最新刊期
      2022 年 第 28 卷 17 期

        经典名方

      • 宋军营,丁蕊,李俊霖,蔡菊,袁永,贾亚泉,张振强
        2022, 28(17): 1-8. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221540
        摘要：目的探讨六味地黄丸通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/叉头框转录因子O3a（FoxO3a）通路调控自噬对快速老化小鼠8型（SAMP8）小鼠记忆功能的影响。方法6月龄SPF级抗快速老化亚系小鼠（SAMR1）雄性小鼠6只设为正常组，6月龄SPF级SAMP8雄性小鼠24只随机均分为模型组、多奈哌齐组（0.747 mg·kg-1）、六味地黄丸高、低剂量组（2.700、1.350 g·kg-1），灌胃给药2个月。Morris水迷宫法检测各组小鼠学习和记忆能力；尼氏染色观察小鼠皮层、海马神经元；免疫组化（IHC）检测皮层、海马微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）阳性表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组小鼠皮层自噬关键分子酵母ATG6同系物（Beclin1）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、自噬相关基因5（ATG5）、胱天蛋白酶-3（Caspase-3）、Caspase-9、Akt、p-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a的蛋白表达水平。结果与正常组小鼠比较，模型组小鼠逃避潜伏期明显延长（P<0.05，P<0.01），穿越平台次数、目标象限停留时间显著减少（P<0.01）；皮层、海马神经细胞数量明显减少、体积缩小，分布疏散，LC3B阳性表达显著增多（P<0.01）；皮层Beclin1、ATG5表达显著升高（P<0.01），Bcl-2表达水平降低（P<0.01），Caspase-3、Caspase-9表达水平显著升高（P<0.01），p-Akt/Akt、p-FoxO3a/FoxO3a表达水平显著降低（P<0.01）。与模型组比较，多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组小，3 d逃避潜伏期明显缩短（P<0.05，P<0.01）；穿越平台次数显著增加（P<0.01）；目标象限停留时间显著增加（P<0.01）；多奈哌齐组皮层海马神经元神经细胞数量增多，六味地黄丸高、低剂量组小鼠神经元数目及尼氏体明显增加且分布致密，细胞损伤程度较低；多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组皮层、海马LC3B阳性表达显著降低（P<0.01）；六味地黄丸高、低剂量组Beclin1表达显著降低（P<0.01），多奈哌齐组和六味地黄丸低剂量组ATG5表达显著降低（P<0.01），多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组皮层Bcl-2表达水平显著升高（P<0.01），Caspase-3表达水平显著降低（P<0.01），Caspase-9表达明显降低（P<0.05，P<0.01），p-Akt/Akt、p-FoxO3a/FoxO3a表达水平显著升高（P<0.01）。结论六味地黄丸有效改善了快速老化SAMP8 AD模型小鼠的学习记忆能力，保护神经元，其机制可能与调控PI3K/Akt/FoxO3a信号通路，下调自噬相关因子ATG5、Beclin1和LC3B表达和减少凋亡有关。  
        关键词：六味地黄丸;阿尔茨海默病;自噬;凋亡;叉头框转录因子O3a（FoxO3a）   
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        发布时间：2022-08-05
      • 张喆,赵舒,韩云鹏,靳枫,商佳荣,王杰鹏,方朝义
        2022, 28(17): 9-16. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221639
        摘要：目的观察补阳还五汤对特发性肺纤维化（IPF）大鼠Kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）/核因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶-1（HO-1）抗氧化信号通路的影响，探讨该方干预IPF的作用机制。方法将40只SPF级雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、尼达尼布组，每组10只。除假手术组外，其余各组气管内滴注博来霉素（0.005 g·kg-1）制备IPF大鼠模型。补阳还五汤组灌服补阳还五汤煎液（14.84 g·kg-1），尼达尼布组灌服尼达尼布混悬液（0.1 g·kg-1），假手术组、模型组灌服等容积生理盐水，共28 d。