最新刊期

    2021 27 23

      经典名方

    • 罗思妮,彭致铖,范倩,蔡盛康,魏梅,程学仁,孙冬梅
      2021, 27(23): 1-10. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211450
      摘要:目的采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap-MS)对小承气汤中的化学成分进行快速识别和鉴定。方法采用CORTECS T3色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.6 μm),以甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)作为流动相进行梯度洗脱(0~5 min,3%~21%A;5~20 min,21%~36%A;20~32 min,36%~50%A;32~42 min,50%~62%A;42~50 min,62%~85%A;50~60 min,85%~95%A),流速0.2 mL·min-1,柱温30 ℃;采用加热电喷雾离子源(HESI),正、负离子模式检测,扫描模式为Full MS/dd-MS2,扫描范围m/z 100~1 200,碰撞能量20,40 eV。通过与对照品比对并结合文献报道、质谱数据库信息等对化合物进行鉴别。结果从小承气汤中共鉴别了123个成分,包括33个黄酮类成分,25个蒽醌及蒽酮类成分,23个苯丙素类成分,15个鞣质类成分,10个含氮类成分及其他类化合物17个。其中,有32个成分通过与对照品比对后确认。结论利用UPLC-Q-Orbitrap-MS技术系统地阐明了小承气汤的物质基础,明确其主要化学成分黄酮类、蒽醌及蒽酮类、苯丙素类成分分别来源于枳实、大黄和厚朴,可为该复方的物质基础全面阐释和质量标准合理制定提供科学依据。  
      关键词:小承气汤;超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap-MS);经典名方;蒽醌类;蒽酮类;黄酮类;苯丙素类   
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      发布时间:2021-10-29
    • 彭伟,张青,黄勤挽,魏蜀君,高永翔
      2021, 27(23): 11-18. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212339
      摘要:目的基于大鼠卵巢切除术(OVX)联合糖皮质激素注射致骨质疏松模型探讨桂枝芍药知母汤(GSZT)对骨质疏松症(OP)模型SD雌鼠的治疗作用。方法OVX手术1周后,除假手术组外,大鼠分为OP模型组、骨化醇组(0.1 mg·kg-1),GSZT低、中、高剂量组(0.8,1.6,3.2 g·kg-1)。除假手术组,大鼠肌肉注射地塞米松(1 mg·kg-1,2次/周),连续6周;给药8周后,处死动物收集股骨样本,计算机微断层扫描(Micro CT)扫描股骨远端1/3,检测骨矿物质密度(BMD),骨体积(BV),组织体积(TV),结构模式指数(SMI),骨小梁连接密度(Conn.D),骨小梁数目(Tb.N),骨小梁厚度(Tb.Th),和骨小梁分离度(Tb.Sp)。采用苏木素-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色检查股骨组织病理学改变。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色分析骨组织中破骨细胞。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测骨组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9),组织蛋白酶K(CTSK),抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测骨组织中核转录因子-κB受体活化因子配体(RANKL),骨保护素(OPG),碱性磷酸酶(ALP),骨碱性磷酸酶(BALP)蛋白表达。结果与正常组比较,OP模型大鼠骨松质部位骨小梁数量明显减少,间距增宽,厚度变薄,连续性差;与模型组比较,GZST中、高剂量组对股骨骨松质的骨小梁改变均有改善作用。Masson染色表明与正常组比较,OP模型组股骨远端骨骺生长板厚度变薄,新生骨面积变小,骨化醇及GZST高剂量组可抑制新生骨的减少。TRAP染色结果表明,与正常组比较,OP组破骨细胞数目明显增加,与模型组比较,GZST中、高剂量组可减少OP大鼠破骨细胞数量。Micro CT结果表明,与正常组比较,OP大鼠BMD,BV,Tb.N,Tb.Th和Conn.D减小,SMI和Tb.Sp显著升高(P<0.01);与模型组比较,GZST中、高剂量可改善OP大鼠骨质疏松程度,BV,Tb.N显著升高,SMI,Tb.Sp显著降低(P<0.01)。ELISA结果表明,与正常组比较,OP模型组ALP含量显著减少(P<0.01),MMP-9,TRAP5b和CTSK含量显著增多(P<0.01);与模型组比较,GSZD高剂量ALP含量显著升高(P<0.01),MMP-9,TRAP5b和CTSK显著减少(P<0.01)。Western blot结果表明,与模型组比较,骨化醇组及GSZD高剂量组均抑制RANKL蛋白的表达(P<0.05),提高OPG表达(P<0.05)。结论本研究表明GZST对OVX联合激素引起的大鼠骨质疏松具有治疗作用,其机制与调节RANKL,OPG相关,为其进一步的临床应用和现代制剂开发奠定了一定基础。  
      关键词:桂枝芍药知母汤;骨质疏松;计算机微断层扫描(Micro CT);核转录因子-κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)   
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      发布时间:2021-10-29
    • 黄佳琦,蒋青青,钟友宝,王梦雪,龙健,赵海梅,刘端勇
      2021, 27(23): 19-25. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212301
      摘要:目的从Toll样受体(TLR)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路,探讨四神丸挥发油有效治疗慢性溃疡性结肠炎的可能机制。方法将BALB/c小鼠随机分成正常组,模型组,四神丸挥发油组,二神丸挥发油组,五味子散挥发油组和美沙拉嗪组,采用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立慢性溃疡性结肠炎小鼠模型,灌胃给药7 d后,通过体质量、结肠质量、结肠质量指数、结肠长度、结肠镜下损伤评分评价其疗效;用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结肠组织上清液中白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10),白细胞介素-17A(IL-17A),白细胞介素-21(IL-21)和γ干扰素(IFN-γ)水平,同时用蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测各组小鼠结肠黏膜中TLR/MyD88信号通路相关蛋白,包括TLR2,MyD88,Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1),白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4),白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK1),肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6),转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白1(TAB1),转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白2(TAB2),丝裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的表达水平。结果与正常组比较,模型组结肠长度显著降低,结肠质量、结肠质量指数和结肠镜下病理损伤评分均显著升高,IL-10水平显著降低,IL-4,IL-21和IFN-γ水平明显升高(P<0.05,P<0.01),TLR2,MyD88,Rac1,IRAK4,IRAK1,TRAF6,TAB1,TAB2,MKK6,p38 MAPK和CREB蛋白表达量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,经四神丸挥发油干预后,小鼠结肠长度显著增加,结肠质量、结肠质量指数和结肠镜下病理损伤评分均显著降低,且小鼠结肠组织中IL-10水平明显升高,而IL-4,IL-17A,IL-21和IFN-γ水平明显降低(P<0.05,P<0.01),同时小鼠结肠组中TLR2,MyD88,Rac1,IRAK4,IRAK1,TRAF6,TAB1,TAB2,MKK6,p38 MAPK和CREB蛋白表达量均明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论四神丸挥发油能有效改善慢性溃疡性结肠炎的炎性损伤,可能是通过抑制TLR/MyD88信号通路实现的。  
      关键词:四神丸挥发油;溃疡性结肠炎;Toll样受体(TLR)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路;疗效   
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      发布时间:2021-10-29
    • 李莉,贾庆玲,王煜姣,王香香,凌江红
      2021, 27(23): 26-34. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212336
      摘要:目的观察柴胡疏肝散对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃动力、胃组织线粒体功能及线粒体自噬的影响,揭示柴胡疏肝散防治FD的作用机制。方法将32只SPF级SD大鼠适应性喂养1周后随机分为正常组、模型组、柴胡疏肝散组(4.8 g·kg-1),多潘立酮组(4.5 mg·kg-1),每组8只。除正常组外,其余3组均采用改良夹尾刺激法复制FD大鼠模型。4周后,采用营养性半固体糊法观察FD大鼠胃排空率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清柠檬酸合成酶(CS),胃动素(MTL),胃泌素(GAS)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察胃组织病理变化,透射电镜观察线粒体特征,免疫荧光共定位法观察胃组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)与电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)表达,提取新鲜胃组织线粒体,生化试剂盒检测线粒体活性氧(ROS),丙二醛(MDA)水平,超氧化物歧化酶(SOD)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测线粒体LC3,自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1),p62蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠胃排空率显著降低(P<0.01),血清CS,MTL,GAS含量显著降低(P<0.01),HE染色可见各组大鼠胃组织未见糜烂、溃疡等病理改变,透射电镜观察胃组织线粒体肿胀、扩张,出现空泡病变,LC3和VDAC1免疫荧光共定位表达显著增加(P<0.01),线粒体ROS,MDA含量显著升高(P<0.01),SOD含量显著降低(P<0.01),LC3,Beclin1蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),p62蛋白表达水平明显下降(P<0.05);与模型组比较,柴胡疏肝散组和多潘立酮组大鼠胃排空率均明显升高(P<0.05),血清CS,MTL,GAS含量明显升高(P<0.05,P<0.01),透射电镜观察胃组织线粒体核膜完整,内部嵴形态清晰,嵴密度较高,部分存在线粒体分裂融合现象,LC3和VDAC1共定位表达显著减少(P<0.01),线粒体ROS,MDA含量均明显降低(P<0.05,P<0.01),SOD含量明显升高(P<0.05),LC3,Beclin1蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),p62蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论柴胡疏肝散防治FD的作用机制可能与改善胃组织线粒体功能、抑制线粒体自噬有关。  
      关键词:柴胡疏肝散;功能性消化不良(FD);胃动力;线粒体功能;氧化应激;线粒体自噬   
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      发布时间:2021-10-29
    • 董燕,刘思鸿,李莎莎,张磊,李斌,张楚楚,叶兴法,许海玉,李兵
      2021, 27(23): 35-43. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211561
      摘要:厚朴温中汤是《古代经典名方目录(第一批)》中收录方剂。笔者通过整理古代医籍、现代文献,系统考证厚朴温中汤处方来源、组方、主治等历史沿革及研究现状。发现该方最早见于金代名医李东垣所著《内外伤辨惑论》,主治脾胃虚寒,心腹胀满。后世医籍记载主治与原方基本一致;煮散剂与水煎剂的剂量不同但用药比例一致;清代时出现丸剂记载。现代主要用该经典名方治疗胃肠道疾病如胃痛、胃肠炎及功能性消化不良等;药理研究发现其具有抗炎、止痛、调节胃肠道功能等作用;药材粒度及煎煮水量对该方各指标性成分无明显影响。笔者通过全面文献考证,可为经典名方厚朴温中汤的现代开发提供理论依据与文献参考。  
      关键词:厚朴温中汤;经典名方;历史沿革;古籍文献;主治病证;剂量;炮制   
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      发布时间:2021-10-29

