最新刊期
      2019 年 第 25 卷 2 期

        配伍

      • 龙声志,朱海燕,吴贤波,陈林,谢毅强,杨帆
        2019, 25(2): 1-7. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190224
        摘要：目的：观察防风-乌梅含药血清对气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells，ASMCs)增殖模型表型转化调控的影响，探索防风-乌梅配伍抑制气道重塑的机制，揭示中药配伍机制。方法：采用血小板衍生因子(platelet derived growth factor，PDGF)诱导的方式建立ASMCs增殖模型；分别给予大鼠灌胃生理盐水、防风、乌梅、防风-乌梅(生药15.425，15.425，30.85 g·kg－1·d－1药液)制备药物血清；取4代对数生长期的人支气管平滑肌细胞(human bronchial smooth muscle cell，HBSMC)，将其分为空白组、细胞模型组、正常大鼠血清组、正常大鼠血清细胞模型组、激素干预组、防风血清组、乌梅血清组、防风-乌梅血清组，对细胞给予相应处理，分别采用免疫荧光、蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测ASMCs收缩型标志蛋白α-肌动蛋白(α-actin)，合成型标志蛋白骨桥蛋白(osteopontin，OPN)表达，观察表型转化情况；酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测ASMCs分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)，转化生长因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)，白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)的含量。结果：与空白组、正常大鼠血清组比较，模型组、正常大鼠血清细胞模型组α-actin荧光强度与蛋白表达较弱，OPN荧光强度与蛋白表达较强，VEGF，TGF-β，IL-6含量明显提高(P<0.05)；与模型组、正常大鼠血清细胞模型组比较，防风-乌梅血清组与激素干预组可显著增强α-actin荧光强度及蛋白表达，降低OPN荧光强度及蛋白表达，降低VEGF，TGF-β，IL-6含量(P<0.05)。结论：防风-乌梅配伍的抑制气道重塑作用，可能与抑制ASMCs由收缩型向合成型的转化，从而减少VEGF，TGF-β，IL-6等活性物质释放有关。  
        关键词：防风;乌梅;哮喘;气道平滑肌细胞;气道重塑;细胞表型   
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        发布时间：2021-02-09
      • 沈晓,郑华珠,孟英姣,闫向丽,王圣鑫,余爱明,王利胜
        2019, 25(2): 8-13. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182309
        摘要：目的：对大鼠灌胃补阳还五汤提取物后的吸收入脑及入血成分进行分析，为该复方的临床应用提供参考。方法：采用UPLC-Q-TOF-MS/MS对正常大鼠脑组织、血浆和脑缺血再灌注大鼠脑组织、血浆进行分析，色谱条件为流动相甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱，流速0.3 mL·min－1，进样量3 μL；质谱条件为电喷雾离子源，正、负离子模式扫描，扫描范围m/z 50～1 000。根据保留时间、精确相对分子质量、一级和二级质谱数据等鉴定补阳五汤中的原型成分。结果：补阳还五汤提取物给药后，发现5个化合物能透过血脑屏障进入正常脑组织，鉴定为毛蕊异黄酮苷、芍药内酯苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-乙酰基、红花黄色素C和黄芪甲苷；2个化合物能透过血脑屏障进入造模脑组织，鉴定为毛蕊异黄酮苷和芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-乙酰基；7个化合物进入正常血浆中，经鉴定为毛蕊异黄酮苷、芍药内酯苷、羟基红花黄色素A等；3个化合物进入造模血浆中，鉴定为毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-乙酰基，6″-O-乙酰基-(6αR，11αR)-9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡糖苷和芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-乙酰基。结论：补阳还五汤在正常与脑缺血损伤大鼠中的药效物质基础不尽相同，可为该复方的作用机制研究奠定基础。  
        关键词：补阳还五汤;毛蕊异黄酮苷;芍药内酯苷;脑匀浆;芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-乙酰基;血浆;原型成分   
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        发布时间：2021-02-09

        经典名方

      • 蒋沙莎,潘永福,杨沫,王运来,尹丹丹,许钒
        2019, 25(2): 14-19. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190226
        摘要：目的：探究内皮素-1(endothelin-1，ET-1)对大鼠肝星状细胞HSC-T6内磷酸化肌球蛋白轻链Ⅱ(phosphorylated myosin light chainⅡ，p-MLCⅡ)，肌球蛋白轻链Ⅱ(myosin light chainⅡ，MLCⅡ)蛋白表达的影响及当归芍药散(Danggui Shaoyao San)含药血清对其的干预作用。方法：将HSC-T6细胞种板后，各组每孔加入DMEM和终体积分数分别为2.5%，5%，10%，15%，20%的空白大鼠血清，采用噻唑蓝(MTT)比色法测定HSC-T6细胞的活力，筛选出适合的大鼠血清浓度范围；将细胞分为空白血清组(5%，10%，15%)和当归芍药散含药血清组(5%，10%，15%)，酶联免疫吸附测定(ELISA)检测基础状态下细胞培养上清液中ET-1的含量；细胞分为空白血清组(10%)，当归芍药散含药血清低、中、高剂量组(5%，10%，15%)，实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测基础状态下细胞培养上清液中ET-1 mRNA的水平；将细胞分为空白血清组(10%)，模型组(10%)，当归芍药散含药血清低、中、高剂量组(5%，10%，15%)，Y-27632抑制剂组(100 μmol·L－1)，除空白血清组外，其余各组均加入10 nmol·L－1 ET-1诱导HSC-T6细胞，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测ET-1诱导的HSC-T6细胞中p-MLCⅡ，MLCⅡ蛋白表达。结果：选用血清浓度为5%，10%，15%作为含药血清浓度。与空白血清组比较，当归芍药散含药血清组明显降低基础状态下ET-1含量，ET-1 mRNA相对含量(P<0.05，P<0.01)。与空白血清组比较，模型组细胞内p-MLCⅡ，MLCⅡ蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)；与模型组比较，当归芍药散含药血清各剂量组及Y-27632抑制剂组均可明显下调p-MLCⅡ，MLCⅡ蛋白表达(P<0.05，P<0.01)。结论：当归芍药散含药血清可能通过下调ET-1的含量，抑制ET-1的自分泌，从而下调p-MLCⅡ，MLCⅡ蛋白表达。  
        关键词：当归芍药散;含药血清;HSC-T6细胞;内皮素-1(ET-1);磷酸化肌球蛋白轻链Ⅱ(p-MLCⅡ)   
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        发布时间：2021-02-09
      • 沈丽娟,吴锡平,王金桂,王倩,孙月雯,关云艳
        2019, 25(2): 20-27. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190230
        摘要：目的：研究大黄牡丹汤对脓毒症大鼠急性肠功能障碍的治疗作用是否与调控肠道髓系细胞触发受体-1(TREM-1)表达有关。方法：雄性SD大鼠100只，腹腔注射4.5 mg·kg－1的脂多糖(LPS)进行造模，造模成功后随机分为5组：模型组，谷氨酰胺组(3.75 g·kg－1)，大黄牡丹汤低、中、高剂量组(7.5，15，30 g·kg－1)，另设正常大鼠10只作为正常组。每日1次。7 d后所有大鼠灌胃混悬液2 mL(乳果糖100 mg，甘露醇50 mg)。留取24 h尿液，运用带电化学检测器的高压液相色谱仪分析尿中乳果糖(lactulose)与甘露醇(mannitol)比值(L/M)。取血和回肠组织，运用高效液相色谱法检测血清瓜氨酸浓度；酶联免疫吸附法检测血清髓系细胞触发受体-1(TREM-1)，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，肠型脂肪酸结合蛋白(iFABP)，D-乳酸浓度；实时荧光定量PCR检测回肠组织TREM-1，Toll样受体2(TLR2)，Toll样受体4(TLR4)，髓样细胞分化蛋白(MyD88)，核转录因子-κB(NF-κB)mRNA的表达水平；电镜观察肠黏膜损伤的病理变化。结果：与正常组比较，模型组血清TREM-1，TNF-α浓度明显升高(P<0.05，P<0.01)；回肠组织TREM-1，TLR2，TLR4，MyD88，NF-κB mRNA表达水平明显升高(P<0.05，P<0.01)；iFABP，D-乳酸浓度，尿L/M明显升高(P<0.05)；血清瓜氨酸浓度明显降低(P<0.05)；回肠黏膜厚度、绒毛长度明显下降(P<0.05)。与模型组比较，各给药组血清TREM-1，TNF-α浓度明显下降(P<0.05，P<0.01)；回肠组织TREM-1，TLR2，TLR4，MyD88，NF-κB mRNA表达水平明显下降(P<0.05，P<0.01)，4组之间无差异；谷氨酰胺组，大黄牡丹汤中、高剂量组血清iFABP，D-乳酸浓度，尿L/M明显下降(P<0.05，P<0.01)；血清瓜氨酸浓度明显升高(P<0.05，P<0.01)；绒毛长度及黏膜层厚度明显升高(P<0.05)；肠黏膜Chiu氏评分明显下降(P<0.05)，3组之间无差异。结论：大黄牡丹汤能有效治疗脓毒症大鼠急性肠功能障碍，其作用机制可能与通过调控肠道髓系细胞触发受体-1表达，减轻肠道炎症反应有关。  
        关键词：大黄牡丹汤;脓毒症;急性肠功能障碍;肠道;髓系细胞触发受体-1   
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        发布时间：2021-02-09
      • 李永伟,谢和平,陈鸿杰,李跃,陈燕,李义伟,李玉洁,向旭
        2019, 25(2): 28-34. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182420
        摘要：目的：探讨阴阳攻积丸(Yingyang Gongji Wan，YYGJ)对肝癌细胞株HepG2的体外作用，为临床应用提供依据。方法：制备YYGJ大鼠含药血清；四唑化合物(MTS)比色法检测YYGJ含药血清组和空白组抑制率；原位末端凋亡法(TUNEL)检测空白组，YYGJ含药血清和5-氟尿嘧啶(5-FU)组凋亡；实时荧光定量PCR(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HepG2细胞上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)，波形蛋白(Vimentin)，基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和Smad4 mRNA和蛋白表达；细胞迁移分析(transwell)检测HepG2细胞侵袭能力。结果：YYGJ含药血清呈浓度时间依赖性抑制HepG2细胞增殖，与空白组比较，第3天YYGJ 5%，10%，20%含药血清抑制率均明显升高(P<0.05)；YYGJ含药血清组凋亡率显著升高(P<0.05)，YYGJ 50%含药血清组凋亡率与5-FU组比较差异不显著。与空白组比较，YYGJ含药血清组E-cadherin，Smad4 mRNA和蛋白表达均明显升高，Vimentin，MMP-2 mRNA和蛋白均明显降低(P<0.05)，与5-FU作用一致；与空白组比较，YYGJ含药血清组HepG2细胞侵袭能力明显降低(P<0.05)，其中YYGJ 50%含药血清组与5-FU组细胞侵袭数目无显著差异。结论：阴阳攻积丸含药血清可抑制HepG2细胞增殖，诱导细胞凋亡，调节肿瘤细胞上皮间质转换(EMT)相关的E-cadherin，Vimentin，MMP-2，Smad4 mRNA和蛋白表达，并降低肿瘤侵袭能力，与化疗药物5-FU作用特点类似。该方可作为治疗肝癌寒湿证型的代表方，应深入研究其抗癌机制。  
        关键词：阴阳攻积丸;原发性肝癌;HepG2细胞;上皮-间质转换   
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        发布时间：2021-02-09