肺功能检测后，取血清及肺组织。苏木素-伊红（HE）染色和马松（Masson）染色观察肺组织病理改变并行半定量分析；检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量；测定血清和肺组织丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、免疫组化和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测Keap1、Nrf2、HO-1 mRNA与蛋白表达情况。结果与假手术组比较，模型组大鼠呼吸系统阻力和弹力增高，顺应性显著降低（P<0.01）；肺指数和病理评分、HYP含量显著升高（P<0.01）；血清和肺组织MDA含量增加，SOD、GSH-Px、CAT活性显著降低（P<0.01）；肺组织Keap1 mRNA与蛋白表达降低，Nrf2、HO-1 mRNA与蛋白表达显著升高（P<0.01）。与模型组比较，补阳还五汤组大鼠呼吸系统阻力和弹力下降，顺应性显著升高（P<0.01）；肺指数、病理评分、肺组织HYP含量显著降低（P<0.01）；血清和肺组织MDA含量下降、SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高（P<0.01）；肺组织Keap1表达降低，Nrf2、HO-1表达升高（P<0.05，P<0.01）。结论补阳还五汤可启动Keap1/Nrf2/HO-1介导的抗氧化效应，增强机体抗氧化能力，延缓IPF大鼠病理进程。  
        关键词：特发性肺纤维化;氧化损伤;Kelch样ECH相关蛋白-1（Keap1）/核因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶-1（HO-1）信号通路;补阳还五汤   
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        发布时间：2022-08-05
      • 乔宗惠,申思楠,邓敦,张舒清,雷磊
        2022, 28(17): 17-24. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221637
        摘要：目的探讨寿胎丸在脂多糖（LPS）诱导的人绒毛外滋养细胞（HTR-8/SVneo）损伤中的作用及其对细胞损伤中氧化应激和焦亡的调控，为寿胎丸安胎的作用机制研究提供新的方向。方法采用LPS（100 μg∙L-1）诱导HTR-8/SVneo细胞损伤建立细胞模型，设置空白组、模型组、寿胎丸组（10%寿胎丸含药血清）、抗氧化剂组（1 mmol·L-1 NAC）、NOD样受体热蛋白结构域3（NLRP3）抑制剂组（50 μmol·L-1MCC950）。分别采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）试剂盒检测细胞活性情况；Hochest 33342/PI双荧光染色和流式细胞术观察细胞死亡情况；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞上清液中白细胞介素-18（IL-18）、白细胞介素-1β（IL-1β）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）释放情况；DCFH-DA探针检测细胞内活性氧（ROS）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测NLRP3、胱天蛋白酶（Caspase）-1、消化道皮肤素D（GSDMD）、IL-1β蛋白的表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测NLRP3、Caspase-1 mRNA的表达。结果与空白组比较，模型组细胞活力显著降低（P<0.01），细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-18含量显著增加（P<0.01），氧化应激因子ROS、MDA含量升高，SOD活性显著降低（P<0.01），NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白和NLRP3、Caspase-1 mRNA表达显著上调（P<0.01）；与模型组比较，寿胎丸组、NAC组及MCC950组细胞活力显著升高（P<0.01），寿胎丸组和NAC组MDA、ROS活性降低，SOD活性显著升高（P<0.01），寿胎丸组和MCC950组细胞上清液中IL-1β、IL-18含量减少（P<0.01），细胞内NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白和NLRP3、Caspase-1、IL-1β mRNA表达均明显降低（P<0.05，P<0.01）。结论寿胎丸可通过抑制氧化应激和细胞焦亡减轻LPS诱导的HTR-8/SVneo细胞损伤，这可能是寿胎丸防治复发性流产，发挥安胎作用的机制之一。  
        关键词：寿胎丸;细胞损伤;氧化应激;细胞焦亡;复发性流产   