      药理

    • 李玉波,于眉,李君玲,郝改梅,梁媛,翟志光,李志更,贾海骅,苗青,王伟
      2021, 27(23): 44-50. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212391
      摘要:目的通过方剂反证寻找病证结合动物模型的证候稳定时间窗,并验证证候的稳定可靠性。方法采用慢性不可预知温和应激(CUMS)法并通过体质量测量、糖水消耗实验、行为学实验、脑组织5-羟色胺(5-HT)检测建立大鼠抑郁症模型,通过人类临床症状等效转化为大鼠宏观表征等方法来进行大鼠的肝郁脾虚证的证候判别,基于宏观表征动态采集量表用逍遥散反证抑郁症肝郁脾虚证病证结合动物模型的稳定可靠性。结果大鼠16周龄时,CUMS组(应激8周)大鼠糖水消耗量、旷场实验穿格次数和活动总距离均明显低于正常组(P<0.05);免疫组化结果显示,CUMS组大鼠脑组织海马CA2区5-HT含量也明显低于正常组(P<0.05),说明抑郁症疾病的模型制作成功。CUMS组大鼠肝郁脾虚证出现于14周龄(应激后6周),16周龄(应激后8周)时数量达到最大值占比约70%,往后数量逐渐下降。方剂反证CUMS组14,16,18,20,22周龄大鼠证候积分分别减少66.6%,70.7%,54.8%,50.4%,44.8%,证候疗效分别为有效、显效、有效、有效、有效。结论CUMS组大鼠14~16周龄即CUMS 6~8周是抑郁症肝郁脾虚证稳定可靠的时间窗。  
      关键词:方剂反证;病证结合;动物模型;抑郁症;肝郁脾虚   
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      发布时间:2021-10-29
    • 张颖,王淳,于丹,高原,井欢,王莹,刘春英
      2021, 27(23): 51-58. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212323
      摘要:目的探讨黄芪多糖(APS)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺腺癌A549/DDP细胞移植瘤上皮间质转化(EMT)进程的影响及其潜在分子机制。方法BALB/c裸鼠随机分为空载组(TGF-β1空载A549/DDP细胞),模型组,顺铂组,联合组(TGF-β1过表达A549/DDP细胞)。联合组灌胃APS(0.3 g·kg-1·d-1)+腹腔注射顺铂(0.003 5 g·kg-1);顺铂组腹腔注射顺铂(0.003 5 g·kg-1)。药物干预后,处死裸鼠,取移植瘤和肺。称量瘤质量,计算抑瘤率;镜下计数肿瘤肺转移数;苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤病理和肿瘤组织肺转移情况;免疫组化,蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测移植瘤中EMT分子标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)的蛋白和mRNA的表达。结果与空载组比较,模型组瘤质量、肺转移结节数增加(P<0.05),肿瘤细胞连接稀疏,细胞长梭样,肺部有大面积肿瘤结节,E-cadherin蛋白和mRNA表达降低,Vimentin,α-SMA蛋白和mRNA表达升高,磷酸化(p)-PI3K,p-Akt蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组、顺铂组比较,联合组瘤质量、肺转移结节数减少(P<0.05);肿瘤细胞连接紧密,细胞圆形或椭圆形,无明显肺转移,E-cadherin蛋白和mRNA表达升高(P<0.05),Vimentin,α-SMA蛋白和mRNA表达降低(P<0.05),p-PI3K,p-Akt蛋白表达降低(P<0.05)。各组间PI3K,Akt蛋白表达差异无统计学意义。结论APS对肺腺癌A549/DDP细胞EMT有抑制作用,这一作用可能与其抑制活化的PI3K/Akt蛋白表达有关。  
      关键词:黄芪多糖;上皮间质转化(EMT);磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt);肺腺癌;移植瘤   
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      发布时间:2021-10-29
    • 袁萍,姜思琴,聂亦然,刘盛玲,傅蔚然,田会茹,付剑江
      2021, 27(23): 59-65. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212324
      摘要:目的观察丹参注射液对肿瘤细胞与血小板相互作用诱导的卵巢癌细胞增殖的抑制作用。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法和集落形成法,观察血小板对SKOV3体外生长的诱导作用及丹参注射液(12,24,48 g·L-1)的抑制作用;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血小板-肿瘤细胞相互作用系统及血小板上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)含量,并观察丹参注射液对TGF-β1分泌的影响;采用微量板法和ELISA观察肿瘤细胞培养上清液对血小板聚集和分泌的影响,并检测丹参注射液的抑制作用;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)观察丹参注射液对血小板核转录因子-κB(NF-κB)信号转导通路的影响及单独用丹参注射液的影响。结果与空白组比较,血小板诱导组吸光度A570显著升高(P<0.01);血小板+丹参注射液组A570则较血小板诱导组显著降低(P<0.01),且与丹参注射液组比较,经血小板诱导的同剂量丹参注射液组细胞增殖抑制率更显著(P<0.01)。与空白组比较,血小板诱导组集落数明显增加(P<0.05);血小板+丹参注射液的集落数则明显低于血小板诱导组(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,血小板诱导组上清液中TGF-β1含量显著升高(P<0.01);血小板+丹参注射液组TGF-β1含量显著降低(P<0.01);与丹参注射液(24 g·L-1)组比较,经血小板诱导的同剂量丹参注射液组抑制率更高(P<0.01)。与空白组比较,经丹参注射液处理的血小板上清中TGF-β1明显减少(P<0.05,P<0.01);经丹参注射液处理的SKOV3上清中TGF-β1的含量差异无统计学意义。与空白组比较,SKOV3细胞上清液诱导组的血小板聚集、血栓素A2(TXB2)和5-羟色胺(5-HT)分泌显著升高(P<0.01),细胞上清液诱导+丹参注射液组上述指标均显著降低(P<0.01),且与丹参注射液(24 g·L-1)组比较,经细胞上清液诱导的同剂量丹参注射液组抑制率更高(P<0.01)。与空白组比较,血小板诱导组的磷酸化TGF-β激活激酶1(p-TAK1),p-NF-κB表达显著升高,p-NF-κB抑制蛋白(p-IκB)表达显著降低(P<0.01);血小板+丹参注射液组p-TAK1,p-NF-κB表达均显著降低,p-IκB表达显著升高(P<0.01)。结论丹参注射液可通过抑制血小板与肿瘤细胞相互作用从而对SKOV3细胞增殖产生的影响,其作用机制可能与抑制血小板分泌TGF-β1有关。  
      关键词:丹参注射液;血小板;卵巢癌;相互作用   
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      发布时间:2021-10-29
    • 焦蕉,唐麒,蒋益兰,李东芳,刘佳琴,胡广生
      2021, 27(23): 66-71. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212325
      摘要:目的观察健脾消癌方对Hox转录本反义基因间RNA(lncRNA HOTAIR)/ 酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响,探讨健脾消癌方抑制结肠癌转移的可能作用机制。方法分析不同细胞株lncRNA HOTAIR的表达情况,采用10%,15%,20%健脾消癌方含药血清作用于HCT116细胞,transwell实验检测健脾消癌方对HCT116细胞的侵袭能力影响,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测lncRNA HOTAIR,JAK2,STAT3 mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK2,磷酸化STAT3(p-STAT3),STAT3蛋白表达情况。结果结肠癌细胞株HCT116中lncRNA HOTAIR的表达水平最高,采用此细胞作为观察对象。与空白组比较,健脾消癌方各组的侵袭细胞数均降低(P<0.05,P<0.01);健脾消癌方中剂量组JAK2 mRNA相对表达水平降低(P<0.05);健脾消癌方中、高剂量组的lncRNA HOTAIR,健脾消癌方高剂量组的JAK2 mRNA相对表达水平显著降低(P<0.01)。与空白组比较,健脾消癌方中剂量组的p-STAT3蛋白相对表达水平均降低(P<0.05);健脾消癌方中、高剂量组的JAK2蛋白,健脾消癌方高剂量组的p-STAT3蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.01)。结论健脾消癌方可有效抑制结肠癌细胞转移,其机制可能与抑制lncRNA HOTAIR/JAK2/STAT3信号通路的表达相关。  
      关键词:健脾消癌方;结肠癌;HCT116细胞;Hox转录本反义基因间RNA;酪氨酸蛋白激酶2;信号传导及转录激活因子3   
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      发布时间:2021-10-29
    • 萧闵,王威,魏巍,周艳艳,陈曙辉,姜兴宇,赵敏,曹继刚
      2021, 27(23): 72-79. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212338