        药剂与炮制

      • 周琴蓉,孙盼盼,肖林焱,刘其南,张丽
        2019, 25(2): 35-39. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182203
        摘要：目的：比较醋炙前后芫花二氯甲烷提取物对于大鼠正常肝细胞BRL及大鼠正常肾细胞NRK的细胞毒性变化。方法：选择BRL及NRK细胞为研究对象，采用噻唑蓝(MTT)比色法评价生、醋芫花二氯甲烷部位对BRL与NRK活性的影响；测定NRK细胞中尿素氮(BUN)，乳酸脱氢酶(LDH)，谷胱甘肽(GSH)的含量，以及BRL细胞中丙氨酸氨基转移酶(ALT)，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)，碱性磷酸酶(ALP)，LDH，GSH的含量，用于评价生、醋芫花二氯甲烷部位对BRL和NRK的氧化损伤作用。结果：与空白组相比，生芫花二氯甲烷部位对NRK和BRL细胞具有显著毒性，显著提高NRK细胞中BUN和LDH的含量(P<0.05，P<0.01)；显著提高BRL细胞中AST，ALT，ALP和LDH的含量(P<0.05，P<0.01)；降低NRK和BRL细胞中的GSH含量。与生芫花二氯甲烷部位相应剂量组相比，醋芫花二氯甲烷部位相应剂量组能提高NRK和BRL的细胞活性，降低NRK细胞中BUN和LDH的含量，降低BRL细胞中ALT，AST，ALP和LDH的含量；提高NRK和BRL细胞中GSH的含量。结论：醋炙可降低芫花二氯甲烷部位对大鼠肝肾细胞的毒性，提高大鼠肝肾细胞功能与抗氧化能力。  
        关键词：芫花;醋炙;NRK;BRL;减毒;肝肾细胞;氧化损伤   
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        发布时间：2021-02-09
      • 杨晓茗,黄尊,张君,左甜甜,沈琦
        2019, 25(2): 40-47. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182301
        摘要：目的：制备黄豆苷元纳米混悬剂胶囊，以市售黄豆苷元胶囊为参考，考察两者对小肠吸收与口服生物利用度的影响。方法：采用沉淀法联用高压均质技术制备黄豆苷元纳米混悬剂，通过正交试验优化其处方，利用X射线粉末衍射分析(XRPD)，傅里叶红外光谱(FT-IR)，透射电子显微镜(TEM)以及粒径，多分散指数和Zeta电位等指标对黄豆苷元纳米混悬剂进行表征。采用外翻肠囊法研究自制制剂与市售黄豆苷元胶囊的体外肠吸收情况，考察了黄豆苷元纳米混悬剂在体内胃肠道的分布，并通过HPLC测定大鼠体内黄豆苷元的血药浓度，以考察口服给药后的生物利用度。结果：以市售黄豆苷元胶囊内容物为参比制剂，自制黄豆苷元纳米混悬剂胶囊的小肠吸收促进率2.49(P<0.01)，胃肠道生物分布评价证实了纳米混悬液的生物黏附性，相对生物利用度294%。结论：沉淀法联用高压均质技术制备的黄豆苷元纳米混悬剂冻干后可用于胶囊剂等剂型的生产，有益于增加药物的小肠吸收并改善口服以后的体内生物利用度。  
        关键词：黄豆苷元;纳米混悬剂;胶囊;高压均质技术;体外肠吸收;药代动力学;生物利用度   
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        发布时间：2021-02-09

