基于线粒体功能揭示《黄帝内经》“七七”理论内涵及高龄IVF-ET患者的中药干预机制

贾志诚; 郭颖; 赖昊; 连方; 高海霞; 李永谦

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20231690

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基于线粒体功能揭示《黄帝内经》“七七”理论内涵及高龄IVF-ET患者的中药干预机制

临床 | 更新时间：2023-05-16

- 基于线粒体功能揭示《黄帝内经》“七七”理论内涵及高龄IVF-ET患者的中药干预机制
- Mitochondrial Function Reveals Connotation of "Seven-Seven" Theory of Huangdi's Internal Classic and Mechanism of Herbal Intervention for Elderly Women Undergoing IVF-ET
- 中国实验方剂学杂志 2023年29卷第12期页码：128-134
- 作者机构：
  
  1.山东中医药大学第一临床医学院，济南 250014
  2.山东中医药大学附属医院，济南 250011
  3.山东中医药大学中医学院，济南 250014
- 作者简介：
  
  贾志诚，硕士，从事中医药在辅助生殖领域的研究，E-mail：doctorjzc@163.com
  郭颖，博士，副主任医师，从事中医药在辅助生殖领域的研究，E-mail：71000916@sdutcm.edu.cn
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金项目(81804130);山东省“泰山青年学者”计划项目(tsqn202211353);济南市科技计划项目(202225005)
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231690
  中图分类号： R242;R2-031;R287;R271.14
- 收稿日期：2023-01-21，
  
  网络出版日期：2023-04-21，
  
  纸质出版日期：2023-06-20
- 稿件说明：
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贾志诚,郭颖,赖昊等.基于线粒体功能揭示《黄帝内经》“七七”理论内涵及高龄IVF-ET患者的中药干预机制[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(12):128-134.

JIA Zhicheng,GUO Ying,LAI Hao,et al.Mitochondrial Function Reveals Connotation of "Seven-Seven" Theory of Huangdi's Internal Classic and Mechanism of Herbal Intervention for Elderly Women Undergoing IVF-ET[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(12):128-134.
贾志诚,郭颖,赖昊等.基于线粒体功能揭示《黄帝内经》“七七”理论内涵及高龄IVF-ET患者的中药干预机制[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(12):128-134. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231690.

JIA Zhicheng,GUO Ying,LAI Hao,et al.Mitochondrial Function Reveals Connotation of "Seven-Seven" Theory of Huangdi's Internal Classic and Mechanism of Herbal Intervention for Elderly Women Undergoing IVF-ET[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(12):128-134. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231690.

摘要

目的

研究不同年龄阶段女性卵巢颗粒细胞线粒体功能的变化及补肾中药二至天癸方对高龄妇女体外受精-胚胎移植技术（IVF-ET）结局的影响，从而验证《黄帝内经》“七七”理论的科学内涵。

方法

收集山东中医药大学附属医院中西医结合生殖与遗传中心行辅助生殖技术的不孕症患者150例，按照《黄帝内经》“七七”理论分为三七、四七组（30例），五七组（60例）和六七组（60例），五七组和六七组采用随机数字+信封法分为对照组和中药组各30例，中药组自促排卵周期启动日给予二至天癸方至扳机日。观察各组之间的IVF结局，使用蛋白免疫印迹法（Western blot）测定各组卵巢颗粒细胞中线粒体融合蛋白1（Mfn1）、线粒体融合蛋白2（Mfn2），线粒体分裂蛋白1（Drp1）的含量。

结果

与三七、四七组比较，五七对照组和六七对照组患者获卵数、双原核（2PN）数、可用胚胎数、优质胚胎数、临床妊娠率和活产率均明显下降（

0.05），六七对照组鲜胚移植率明显下降（

0.05）。与五七对照组比较，六七对照组患者患者获卵数、2PN数、可用胚胎数、优质胚胎数和临床妊娠率均明显下降（

0.05）。与五七对照组比较，五七中药组患者获卵数、2PN数、可用胚胎数明显升高（

0.05）；与六七对照组比较，六七中药组患者获卵数明显升高（

0.05）。与三七、四七组比较，五七和六七对照组患者卵巢颗粒细胞中Mfn1和Mfn2蛋白表达明显降低，Drp1蛋白表达升高（

0.05）；与五七对照组比较，六七对照组患者卵巢颗粒细胞中Mfn1和Mfn2蛋白表达明显降低，Drp1蛋白表达升高（

0.05）。与五七对照组比较，五七中药组患者卵巢颗粒细胞中Mfn2蛋白表达升高，Drp1蛋白表达降低（

0.05）；与六七对照组比较，六七中药组患者卵巢颗粒细胞中Mfn1和Mfn2蛋白表达升高，Drp1蛋白表达降低（

0.05）。

结论

随着年龄的增长，女性在“五七”后IVF结局预后变差，卵巢颗粒细胞中线粒体融合能力下降，而裂变增多，从线粒体功能验证了《黄帝内经》“七七”理论的内涵。二至天癸方可以调节高龄女性的卵巢颗粒细胞线粒体功能，提高Mfn1、Mfn2表达水平，促进线粒体融合，抑制Drp1而减少线粒体分裂，缓解年龄带来的卵巢功能减退，提高卵母细胞发育潜能，改善高龄女性的IVF结局，但对于“六七”之年的超高龄女性临床效果欠佳。

Abstract

Objective

To study the changes of mitochondrial function of ovarian granulosa cells in women of different ages and the effect of Erzhi-Tiangui prescription on

in vitro

fertilization-embryo transfer （IVF-ET） outcomes for elderly women， so as to verify the connotation of the "Seven-Seven" theory in the

Huangdi's Internal Classic

（《黄帝内经》）.