      摘要:目的明确疏肝补肾毓麟汤抑制电压依赖性阴离子通道2(VDAC2)基因甲基化,通过环磷酸腺苷/蛋白激酶A(cAMP/PKA)通路,调节线粒体功能,提高精子活力的作用机制。方法雄性SD大鼠40只随机分成空白组、模型组、疏肝补肾毓麟汤高、低剂量组及左卡尼汀组,每组8只。采用腺嘌呤(0.05 g·kg-1)灌胃14 d,复制少弱精症大鼠模型;疏肝补肾毓麟汤组给予疏肝补肾毓麟汤高、低剂量(32.4,8.1 g·kg-1)灌胃;左卡尼汀组予以左卡尼汀(0.27 g·kg-1)灌胃。全自动精子分析仪检测精子活力;苏木素-伊红(HE)染色观察睾丸组织病理形态学变化;流式细胞法检测精子线粒体膜电位差;免疫荧光法检测睾丸VDAC2的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测睾丸组织VDAC2 mRNA表达;亚硫酸氢盐测序法检测睾丸组织VDAC2基因甲基化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测睾丸组织cAMP表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测睾丸组织PKA蛋白表达。结果与空白组比较,模型组精子密度及活动率均显著降低(P<0.01),线粒体膜电位显著增高(P<0.01),睾丸组织VDAC2的mRNA及蛋白,PKA蛋白,cAMP含量均显著降低(P<0.01),VDAC2甲基化程度显著增高(P<0.01);与模型组比较,左卡尼汀组、疏肝补肾毓麟汤高、低剂量组精子密度及活动率、线粒体膜电位均显著升高(P<0.01),睾丸组织VDAC2的mRNA及蛋白,PKA蛋白,cAMP含量均显著升高(P<0.01),VDAC2甲基化程度显著降低(P<0.01);与左卡尼汀组比较,疏肝补肾毓麟汤低剂量组精子密度及活动率、线粒体膜电位均显著降低(P<0.01),睾丸组织VDAC2的mRNA及蛋白,PKA蛋白,cAMP含量表达均显著降低(P<0.01),VDAC2甲基化程度显著升高(P<0.01)。结论疏肝补肾毓麟汤可能通过抑制VDAC2基因甲基化,增加VDAC2表达,调节cAMP/PKA通路,改变线粒体膜电位增强精子活力。  
      关键词:弱精症;疏肝补肾毓麟汤;电压依赖性阴离子通道2;甲基化;线粒体膜电位   
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      发布时间:2021-10-29
    • 李春英,易艳,赵雍,张宇实,韩佳寅,刘素彦,梁爱华
      2021, 27(23): 80-87. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212302
      摘要:目的基于血栓变化、炎性指标、脏器功能和病理改变等考察香丹注射液(Xiangdan injection,XDI)和清开灵注射液(Qingkailing injection, QKLI)联合用药在炎症血栓动物模型的治疗上是否具有协同增效作用。方法100只雄性SD大鼠,根据体质量随机分为正常组,炎症血栓模型组,XDI组(2.5,5 mL·kg-1),QKLI组(5,10 mL·kg-1),XDI+QKLI组[(2.5+5) mL·kg-1,(2.5+10) mL·kg-1,(5+5) mL·kg-1,(5+10) mL·kg-1,每组10只大鼠。各组均腹腔注射给与相应注射液,每天1次,共4 d,正常组和模型组注射生理盐水。给药第2天,除正常组外,其余各组大鼠均造模,即先采用25 mg·kg-1角叉菜胶腹腔注射入大鼠体内,16 h后大鼠再尾静脉注射50 μg·kg-1脂多糖(LPS)。注射LPS 24 h后,各组大鼠测定肝脏指数、肾脏指数,测定血小板(PLT)数量,测量血栓长度,全自动生化分析仪测定各项肝肾功能天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),碱性磷酸酶(ALP),肌酐(Crea)及尿素氮(BUN),酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察心、肝、肺、肾脏组织病理学变化,以及观察脏器病变分级情况。结果与正常组比较,模型组大鼠PLT数量显著下降,大鼠尾部血栓长度显著增加,肝脏指数显著升高,肝肾功能ALT,ALP,BUN含量明显升高,IL-6和TNF-α含量明显升高(P<0.05,P<0.01),肝、肺、肾脏组织出现明显病理损伤(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,XDI 5 mL·kg-1组明显降低大鼠血清ALT和ALP含量(P<0.05,P<0.01),QKLI 5,10 mL·kg-1组大鼠血清ALT,ALP和TNF-α含量明显下降(P<0.05,P<0.01),XDI 5 mL·kg-1和QKLI 10 mL·kg-1单独用药均对LPS引起的肺脏病变损伤有明显减轻作用(P<0.05);XDI和QKLI合用后,明显降低大鼠的ALT,AST,ALP和TNF-α含量,尤其是XDI和QKLI合用(5+10) mL·kg-1组效果最为明显(P<0.05,P<0.01),并且大鼠尾部血栓长度明显缩短(P<0.05),肺脏病变程度也减轻(P<0.05)。与部分相同剂量XDI或QKLI单用组比较,两药合用后,大鼠血清ALT,BUN,TNF-α含量和肝脏指数都明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论XDI和QKLI单独用药对炎症血栓模型大鼠的脏器功能和器质损害及炎症反应有一定改善作用和抑制作用。两者合用后相对其单独用药,对于减少静脉血栓长度,改善肝肾功能,降低炎性因子,保护肺、肝、肾等脏器结构都有一定协同增效作用。  
      关键词:香丹注射液;清开灵注射液;炎症;血栓;联合用药   
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      发布时间:2021-10-29
    • 李哲,陈斐斐,韩小康,陈梦晗,杨锋
      2021, 27(23): 88-96. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212104
      摘要:目的探讨山药多糖关节腔注射对兔膝关节骨性关节炎模型软骨退变的保护机制及抑制炎症因子表达水平的影响,为山药多糖的开发及研究提供相关证据,同时为进一步研究奠定基础。方法将55只新西兰白兔,用随机数字表法分为5组,每组11只,采用改良Hulth法制备膝关节骨性关节炎兔模型,分别为模型组、山药多糖低、中、高剂量(0.7,1.43,2.15 mg·kg-1)组、玻璃酸钠(1.00 mg·kg-1)组。造模成功1周后模型组不干预治疗,各组使用相应药物干预5周,1次/周。5周后通过肉眼观察关节大体标本,光镜下观察关节软骨组织苏木素-伊红(HE)染色和甲苯胺蓝(TB)染色病理切片及评分,使用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测兔膝关节液白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,采用免疫组化法检测关节软骨基质金属蛋白酶-13(MMP-13),转化生长因子-β1(TGF-β1),Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)的表达。结果山药多糖干预5周后,与模型组比较,山药多糖各组关节液中IL-6,IL-1β,TNF-α的含量均明显降低(P<0.05),关节软骨中MMP-13的表达水平均也明显低于模型组(P<0.05),而TGF-β1和Col-Ⅱ的含量明显升高(P<0.05);与山药多糖低、高剂量组比较,山药多糖中剂量组兔膝关节炎症因子IL-6,IL-1β,TNF-α含量明显降低(P<0.05),软骨组织中TGF-β1和Col-Ⅱ的含量明显升高(P<0.05),MMP-13的含量明显降低(P<0.05)。与玻璃酸钠组比较,山药多糖中剂量组兔膝关节炎症因子IL-6,IL-1β,TNF-α含量,软骨组织中TGF-β1,Col-Ⅱ和MMP-13含量差异无统计学意义。结论山药多糖关节腔注射可明显降低兔膝关节液中IL-6,IL-1β,TNF-α的表达,并能有效抑制关节软骨中MMP-13表达,使关节软骨胶原的降解得到抑制,促进TGF-β1,Col-Ⅱ的合成,对关节软骨起到保护及修复作用,从而延缓关节软骨的退变。  
      关键词:膝骨性关节炎;山药多糖;关节腔注射;保护机制;细胞因子   
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      发布时间:2021-10-29
    • 李明利,边宝林,王宏洁,司南,魏晓露,赵海誉,周严严
      2021, 27(23): 97-103. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212304
      摘要:目的通过观察玛咖不同提取物和单体对小鼠的免疫调节作用,探讨其对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法用反相硅胶柱(ODS柱)将玛咖甲醇提取物进行分段富集,获得Fr1, Fr2, Fr3, Fr4, Fr5和Fr6 6个部位及3个单体。设置玛咖不同提取物和单体的不同给药剂量组,采用细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测其对无丝裂原组、刀豆蛋白A(Con A)诱导组、脂多糖(LPS)诱导组模型小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,采用酶联免疫吸附测定试验法(ELISA)测定IL-2和TNF-α的含量。结果与模型组比较,玛咖提取物Fr3,Fr6,单体N-苄基十六碳酰胺和1,2-二氢-4-甲醛-3-苯甲基-N-羟基吡啶对Con A诱导的T淋巴细胞和LPS诱导的B淋巴细胞存在一定促进增殖作用(P<0.01),增殖作用较弱,玛咖提取物和单体能显著诱导脾淋巴细胞分泌IL-2和TNF-α(P<0.01)。结论玛咖提取物及单体能够通过增强IL-2和TNF-α的分泌发挥免疫增强作用,同时可以一定程度上促进脾淋巴细胞的增殖。作用药效物质基础推测可能是玛咖酰胺和吡啶类生物碱,具体作用机制仍需进一步探讨。  
      关键词:玛咖;脾淋巴细胞;细胞增殖与活性检测法(CCK-8);酶联免疫吸附实验(ELISA);白细胞介素-2(IL-2);肿瘤坏死因子-α(TNF-α)   
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      发布时间:2021-10-29