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        发布时间：2022-08-05
      • 朱敏,周阁,段金廒
        2022, 28(17): 25-32. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221006
        摘要：目的采用16S rRNA技术研究四物汤对雷公藤多苷致卵巢功能低下模型大鼠肠道菌群的影响，探讨四物汤改善卵巢功能低下的作用机制。方法20只8周龄雌性SD大鼠随机分为4组，分别为正常组、模型组、四物汤高、低剂量组。除正常组外，其他3组均按50 mg·kg-1灌胃雷公藤多苷片造模，连续给药14 d，第15天停止造模，高剂量组按人临床日用量（40 g）的3倍，低剂量组按人临床日用量的1.5倍给药，连续灌胃18 d，模型组和正常组灌胃等体积生理盐水。第18天，收集粪便用16S rRNA进行基因测序，给药后1 h，麻醉后腹主动脉取血，采用放射免疫法检测激素水平，取双侧卵巢，包埋切片后苏木素-伊红（HE）染色进行病理学观察。结果与正常组比较，模型组黄体生成素（LH）水平明显升高（P<0.05），雌二醇（E2）水平明显降低（P<0.05）；与模型组比较，四物汤高、低剂量组的LH水平均明显降低（P<0.05），E2水平均明显升高（P<0.05），四物汤给药后，能不同程度扭转雷公藤多苷造成的血清促卵泡激素（FSH）、LH水平明显升高，E2、孕酮（P）水平明显降低；正常组有大量处于不同发育阶段的各级卵泡，模型组中闭锁卵泡明显增多，四物汤高剂量组可见大量成熟卵泡、次级卵泡及初级卵泡，低剂量组黄体增加，可见原始卵泡、次级卵泡；与正常组和给药组比较，模型组疣微菌门和Epsilonbacteraeota的丰度明显减少；与正常组比较，模型组在门、纲、目、科、属分类层面上均存在差异菌群，其中模型组的厚壁菌门和拟杆菌门比例增加；雷公藤多苷造模后，毛螺菌科丰度明显降低，瘤胃菌属UCG-005丰度明显增加；四物汤给药组与正常组、模型组能明显区分开，且给药组具有向正常组靠近的趋势。结论四物汤对雷公藤多苷致卵巢功能低下模型大鼠有改善作用，其机制可能与调节肠道菌群多样性有关。  
        关键词：四物汤;卵巢功能减退;卵巢早衰;16S rRNA;肠道菌群   
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        发布时间：2022-08-05

        药理

      • 罗雅琴,于新阳,张月明,黄伟
        2022, 28(17): 43-51. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221636
        摘要：目的基于腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/Unc-51样激酶1（AMPK/mTOR/ULK1）信号通路介导的自噬探讨芪黄益气摄血方治疗免疫性血小板减少症（ITP）模型小鼠的作用机制。方法50只BALB/c小鼠随机分为5组，分别为正常组、模型组、芪黄益气摄血方高、低剂量组和强的松组，每组10只。采用豚鼠抗小鼠血小板血清（APS）腹腔注射方法，建立ITP小鼠模型；注射APS后的第8天，各组分别灌胃给药，连续14 d。检测外周血血小板计数（PLT）和血红蛋白（Hb）浓度变化；分离脾脏、胸腺组织，称质量，计算脏器指数；取胸骨做骨髓涂片，显微镜下进行骨髓巨核细胞分类；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清血小板生成素（TPO）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、γ干扰素（IFN-γ）水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测脾脏AMPK、mTOR、ULK1、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、自噬关键分子酵母Atg6同系物（Beclin1）、p62 mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测脾脏AMPK、p-AMPK、p-mTOR、p-ULK1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p62蛋白表达水平。结果与正常组比较，模型组小鼠外周血PLT计数、Hb及TPO水平明显下降（P<0.05，P<0.01），脾脏和胸腺指数显著升高（P<0.01），骨髓产板巨核细胞数显著减少（P<0.01），血清IL-6、TNF-α、IFN-γ水平显著升高（P<0.01），而IL-10、TGF-β1水平显著降低（P<0.01）；与模型组比较，芪黄益气摄血方高、低剂量组及强的松组显著增加模型小鼠PLT计数、TPO水平（P<0.01），明显降低脾脏和胸腺指数（P<0.05，P<0.01），明显增加骨髓产板巨核细胞数（P<0.05，P<0.01），明显降低血清IL-6、TNF-α、IFN-γ水平（P<0.05，P<0.01），明显提高IL-10、TGF-β1水平（P<0.05，P<0.01）；与芪黄益气摄血方低剂量组比较，芪黄益气摄血方高剂量组和强的松组在改善PLT计数、细胞炎性因子水平方面呈现不同程度的显著性差异（P<0.05，P<0.01）。