Method

A total of 150 infertility patients undergoing IVF-ET at the Reproductive and Genetic Center of Integrative Medicine， Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine were recruited and assigned into "hree-Seven/Four-Seven （30 cases）， Five-Seven （60 cases）， and Six-Seven （60 cases） groups according to the "Seven-Seven" theory

The Five-Seven and Six-Seven groups were further assigned into control and Chinese medicine subgroups using the random number plus envelope method， and the Chinese medicine group was administrated with Erzhi Tiangui prescription from the start day of controlled ovulation stimulation cycle to the trigger day. The IVF outcome was observed， and Western blot was employed to determine the levels of mitofusin 1 （MFN1）， mitofusin 2 （MFN2）， and dynamin-related protein 1 （Drp1） in the ovarian granulosa cells.

Result

Compared with the Three-Seven/Four-Seven group， the control subgroups of the Five-Seven and Six-Seven groups showed decreased retrieved oocytes， two pronuclear （2PN） embryos， available embryos， high-quality embryos， clinical pregnancy rate， and live birth rate （

0.05）. Moreover， the control subgroup of the Six-Seven group showed decreased fresh embryo transfer rate（

0.05）. Compared with the control subgroup of the Five-Seven group， that of the Six-Seven group showed reduced retrieved oocytes， 2PN embryos， available embryos， high-quality embryos， and clinical pregnancy rate （

0.05）. The Chinese medicine subgroup had more retrieved oocytes， 2PN oocytes， and available embryos than the control subgroup in the Five-Seven groups （

0.05）. The Chinese medicine subgroup had more retrieved oocytes， than the control subgroup in the Six-Seven groups （

0.05）. The control subgroup of the Six-Seven group showed lower expression levels of Mfn1 and Mfn2 and higher level of Drp1 than the control subgroup of the Five-Seven group （

0.05）， which indicated that the levels of Mfn1 and Mfn2 in ovarian granulosa cells were down-regulated while the expression of Drp1 was up-regulated with aging （

0.05）. The Chinese medicine subgroup had higher Mfn2 level and lower Drp1 level than the control subgroup in the Five-Seven group （

0.05）， and the Chinese medicine subgroup had higher Mfn1 and Mfn2 levels and lower Drp1 level than then control subgroup in the Six-Seven group （

0.05）.

Conclusions

The prognosis of IVF in women after "Five-Seven" became worse with aging， and the mitochondria in ovarian granulosa cells showed decreased fusion ability and increased fission， which verified the connotation of the "Seven-Seven" theory from the mitochondrial function. Erzhi Tiangui prescription can regulate the mitochondrial function of ovarian granulosa cells in elderly women， up-regulate the expression levels of Mfn1 and Mfn2 to promote mitochondrial fusion， and down-regulate the expression of Drp1 to reduce mitochondrial fission， thus alleviating the ovarian hypofunction caused by aging， improve the development potential of oocytes， and improve the IVF outcomes of elderly women. However， this prescription has limited efficacy for the elderly women in the age range of "Six-Seven".

关键词

Keywords

references

JING W ， LIU J ， MA Q ， et al . Fertility intentions to have a second or third child under China's three-child policy：A national cross-sectional study ［J］. Hum Reprod ， 2022 ， 37 （ 8 ）： 1907 - 1918 .

蒋励，陈耀龙，罗旭飞，等 . 中国高龄不孕女性辅助生殖临床实践指南［J］. 中国循证医学杂志， 2019 ， 19 （ 3 ）： 253 - 270 .

UBALDI F M ， CIMADOMO D ， VAIARELLI A ， et al . Advanced maternal age in IVF：Still a challenge？ The present and the future of its treatment ［J］. Front Endocrinol （Lausanne）， 2019 ， 10 ： 94 .

李今庸 . 《素问》“女子七七”、“男子八八”解［J］. 湖北中医杂志， 1982 （ 1 ）： 31 .

CHIANG J L ， SHUKLA P ， PAGIDAS K ， et al . Mitochondria in ovarian aging and reproductive longevity ［J］. Ageing Res Rev ， 2020 ， 63 ： 101168 .

LIU J ， WANG L ， GE L ， et al . Lanthanum decreased VAPB-PTPP51，BAP31-FIS1，and MFN2-MFN1 expression of mitochondria-associated membranes and induced abnormal autophagy in rat hippocampus ［J］. Food Chem Toxicol ， 2022 ， 161 ： 112831 .