      临床

    • 苏菲,娄彦妮,李利亚,程志强
      2021, 27(23): 104-110. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212394
      摘要:目的探索香砂六君子汤加减贴剂防治消化道肿瘤患者中、高性致吐化疗方案后消化道反应、免疫机能及生存质量的改善情况。方法纳入2018年1月至2021年5月中日友好医院中西医结合肿瘤内科确诊消化道恶性肿瘤并行中、高性致吐化疗方案的住院患者140例,参照药物临床试验质量管理规范(GCP)按1∶1随机分为观察组(70例)和对照组(70例),入组者化疗前20 min均给予常规止吐处理1次(托烷司琼5 mg+地塞米松5 mg或甲泼尼龙40 mg),观察组患者在此基础上化疗后第2天加用香砂六君贴疗法1周(选穴为中脘、内关、足三里,每日6 h,每日更换敷贴),观察组患者同时贴敷安慰贴剂,观察化疗后两组患者治疗前及治疗后1周消化道反应分级情况、淋巴细胞亚群浓度及患者生存质量评分等数据,并进行统计分析。结果治疗后,与本组治疗前比较,两组患者化疗相关消化道反应分级均明显下降(P<0.05);与对照组治疗后相比较,观察组患者消化道反应分级下降更明显(P<0.05)。观察组总有效率为81.43%(57/70),明显高于对照组的62.86%(44/70),差异有统计学意义(χ2=9.73,P<0.05)。对观察组进行分层分析,与本组治疗前比较,不同种类肿瘤中食管癌和结直肠癌患者治疗后消化道反应分级明显下降(P<0.05);不同性别患者治疗后消化道反应分级明显均下降(P<0.05)。免疫功能结果显示,与本组治疗前比较,对照组患者CD3+,CD4+,CD8+,NK细胞亚群浓度差异均无统计学意义,观察组患者CD3+,CD4+,NK细胞亚群明显升高,且优于对照组(P<0.05)。与对照组比较,香砂六君贴观察组的生存质量Karnofsky评分明显升高,生存质量改善(P<0.05)。结论香砂六君贴可降低消化道肿瘤患者中、高性致吐化疗方案后消化道反应分级、改善患者免疫机能及提高生存质量;中医外治穴位贴敷疗法值得临床推广应用。  
      关键词:香砂六君子汤;消化道肿瘤;中医外治;化疗;消化道反应   
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      发布时间:2021-10-29
    • 祝新璐,胡思源,钟成梁,罗红芳,张云峰,张月霞,高茉丽,冯海军,吴娟,丁樱,孟牛安,白玉华,易文龙
      2021, 27(23): 111-117. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212392
      摘要:目的评价龙牡壮骨颗粒治疗小儿反复呼吸道感染(肺脾气虚证)的临床疗效及安全性。方法本研究采用分层区组随机、双盲双模拟、阳性药(匹多莫德颗粒)平行对照、非劣效性检验、多中心临床研究的方法,计划纳入240例患儿,以1∶1比例分为观察组和对照组。疗程8周,随访12个月。观察指标为疾病痊愈率、呼吸道感染次数、平均病程、中医证候疗效、单项症状疗效、免疫指标疗效及安全性指标。结果本次试验10家研究中心共入选受试者237例,其中,观察组118例,对照组119例。236例进入全分析集(FAS),210例进入符合方案数据集(PPS),236例进入安全性数据集(SS)。两组基线资料差异均无统计学意义,具有可比性。观察组疾病痊愈率为75.21%(88/117),对照组为73.95%(88/119),两组差值的95%置信区间(CI),FAS为1.26%(-9.85%,12.37%),PPS为3.81%(-6.28%,13.90%),在非劣界值为10%的条件下,治疗终点疾病痊愈率的非劣效检验成立,FAS,PPS分析结论一致。上呼吸道感染、支气管炎、肺炎次数及病程的组间比较,差异均无统计学意义。中医证候等级疗效,治疗4周两组间比较,差异无统计学意义,治疗8周两组间比较,差异有统计学意义(P<0.01)。单项症状消失率,治疗4周,各单项症状消失率(面色少华、形体消瘦、少气懒言、气短、食少、纳呆、多汗、大便稀溏)的组间比较,差异均无统计学意义;治疗8周,仅少气懒言、纳呆、多汗的消失率的组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);免疫指标基线及治疗后8周的组间比较,差异均无统计学意义;除观察组的CD8外(P<0.05),其余免疫指标,治疗前后的自身比较,差异均无统计学意义。两组不良反应发生率的组间比较,差异无统计学意义。结论龙牡壮骨颗粒治疗小儿反复呼吸道感染(肺脾气虚证)改善疾病痊愈率非劣于匹多莫德颗粒,且药物安全性良好,具有临床推广价值。  
      关键词:龙牡壮骨颗粒;反复呼吸道感染;儿童;随机对照试验   
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      发布时间:2021-10-29
    • 林秀慧,吴志敏,王逸如,刘芳
      2021, 27(23): 118-124. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212395