Real-time PCR和Western blot结果显示，与正常组比较，模型组小鼠脾脏AMPK、LC3、Beclin1 mRNA和p-AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表达均明显上调（P<0.05，P<0.01），mTOR、ULK1、p62 mRNA和p-mTOR、p-ULK1、p62蛋白表达水平明显下调（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，芪黄益气摄血方高、低剂量组及强的松组可明显下调脾脏AMPK、LC3、Beclin1 mRNA和p-AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表达（P<0.05，P<0.01），同时明显上调mTOR、ULK1、p62 mRNA和p-mTOR、p-ULK1、p62蛋白表达水平（P<0.05，P<0.01）。结论芪黄益气摄血方可能通过调控AMPK/mTOR/ULK1信号通路抑制自噬的过度发生，从而调节免疫失耐受，发挥治疗ITP作用。  
        关键词：芪黄益气摄血方;免疫性血小板减少症（ITP）;自噬;腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/Unc-51样激酶1（AMPK/mTOR/ULK1）信号通路;炎症反应   
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        发布时间：2022-08-05
      • 刘莹,王兆博,申力,曹洪欣
        2022, 28(17): 52-59. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221103
        摘要：目的揭示温心方对心肌缺血再灌注损伤大鼠线粒体能量代谢的改善作用及其对沉默信息调节因子1（SIRT1）/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α（PGC-1α）/雌激素受体相关受体α（ERRα）能量信号通路的作用。方法SPF级Wistar雄性大鼠90只，随机分为假手术组、模型组、温心方低、中、高剂量组；温心方低、中、高剂量组分别给予0.99、1.98、3.96 g·kg-1的颗粒剂灌胃，假手术组和模型组均予以等体积生理盐水灌胃；预给药21 d后，模型组及温心方组采用冠状动脉左前降支结扎30 min，再灌注2 h复制大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）模型，假手术组只穿线，不结扎；TTC染色观察心肌梗死面积，苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织病理形态，试剂盒检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）和乳酸脱氢酶（LDH）活性、心肌组织ATP含量及线粒体复合体Ⅳ（CCO）、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织SIRT1、PGC-1α、ERRα、TFAM mRNA及蛋白表达。结果与假手术组比较，模型组心肌纤维断裂，排列紊乱，细胞胞质水肿，细胞核出现固缩、偏移；CK-MB、LDH活性明显升高（P<0.05，P<0.01），ATP含量及CCO、SDH活性明显降低（P<0.05，P<0.01），心肌组织心肌组织SIRT1、PGC-1α、ERRα、mtTFA mRNA及蛋白表达均明显降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，温心方预处理各组心肌梗死面积显著缩小，且以高剂量组最显著（P<0.01），心肌组织病理形态有所改善，CK-MB、LDH活性明显降低（P<0.05，P<0.01），ATP含量及CCO、SDH活性均有提高，以高剂量组最显著（P<0.01），心肌组织SIRT1、PGC-1α、ERRα、TFAM mRNA及蛋白表达均有不同程度提高（P<0.05，P<0.01）。结论温心方可通过调控SIRT1/PGC-1α/ERRα信号通路，改善心肌线粒体能量代谢，保护心肌缺血再灌注损伤。  
        关键词：温心方;心肌缺血再灌注损伤;线粒体能量代谢;过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α（PGC-1α）   
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        发布时间：2022-08-05
      • 刘静雯,王瑜,冯媛媛,贾茹,孙筱婷,王炎,李琦
        2022, 28(17): 60-66. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221025