        药理

      • 杜欣芸,李常青,陈滨,李小翚
        2019, 25(2): 48-54. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182422
        摘要：目的：观察叶下珠复方Ⅱ号对肝癌 Huh7细胞增殖、凋亡与自噬的影响，进一步探讨其抗肝癌的作用机制。方法：体外培养肝癌 Huh7细胞，设空白组，叶下珠复方Ⅱ号高、低质量浓度组(40，20 g·L－1)和5-氟尿嘧啶(5-FU)(0.04 g·L－1)组，采用噻唑蓝(MTT)比色法检测叶下珠复方Ⅱ号对肝癌 Huh7细胞增殖的影响，流式细胞仪检细胞凋亡变化，单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察药物作用后细胞自噬体的变化，实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)，丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶2(Akt2)，B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)mRNA表达的改变，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Akt2和LC3Ⅱ蛋白表达的变化。结果：叶下珠复方Ⅱ号(40，20 g·L－1)可显著抑制肝癌Huh7细胞，并诱导其凋亡，凋亡率分别为51.72%，19.74%，显著高于空白组(P<0.01)。采用MDC染色后，叶下珠复方Ⅱ号(40，20 g·L－1)组可见大量自噬体的形成。与空白组比较，叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组PI3K，Akt2，Bcl-2 mRNA表达均显著下降，LC3Ⅱ mRNA表达均显著增加(P<0.01)。与空白组比较，叶下珠复方Ⅱ号(40，20 g·L－1)组处理后的Akt2蛋白表达显著下降，LC3Ⅱ蛋白表达明显增加(P<0.05，P<0.01)。结论：叶下珠复方Ⅱ号对肝癌Huh7细胞增殖有明显的抑制作用，其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化从而诱导细胞凋亡和自噬有关。  
        关键词：叶下珠复方Ⅱ;增殖;凋亡;自噬;Huh7细胞   
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        发布时间：2021-02-09
      • 林华,袁丽仙,高丽辉,李玲,牛艳芬
        2019, 25(2): 55-59. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190292
        摘要：目的：研究芒果苷对氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠血尿酸的影响以及对磷酸核糖焦磷酸合成酶(PRPS)，磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(PRPPAT)和次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT) mRNA表达水平的影响。方法：雄性昆明种小鼠60只，随机分为正常组、高尿酸血症模型组、芒果苷1.5，3.0，6.0 mg·kg－1组、别嘌醇组(1.0 mg·kg－1)，每组10只。按10 mL·kg－1每天灌胃给药2次，连续10次，给药后1 h再灌胃给予氧嗪酸钾(500.0 mg·kg－1)诱导形成高尿酸血症小鼠。磷钨酸法测血清尿酸水平，采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测小鼠肝脏PRPS，PRPPAT和脑组织中HGPRT mRNA的表达水平。结果：灌胃给予氧嗪酸钾后，与正常组比较，模型组小鼠血尿酸水平显著升高(P<0.05)；给予芒果苷和别嘌醇后，与模型组比较，芒果苷各剂量(1.5，3.0，6.0 mg·kg－1)和别嘌醇(1.0 mg·kg－1)均能显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平(P<0.05，P<0.01)；与正常组和模型组比较，芒果苷各剂量组小鼠肝脏PRPS 和PRPPAT mRNA的表达没有显著性差异，小鼠脑组织中HGPRT mRNA 表达水平也没有显著性差异。结论：在本实验条件下，芒果苷的降尿酸作用与嘌呤代谢相关酶PRPS，PRPPAT和HGPRT mRNA的表达无关。  
        关键词：芒果苷;高尿酸血症;磷酸核糖焦磷酸合成酶;磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶;次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶   
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        发布时间：2021-02-09
      • 宋菲,杨健,王春,王霞,李维维,潘洁,兰燕宇,刘亭
        2019, 25(2): 60-67. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20181905
        摘要：目的：采用Cocktail探针药物法考察羊耳菊活性部位提取物(以下均简称为羊耳菊)对6种大鼠细胞色素P450(CYP450)主要亚型酶活性的影响。方法：羊耳菊高、低剂量组大鼠给药剂量分别为8.127，2.709 g·kg－1·d－1(以生药量计算)，分别连续灌胃7，14 d后尾静脉注射Cocktail探针药物咖啡因、咪达唑仑、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、美托洛尔和氯唑沙宗，不同时间点采集血样，建立超高效液相串联质谱法(UPLC-MS)测定大鼠血浆中6种探针药物的浓度，运用DAS 2.0软件计算其药动学参数，以考察羊耳菊在大鼠体内对CYP1A2，CYP3A，CYP2C9，CYP2C19，CYP2D6，CYP2E1这6种亚型酶代谢活性的影响。结果：与空白组相比，奥美拉唑指标下，给药组的药时曲线下面积AUC0-t和AUC0-∞增大，14 d给药组的半衰期(T1/2)增大，清除率(CL)降低；甲苯磺丁脲指标下，14 d高剂量组的AUC0-t，AUC0-∞和T1/2增大；咖啡因指标下，给药组的T1/2明显增大，14 d给药组的AUC0-t和AUC0-∞增大而CL降低；但以上3个指标的表观分布容积(V)均无明显变化。与空白组相比，咪达唑仑指标下，除7 d低剂量组之外，其他给药组的AUC0-t，AUC0-∞和T1/2明显增大，CL明显降低，V增大；氯唑沙宗和美托洛尔的药动学参数与空白组相比差异没有显著性。结论：羊耳菊对大鼠肝药酶CYP3A，CYP1A2，CYP2C9和CYP2C19的活性具有不同程度的抑制作用，其中对CYP3A的抑制作用最强。  
        关键词：Cocktail探针药物法;羊耳菊;活性部位;提取物;细胞色素P450;药物相互作用;咪达唑仑   
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      • 刘倩,傅缨,资晓飞,熊耀斌,李媛
        2019, 25(2): 68-73. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182322
        摘要：目的：探讨小檗碱(berberine，BBR)对高糖环境下人肝癌HCCLM3细胞增殖、凋亡及自噬相关基因表达的影响，并探究其可能的抗肿瘤分子机制。方法：把HCCLM3细胞加入低、中、高质量浓度葡萄糖中，通过细胞增殖实验(cell counting kit-8，CCK-8)检测发现高质量浓度葡萄糖对HCCLM3细胞增殖的作用最明显。基于此，选择高糖培养HCCLM3细胞，加入BBR(5，10，20，30，40，50 μmol·L－1)进行体外干预24 h，研究各组药物对HCCLM3细胞增殖的抑制效果，并设顺铂组对照，通过流式细胞仪观察细胞凋亡率的变化，实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)和自噬相关基因Atg5，Beclin1 mRNA表达水平。结果：与空白组比较，随着葡萄糖浓度的增加，HCCLM3细胞在高糖组中增殖能力最强(P<0.05)；BBR对高糖培养下HCCLM3增殖的抑制作用与BBR浓度有相关性，BBR(5，10，20，30，40，50 μmol·L－1)组抑制率依次为33.86%，40.75%(P<0.05)，49.22%，55.1%，60.12%，61.42%(P<0.01)；细胞凋亡率随BBR浓度增加有显著上升(P<0.01)；与单纯高糖组比较，各干预组中凋亡基因Bcl-2与自噬基因Atg5，Beclin1 mRNA表达上调(P<0.05，P<0.01)。结论：BBR对高糖环境下HCCLM3细胞增殖具有抑制作用，可能是通过调控Bcl-2的表达，诱导该细胞凋亡，同时又上调Beclin1，Atg5 mRNA表达水平，促进自噬发挥抗肿瘤作用。  
        关键词：小檗碱;HCCLM3细胞;高糖;凋亡;自噬   
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        发布时间：2021-02-09
      • 马可可,鞠营辉,陈清青,李维祖,李卫平
        2019, 25(2): 74-81. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190227
        摘要：目的：研究黄芪甲苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其对磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)信号的调控作用，探讨黄芪甲苷保护2型糖尿病肾病的机制。方法：6周高糖高脂饮食后，给予链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射(35 mg·kg－1)建立2型糖尿病大鼠模型，随机分为正常组，模型组，黄芪甲苷(20，40，80 mg·kg－1)组及盐酸二甲双胍(阳性药)组。连续给药8周后检测各组大鼠体质量，肾脏指数，血糖，24 h尿蛋白，尿微量白蛋白，尿肌酐，血肌酐及血尿素氮含量的变化；苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理形态学变化；马松(Masson)三色染色观察胶原表达水平；过碘酸六胺银(PASM)染色观察基底膜的变化；免疫组化检测磷酸化FoxO1(p-FoxO1)蛋白表达；蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析PI3K/Akt/FoxO1信号蛋白及自噬标记蛋白PI3K，微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅰ/Ⅱ，B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)/腺病毒E1B 19 kDa相互作用蛋白3(BNIP3)，Beclin1，p-Akt，Akt表达水平。结果：与正常组比较，模型组肾小球基底膜增厚，细胞外基质增多，系膜扩张，胶原蛋白显著增加，PI3K/Akt/FoxO1信号增强(P<0.01)，自噬活性减弱(P<0.01)；与模型组比较，黄芪甲苷中、高剂量肾脏组织病变明显改善，明显抑制肾组织PI3K，Akt及FoxO1磷酸化水平(P<0.05，P<0.01)，同时增强自噬反应，上调BNIP3，LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ和Beclin1的表达(P<0.05，P<0.01)。结论：黄芪甲苷可能通过抑制PI3K/Akt/FoxO1信号增加肾组织细胞自噬活性，减缓了2型糖尿病肾病的发展进程。  
        关键词：糖尿病肾病;黄芪甲苷;磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)信号通路;自噬   
