Mechanisms of Jianpi Yangzheng Xiaozheng Prescription in Regulating USP51 to Inhibit Progression of Poorly Cohesive Gastric Carcinoma

LIN Sitian; LIU Yuanjie; YIN Yi; LIU Shenlin; ZOU Xi

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20251924

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Mechanisms of Jianpi Yangzheng Xiaozheng Prescription in Regulating USP51 to Inhibit Progression of Poorly Cohesive Gastric Carcinoma

更新时间：2026-04-30

- Mechanisms of Jianpi Yangzheng Xiaozheng Prescription in Regulating USP51 to Inhibit Progression of Poorly Cohesive Gastric Carcinoma
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 32, Issue 11, Pages: 97-111(2026)
- 作者机构：
  
  南京中医药大学附属医院，南京 210029
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20251924
  CLC： R256;R735;R285
- Received：14 June 2025，
  
  Revised：2025-08-30，
  
  Accepted：05 September 2025，
  
  Online First：12 September 2025，
  
  Published：05 June 2026
- 稿件说明：
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林思湉,刘元杰,殷艺等.健脾养正消癥方调控USP51抑制低黏附性胃癌进展的机制[J].中国实验方剂学杂志,2026,32(11):97-111.

LIN Sitian,LIU Yuanjie,YIN Yi,et al.Mechanisms of Jianpi Yangzheng Xiaozheng Prescription in Regulating USP51 to Inhibit Progression of Poorly Cohesive Gastric Carcinoma[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2026,32(11):97-111.
林思湉,刘元杰,殷艺等.健脾养正消癥方调控USP51抑制低黏附性胃癌进展的机制[J].中国实验方剂学杂志,2026,32(11):97-111. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20251924.

LIN Sitian,LIU Yuanjie,YIN Yi,et al.Mechanisms of Jianpi Yangzheng Xiaozheng Prescription in Regulating USP51 to Inhibit Progression of Poorly Cohesive Gastric Carcinoma[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2026,32(11):97-111. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20251924.

摘要

目的

探讨健脾养正消癥方（JPYZXZ）通过调控泛素化特异性蛋白酶51（USP51）治疗低黏附性胃癌（PC-GC）的作用机制。

方法

体外实验：采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法和平板克隆形成实验检测不同浓度JPYZXZ（2，4，6 g·L

-1

）对PC-GC细胞系细胞（MKN-45和HGC-27）活力及增殖能力的影响；通过划痕实验和Transwell实验评估细胞迁移能力。利用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测细胞中USP51 mRNA及蛋白水平、锌指E盒结合同源异形盒1（ZEB1）和上皮间充质转化（EMT）标志物［上皮钙黏蛋白（E-cadherin）等］的表达。随后，构建USP51敲减（sh-USP51）和过表达（oe-USP51）的MKN-45及HGC-27稳转细胞株，通过划痕、Transwell实验和Western blot评估其迁移能力及EMT相关蛋白的变化。体内实验：建立MKN-45人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型。将30只BALB/c裸鼠随机分为6组［空白（NC）、NC+JPYZXZ、sh-USP51、sh-USP51+JPYZXZ、oe-USP51、oe-USP51+JPYZXZ］，每组5只。造模成功后，给药组给予JPYZXZ（30 g·kg

-1

）灌胃干预28 d。期间监测裸鼠体质量及瘤体体积。采用Western blot和免疫组化（IHC）检测瘤组织USP51及EMT相关蛋白表达情况。

结果

与空白组比较，JPYZXZ各组和5-FU组的MKN-45和HGC-27细胞克隆形成率、划痕愈合率及Transwell穿膜数显著降低（

0.05），USP51 mRNA及蛋白表达下降（

0.05），ZEB1和间质表型蛋白表达降低（如间质钙黏蛋白，波形蛋白）（

0.05），而上皮表型标志物E-cadherin表达明显升高（

0.05）。与正常组比较，sh-USP51组USP51的表达下降，oe-USP51组USP51表达明显升高（

0.05）。与NC组比较，USP51敲减后，胃癌

细胞的迁移和增殖能力显著下降（

0.01），ZEB1和EMT相关蛋白的表达减少，E-cadherin表达明显升高（

0.05）。体内实验结果表明JPYZXZ干预能有效抑制裸鼠移植瘤生长（

0.05），并显著逆转瘤组织中EMT相关蛋白的异常表达（

0.05）。

结论

JPYZXZ治疗低黏附胃癌的机制可能与调控USP51-ZEB1信号抑制EMT进程有关。

Abstract

Objective

To investigate the mechanisms by which Jianpi Yangzheng Xiaozheng prescription （JPYZXZ） treats poorly cohesive gastric carcinoma （PC-GC） through regulation of ubiquitin-specific peptidase 51 （USP51）.

Methods

In vitro

experiments： Cell viability and proliferation of PC-GC cell lines （MKN-45 and HGC-27） treated with different concentrations of JPYZXZ （2， 4， 6 g·L

-1

） were assessed using Cell Counting Kit-8 （CCK-8） and colony formation assays. Cell migration was evaluated by wound healing （scratch） and Transwell assays. The mRNA and protein expression levels of USP51， zinc finger E-box-binding homeobox 1 （ZEB1）， and epithelial-mesenchymal transition （EMT）-related markers （

e.g

.， E-cadherin） were detected by quantitative real-time PCR （Real-time PCR） and Western blot， respectively. Subsequently， stable MKN-45 and HGC-27 cell lines with USP51 knockdown （sh-USP51） and overexpression （oe-USP51） were constructed. Their migration ability and EMT-related protein expression were further evaluated by scratch assay， Transwell assay， and Western blot.

In vivo

experiments： A subcutaneous xenograft model of MKN-45 human gastric cancer was established in BALB/c nude mice. Thirty mice were randomly divided into six groups （NC， NC + JPYZXZ， sh-USP51， sh-USP51 + JPYZXZ， oe-USP51， and oe-USP51 + JPYZXZ）， with five mice in each group. After successful modeling， mice in the treatment groups were administered JPYZXZ （30 g·kg

-1

） by gavage for 28 days. Body weight and tumor volume were monitored during the experiment. The expression levels of US

P51 and EMT-related proteins in tumor tissues were detected by Western blot and immunohistochemistry （IHC）.

Results

Compared with the blank group， the colony formation rate， wound healing rate， and number of migrated cells in MKN-45 and HGC-27 cells were significantly reduced in all JPYZXZ groups and the 5-fluorouracil （5-FU） group （

0.05）. The mRNA and protein expression levels of USP51 were decreased （

0.05）. The expression of ZEB1 and mesenchymal phenotype proteins （

e.g

.， N-cadherin and vimentin） was reduced （

0.05）， whereas the expression of the epithelial marker E-cadherin was increased （

0.05）. Compared with the control group， USP51 expression was decreased in the sh-USP51 group and increased in the oe-USP51 group （

0.05）. Compared with the NC group， USP51 knockdown significantly reduced the migration and proliferation of gastric cancer cells （

0.01）， decreased the expression of ZEB1 and EMT-related proteins， and increased E-cadherin expression （

0.05）.

In vivo

results showed that JPYZXZ significantly inhibited the growth of xenograft tumors in nude mice （

0.05） and markedly reversed the abnormal expression of EMT-related proteins in tumor tissues （

0.05）.

Conclusion

The therapeutic mechanisms of JPYZXZ in PC-GC may be associated with inhibition of the EMT process via regulation of the USP51-ZEB1 signaling pathway.

关键词

Keywords

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