        摘要：目的探讨补肾解毒方调控肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化对大肠癌转移的影响。方法构建C57BL/6小鼠大肠癌皮下移植瘤模型，随机分为正常组、补肾解毒方低、高剂量（11.2、22.4 g·kg-1）组，待肿瘤生长至1.5~2.0 cm3时剥离瘤体。剥离瘤体28 d后处死小鼠，观察小鼠肺转移情况。苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肺组织病理学变化，免疫荧光（IF）染色检测肺转移灶肿瘤细胞缺氧、凋亡变化；流式细胞术检测肿瘤组织中M1型和M2型巨噬细胞分群比；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中M2型巨噬细胞（M2-TAMs）极化相关基因（Arg1、CD206、CD163）的表达。结果正常组、补肾解毒方低、高剂量组小鼠转移率分别为70%、40%、10%。与正常组比较，补肾解毒方低、高剂量组转移率均降低，证明补肾解毒方抑制小鼠肺转移；HE染色表明，与正常组比较，补肾解毒方低、高剂量组肺转移灶中肿瘤细胞浸润显著减少（P<0.01）；免疫荧光染色结果表明，与正常组比较，补肾解毒方低、高剂量组肺转移灶中肿瘤细胞凋亡增多、缺氧环境改善；Real-time PCR结果显示，与正常组比较，补肾解毒方低、高剂量组肿瘤组织中M2型巨噬细胞极化基因（Arg1、CD206、CD163）表达显著下降（P<0.01）；流式细胞术显示，与正常组M2型巨噬细胞分群率为34.867%，补肾解毒方低、高剂量组M2型巨噬细胞分群率分别为22.033%、11.633%，显著降低（P<0.01）；与补肾解毒方低剂量组比较，补肾解毒方高剂量组M2型巨噬细胞分群率显著降低（P<0.01）， 证明补肾解毒方显著抑制肿瘤组织内M2型巨噬细胞激活，且呈剂量依赖性。结论补肾解毒方通过抑制肿瘤组织中M2型巨噬细胞激活抑制小鼠大肠癌肺转移。  
        关键词：补肾解毒方;肿瘤微环境;M2型巨噬细胞;大肠癌;侵袭转移   
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        发布时间：2022-08-05
      • 何俊慧,朱涪翠,李冬梅,韦洁,范建华,韦桂宁
        2022, 28(17): 67-74. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.202201005
        摘要：目的研究十大功劳叶提取物的抗抑郁作用及其潜在机制。方法经HPLC-MS/MS手段鉴定分离十大功劳叶提取物主要化学成分。通过小鼠行为绝望实验初步探究十大功劳叶提取物的潜在抗抑郁作用，将小鼠随机分为空白组、氟西汀组（10 mg·kg-1）、十大功劳叶提取物组（10、2.5 g·kg-1），连续灌胃给药12 d，于末次给药1 h后，测定小鼠游泳不动时间和悬尾不动时间。进而采用利血平（0.5 mg·kg-1）腹腔注射诱导大鼠抑郁模型探究其抗抑郁作用机制，分组如下，分别为正常组、模型组、氟西汀组（1.8 mg·kg-1）、十大功劳叶提取物组（10、2.5 g·kg-1），每天灌胃给药1次，连续10 d，末次给药1 h后，做行为学检查；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的水平；免疫组化法测定大鼠脑组织中IL-6和IL-1β蛋白的表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠海马组织中核转录因子-κB（NF-κB）和NOD样受体蛋白3（NLRP3）蛋白的表达。结果从十大功劳叶提取物中分离鉴定得到7种化学成分，主要为生物碱。小鼠行为绝望实验结果显示，与空白组比较，十大功劳叶提取物高剂量组小鼠游泳不动时间和悬尾不动时间明显缩短（P<0.05，P<0.01）。大鼠抑郁实验结果显示，与正常组比较，模型组中大鼠上睑下垂现象明显增加（P<0.05），圈内保留时间显著延长（P<0.01）；大鼠血清中IL-6、TNF-α水平明显升高（P<0.05）；大鼠脑组织中IL-6、IL-1β免疫组织化学染色阳性表达率显著升高（P<0.01）；大鼠海马组织中NF-κB、NLRP3蛋白表达显著升高（P<0.01）。与模型组比较，十大功劳叶提取物高剂量明显缩短大鼠在圈内保留时间（P<0.05），降低大鼠血清中IL-6、TNF-α水平（P<0.05，P<0.01），降低大鼠脑组织中IL-6、IL-1β免疫组织化学染色阳性表达率（P<0.01）；降低大鼠海马组织中NF-κB、NLRP3蛋白表达（P<0.05，P<0.01）。结论十大功劳叶提取物具有明显的抗抑郁作用，且能改善利血平诱导的抑郁大鼠炎症反应，其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3信号通路有关。  
        关键词：十大功劳叶;抑郁症;炎症;NOD样受体蛋白3（NLRP3）;核转录因子-κB（NF-κB）   
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        发布时间：2022-08-05