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        发布时间：2021-02-09
      • 杨易韵,牛璐璐,柴辉,朱贝贝,刘凯
        2019, 25(2): 82-88. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190225
        摘要：目的：基于Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路观察地龙多肽类组分对自发性高血压大鼠(SHR)早期肾损害的影响及作用机制。方法：将40只SHR随机分为模型组(等容量蒸馏水灌胃)，地龙多肽类组分低、中、高剂量组(126，252，504 mg·kg－1)，贝那普利组(0.9 mg·kg－1)，每组8只；同周龄雄性同源正常血压大鼠8只为正常组，给予等容量蒸馏水灌胃。各组连续给药60 d后，酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定大鼠24 h尿液中微量白蛋白(mAlb)，N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)及血清血管紧张素II(AngⅡ)的水平，透射电镜观察大鼠肾脏组织超微结构的变化，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾脏TLR4，NF-κB p65蛋白水平，免疫组化检测肾脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，白细胞介素-10(IL-10)表达。结果：与正常组比较，模型组大鼠24 h尿mAlb，NAG及血清AngⅡ水平升高(P<0.05)，TLR4，NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.05)，TNF-α表达增多(P<0.05)，IL-10表达减少(P<0.05)。肾脏组织透射电镜显示，模型组大鼠肾小球大部分毛细血管节段足细胞足突融合、系膜细胞增多、系膜基质增生。与模型组比较，地龙多肽类组分各剂量组及贝那普利组大鼠尿mAlb，NAG及血清AngⅡ水平均降低(P<0.05)，TLR4，NF-κB p65蛋白表达均降低(P<0.05)，TNF-α肾脏阳性表达有不同程度减少(P<0.05)，IL-10表达增加(P<0.05)。肾脏组织透射电镜显示，给予高剂量地龙多肽类组分及贝那普利后大鼠肾脏受损表现有不同程度改善。结论：地龙多肽类组分可以减轻自发性高血压大鼠早期肾损害，其机制可能通过调控AngⅡ-TLR4/NF-κB通路实现。  
        关键词：地龙多肽类组分;自发性高血压大鼠;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ);Toll样受体4(TLR4);核转录因子-κB(NF-κB)   
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        发布时间：2021-02-09
      • 王靖霞,刘春芳,何莲花,孙丛丛,李逸群,孟昊业,彭江,荆宇,苗艳东,林娜
        2019, 25(2): 89-95. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190228
        摘要：目的：观察风湿祛痛胶囊对大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)的干预作用。方法：SD大鼠随机分为正常组、模型组、风湿祛痛胶囊低、中、高剂量组(0.25，0.5，1 g·kg－1·d－1)，对照药甲氨蝶呤组(0.2 mg·kg－1·d－1)，除正常组外，其他各组以Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂免疫大鼠建立CIA模型，首次免疫后第1天给药组开始灌胃给药，每天1次，共给药19 d；首次免疫第8天开始观察大鼠关节红肿和畸形症状、评价关节炎临床积分和发病率，第19天取材后，炎症关节进行微计算机断层扫描技术检测和骨计量学分析，同时进行炎症关节组织病理学检查并从滑膜炎症、血管翳、软骨侵蚀和骨破坏等方面进行半定量评分，酶联免疫吸附测定法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，血管内皮生长因子(VEGF)，基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和核转录因子-κB受体活化因子配基(RANKL)含量。结果：风湿祛痛胶囊能剂量依赖地改善CIA大鼠炎症关节红、肿和畸形症状；与正常组比较，模型组大鼠炎症关节红、肿和畸形明显临床积分和发病率、关节滑膜炎症、血管翳、软骨侵蚀和骨破坏的病理评分显著升高(P<0.01)，炎症关节骨密度(BMD)，骨体积分数(BV/TV)，骨小梁厚度(Tb.Th)，骨小梁数量(Tb.N)显著降低(P<0.01)，骨表面积体积比(BS/BV)和骨小梁分离度(Tb.Sp)显著升高(P<0.01)，血清IL-1β，TNF-α，VEGF，MMP3和RANKL的含量显著升高(P<0.01)；与模型组相比，各风湿祛痛胶囊组红肿、畸形症状明显改善，临床积分和发病率、关节滑膜炎症、血管翳、软骨侵蚀和骨破坏的病理评分均明显降低(P<0.05，P<0.01)，BMD，BV/TV，Tb.Th，Tb.N明显升高(P<0.05，P<0.01)，BS/BV和Tb.Sp明显降低(P<0.05，P<0.01)，血清IL-1β，TNF-α，VEGF，MMP-3和RANKL的含量明显降低(P<0.05，P<0.01)，且甲氨蝶呤组与高剂量组的作用相近。结论：风湿祛痛胶囊能有效缓解CIA的临床症状和病情，降低发病率，减轻关节的组织病理学和影像学严重度，同时抑制血清中的促炎细胞因子含量。  
        关键词：风湿祛痛胶囊;胶原诱导性关节炎;病理学;影像学;细胞因子   
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        发布时间：2021-02-09
      • 刘晓,于文涛,靳贺超,景佳星,苏凤哲
        2019, 25(2): 96-102. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190229
        摘要：目的：观察补肾通络方对博莱霉素所致肺纤维化大鼠肺组织病理及转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads通路蛋白的影响，揭示该方抑制肺纤维化的作用机制。方法：48只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常组8只，模型组、补肾通络低、高剂量组、氢化可的松琥珀酸钠组各10只。除正常组外，各组均采用博莱霉素法诱导肺纤维化制备模型。从术后第3天开始，补肾通络高、低剂量组分别给予14.2，7.1 g·kg－1补肾通络方药灌胃，氢化可的松琥珀酸钠组给予4.58 g·kg－1氢化可的松琥珀酸钠溶液腹腔注射，正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃，共治疗28 d。大鼠处死后测定血清羟脯氨酸(HYP)，透明质酸(HA)，层粘连蛋白(LN)的含量，取肺组织，采用苏木精-伊红染色法(HE)及马松(Masson)三色染色法观察肺组织病理形态变化，采用实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)观察各组大鼠肺组织TGF-β1，Smad2，Smad3，Smad7等mRNA和蛋白表达变化。结果：与正常组相比，模型组大鼠肺纤维化明显，HYP，HA，LN含量升高(P<0.05，P<0.01)，肺组织TGF-β1，Smad2，Smad3蛋白和mRNA表达升高(P<0.05，P<0.01)，Smad7蛋白和mRNA表达降低(P<0.01)；与模型组相比，补肾通络高剂量组血清HYP，HA，LN的含量下降(P<0.05，P<0.01)肺组织TGF-β1，Smad2，Smad3蛋白和mRNA表达降低(P<0.05)，Smad7蛋白和mRNA表达升高(P<0.01)。结论：补肾通络方可有效改善肺纤维化的病变进程，其机制可能与调节TGF-β1/Smads通路有关。  
        关键词：补肾通络方;肺纤维化;转化生长因子;博来霉素;人参蛤蚧散   
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        发布时间：2021-02-09
      • 王妮佳,王嘉仡,孟宪生,包永睿,王帅,李天骄
        2019, 25(2): 103-108. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182204
        摘要：目的：研究鸡血藤总鞣质的化学成分，并分析该有效部位对宫颈癌细胞HeLa的药效与作用机制，为鸡血藤抗宫颈癌提供实验依据。方法：运用UPLC-Q-TOF/MS对鸡血藤鞣质类化学成分进行定性分析。将不同质量浓度的鸡血藤总鞣质作用于宫颈癌细胞HeLa，通过3维(3D)微流控芯片筛选合适的给药浓度及时间。运用流式细胞仪测定鸡血藤总鞣质对宫颈癌细胞HeLa周期与凋亡的影响，分别应用FlowJo v10.0.7及ModFit LT 3.2软件进行分析。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)测定经鸡血藤总鞣质作用后，宫颈癌细胞HeLa上清液中血管内皮生长因子-A(VEGF-A)与半胱天冬酶-3(Caspase-3)因子的含量变化。结果：鉴定并推断了鸡血藤总鞣质中15种成分。最终确定鸡血藤总鞣质低、中、高给药质量浓度分别为0.5，1.0，2.0 g·L－1，36 h为最佳给药时间。经鸡血藤总鞣质作用后宫颈癌细胞HeLa早凋与晚凋比例明显增加，宫颈癌细胞HeLa DNA合成前期(G0/G1期)明显增加，DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2/M期)减小。经鸡血藤总鞣质作用后，宫颈癌细胞HeLa上清液中VEGF-A因子显著降低，Caspase-3因子显著增加。结论：鸡血藤中含有丰富的鞣质类成分，此类成分对宫颈癌细胞HeLa有明显的抑制其增殖并促进其凋亡的作用，为该有效部位的后续研究与开发提供了实验依据。  
        关键词：鸡血藤;总鞣质;3D微流控芯片;宫颈癌细胞HeLa;细胞凋亡;细胞周期;酶联免疫吸附测定法   
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        发布时间：2021-02-09
      • 徐男,王亮,时海燕,李晓宇,张成博,孙蓉
        2019, 25(2): 109-117. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182013
        摘要：目的：探讨半夏白术天麻汤治疗高血压的分子机制。方法：综合利用中药整合药理学平台(TCM-IP)的中药方剂数据库、中药材数据库、中药成分数据库和疾病/症状靶标数据库的信息和分析功能，检索方中中药所含的化学成分信息，构建半夏白术天麻汤作用的潜在靶标和疾病靶标之间的相互作用网络，然后富集计算核心靶标，进行基因功能分析和通路分析，再进一步构建“中药材-化学成分-核心靶标-关键通路”多维关系网络。结果：对半夏白术天麻汤预测共得到90个活性成分，包括生物碱、核苷、黄酮、皂苷、有机酸等；涉及287个核心靶标，其中包括13个直接靶标，如腺苷酸环化酶，G蛋白偶联β1受体，葡萄糖激酶等；涉及神经系统、内分泌系统、循环系统、雌激素信号通路、趋化因子信号通路、促性腺激素释放激素信号通路等相关生物过程和信号通路。结论：半夏白术天麻汤通过调节神经递质浓度和活性异常、改善胰岛素抵抗、调节炎症因子的产生、抑制炎症反应等过程来发挥保护血管内皮细胞的药理作用，进而达到治疗高血压的临床疗效，为全面阐释该方的作用机制提供了参考。  
        关键词：半夏白术天麻汤;高血压;整合药理学;作用机制;数据库;葡萄糖激酶;神经系统   
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        发布时间：2021-02-09

