEGF in rat ankle joints in the administration groups was significantly down-regulated （

0.05，

0.01）， and the swertiamarin paired with clematichinenoside AR group had the most significant effect.

Conclusion

The component compatibility of Gentianae Macrophyllae Radix and Clematidis Radix et Rhizoma exerts a good therapeutic effect on the rat model of RA， and the compatibility of components from the two medicines has a multi-channel， multi-target， and synergistic effect. The five component compatibility patterns， namely gentiobioside with magnoflorine， gentiobioside with clematichinenoside AR， sweroside with clematichinenoside AR， swertiamarin with magnoflorine， and swertiamarin with clematichinenoside AR， all have potential advantages. The mechanism may be related to the reduction of inflammatory factor secretion and the inhibition of abnormal protein and mRNA expression of NF-

B and VEGF.

关键词

Keywords

references

蒋明 . 中华风湿病学［M］. 北京：华夏出版社， 2004 ， 697 - 771 .

龚雪，汪元 . 类风湿关节炎中医病因病机研究进展［J］. 风湿病与关节炎， 2020 ， 9 （ 6 ）： 62 - 65 .

张伯礼，王永炎 . 方剂关键科学问题的基础研究-以组分配伍研制现代中药［J］. 中国天然药物， 2005 ， 3 （ 5 ）： 258 - 261 .

张俊华，樊官伟，张晗，等 . 组分中药理论的发展与应用［J］. 中国中药杂志， 2017 ， 42 （ 21 ）： 4054 - 4058 .

吴笛，云雪林，李可 . 方剂配伍新模式浅议［J］. 中国药业， 2017 ， 26 （ 19 ）： 90 - 92 .

胡彦君，王雅琪，王勇平，等 . 中药药效组分群筛选配伍思路及质控模式探讨［J］. 中草药， 2016 ， 47 （ 17 ）： 2965 - 2971 .

阚玉娜，谢佳明，马立威，等 . 中药活性成分改善类风湿性关节炎作用机制研究进展［J］. 辽宁中医药大学学报， 2021 ， 23 （ 10 ）： 139 - 145 .

高学敏 . 中药学［M］. 北京：中国中医药出版社， 2007 ： 173 ， 186 .

杨飞霞，王玉，夏鹏飞，等 . 秦艽化学成分和药理作用研究进展及质量标志物（Q-marker）的预测分析［J］. 中草药， 2020 ， 51 （ 10 ）： 2718 - 2731 .

张慧娟，李菊，马晓慧，等 . 裂环环烯醚萜苷类化合物的药理作用研究进展［J］. 药学研究， 2018 ， 37 （ 11 ）： 659 - 663 .

郑佳逸，辛贵忠，刘丽芳 . 威灵仙中的三萜皂苷类成分及其抗关节炎作用机制的研究进展［J］. 中国野生植物资源， 2018 ， 37 （ 5 ）： 39 - 48 .

付强，王萍，杜宇凤，等 . 威灵仙化学成分及其药理活性最新研究进展［J］. 成都大学学报：自然科学版， 2018 ， 37 （ 2 ）： 113 - 119 .

马腾茂，强宇靖，罗奎元，等 . 秦艽不同配伍药对对风寒湿痹类风湿关节炎模型大鼠血清炎性因子及踝关节病理学改变的影响［J］. 中国全科医学， 2017 ， 20 （ 15 ）： 1878 - 1883 .

马腾茂，刘飞，王蓉，等 . 秦艽不同配伍药对对风湿热痹类风湿性关节炎模型大鼠镇痛作用及血清TNF- α、 IL-1 β 、PGE 2 的影响［J］. 辽宁中医杂志， 2017 ， 44 （ 11 ）： 2423 - 2426 .

王蓉，苏杉，马腾茂，等 . 秦艽不同配伍药对对风湿热痹型RA大鼠踝关节VEGF表达及病理学的影响［J］. 中药新药与临床药理， 2018 ， 29 （ 2 ）： 136 - 142 .

苏杉，王蓉，赵敏，等 . 秦艽不同配伍对风寒湿痹类风湿关节炎大鼠类风湿因子，C-反应蛋白及核转录因子- κ B的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2018 ， 24 （ 19 ）： 159 - 165 .

苏杉，王蓉，赵敏，等 . 秦艽不同配伍对风寒湿痹模型大鼠MMP-3及TIMP-1的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 （ 3 ）： 8 - 14 .

苏杉，王蓉，赵敏，等 . 秦艽不同配伍药对对风寒湿痹型类风湿关节炎大鼠踝关节核因子 κ B、血管内皮生长因子表达及病理学改变的影响［J］. 辽宁中医杂志， 2020 ， 47 （ 3 ）：179-182， 223 - 224 .

吴晨，魏昀，葛珊，等 . 獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞促凋亡作用及Bcl-2表达情况的影响［J］. 中国中药杂志， 2021 ， 46 （ 2 ）： 406 - 411 .

葛珊，魏昀，吴晨，等 . 秦艽、威灵仙主要成分龙胆苦苷、木兰花碱对RA模型大鼠抗炎作用机制研究［J］. 中药药理与临床， 2022 ， 38 （ 4 ）： 62 - 67 .