VANDER BORGHT M ， WYNS C . Fertility and infertility：Definition and epidemiology ［J］. Clin Biochem ， 2018 ， 62 ： 2 - 10 .

郑筱萸 . 中药新药临床研究指导原则［M］. 北京：中国医药科技出版社， 2002 .

沈自尹，王文健 . 中医虚证辨证参考标准［J］. 中西医结合杂志， 1986 （ 10 ）： 598 .

BRAAKHEKKE M ， KAMPHUIS E I ， DANCET E A ， et al . Ongoing pregnancy qualifies best as the primary outcome measure of choice in trials in reproductive medicine：An opinion paper ［J］. Fertil Steril ， 2014 ， 101 （ 5 ）： 1203 - 1204 .

The Istanbul consensus workshop on embryo assessment：Proceedings of an expert meeting ［J］. Hum Reprod ， 2011 ， 26 （ 6 ）： 1270 - 1283 .

刘道英，张建伟 . 反复种植失败诊断标准的研究进展［J］. 国际生殖健康/计划生育杂志， 2019 ， 38 （ 5 ）： 397 - 400 .

徐苓，宋亦军 . 卵巢早衰的临床表现和诊断标准［J］. 实用妇产科杂志， 2003 ， 19 （ 4 ）： 195 - 196 .

宋颖，李蓉 . 多囊卵巢综合征中国诊疗指南解读［J］. 实用妇产科杂志， 2018 ， 34 （ 10 ）： 737 - 741 .

No authors listed . Infertility workup for the women's health specialist：ACOG committee opinion，Number 781 ［J］. Obstet Gynecol ， 2019 ， 133 （ 6 ）： e377 - e384 .

陈瑛，郁琦 . 年龄与卵巢功能——对卵巢衰老的认识［J］. 中国实用妇科与产科杂志， 2017 ， 33 （ 1 ）： 68 - 70 .

连方 . 不孕症中医文献的研究［D］. 济南：山东中医药大学， 2002 .

孙振高，张兴兴，宋景艳，等 . 基于卵泡液代谢组学的《黄帝内经》“七七理论”临床研究［J］. 中国中西医结合杂志， 2018 ， 38 （ 10 ）： 1168 - 1173 .

罗元恺 . 肾气·天癸·冲任的探讨及其与妇科的关系［J］. 上海中医药杂志， 1983 （ 1 ）： 11 - 13 .

王艺绚，庞聪慧，吴海萃，等 . 基于sPD-1和Th17/Treg相关细胞因子探讨二至天癸方辨治肾虚型反复种植失败的疗效和机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2023 ， 29 （ 7 ）： 139 - 145 .

李然，郭颖 . 基于网络药理学及分子对接探讨二至天癸方治疗女性不孕症的作用机制［J］. 中国药理学通报， 2022 ， 38 （ 1 ）： 126 - 133 .

EIJKEMANS M J ， VAN POPPEL F ， HABBEMA D F ， et al . Too old to have children？ Lessons from natural fertility populations ［J］. Hum Reprod ， 2014 ， 29 （ 6 ）： 1304 - 1312 .

柴国路，许培，陈兢思，等 . 高龄产妇妊娠并发症及妊娠结局分析［J］. 中国妇产科临床杂志， 2019 ， 20 （ 6 ）： 506 - 509 .

史薇，刘敏，王智超，等 . 补肾养血活血类中药复方调控线粒体稳态治疗卵巢功能减退类疾病的研究进展［J］. 中国实验方剂学杂志， 2023 ， 29 （ 1 ）： 240 - 249 .

ZHANG M ， BENER M B ， JIANG Z ， et al . Mitofusin 1 is required for female fertility and to maintain ovarian follicular reserve ［J］. Cell Death Dis ， 2019 ， 10 （ 8 ）： 560 .

CARVALHO K F ， MACHADO T S ， GARCIA B M ， et al . Mitofusin 1 is required for oocyte growth and communication with follicular somatic cells ［J］. FASEB J ， 2020 ， 34 （ 6 ）： 7644 - 7660 .

CHEN W ， XU X ， WANG L ， et al . Low Expression of Mfn2 is associated with mitochondrial damage and apoptosis of ovarian tissues in the premature ovarian failure model ［J］. PLoS One ， 2015 ， 10 （ 9 ）： e0136421 .

ZHAO N ， ZHANG Y ， LIU Q ， et al . Mfn2 affects embryo development via mitochondrial dysfunction and apoptosis ［J］. PLoS One ， 2015 ， 10 （ 5 ）： e0125680 .

TILOKANI L ， NAGASHIMA S ， PAUPE V ， et al . Mitochondrial dynamics：Overview of molecular mechanisms ［J］. Essays Biochem ， 2018 ， 62 （ 3 ）： 341 - 360 .

KANDIMALLA R ， MANCZAK M ， PRADEEPKIRAN J A ， et al . A partial reduction of Drp1 improves cognitive behavior and enhances mitophagy，autophagy and dendritic spines in a transgenic Tau mouse model of Alzheimer disease ［J］. Hum Mol Genet ， 2022 ， 31 （ 11 ）： 1788 - 1805 .

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