        早期肝损伤动物模型生物标志物变化规律研究专题

      • 朱平生,焦炎杰,付双楠,苗明三,孟玉,朱正望,高达
        2019, 25(2): 118-123. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190221
        摘要：目的：通过比较对乙酰氨基酚(APAP)致肝损伤模型大鼠传统生物标志物丙氨酸氨基转移酶(ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(AST)，碱性磷酸酶(ALP)，总胆红素(TBIL)和潜在生物标志物谷氨酸脱氢酶(GLDH)，嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)，α-谷胱甘肽-S-转移酶(α-GST)，精氨酸酶1(Arg1)的变化来判断GLDH，PNP，α-GST，Arg1是否可以作为检测药物性肝损伤的早期生物标志物。方法：48只大鼠随机分为2组，分为正常组、模型组，每组24只，雌雄各半。给予模型组灌胃1 250 mg·kg －1 APAP溶液复制药物性肝损伤的模型，在给予APAP后3，6，12，24 h，每个时间点每组随机取6只大鼠(雌雄各半)，检测血清ALT，AST，ALP，TBIL，GLDH，PNP，α-GST，Arg1水平及肝组织匀浆GLDH，PNP，α-GST，Arg1水平；苏木素-伊红(HE)染色检查肝组织病理学变化。结果：与正常组比较，模型组大鼠血清和肝组织匀浆的ALT，AST，ALP，TBIL，GLDH，PNP，α-GST，Arg1水平均明显升高(P<0.05，P<0.01)，表明APAP致药物性肝损伤模型复制成功。模型组大鼠血清和肝组织的GLDH，PNP，α-GST，Arg1水平比ALT，AST水平升高时间早，幅度大。结论：GLDH，PNP，α-GST，Arg1较传统肝功能检测指标具有较好的灵敏性，可以作为早期检测药物性肝损伤的生物标志物。  
        关键词：对乙酰氨基酚;肝损伤;早期生物标志物;变化规律   
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        发布时间：2021-02-09
      • 朱平生,孟玉,付双楠,苗明三,焦炎杰,朱正望,高达
        2019, 25(2): 124-128. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190222
        摘要：目的：采用四氯化碳(CCl4)复制大鼠肝损伤的动物模型，研究肝损伤早期生物标志物谷氨酸脱氢酶(GLDH)，嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)，α-谷胱甘肽-S-转移酶(α-GST)，精氨酸酶1(Arg1)的动态变化，为急性肝损伤的早期发现提供实验依据。方法：48只Wistar大鼠，随机分为正常组和模型组，模型组腹腔注射10%的CCl4橄榄油溶液10 mL·kg－1，禁食不禁水，于3，6，12，24 h后处死各组动物，测定血清肝功能丙氨酸氨基转移酶(ALT)，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)，胆红素(TBIL)，碱性磷酸酶(ALP)的水平，α-GST，Arg1，GLDH，PNP水平，肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽(GSH)，丙二醛(MDA)的水平。结果：与正常组比较，给药3 h后ALT，AST，TBIL，α-GST，Arg1，GLDH，PNP，MDA水平显著升高，SOD明显下降(P<0.01)，给药6，12 h后ALT，AST，α-GST，Arg1，GLDH，TBIL，ALP，MDA水平显著升高，GSH，SOD明显下降(P<0.05，P<0.01)，给药24 h后ALT，AST，α-GST，Arg1，TBIL，ALP，MDA水平显著升高，GSH，SOD显著下降(P<0.01)。结论：α-GST，Arg1，GLDH，PNP较传统肝功能检测指标具有较好的灵敏性，可用于CCl4致大鼠肝损伤早期检测。  
        关键词：肝损伤;四氯化碳(CCl4);早期生物标志物;变化规律   
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        发布时间：2021-02-09
      • 朱平生,焦炎杰,付双楠,苗明三,孟玉,高达,朱正望
        2019, 25(2): 129-133. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190223
        摘要：目的：研究酒精性肝损伤的生物标志物谷氨酸脱氢酶(GLDH)，α-谷胱甘肽-S-转移酶(α-GST)，嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)，精氨酸酶1(Arg1)的动态变化，明确这些指标联合检测是否可以作为酒精性肝损伤早诊断生物标志物。方法：Wistar大鼠48只，随机分为正常组和模型组2组，每组24只，雌雄各半。每日禁食但不禁水7 h后，模型组灌胃50%乙醇/10 mg·kg －1，正常组灌服同样体积的生理盐水；1 h后按前用量重复灌胃50%乙醇1次，正常组灌服同体积生理盐水，连续造模和给药6 d，造成急性酒精性肝损伤模型。在第2，3，4，6天末次酒精灌胃3 h后，分别随机取2组大鼠每组6只雌雄各半，共12只，处死各组动物，测定天门冬氨酸氨基转移酶(AST)，丙氨酸氨基转移酶(ALT)，碱性磷酸酶(ALP)，胆红素(TBIL)，GLDH，α-GST，PNP，Arg1水平。结果：与正常组比较，模型组大鼠ALT，AST，ALP，TBIL，GLDH，PNP，α-GST，Arg1水平差异显著(P<0.01)，表明酒精性肝损伤模型已成功建立。模型组大鼠GLDH，PNP，α-GST，Arg1比ALT，AST水平升高时间早，幅度大。结论：GLDH，PNP，α-GST，Arg1较传统肝功能检测有较强的灵敏性，可以作为酒精性肝损伤早期检测生物标志物。  
        关键词：肝损伤;酒精;早期生物标志物;变化规律   
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        发布时间：2021-02-09