葛珊，郑丽霞，李飒，等 . 龙胆苦苷、木兰花碱对RA模型大鼠踝关节组织病理学及血清PGE 2 、Bcl-2水平的影响［J］. 中兽医医药杂志， 2022 ， 41 （ 6 ）： 19 - 24，2 .

顾正位，冯帅，蒋海强，等 . 木瓜醇提物对大鼠类风湿性关节炎模型关节炎症及滑膜细胞凋亡的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 18 ）： 45 - 50 .

马天越，方宜梅，郭甘霖，等 . 二四汤对牛Ⅱ型胶原诱导大鼠类风湿关节炎的干预机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 5 ）： 38 - 45 .

马茹，郭子嘉，陶庆文，等 . 治尪汤联合甲氨蝶呤调节RANKL/OPG通路改善胶原诱导关节炎大鼠骨破坏的作用机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 5 ）： 46 - 54 .

张华燕，何援军 . 薯蓣皂苷元改善类风湿关节炎模型大鼠关节肿胀的效果及作用机制研究［J］. 中医正骨， 2021 ， 33 （ 4 ）： 44 - 50 .

王亮亮，姚书东，沈芳 . 类风湿关节炎血清前列腺素E2与疾病活动度的相关性研究［J］. 现代实用医学， 2021 ， 33 （ 7 ）： 924 - 926 .

任焕民，刘晓良 . RF、AKA、CRP、CCP和ANA五项检测诊断类风湿性关节炎的临床意义［J］. 河北医学， 2016 ， 22 （ 12 ）： 1943 - 1945 .

罗帅，李小枫，黄成，等 . 炎症因子在类风湿关节炎中的研究进展［J］. 中国药理学通报， 2022 ， 38 （ 3 ）： 330 - 338 .

李茜，梁晓东，唐迎雪 . 马钱子苏木有效组分配伍对RA血瘀证模型大鼠炎症和血管内皮损伤的影响［J］. 山东中医杂志， 2018 ， 37 （ 2 ）： 148 - 155 .

王美灵，张雷明，郝妍斐，等 . 龙胆苦苷对类风湿性关节炎的保护作用及其机制［J］. 中国药理学与毒理学杂志， 2019 ， 33 （ 9 ）： 721 .

ZHANG R ， WANG C M ， JIANG H J ， et al . Protective effects of sweroside on IL-1 β -induced inflammation in rat articular chondrocytes through suppression of NF- κ B and mTORC1 signaling pathway ［J］. Inflammation ， 2019 ， 42 （ 2 ）： 496 - 505 .

王新强，吴良邦，章月红，等 . 獐牙菜苦苷通过抑制NF- κ B、NLRP炎症小体信号通路发挥对佐剂性关节炎大鼠的保护作用［J］. 药物生物技术， 2021 ， 28 （ 2 ）： 123 - 128 .

SARAVANAN S ， ISLAM V I ， BABU N P ， et al . Swertiamarin attenuates inflammation mediators via modulating NF- κ B/I κ B and JAK2/STAT3 transcription factors in adjuvant induced arthritis ［J］. Eur J Pharm Sci ， 2014 ， 56 ： 70 - 86 .

崔杰 . 基于LncRNA-mRNA芯片技术的类叶牡丹抗类风湿性关节炎作用的机制研究［D］. 哈尔滨：黑龙江中医药大学， 2018 .

XIONG Y ， MA Y ， KODITHUWAKKU N D ， et al . Protective effects of Clematichinenoside AR against inflammation and cytotoxicity induced by human tumor necrosis factor- α ［J］. Int Immunopharmacol ， 2019 ， 75 ： 105563 .

董建斌，李金田，张毅，等 . 核因子 κ B与过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 在类风湿性关节炎发病机制中的研究进展［J］. 中国当代医药， 2020 ， 27 （ 10 ）： 24 - 27 .

毕文慧，刘暘 . VEGF在类风湿关节炎发生、发展及治疗中的研究进展［J］. 内蒙古医科大学学报， 2019 ， 41 （ 2 ）： 211 - 214 .

王志平，崔轶凡，甘涛，等 . 膈下逐瘀汤对EMT气滞血瘀型大鼠NF- κ B信号通路及其下游因子的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 22 ）： 23 - 32 .

TANIGUCHI K ， KARIN M . NF- κ B， inflammation， immunity and cancer：Coming of age ［J］. Nat Rev Immunol ， 2018 ， 18 （ 5 ）： 309 - 324 .

LIU M ， XU W ， SU M ， et al . REC8 suppresses tumor angiogenesis by inhibition of NF- κ B-mediated vascular endothelial growth factor expression in gastric cancer cells ［J］. Biol Res ， 2020 ， 53 （ 1 ）： 41 .

冯为 . 高迁移率族蛋白B1、基质金属蛋白酶-9及血管内皮生长因子在肺癌患者组织中的表达及临床意义研究［J］. 中国实验诊断学， 2021 ， 25 （ 2 ）： 185 - 187 .

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