      摘要:目的探讨芪仙通络方对脑梗死恢复期患者神经功能修复的影响及其机制。方法选取2020年1月至6月温州市中医院神经内科住院的脑梗死恢复期患者100例,按随机数字表法平均分成观察组(50例)和对照组(50例)。对照组给予常规的西医治疗,观察组给予相同的西医治疗,并加服芪仙通络方,两组均连续治疗12周。比较两组治疗前后的临床疗效,神经功能缺损评分[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)],日常生活能力评定[改良Barthel指数(MBI)],上下肢运动功能评定[Fugl-Meyer评定量表(FMA)评分]情况,以及外周血脑内脑源性神经营养因子(BDNF),血管内皮生长因子(VEGF)及细胞基质衍生因子-1(SDF-1)的水平。结果观察组治疗总有效率为84.00%(42/50),高于对照组的66.00%(33/50),差异有统计学意义(Z=-7.365,P<0.05);治疗前观察组和对照组治疗前MBI,FMA评分及NIHSS评分比较,差异无统计学意义;两组患者MBI指数及FMA评分均显著升高(P<0.01),NIHSS评分均明显降低(P<0.05,P<0.01)。与对照组治疗后比较,观察组患者MBI指数及FMA评分均明显升高,NIHSS评分均明显降低(P<0.05)。两组治疗前后BDNF水平差异无统计学意义;两组治疗后血清VEGF及SDF-1水平均高于本组治疗前,且观察组高于对照组(P<0.05)。结论芪仙通络方可以有效改善脑梗死恢复期患者临床疗效,提高患者生活质量,改善患者的预后。该方作用机制可能通过促进患者外周血内源性VEGF,SDF-1的表达,从而激活SDF-1/趋化因子受体4(CXCR4)信号通路,诱导内皮祖细胞的募集和动员,促进血管新生及缺血脑组织的修复。  
      关键词:脑梗死恢复期;芪仙通络方;温阳活血法;神经修复;脑内脑源性神经营养因子(BDNF);血管内皮生长因子(VEGF);细胞基质衍生因子-1(SDF-1)   
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      发布时间:2021-10-29
    • 徐月芳,华诏召,尧小云,孙哲,翟婷婷
      2021, 27(23): 125-130. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210833
      摘要:目的观察补中益气汤合二仙汤加减治疗围绝经期妇女压力性尿失禁(SUI)脾肾气虚证的临床疗效。方法将106例患者随机按数字表法分为对照组52例和观察组54例。两组患者均给予生活方式干预和盆底肌训练(PFMT)。对照组口服缩泉丸,6 g/次,2次/d;观察组口服补中益气汤合二仙汤加减,1剂/d;两组疗程均为8周。进行治疗前后国际尿失禁咨询问卷简表(ICIQ-SF)评分,检测治疗前后最大尿流率(Qmax),最大尿道闭合压(MUCP),残余尿量(RUV),腹压漏尿点压力(ALPP)和膀胱顺应性(BC)等参数尿流动力学指标;记录治疗前后24 h漏尿失禁次数、尿失禁漏尿程度评分,1 h漏尿量和脾肾气虚证评分;检测治疗前后雌二醇(E2),卵泡刺激素(FSH),垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)和血管活性肠肽(VIP)水平。结果治疗后,观察组ICIQ-SF量表尿失禁频率、严重程度和对生活质量影响3个维度评分及ICIQ-SF总分均低于对照组(P<0.01);观察组Qmax,MUCP,ALPP和BC均高于对照组(P<0.01),RUV低于对照组(P<0.01);观察组24 h漏尿失禁次数、尿失禁漏尿程度评分,1 h漏尿量和脾肾气虚证评分均低于对照组(P<0.01);观察组E2,PACAP和VIP均高于对照组(P<0.01),FSH低于对照组(P<0.01);观察组临床治愈率为(29/50)58.00%,有效率为(47/50)94.00%,分别高于对照组的(18/48)37.50%和(38/48)79.17%(χ2=4.124,χ2=4.683,P<0.05)。结论在生活方式和PFMT干预的基础上,补中益气汤合二仙汤加减治疗绝经期女性SUI脾肾气虚证患者可明显改善尿失禁症状和程度,提高生活质量,并能调节性激素,PACAP和VIP水平,改善尿流动力学参数,临床治愈率和有效率均高于对照组。  
      关键词:压力性尿失禁;围绝经期;脾肾气虚证;补中益气汤;二仙汤;性激素;垂体腺苷酸环化酶激活肽;血管活性肠肽   
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      发布时间:2021-10-29
    • 商德俊,杜建明,梁启军,陶琦
      2021, 27(23): 131-136. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210333
      摘要:目的观察加味小承气汤联合穴位埋线治疗食源性肥胖(DIO)胃热湿阻证的临床疗效与安全性。方法将172例患者按随机数字表法分为对照组84例和观察组88例。两组患者均给予饮食和运动的生活方式调整,并进行穴位埋线,10 d进行1次,间隔5 d再行1次埋线,共埋6次。观察组服用加味小承气汤颗粒剂,10 g/次,分早晚2次温开水冲服;对照组服用加味小承气汤颗粒剂模拟剂,10 g/次,温开水冲服,2次/d。两组疗程均为4个月。测量治疗前后体质量指数(BMI),脂肪百分率(F%),肥胖度、腰臀比(WHR),采用彩色多普勒超声检查仪测量腹部脂肪厚度、肝前脂肪厚度(AHF),肾周脂肪囊厚度(PRF),并计算内脏脂肪指数(UVI);检测治疗前后空腹血糖(FBG),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),空腹胰岛素(FINS),瘦素(LP),脂联素(APN),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);进行安全性评价。结果观察组患者BMI,F%,肥胖度和WHR均低于对照组(P<0.05,P<0.01);观察组患者皮下脂肪厚度,AHF,PRF和UVI均低于对照组(P<0.01);观察组患者TG,TC,LDL-C和FINS均低于对照组(P<0.01);观察组患者LP和HOMA-IR均低于对照组(P<0.01),APN高于对照组(P<0.01);观察组的临床疗效总有效率为(71/80)88.75%,高于对照组的(57/75)76.00%(χ2=4.374,P<0.05)。结论加味小承气汤联合穴位埋线治疗胃热湿阻型DIO,可调节LP,APN等因子,改善糖、脂等能量代谢,能有效控制肥胖情况,且安全,值得临床使用。  
      关键词:食源性肥胖症;胃热湿阻证;小承气汤;穴位埋线;脂肪细胞因子   
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      发布时间:2021-10-29