        临床

      • 李芳芳,康学东
        2019, 25(2): 134-138. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190116
        摘要：目的：观察加味逍遥散治疗肝郁脾虚型2型糖尿病伴焦虑、抑郁情绪障碍患者的临床疗效。方法：选取符合纳入标准的肝郁脾虚型2型糖尿病伴焦虑、抑郁情绪障碍患者76例，随机分为对照组和治疗组，各38例。对照组给予基础药物二甲双胍缓释片联合黛力新治疗，治疗组在对照组的基础上联合加味逍遥散治疗。观察用药前后患者空腹血糖(fasting plasma glucose，FPG)，餐后2 h血糖(2 hours postprandial blood glucose，2 hPG)，糖化血红蛋白(haemoglobin A1c，HbA1c)，空腹血清胰岛素(FINS)水平及服糖后30 min血清胰岛素(30 min INS)水平，汉密尔顿抑郁量表评分(HAMD)，汉密尔顿焦虑量表评分(HAMA)等指标的变化。结果：与本组治疗前比较，两组患者FPG，2 hPG，HbA1c水平均明显降低(P<0.05)，FINS水平显著下降(P<0.01)，服糖后30 min INS水平明显升高(P<0.05)，HAMD评分，HAMA评分明显降低(P<0.05)；治疗后与对照组比较，治疗组患者FBG，2 hPG，HbA1c水平均显著降低(P<0.01)，治疗组FINS水平明显降低(P<0.05)，服糖后30 min INS水平明显升高(P<0.05)，治疗组HAMD，HAMA评分显著降低(P<0.01)，两组不良反应无明显差异。结论：加味逍遥散联合基础用药可以明显减轻肝郁脾虚型2型糖尿病伴情绪障碍患者的抑郁、焦虑程度，降低患者血糖、糖化血红蛋白，降低空腹胰岛素，升高服糖30 min INS水平，其作用可能与改善此类患者焦虑、抑郁等不良情绪有关。  
        关键词：加味逍遥散;肝郁脾虚;2型糖尿病;情绪障碍   
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        发布时间：2021-02-09
      • 朱云鹤,吴云虎,方向
        2019, 25(2): 139-143. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182324
        摘要：目的：观察通窍活血汤治疗瘀血内阻型血管性认知障碍的临床疗效，探讨其作用机制。方法：将符合纳入标准的60例中医辨证为瘀血内阻型血管性认知障碍患者随机分为治疗组和对照组，每组各30例。基于内科基础治疗的同时，对照组予以盐酸多奈哌齐口服，起始量5 mg·d－1，4周后加至10 mg·d－1。治疗组在服用盐酸多奈哌齐的同时服用通窍活血汤，两组均治疗3个月，采用证候积分评价其症状变化，简易精神量表(MMSE)评价患者认知功能，日常生活能力量表(ADL)评价患者日常生活能力，颅脑磁共振动脉自旋标记灌注技术(MRI-ASL)检查了解局部血流灌注情况(CBF值)的变化，全自动生化分析仪测定血浆同型半胱氨酸水平。结果：①与本组治疗前相比，治疗组中医证候评分(SDSVD)改善明显(P<0.05)，组间比较治疗组改善程度明显优于对照组(P<0.05)；②患者的认知能力及日常生活能力较本组治疗前明显提高，2组MMSE评分及ADL评分较本组治疗前显著改善(P<0.01)，治疗组改善程度优于对照组(P<0.05)；③治疗组治疗后CBF值明显高于本组治疗前(P<0.05)及对照组(P<0.01)；④治疗后治疗组血浆同型半胱氨酸水平较对照组明显下降(P<0.05)。结论：通窍活血汤加减联合盐酸多奈哌齐能有效改善瘀血阻窍型血管性痴呆患者的认知能力、日常生活能力，改善其脑血流灌注及降低同型半胱氨酸水平，值得临床推广。  
        关键词：血管性认知障碍;通窍活血汤;磁共振灌注成像;同型半胱氨酸   
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        发布时间：2021-02-09
      • 覃玉芳,李贵平
        2019, 25(2): 144-149. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190231
        摘要：目的：观察加味犀角地黄汤辨治儿童紫癜性肾炎血热夹瘀证的临床疗效及对炎症因子和凝血功能的影响。方法：将122例患者采用随机数字表法分为对照组60例和观察组62例。对照组口服醋酸泼尼松龙片，1.5～2 mg·kg－1·d－1，4周后改为隔日口服，经4周后再逐渐减量；口服双嘧达莫片，3～5 mg·kg－1·d－1；口服复方芦丁片，1片/次，3次/d。观察组在对照组治疗的基础上采用加味犀角地黄汤辨证内服，1剂/d。两组均连续治疗12周。进行治疗前后血热夹瘀证评分；检测治疗前后尿β2 微球蛋白(β2-MG)，24 h尿蛋白定量(24 h UmAlb)，尿微量蛋白(mAlb)，胱抑素C(CysC)，血小板计数(PLT)，血浆凝血酶原时间(PT)，活化部分凝血酶原时间(APTT)，白细胞介素-2(IL-2)，IL-4，IL-10，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，血管性假性血友病因子(vWF)，血小板活化因子(PAF)，血栓调节蛋白(TM)，血浆纤维蛋白原(FIB)，尿红细胞(RBC)和尿蛋白(PRO)情况。结果：观察组临床疗效总有效率为95.16%，高于对照组的81.54%(χ2＝5.466，P<0.05)；观察组中医证候总有效为96.77%，高于对照组的75%(χ2＝12.052，P<0.01)；治疗后观察组患儿β2-MG，24 h UmAlb，mAlb，CysC水平均明显低于对照组(P<0.01)；治疗后两组患者PT均较治疗前延长(P<0.05)，观察组延长更为显著(P<0.05)；治疗后观察组FIB水平低于对照组(P<0.05)；观察组患儿血清IL-4，IL-10和TNF-α水平均低于对照组，IL-2水平高于对照组(P<0.01)；观察组患儿vWF，PAF和TM水平均低于对照组(P<0.01)。结论：在常规激素治疗的基础上，服用加味犀角地黄汤辨治HSPN血热夹瘀证患儿，可起到护保肾功能，减轻蛋白尿、血尿，有明显的临床疗效，并具有抗炎、改善凝血功能的作用。  
        关键词：紫癜性肾炎;血热夹瘀证;犀角地黄汤;抗炎;凝血功能;肾功能   
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        发布时间：2021-02-09
      • 相翠玉,刘洁,张永洲,徐吉祥
        2019, 25(2): 150-155. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190232
        摘要：目的：观察加味四磨汤对成人功能性便秘(气滞秘)的疗效，探讨其对患者血清肠神经递质一氧化氮合酶(nNOS)，一氧化氮(NO)，血管活性肠肽(VIP)以及超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)，谷胱甘肽(GSH)水平的影响。方法：筛选就诊的功能性便秘患者110例，按随机数字表法分为治疗组和对照组各55例。对照组根据常规干预措施，口服促动力药多潘立酮片，1片/次，3次/d；和通便药酚酞片，100 mg/次，2次/d。治疗组采取加味四磨汤内服治疗，每日1剂。两组疗程均连续治疗4周。比较两组患者功能性便秘主要症状、气滞秘症状评分和临床疗效。分析两组患者停药后的便秘复发率。检测血清肠神经递质nNOS，NO，VIP水平以及SOD，MDA，GSH水平。结果：治疗结束后，主要临床症状[排便困难、腹胀、排便时间、排便次数、粪便性状(Bristol)]评分治疗组均明显少于对照组(P<0.01)。治疗后，气滞秘症状(排便不爽、腹胀、肠鸣、矢气频、胸胁满闷)评分治疗组均明显低于对照组(P<0.01)。治疗结束后4周，治疗组临床疗效总有效率为98.04%显著高于对照组的84.62%(χ2＝4.379，P<0.05)。停药4和8周时，治疗组便秘复发率分别为3.92%和8.16%，均明显低于对照组的18.18%和27.78%(P<0.05)。治疗后，治疗组血清肠神经递质nNOS，NO，VIP水平均明显低于对照组(P<0.01)。治疗组血清SOD，GSH水平均显著高于对照组，MDA水平低于对照组(P<0.01)。结论：加味四磨汤治疗成人功能性便秘(气滞秘)可明显改善患者的临床症状和证候症状，提高临床疗效，减少复发率，调节患者体内肠神经递质水平及SOD，MDA，GSH 的水平。  
        关键词：四磨汤;功能性便秘;气滞秘;肠神经递质   
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        发布时间：2021-02-09