      • 蒋兵,杨韬,封龙飞,王涛,苏海翔
        2022, 28(17): 75-83. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221421
        摘要：目的红景天苷是从红景天的根茎部中提取得到的，是红景天中含量最高的天然活性化合物。该实验旨在研究红景天苷对人源性肝癌细胞（HepG2细胞）增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法选取未作任何处理的HepG2细胞作为空白组，以终浓度为20、40、80 μmol·L-1红景天苷处理的HepG2细胞作为红景天苷组。采用多功能细胞分析仪测定红景天苷对HepG2细胞增殖的影响，划痕实验测定红景天苷对HepG2细胞迁移能力的影响，Transwell小室实验测定红景天苷对HepG2细胞侵袭能力的影响，倒置显微镜观察红景天苷对HepG2细胞形态的影响，透射电镜观察红景天苷对HepG2细胞中线粒体的影响，流式细胞术分析红景天苷对HepG2细胞凋亡及周期分布的影响，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定红景天苷对HepG2细胞相关凋亡基因的影响，蛋白免疫印迹法测定红景天苷对HepG2细胞相关迁移、侵袭及凋亡蛋白的影响。结果与空白组比较，红景天苷组（20、40、80 μmol·L-1）细胞指数均明显下降（P<0.05），愈合面积均明显增加（P<0.05），且呈时间和浓度依赖性；红景天苷组（20、80 μmol·L-1）中能够穿过Matrigel基质胶的HepG2细胞数量呈浓度依赖性减少；红景天苷组（20、40、80 μmol·L-1）总凋亡率呈浓度依赖性升高，且阻滞细胞于G2/M期（P<0.05）；红景天苷组（20、80 μmol·L-1）上皮性钙黏附蛋白（E-cadherin）表达呈浓度依赖性升高（P<0.05），神经钙黏附蛋白（N-cadherin）表达呈浓度依赖性降低（P<0.05）。红景天苷组（20、40、80 μmol·L-1）胱天蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA表达、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）、Caspase-3蛋白及胱天蛋白酶-9（Caspase-9）蛋白表达均呈浓度依赖性升高（P<0.05），肌动蛋白结合蛋白（Girdin）及Bcl-2表达均呈浓度依赖性降低（P<0.05）。结论红景天苷对HepG2细胞的增殖、迁移及侵袭均具有抑制作用，且通过线粒体途径诱导HepG2细胞凋亡。表明红景天苷可作为一种潜在的肝癌化疗候选药物。  
        关键词：肝癌;红景天苷;增殖;迁移;侵袭;凋亡   
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        发布时间：2022-08-05

        临床

      • 朱旭东,杨明,叶和松,何麒,邵轶群
        2022, 28(17): 84-90. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221796
        摘要：目的探讨金水相生方对晚期前列腺癌患者5年生存率临床结局的影响及相关影响因素分析。方法采集2014年5月1日至2016年5月1日上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院和江苏省第二中医院泌尿外科门诊和病房收治的符合晚期前列腺癌并使用金水相生方辅助治疗的患者（观察组，155例），并根据患者年龄及Gleason评分同期采用倾向性评分法按1∶1的比例匹配未使用金水相生方的患者（对照组，155例）。观察各组患者1、3、5年雄激素抵抗率、生存率和中位生存期及中位无进展生存期，并通过卡方检验、t检验、Kaplan-Meier和Cox生存分析，分析筛选晚期前列腺癌预后因素。结果观察组1、3、5年雄激素抵抗率分别为9.0%（14/155）、72.3%（112/155）、92.9%（144/155），对照组1、3、5年雄激素抵抗率分别为20.6%（32/155）、87.7%（136/155）、97.4%（151/155），观察组1年（χ2=8.271，P<0.01）、3年（χ2=11.613，P<0.01）雄激素抵抗率显著低于对照组；观察组中位生存期和中位无进展生存期分别为（26.35±9.01）个月和（11.02±4.40）个月，对照组中位生存期和中位无进展生存期分别为（22.31±9.21）个月和（9.87±5.12）个月，与对照组比较，观察组中位生存期和中位无进展生存期显著延长，差异均具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）；观察组1、3、5年累计生存率分别为96.1%（149/155）、80.6%（125/155）、39.4%（61/155）；对照组1、3、5年累计生存率分别为94.2%（146/155）、60.0%（93/155）、22.6%（35/155），观察组3年（χ2=15.828，P<0.01）、5年（χ2=10.201，P<0.01）累计生存率显著高于对照组。单因素分析结果显示，Gleason评分、初始前列腺特异性抗原（PSA）、肿瘤发生部位、肿瘤分期、去势方案、放疗、化疗、全雄阻断治疗、金水相生方为预后相关因素（P<0.05，P<0.01）；多因素分析结果显示，初始PSA、肿瘤部位、肿瘤分期为影响晚期前列腺癌患者生存时间的独立危险因素，而金水相生方、去势方案、化疗、放疗与全雄阻断是影响晚期前列腺癌预后的独立保护因素。结论金水相生方对晚期前列腺癌患者的生存有保护作用，可降低晚期前列腺癌雄激素抵抗率和死亡风险，使患者生存获益，值得进一步推广。  