      药学基础

    • 焦焕然,张敏敏,赵恒强,刘伟,刘孟建,崔莉
      2021, 27(23): 137-144. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211652
      摘要:目的比较不同干燥方式对瓜蒌化学成分的影响。方法采用常温晾干、晒干,热风干燥(40,60,80 ℃),变温干燥(50~80,80~50 ℃)等方式干燥瓜蒌,通过高效液相色谱法(HPLC)比较不同方式处理后瓜蒌皮、籽中核苷类成分和黄酮类成分的含量差异,流动相乙腈-0.2%乙酸水溶液(3∶7)(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~15 min,97%~95%B;15~30 min,95%~90%B;30~35 min,90%~87%B;35~40 min,87%~86.5%B;40~48 min,86.5%~97%B;48~50 min,97%B),检测波长选择260 nm,流速设定0.4 mL·min-1。采用气相色谱-离子迁移谱法(GC-IMS)比较不同方式处理后样品中挥发性成分变化,SE-54毛细管色谱柱(0.32 mm×30 m,0.25 μm),于80 ℃,500 r·min-1孵育15 min,进样针温度85 ℃,进样量400 μL,分析时间35 min,载气为高纯氮气,载气流速2.0 mL·min-1,漂移气体流速150 mL·min-1,IMS探测器温度45 ℃。结果尿苷、腺苷、腺嘌呤在50 ℃以上的热风干燥处理后含量较高,较低温度干燥有利于保持胞苷、胞嘧啶、芦丁、木犀草苷和2ʹ-脱氧腺苷的稳定。GC-IMS技术可较好地实现不同方式处理后瓜蒌样品的分析和识别,80 ℃热风干燥和变温干燥后具有更多的挥发性成分。结论40 ℃和60 ℃热风干燥能较好地保留核苷类和黄酮类成分,并且挥发性成分与传统干燥方式下相似,具有高效可控、适宜工业化生产等优势。  
      关键词:热风干燥;瓜蒌;核苷类;挥发性成分;气相色谱-离子迁移谱法(GC-IMS);黄酮类   
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      发布时间:2021-10-29
    • 原静静,孙晓琛,栗锦鹏,杜弢,王惠珍
      2021, 27(23): 145-152. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211415
      摘要:目的通过对采收期党参根部代谢组测定,探索党参适应干旱的生物学机制。方法利用非靶向代谢组学液相色谱-质谱法(LC-MS),通过多元统计分析、单变量统计分析和代谢通路富集分析,对党参干旱胁迫下差异代谢物进行筛选。结果①轻度干旱胁迫(LD)与正常(CK)组显著差异代谢物274个,其中142个上调,132个下调;中度干旱胁迫(MD)与CK组显著差异代谢物284个,其中157个上调,127个下调;重度干旱胁迫(SD)与CK组显著差异代谢物317个,其中133个上调,184个下调。②差异代谢物被注释到京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库得到82条差异代谢通路,其中鞘脂类代谢为极显著富集的差异代谢通路(P<0.01),精氨酸和脯氨酸代谢、色氨酸代谢、丙氨酸代谢、半乳糖代谢、烟酸及烟酰胺代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、花生四烯酸代谢、亚麻酸代谢和甘油脂类代谢为显著富集的差异代谢物通路(P<0.05)。③对富集前后3个对比组的差异代谢物进行分类分析,发现主要集中在脂肪酰基、羧酸类及其衍生物、有机氧化物3类,其次在鞘脂类、吲哚类及其衍生物、有机氮化合物、甘油磷脂、嘧啶及其衍生物、类肽、甘油酯等类;与糖类相关的代谢物在党参干旱胁迫中表现为上调,脂类相关的代谢物脂肪酰基表现为下调,其余均表现为上调。结论阐明了干旱胁迫下党参根中代谢物的变化,其中糖类和脂类相关代谢物是党参受干旱刺激后的主要产物,且此类物质可能是提高党参抵御干旱能力的主要原因,这为后期深入研究党参抗旱机制奠定基础。  
      关键词:党参;干旱胁迫;代谢组;差异代谢物;代谢通路   
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      发布时间:2021-10-29
    • 张丹,杜晨晖,裴香萍,刘晓丽,詹海仙
      2021, 27(23): 153-162. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211419
      摘要:目的由于不同基原和产地的党参有效成分差异较大,开发党参特异分子标记对于党参种质资源准确鉴定意义重大。方法该研究应用生物信息学软件Primer 5.0,NTSYS-pc 2.10e,PopGene 32,对小党参Codonopsis minima叶绿体、秦岭党参C. tsinlingensis叶绿体和轮叶党参C. lanceolata线粒体基因组序列进行简单重复序列标记(SSR)位点搜索,利用Primer 5.0软件设计出120对SSR引物,筛选效果好且多态性高的16对cpSSR引物和10对mtSSR引物对20份党参材料进行种间通用性分析。结果结果显示,分别从基因组序列中搜索到66个cpSSR位点和26个mtSSR位点,其中小党参叶绿体中单核苷酸(86.20%),二核苷酸(6.9%),三核苷酸(6.9%);秦岭党参叶绿体中单核苷酸(83.78%),二核苷酸(13.51%),三核苷酸(2.71%);轮叶党参线粒体中单核苷酸(46.15%),二核苷酸(53.85%)。聚合酶链式反应(PCR)鉴定结果表明开发的26对SSR引物在党参属内具有很好的适用性。NTSYS-pc 2.10e软件分析显示20份党参材料的遗传相似系数在0.38~1.00,在阈值0.53处分为2个亚群。运用PopGene 32软件对20份党参进行多样性分析并筛选出4对多态性引物,分析发现观测等位基因数(Na)共为12个,有效等位基因数(Ne)为1.362 9~2.605 9个,各位点多态性位点百分率(PPL)均为100%,遗传学参数Ho,He,香浓指数(I)的平均值分别为0.555 8,0.444 2,0.753 2,说明各位点的多态性水平较高。以筛选出的4对引物对20份党参材料进行DNA指纹图谱绘制,发现DNA指纹图谱可将20份材料进行鉴别。结论该研究可为党参属种间的亲缘关系和种内遗传分化研究提供分子依据。  
      关键词:党参;叶绿体;线粒体;微卫星;开发及应用   
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      发布时间:2021-10-29
    • 梁芳瑜,何茂秋,徐昌艳,杨小生,杨娟,罗忠圣,覃容贵
      2021, 27(23): 163-171. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211412
      摘要:目的建立宽叶缬草的相关序列扩增多态性(SRAP)-聚合酶链式反应(PCR)反应体系,为宽叶缬草良种选育提供理论和技术基础。方法采用单因素试验考察Taq Mix用量,Mg2+浓度,模板DNA浓度,Taq DNA聚合酶浓度对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响,以此为基础进行正交试验,优化宽叶缬草SRAP-PCR反应体系,并在最优反应体系条件下筛选可用于宽叶缬草遗传多样性研究的有效引物。结果单因素实验结果表明Taq Mix用量为8~11 μL时扩增效果较佳;加入低浓度Mg2+可获得较佳扩增效果;中低浓度模板DNA用量可提高扩增效果;加入少量Taq DNA聚合酶可增加扩增结果丰富度。正交实验结果表明各因素对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响程度大小依次为Taq Mix用量>Taq DNA聚合酶加入量>Mg2+加入量>模板DNA用量。适于宽叶缬草的最优反应体系为Taq Mix 11 μL,模板DNA 30 ng,Mg2+ 0.025 mmol·L-1,Taq DNA 1.5 U,正向引物与反向引物各5 μmol·L-1,用双蒸水补足体系至 20 μL。最优退火温度为36.8 ℃。应用最优体系从88对引物中筛选出17对适用于宽叶缬草SRAP-PCR的条带清晰、多态性较高的有效引物。结论建立的宽叶缬草SRAP-PCR反应体系稳定性良好,可用于宽叶缬草遗传多样性研究。  
      关键词:宽叶缬草;相关序列扩增多态性(SRAP);体系优化;引物筛选;正交试验设计   
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      发布时间:2021-10-29
    • 陈麒羽,徐文芬,张永萍,孙庆文,黄园,潘国吉,陆祥
      2021, 27(23): 172-180. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211414
      摘要:目的探索小花清风藤潜在适宜分布区及其优质药材产区空间分布状况。方法结合小花清风藤分布信息及环境因子,运用最大熵(MaxEnt)生态位模型及地理信息系统软件(ArcGIS),预测小花清风藤的潜在适宜分布区。基于环境因子与小花清风藤中总皂苷,总黄酮,槲皮素-3-O-龙胆双糖苷,camellianoside,tsubakioside A,山柰酚-3-O-芸香糖苷,异鼠李素-3-O-芸香糖苷的相关性,借助ArcGIS软件空间插值及模糊叠加功能,对小花清风藤进行品质区划。结果小花清风藤在我国主要分布于云南、贵州、广西等省区,中、高适生区面积约占全国面积的2.88%。10月,11月降水量,最暖、最干季降水量,温度季节性变化的标准差及海拔是影响小花清风藤适宜性的主要环境因子。坡度、降水量、辐射强度及温度变化等对小花清风藤次生代谢产物的积累具有较大影响。综合潜在适宜分布区及各成分空间插值结果,小花清风藤高品质区主要集中于贵州省西南部,以晴隆县、关岭县、镇宁县、普安县、兴仁县等地区为核心。结论该研究为小花清风藤的人工栽培选址及药材收购等提供了一定科学指导。  
      关键词:清风藤科;小花清风藤;生态适宜性;品质适宜性;最大熵模型;空间插值   
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      发布时间:2021-10-29