        质量评价

      • 付露,沙合尼西·赛力克江,洪吟秋,司金光,张涛,邹忠梅
        2019, 25(2): 156-162. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190109
        摘要：目的：研究地胆草(Elephantopus scaber)全草95%乙醇提取物的化学成分，并测定其抗氧化活性。方法：采用硅胶柱色谱，LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)，开放ODS柱色谱和半制备高效液相色谱及重结晶等技术手段进行分离纯化，通过核磁共振波谱和质谱技术，结合文献数据进行结构鉴定。结果：分离得到14个化合物，分别鉴定为(E)-3-(3，4-二羟基苯亚甲基)-5-(3，4-二羟基苯基)-2(3H)-呋喃酮(1)，秦皮乙素(2)，二氢芥子醇(3)，异地芰普内酯(4)，咖啡酸(5)，木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(6)，木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷甲酯(7)，绿原酸甲酯(8)，blumenol A(9)，(6R，9R)-3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)，byzantionoside B(11)，3，5-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯(12)，3，4-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯(13)，4，5-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯(14)。结论：其中化合物1～4和8～10为首次从地胆草属植物中分离得到，化合物11为首次从地胆草植物中分离得到。对从地胆草中分离的12个化合物进行了清除1，1-二苯基-2-三磷基苯肼(DPPH)自由基和2′-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS＋)自由基实验，结果显示化合物1，2，5，6，12和13具有显著的抗氧化活性。  
        关键词：地胆草;95%乙醇提取物;抗氧化活性;秦皮乙素;咖啡酸   
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        发布时间：2021-02-09
      • 朱小芳,马亚娟,白文婷,黄丽萍,平欲晖,谢一辉
        2019, 25(2): 163-168. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190216
        摘要：目的：对藏族药宽筋藤脂溶性部位的化学成分进行分离，并对分离得到的单体化合物进行结构鉴定。方法：宽筋藤干燥根茎80 kg，用生药量5倍80%乙醇浸泡1 h，然后沸水回流1 h，滤过，再重复上述步骤，合并2次提取液，回收溶剂得到总浸膏。将所得浸膏用传统溶剂萃取、回收溶液，分别得到石油醚浸膏，二氯甲烷浸膏，乙酸乙酯浸膏，正丁醇浸膏，水浸膏。对其中二氯甲烷萃取部位采用硅胶柱色谱、半制备液相色谱和LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(SephadexLH-20)色谱，重结晶等方法进行分离纯化，综合质谱(ESI-MS)，核磁共振谱(1H-NMR和13C-NMR)等波谱数据并结合文献鉴定化学结构。结果：从二氯甲烷萃取部位中分离得到15个化合物，分别鉴定为正十二烷醇(1)，正二十六烷醇(2)，棕榈酸(3)，邻苯二甲酸二丁酯(4)，香草酸(5)，香草醛(6)，夹竹桃素(7)，tinocordifolioside(8)，杜仲树脂酚(9)，异落叶松脂素(10)，橙黄胡椒酰胺(11)，橙黄胡椒乙酰胺(12)，小檗碱(13)，胡萝卜苷(14)，β-谷甾醇(15)。结论：其中，化合物除3，4，6，14，15外，其他10个化合物均为首次从该植物中分离得到。  
        关键词：宽筋藤;根茎;脂溶性部位;正十二烷醇;正二十六烷醇   
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        发布时间：2021-02-09
      • 陈圣加,黄应正,卢健,刘建群,黄慧莲,舒积成
        2019, 25(2): 169-174. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190212
        摘要：目的：桃金娘科Myrrhinaceae番石榴Psidium guajava不同部位具有不同药用功效，其叶和果实化学成分研究深入，但有关根的化学物质基础报道甚少，为明确番石榴根的化学成分，对番石榴根进行了系统地化学成分分离与鉴定。方法：采用硅胶柱色谱，LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)柱色谱，大孔树脂柱色谱，反相硅胶柱色谱(ODS)及半制备高效液相色谱(HPLC)等多种色谱方法对番石榴根醇提浸膏分离纯化，应用核磁共振(NMR)和质谱，结合理化性质，鉴定化合物的结构。结果：从番石榴根中分离出16个酚酸类化合物，分别为3，3′，4′-三甲基鞣花酸(1)，3，3′，4-三甲基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷(2)，3-甲基鞣花酸-4′-O-α-L-鼠李糖苷(3)，3′-O-methyl-3，4-O，O-metheneellagic acid-4′-O-β-D-glucopyranoside(4)，没食子酸(5)，没食子酸甲酯(6)，没食子酸乙酯(7)，3，4，5-trimethoxypheny-1-β-D-glucopyranoside(8)，3，5-二甲氧基-4-羟基-苯甲酸-7-O-β-D-葡萄糖苷(9)，1-hydroxy-3，4，5-trimethoxyphenyl-1-O-[6′-O-(4″-carboxy-1″，3″，5″-trihydroxy)phenyl]-β-D-glucopyranoside(10)，香草酸(11)，原儿茶酸(12)，开环异落叶松脂素9-O-β-D-葡萄糖苷(13)，根皮素4′-O-β-D-葡萄糖苷(14)，cinchonain Ib(15)，表儿茶素(16)。结论：化合物3，4，6，8～10，13～15为首次从该植物中分离得到。  
        关键词：番石榴;根;酚酸;醇提物   
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        发布时间：2021-02-09
      • 黄之镨,张晓梅,姜燕,赵玉瑛,马伟光
        2019, 25(2): 175-180. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190108
        摘要：目的：研究酸枣仁芽的化学成分，从物质基础的角度探寻萌发对酸枣仁活性的影响。方法：将干燥的酸枣仁芽粉碎后石油醚浸泡提取，除去油脂类成分，残渣干燥后再用甲醇加热回流提取，减压浓缩后得酸枣仁芽甲醇浸膏，将浸膏溶解，采用硅胶，C18反相硅胶，LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶等多种柱色谱方法进行分离纯化，并利用NMR和MS等现代波谱技术，结合参考文献确定化合物的化学结构。结果：从酸枣仁芽中分离鉴定13个化合物，分别为酸枣仁皂苷B (1)，酸枣仁皂苷D (2)，酸枣仁皂苷A (3)，白桦脂酸(4)，白桦脂醇(5)，羽扇豆醇(6)，麦珠子酸(7)，美洲茶酸(8)，齐墩果酸(9)，熊果酸(10)，木兰花碱(11)，荷叶碱(12)，当药黄素(13)。结论：以上化合物均首次从酸枣仁芽中分离得到。经对比，发现酸枣仁芽的化学成分与传统药用部位种子相似，主要为三萜及皂苷类、黄酮类、生物碱类化合物等，为酸枣仁芽药用资源的开发利用提供了一定的化学依据。  
        关键词：酸枣仁芽;三萜及皂苷;化学成分   
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        发布时间：2021-02-09
      • 殷启蒙,王润坤,胡琛,唐淳,赵之琛,刘量
        2019, 25(2): 181-185. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190111
        摘要：目的：对斑叶兰属植物斑叶兰Goodyera schlechtendaliana的化学成分进行分离纯化，从而丰富斑叶兰的化学成分，为斑叶兰后续深入研究奠定基础。方法：取斑叶兰干燥全草10 kg，85 ℃下用95%乙醇回流提取4次，合并提取液，减压浓缩得到粗浸膏，再将粗浸膏混悬于蒸馏水中，依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取部位。采用硅胶，Sephadex LH-20，ODS等多种色谱填料和半制备高效液相对斑叶兰的乙酸乙酯和正丁醇萃取部位进行分离和纯化，利用1H-NMR，13C-NMR，MS等各种现代波谱技术以及化合物的理化性质并结合参考文献确定化合物的化学结构。结果：从斑叶兰乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离得到10个化合物，分别是2，5-二羟基-4-甲氧基-9，10-二氢菲(1)，间苯三酚三甲醚(2)，3，4-二羟基苯甲酸(3)，4-羟基苯甲醛(4)，4-羟基苯甲酸(5)，槲皮素(6)，香兰素(7)，胡萝卜苷(8)，腺嘌呤(9)，腺嘌呤核苷(10)。结论：化合物1～10均为首次从斑叶兰属植物中分离得到。  
        关键词：斑叶兰;化学成分;分离纯化;结构鉴定   
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        发布时间：2021-02-09
      • 梁献葵,王艳慧,雷敬卫,龚海燕,唐维维,谢彩侠
        2019, 25(2): 186-195. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182317
        摘要：目的：研究并比较不同果形栀子鲜品不同极性部位(石油醚部位、三氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位)指纹图谱，深入了解其化学成分含量差异及分布情况。方法：将栀子用水回流提取，得水提取物，取水提物0.1 g，用水50 mL溶解后，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，得到各萃取相及萃取后的水相，浓缩至浸膏。建立HPLC指纹图谱，并采用相似度评价系统软件进行数据分析。结果：不同产地栀子水提物三氯甲烷部位指纹图谱可以将福建、河南、江西产栀子分开。福建栀子水提物与河南、江西的区别主要体现在石油醚部位，且其脂溶性成分比河南、江西栀子多；河南栀子水提物与福建、江西栀子的区别主要体现在乙酸乙酯部位，且其环烯迷萜苷类成分含量明显高于福建、江西栀子。江西栀子水提物与河南、福建栀子的差异主要体现在正丁醇部位，其无有机酸类峰C1。六、七棱栀子：栀子水提物的三氯甲烷部位指纹图谱可以将福建与河南的六、七棱栀子区分开，且七棱栀子各成分含量均大于六棱；栀子水提物的石油醚和乙酸乙酯部位指纹图谱均可以将江西六、七棱栀子区分开。河南六棱栀子Z3峰明显高于七棱；江西七棱栀子水提物三氯甲烷、乙酸乙酯部位各成分含量大于六棱。结论：福建、河南、江西栀子化学成分含量及种类存在显著差异；六、七棱栀子图谱差异主要体现在峰高。  
        关键词：栀子;果形;鲜品;极性部位;指纹图谱;高效液相色谱   
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      • 吴茵,白万军,魏欣
        2019, 25(2): 196-200. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20181916
        摘要：目的：中药木蝴蝶中主要含有黄酮类化学成分，具有抗炎、抗菌、抗氧化等药理作用。该研究采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对木蝴蝶中种类繁多的黄酮和黄酮苷类成分进行了快速全面的分析。方法：采用Kinetex-XB C18色谱柱(2.1 mm × 50 mm，1.7 μm)，以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速设定为0.25 mL·min－1；进样量3 μL。质谱使用ESI离子源，负离子模式扫描采集数据。通过Peakview 2.2和Masterview 1.0软件进行目标及非目标筛查化合物，根据精确质量数和同位素峰度比及二级谱图比对完成目标化合物识别，通过裂解规律分析，结合已有文献报道，确定非目标化合物结构式。结果：根据精确相对分子质量和碎片离子分析，并结合相关文献检索及质谱裂解规律，共鉴定出木蝴蝶中36个黄酮类化学成分，其中包括10个黄酮苷元和26个黄酮苷类成分。结论：采用UPLC-Q-TOF-MS技术建立了快速分析木蝴蝶黄酮类化学成分的方法，该法快速、准确，为木蝴蝶的化学成分鉴定提供一种新的策略，并为木蝴蝶进一步质量控制和物质基础研究提供了技术支持。  
        关键词：木蝴蝶;超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱;化学成分;黄酮   
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        发布时间：2021-02-09
      • 张亚楠,包永睿,孟宪生,王帅,李天骄
        2019, 25(2): 201-205. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20190214
        摘要：目的：明确苎麻根石油醚部位体外抗胃癌活性并揭示其发挥药效的物质基础，为苎麻根的开发利用奠定基础。方法：采用噻唑蓝(MTT)法考察不同给药剂量，不同给药时间下苎麻根石油醚部位对人胃癌HGC-27细胞的增殖抑制作用及其与时间、剂量的关系；采用流式细胞仪检测苎麻根石油醚部位作用于人胃癌HGC-27细胞后细胞凋亡率和细胞周期的变化；通过GC-MS对发挥药效的苎麻根石油醚部位进行成分解析。结果：不同质量浓度的苎麻根石油醚部位作用于人胃癌HGC-27细胞24，48，72 h 后，均呈现出较好的细胞增殖抑制作用，并呈现一定的时间-剂量-效应关系，差异有统计学意义(P<0.05)；苎麻根石油醚部位作用人胃癌HGC-27细胞后可诱导细胞凋亡，影响细胞周期的正常变化，G0/G1期细胞比例明显减少，S期细胞比例明显增多；通过GC-MS鉴定出苎麻根石油醚部位中26种化学成分，主要包括谷甾醇、豆甾醇等。结论：苎麻根石油醚部位为其抗胃癌活性部位，其发挥药效的主要成分为甾醇类化合物，为苎麻根在临床上的合理应用及其在抗肿瘤方面的进一步研究奠定基础。  
        关键词：苎麻根;人胃癌HGC-27细胞株;细胞周期;细胞凋亡;色相色谱-质谱   
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        发布时间：2021-02-09