        关键词：金水相生方;倾向性匹配方法;雄激素抵抗;前列腺癌;生存分析   
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        发布时间：2022-08-05
      • 吴亚东,郭振光,邓文杰,齐晓艳,许京伟,鲁玉州,梁博程
        2022, 28(17): 91-97. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221323
        摘要：目的基于“脾主肌肉”理论探讨补中益气汤对脾胃气虚型老年性骨质疏松椎体压缩性骨折（OVCF）椎体成形术后患者骨转换标志物及生存质量的影响。方法选取自2020年1月至2021年1月，在日照市中医医院诊疗行椎体（后凸）成形术的老年性OVCF患者135例，采用区组随机方法，将受试者以2∶1分为观察组（90例）和对照组（45例），两组均采用骨化三醇胶丸（0.5 μg·d-1）、钙尔奇D（1 200 mg·d-1）进行抗骨质疏松基础治疗，观察组在此基础上采用补中益气汤治疗。观测两组以下指标：治疗前、治疗6、12个月后骨密度、血清Ⅰ型原胶原氨基端前肽（PINP）、血清骨钙素（OST）、血清β-胶联降解产物（β-CTx）、四肢骨骼肌指数（ASMI）、股四头肌肌力；治疗前、治疗3、6个月后中医证候积分、疼痛视觉模拟评分（VAS）；治疗前、治疗3、6、12个月后欧洲骨质疏松症基金会生活质量问卷（QUALEFFO）评分。结果观察组和对照组分别有85、41例患者获得随访，观察组一般疗效优于对照组（χ2=10.503，P<0.05）。与对照组比较，观察组PINP升高，β-CTx降低（P<0.05，P<0.01），骨密度和ASMI升高，股四头肌肌力增加（P<0.05，P<0.01），中医证候评分、VAS评分、QUALEFFO量表评分降低（P<0.05，P<0.01）；未发现与补中益气汤相关不良反应。结论补中益气汤可以调节脾胃气虚型老年OVCF术后患者骨代谢指标，可促进成骨，提高骨密度，同时可以增加四肢骨骼肌肌量和股四头肌肌力，减轻临床症状，改善生存质量，值得临床应用。  
        关键词：补中益气汤;老年性骨质疏松椎体压缩性骨折;骨转换标志物;生存质量   
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        发布时间：2022-08-05
      • 张虎,谭伟,阮佩,李春祥,张静,黄时萍,贾琼珍,张泉,王丽芳
        2022, 28(17): 98-105. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221793
        摘要：目的观察达格列净片联合麝香保心丸治疗气虚血瘀型射血分数降低心力衰竭（HFrEF）患者急性发作期的临床疗效。方法选取气虚血瘀型HFrEF急性发作期住院患者176例，随机分为对照组、麝香保心丸组、达格列净组、综合治疗组（后3组合称观察组），按各组设计方案实施综合治疗，分别于入院时、治疗1周、治疗2周记录患者纽约心脏协会心功能分级（NYHA分级）、6分钟步行实验（6MWT）、堪萨斯城心肌病问卷量表（KCCQ量表）、中医证候积分、N末端前体脑钠肽（NT-proBNP）、可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）、白细胞介素-6（IL-6）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、住院天数、院内死亡率、30 d内再入院率，并进行统计学分析，评价各组疗效。结果与对照组比较，麝香保心丸组患者治疗1周后，有更好的NYHA分级、KCCQ评分、中医证候评分及疗效、IL-6、hs-CRP（P<0.05，P<0.01）；治疗2周后，有更好的中医证候评分及疗效、hs-CRP（P<0.05，P<0.01）。与对照组比较，达格列净组治疗1周后，有更好的中医证候评分、NT-proBNP、sST2（P<0.05，P<0.01）；治疗2周后，有更好的NYHA分级、KCCQ评分、NT-proBNP、sST2及住院时长（P<0.05，P<0.01）。与对照组比较，综合治疗组患者治疗1周后，有更好的NYHA分级、6MWT、KCCQ评分、中医证候评分及疗效、NT-proBNP、sST2、IL-6、Hs-CRP（P<0.05，P<0.01）；治疗2周后，有更好的NYHA分级、KCCQ评分、中医证候评分及疗效、NT-proBNP、sST2、IL-6、hs-CRP及住院时长（P<0.01）。各组其余未列项与对照组比较差异无统计学意义。结论麝香保心丸、达格列净片可不同程度改善气虚血瘀型HFrEF患者急性发作期治疗效果，联合使用时优势更显著，同时具有较好的安全性与耐受性。  