      数据挖掘

    • 韩丝银,李林华,黄景春,黎昭君,陈菁华,闫强强,林江
      2021, 27(23): 181-189. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211411
      摘要:目的遴选及评估用于治疗卵巢储备功能下降(DOR)的中药新方及其适宜剂量。方法检索中国期刊全文数据库、万方、维普等数据库,收集有关中医药治疗DOR的文献,应用中医传承辅助平台V2.5建立数据库并进行数据挖掘得出药物核心组合及中药新方组合,采用专家小组讨论法确定用于实验评估的中药新方。将SD雌性大鼠分为空白组,DOR模型组,坤泰胶囊组,中药新方(简称新方)低、中、高剂量组,每组12只大鼠。坤泰胶囊组,新方低、中、高剂量组分别给DOR大鼠灌胃坤泰胶囊溶液(按说明书用量折算为0.5 g·kg-1)和3.037 5,6.075,9.12 g·kg-1新方水煎液进行干预治疗。21 d后,阴道脱落细胞涂片观察大鼠动情周期,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织结构,生化法检测血清中抗穆勒氏管激素(AMH),卵泡刺激素(FSH),黄体生成素(LH),雌二醇(E2)含量和卵巢中活性氧(ROS),丙二醛(MDA),谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果用于实验评估的中药新方由熟地黄20 g,鹿角胶12 g,枸杞子20 g,山茱萸12 g,合欢皮9 g,莲子心3 g,党参20 g,黄芪30 g,白术12 g,山药30 g,炙甘草6 g共11味药组成;与模型组相比,坤泰胶囊组、新方中、高剂量组动情周期、卵泡发育明显改善,血清中AMH,E2含量明显升高(P<0.05),FSH和LH含量明显降低(P<0.05),卵巢中ROS和MDA含量明显降低(P<0.05),SOD,CAT,GSH-Px活力及GSH含量明显升高(P<0.05)。与坤泰胶囊组相比,新方中、高剂量组的上述指标没有显著差异,而动情周期和卵泡发育呈现更好。结论通过数据挖掘筛选的中药新方可提高DOR大鼠卵巢抗氧化,促进卵泡发育,改善血清激素水平和动情周期,有效提高卵巢储备功能,最适浓度可选择为中剂量6.075 g·kg-1。  
      关键词:卵巢储备功能下降;大鼠;激素;抗氧化;中医传承辅助平台   
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      发布时间:2021-10-29

      学术探讨

    • 贾振华
      2021, 27(23): 190-194. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211563
      摘要:气道黏液是气道防御屏障功能的重要组成部分,气道黏液分泌异常与慢性阻塞性肺疾病、社区获得性肺炎及新型冠状病毒肺炎等呼吸系统传染性或感染性疾病反复发作、病情迁延或发展加重密切相关。以中医络病理论指导研发的创新中药连花清咳片具有“化痰止咳”的作用特点,能够减少痰液生成、降低痰液黏度、促进痰液排出;可以明显改善急性支气管炎和新型冠状病毒肺炎患者的咳痰、咳嗽症状,以揭示“化痰止咳”改善通气换气功能的科学内涵和临床价值。  
      关键词:气道黏液;络病理论;连花清咳;化痰;呼吸系统疾病;新型冠状病毒肺炎   
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      发布时间:2021-10-29