        综述

      • 樊建,沈莹,赵娟萍,孙雪晴,关枫,韩凤娟,王艳宏
        2019, 25(2): 206-213. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20181808
        摘要：由于疗效确切、药性稳定、不良反应率低，用于风湿病治疗的中药外用膏剂越来越受到国内外学者的关注。本文选择经国家食品药品监督管理总局(CFDA)批准上市并用于治疗风湿病的中药外用膏剂为研究对象，对其剂型、品种以及规格等方面进行梳理与分析；查阅近年来发表的中药外用膏剂研究的相关文献，对其制剂新技术应用、制剂处方研究、成型工艺研究、药效学与安全性研究等进行归纳、分析和总结；指出用于风湿病治疗的中药外用膏剂研究中存在的问题，如缺乏新型制剂，相关促透剂的促透物质基础、促透机制、促透规律研究较少，质量控制标准研究中检测指标的选择不够全面，药代动力学的定性、定量研究相对匮乏等。同时，提出应规范中药外用膏剂的剂型分类及规格描述，亦应积极引进中药智能化、缓控释、靶向制剂等新剂型；加强相关促透剂本身透皮行为的研究，并探讨促透剂自身成分透皮吸收与促透皮吸收的相关性；采用生物效应指标或化学与生物效应相结合的综合评价指标，借鉴中药多维谱效学的最新研究成果，从而建立符合现代透皮理念的科学检测指标及质量控制方法。  
        关键词：中药外用膏剂;风湿病;应用现状;药效学;成型工艺;透皮行为;安全性   
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        发布时间：2021-02-09
      • 富晓旭,高泓,刘桠,周秀娟,周明阳,谢春光
        2019, 25(2): 214-219. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182214
        摘要：减少血糖波动是目前干预糖尿病和预防并发症的重点，也是中医药在糖尿病治疗中的优势所在。越来越多的研究表明，胰岛微循环障碍是胰岛功能下降进而引发血糖波动的关键病理环节，而胰岛微循环局部肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system，RAS)的过度激活作为胰岛功能失代偿的使动环节，与胰岛内分泌细胞功能密切相关，是研究胰岛功能的关键靶点。中医学认为糖尿病血糖波动与“脾气散精”障碍密切相关，脾不散“精”(血糖)，精滞为浊，浊邪壅塞，是血糖稳态失衡的使动环节，亦为糖尿病全病程的关键病机。通过补益“脾”气以促进“胰”中精微物质的布散能够恢复糖调节激素间的平衡，从而减少血糖波动。目前，“脾气散精”对血糖波动的调节机制尚不明确。作者基于以往的临床和科研工作基础，提出“脾气散精”环节通过促进机体胰岛微循环从而发挥其改善胰岛功能、调节血糖稳态的作用，其机制可能与抑制胰岛微循环局部RAS的激活状态相关。RAS系统在胰岛微循环中各信号通路的相互拮抗关系，与中医理论中脾气散精与固精作用的对立制约关系相类似。因此“脾气散精”环节对血糖波动的调节机制有必要从胰岛微循环RAS整体调控的角度进行深入探索，以此揭示中医药调节机体内环境稳态，减少糖尿病患者血糖波动的科学内涵。  
        关键词：糖尿病;血糖波动;脾气散精;胰岛微循环   
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        发布时间：2021-02-09
      • 林玲,韩涛,陆璐,孙倩倩,孙明瑜
        2019, 25(2): 220-227. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182329
        摘要：胃癌是目前在全球范围中发病率和死亡率较高的一种疾病，也是在全球医学界作为重点关注的疾病。胃癌的发生是一个多重阶段、多重因素的过程。大量流行病学、病理学和临床证据证实，慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis，CAG)患者的胃癌罹患风险增高，CAG的患病率与胃癌死亡率高度相关。胃黏膜萎缩和肠上皮化生(特别是不完全型结肠化生)及异型增生是胃癌的癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer，PLGC)的主要阶段。对CAG患者尤其是伴有肠化和异型增生者进行病情监测，对于早期胃癌的发现意义重大。CAG与PLGC作为在胃癌发生过程中的重要病理阶段意义非凡，近年来与此相关的深入临床及实验研究越来越多。迄今为止，动物实验是CAG与PLGC疾病实验方向的主要研究途径，所以造模方法的探索显得尤为关键，选择一个稳定可靠的模型是研究动物实验的首要因素。鉴于两种疾病的关联性，本文总结了近年来CAG与PLGC动物模型的建立方法，大致分为化学药物诱变法、物理方式刺激法、免疫造模法、幽门螺杆菌感染复制法以及手术造模法，对各种方法在之前实验中的应用分别举例，并加以笔者后续探索而且已经成功的实验造模方法，同时对各种方法的优缺点做简要评述，为今后CAG与PLGC实验中动物模型的建立和应用提供一定的参考。  
        关键词：慢性萎缩性胃炎;癌前病变;动物模型;胃癌   
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        发布时间：2021-02-09
      • 张丽佳,刘光珍
        2019, 25(2): 228-234. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20182327
        摘要：慢性肾脏病是指持续3个月以上肾脏结构与功能异常，以尿液、血液、肾脏结构异常为临床指标。蛋白尿是慢性肾脏病的重要临床表现，与肾小球损害亦密切相关，既是慢性肾脏病发生的病理表现，也是加快慢性肾脏病发展的一个重要病理因素。中医历经几千年发展，在治疗慢性肾脏病方面具有系统完善的理论基础与丰富的临床经验。借鉴中医治疗“精气外泄”“腰痛”“虚劳”“尿血”“水肿”的原则与方法，蛋白尿治疗总则为协调机体阴阳，恢复阴阳平衡，具体方法有祛瘀法、发汗法、利小便法、补脾固肾法、疏肝活络法及利湿解毒法等。古代及现代医家根据治则与治法，创立了行之有效的方剂。现代研究发现，中医方剂降低蛋白尿的机制主要有改善足细胞足突大面积融合、裂隙完全消失的病理表现，上调足细胞裂孔隔膜上nephrin和podocin蛋白的表达，免疫调节与减轻系统炎症，提高血清超氧化物歧化酶(SOD)水平及机体清除自由基的能力等。笔者现从经方、验方以及中成药这3个方面，论述治疗肾性蛋白尿的方法及其机制，为临床治疗慢性肾脏病、减少蛋白尿排泄及改善患者临床症状提供理论参考。  
        关键词：慢性肾脏病;蛋白尿;治法;经方;验方   
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        发布时间：2021-02-09
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