      综述

    • 朱金莲,邓颖嘉,何燕珊,王瑞,匡海学,王秋红
      2021, 27(23): 201-209. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211549
      摘要:洋金花为止咳平喘药,其花和叶中富含多种化合物,包括醉茄内酯类、生物碱类、萜类、黄酮类及酰胺类等成分。因其具有平喘止咳、解痉定痛的功效,传统上常用于治疗哮喘咳嗽、脘腹冷痛、风湿痹痛、小儿慢惊,还可作为外科麻醉的原料药。现代药理研究表明,洋金花除了具有平喘止咳、解痉定痛等传统功效外,还具有抗炎、免疫抑制、抗惊厥、抗癫痫、抗肿瘤等作用,常用于银屑病、帕金森病、癫痫、类风湿性关节炎等疾病的治疗。目前,有关洋金花的化学成分研究主要集中在醉茄内酯类及生物碱成分;同时,洋金花化学成分类别划分比较笼统,化学成分在不同药用部位中的分布情况也不太清楚,多糖成分药理作用研究相对较少。基于此,笔者拟系统检索洋金花国内外的相关文献,对其不同结构类型的化学成分、药理作用及临床应用进行了总结与分析,以期为洋金花的进一步开发与利用提供参考。  
      关键词:洋金花;醉茄内酯;萜类;麻醉;平喘止咳;银屑病;抗炎   
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      发布时间:2021-10-29
    • 王雪振,张小雨,牟悦,夏雷,张亚楠
      2021, 27(23): 210-217. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212321
      摘要:中药黄芪活性成分毛蕊异黄酮(CA),是从黄芪中提取出的功能性植物雌激素异黄酮,具有高效、毒副作用小、多靶点等特性,包含抗氧化、抗辐射、抗菌、保护心脑血管、增强免疫等多重药理作用。此外,多项研究还发现CA具有显著的抗肿瘤生物作用,有望成为治疗恶性肿瘤的潜在药物成分。研究表明,CA可通过多种作用机制发挥抗肿瘤作用,例如诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖及迁移及侵袭等,且CA在乳腺癌、结直肠癌、肺癌、宫颈癌、卵巢癌、鼻咽癌等多种常见恶性肿瘤中均有研究表明具有抗肿瘤功效,其抗肿瘤活性的作用机制主要体现于可通过调节B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)家族基因,微小RNA(miRNA),雌激素受体β(ERβ)触发肿瘤细胞凋亡;其抗增殖活性主要体现在对周期蛋白(Cyclin)家族,WD repeat-containing protein 7(WDR7-7)蛋白,尤文肉瘤相关转录物1(EWSAT1)等的调节作用;通过阻断上皮间质转化(EMT)进程,血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶(MMP)抑制肿瘤细胞的转移和侵袭。此外,还可通过调节自噬标志物-1(Beclin-1)诱导肿瘤细胞自噬发挥抗肿瘤作用,且CA还可增强对化疗药物的敏感性以加强治疗效果。虽CA抗肿瘤研究基数较大,作用广泛,效果佳,但缺乏对CA抗肿瘤作用机制的系统性综述,为此,本研究基于CA抗肿瘤作用机制进行文献综述,以期为科研研究者和临床工作者提供借鉴及信息参考。  
      关键词:毛蕊异黄酮;肿瘤;癌症;机制;研究进展   
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      发布时间:2021-10-29
    • 杨艺,王建波,王佑辉,王伟
      2021, 27(23): 218-225. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211494
      摘要:轮状病毒性肠炎(RVE)是一种常见的消化系统传染病,一般多发于婴幼儿,全球发病率居高不下,危害较大。然而目前西医仅采取补液、止泻、纠正电解质紊乱、保护胃肠道黏膜、调节肠道微生态等对症治疗的方法而无特效药物,疗效相对缓慢,并且在预防RVE发病及缩短病程周期等方面存在一定缺陷。中医药治疗RVE具有多靶点、安全价廉效优等显著优势,但具体作用机制阐释不足,研究基础仍然十分薄弱。对于中药单体及其活性成分在RVE发病中的作用目前虽有一定数量的研究,但所涉及的种类仍较少,且其对自噬相关通路影响的研究缺乏大规模实验数据的支撑,实验研究及临床依据均不足。对于中药复方的相关研究则更为表浅,范围更加局限,存在诸多不可忽视的问题。自噬(autophagy)作为高度保守的生物学现象,涉及多种信号通路,其功能失调与多种病理过程有关。研究表明自噬在RVE发病中起重要作用,尤其是病毒感染初期。自噬可以通过肠黏膜屏障损伤、肠神经功能紊乱及机体免疫异常等机制,导致RVE的发生和发展。近年来大量实验研究证实,中药可通过干预自噬在循环、呼吸、消化、肿瘤、免疫等多系统疾病的治疗中发挥重要作用。同时,少量研究表明,中药单体及其活性成分、中药复方可通过干预相关信号通路调控自噬干预病毒复制,从而在RVE的发病及病情进展过程中发挥积极作用。然而目前针对中药调控自噬治疗RVE的研究较少,并且尚未有系统阐述,该文旨在通过对自噬在RVE发病中的作用及中药干预自噬治疗RVE等方面进行文献检索并加以分析,以期为中医药治疗RVE提供更多的理论和临床依据。  
      关键词:轮状病毒性肠炎;自噬;中药复方;中药单体;研究进展   
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      发布时间:2021-10-29
    • 黄智超,李国峰,郎一帆,安琼,陈海芳,张武岗
      2021, 27(23): 226-236. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212326
      摘要:肺癌是一种具有极高发病率和死亡率的恶性肿瘤,对人类的生命健康产生重大威胁。现阶段治疗肺癌的常用手段有手术切除、放疗、化疗、靶向治疗、免疫治疗等,但这些方法普遍存在毒副作用大,治疗费用高等问题。中药的使用在我国有2 000多年的历史,在治疗肿瘤方面具有其独特的优势,现代药理实验发现中药可通过诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤血管生成和降低肿瘤细胞耐药性等多种途径抑制肿瘤生长,延长患者生存期,改善临床症状,提高患者生活质量。细胞凋亡是一种细胞自发性的程序性死亡的过程,与肿瘤的发生发展密切相关。研究表明多种中药可通过诱导细胞凋亡抑制肺癌发展,该文就中药通过诱导细胞凋亡治疗肺癌这一机制对国内外文献进行检索、分析、归纳与总结,发现中药诱导肺癌细胞凋亡主要是通过调控凋亡相关因子及凋亡相关信号通路实现的,包括凋亡抑制蛋白(IAPs),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),p53蛋白,第二个线粒体源半胱天冬蛋白酶激活因子(Smac)/低等电点凋亡抑制直接结合蛋白(DIABLO),外源性死亡受体途径,内源性线粒体途径,非受体型酪氨酸蛋白激酶(JAK)/信号传导与转录激活因子(STAT)信号通路,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路。此外,分泌型糖蛋白(Wnt)/β-链蛋白(β-catenin)/生存素(Survivin)信号通路和Notch信号通路对诱导细胞凋亡也起着重要作用。  
      关键词:肺癌;中药;细胞凋亡;信号通路;机制   
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      发布时间:2021-10-29
    • 沈俊希,刘怀全,于海洋,张旭飞,陈云志,朱星
      2021, 27(23): 237-244. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212303
      摘要:慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种临床常见的慢性呼吸系统疾病,其病程长且难以治愈,并与免疫失衡等因素密切相关。辅助性T细胞17(Th17)作为免疫促进细胞,而调节性T细胞(Treg)起到免疫抑制作用,两者共同发挥维持机体免疫微环境平衡的作用。COPD的病程中Th17细胞比例通常增多,而抑制Th17活性的Treg细胞比例则减少,两者协调平衡在COPD的炎症和免疫过程中起重要作用。目前西医临床上主要以鼻吸入制剂和口服药物治疗为主,虽能发挥一定疗效,但存在药物不良反应及经济负担较重等问题日益凸显。现代研究表明,中医药具有不良反应少、疗效稳定、多靶向调节的治疗特点,在防治COPD方面具有独特优势和广阔前景。近年来,中医药领域以Th17/Treg细胞平衡为切入点,开展了大量中医药干预COPD中Th17/Treg平衡的临床和试验研究,大量研究证据表明干预Th17/Treg平衡是中医药治疗COPD的重要潜在靶点。该文章主要对前人关于单味中药、中药有效成分及中药复方对COPD中Th17/Treg细胞平衡的干预作用研究进行了总结与分析,帮助临床及科研人员更为准确、全面地认识中医药干预CPPD中Th17/Treg平衡的潜在靶点,并推动相关研究为临床合理应用中医药防治COPD提供参考。  
      关键词:中医药;辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg);慢性阻塞性肺疾病(COPD);研究进展   
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      发布时间:2021-10-29
    • 汪丹丹,陈文静,贾步云,陈光亮
      2021, 27(23): 245-250. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212337
      摘要:非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种以肝细胞内脂质过度蓄积,与胰岛素抵抗和遗传易感密切相关的代谢应激性肝损伤。中医称其为“肝癖”。NAFLD影响着全球约25%的人,是世界卫生保健系统的主要负担,但其确切发病机制尚不清楚,开展NAFLD相关的基础研究具有重要的临床意义和社会价值。动物模型作为研究NAFLD的重要工具,对于明确NAFLD发生、发展的病理生理学机制尤为重要,近年来国内外关于NAFLD的造模方法不断更新,尤其是中医证候方面的模型取得了一定的发展。笔者通过查阅和整理近年来国内外的相关文献资料,对NAFLD动物模型复制方法进行了总结。该文对膳食诱导(高脂饲料、高脂高果糖饲料、高脂高胆固醇饲料、蛋氨酸胆碱缺乏饲料)模型、遗传基因缺陷[瘦素基因缺乏(Lepob/Lepob)]小鼠、常染色体隐性糖尿病基因纯合子缺乏(ob/ob)小鼠、携带突变Alms1基因(foz/foz)小鼠,FATZO小鼠)+特殊饮食模型、中医证候(肝郁脾虚证、痰湿证、血瘀证、痰瘀互结证、气滞血瘀证)模型进行综述,并对其优缺点进行探讨,以期为制备更科学合理、经济便捷的NAFLD动物模型提供参考,为深入研究NAFLD的发病机制、预防与治疗NAFLD奠定基础。  
      关键词:非酒精性脂肪性肝病;动物模型;膳食诱导;遗传基因缺陷;中医证候;研究进展   
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      发布时间:2021-10-29
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