        关键词：射血分数降低的心力衰竭;气虚血瘀型;急性发作期;达格列净;麝香保心丸;临床疗效   
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        发布时间：2022-08-05

        特异性PCR的应用专题

      • 陈梓媛,赵玉洋,谢旭桃,谢文波,金艳,蒋超,袁媛
        2022, 28(17): 106-112. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221012
        摘要：目的建立一种同时鉴别九里香药材两基原九里香Murraya exotica和千里香M. paniculata的DNA分子鉴别方法。方法通过比较九里香、千里香的叶绿体基因组序列差异，根据叶绿体基因组上的单核苷酸多态性（SNP）变异位点分别设计九里香和千里香的特异性鉴别引物P03和P04，对影响聚合酶链式反应（PCR）结果的退火温度、循环次数、引物浓度比进行优化，建立了九里香和千里香的多重位点特异性PCR鉴别方法，并对影响该方法重复性的Taq酶种类、PCR仪型号进行耐受性考察和适用性考察。结果在该多重位点特异性PCR鉴别方法中，当PCR反应循环数为31次，退火温度为60 ℃，九里香P03和千里香P04引物比为1∶2时，九里香可获得约330 bp的特异性条带，千里香可得到约230 bp的特异性条带，不同来源的九里香和千里香样品使用建立的多重位点特异性PCR鉴别方法均可获得一致结果。结论该文建立一种快速、准确鉴别九里香药材基原的多重位点特异性PCR鉴别方法，可在单次鉴定操作中根据条带位置同时鉴别九里香和千里香。  
        关键词：九里香;千里香;多重位点特异性聚合酶链式反应（PCR）;分子鉴别   
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        发布时间：2022-08-05
      • 谢莹,华中一,赵玉洋,周骏辉,李晓琳,袁媛
        2022, 28(17): 113-118. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221212
        摘要：目的建立一种快速筛选高纯合度天麻种质材料的方法，为其纯系育种和杂交育种奠定基础。方法以本课题组前期天麻全基因组测序和群体重测序为基础，利用单核苷酸多态性（SNP）位点开发20个限制性内切酶片段长度多态性（RFLP）标记，并采用聚合酶链式反应（PCR）-RFLP法对15份天麻种质的20个RFLP标记进行限制性内切酶实验，根据20个RFLP标记位点酶切条带数目，计算15份天麻种质的纯合度，进而对天麻种质纯合度进行评估；在此基础上，利用基因组重测序技术对评估结果进行验证。结果利用PCR-RFLP法筛选获得10份纯合度>95%的种质材料，其中3份种质材料的纯合度为95%，7份种质材料的纯合度为100%；利用基因组重测序法筛选获得9份纯合度>95%的种质材料，其中8份种质材料与PCR-RFLP法检测结果一致。结论该文所建立的用于筛选高纯合度天麻种质的PCR-RFLP法精确度为80%，准确率为89%。该方法实验操作简便、检测效率高，且成本显著低于基因组重测序技术，为天麻纯系育种提供了技术支撑，也为其他中药材品种选育研究提供了借鉴。  
        关键词：天麻;单核苷酸多态性（SNP）位点;限制性内切酶片段长度多态性（RFLP）标记;纯合度   
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        发布时间：2022-08-05
      • 胡力,赵玉洋,袁媛,蒋超
        2022, 28(17): 119-126. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221211
        摘要：目的为保障临床用药的安全性和有效性，建立地龙（参环毛蚓）药材及其加工制品混伪、掺假特异性聚合酶链式反应（PCR）鉴定方法。方法根据地龙氧化酶亚基1（COⅠ）基因序列筛选出地龙配方颗粒的稳定引物区间，并根据区间内筛选获得地龙的特异性单核苷酸多态性（SNP）位点，根据SNP位点设计地龙特异性鉴别引物dlshmy-F及dlshmy-R，分别采集地龙及其混伪品，建立地龙配方颗粒特异性PCR鉴别方法并优化PCR反应体系，对该方法进行耐受性和适用性考察。结果退火温度为62 ℃，循环次数为36次，地龙及其配方颗粒经PCR反应及凝胶电泳后，可在约170 bp处观察到单一明亮的特异性鉴别条带，其他近源伪品如通俗环毛蚓、保宁腔蚓、栉盲环毛蚓等20种伪品及阴性对照均无条带。结论该研究建立的特异性PCR鉴别方法可快速准确的鉴别出地龙药材、配方颗粒、冻干粉中的参环毛蚓源性成分，准确鉴定出全国广地龙中药材及饮片以及地龙的基原，也可为其他的中药配方颗粒质量标准研究提供了参考。  
        关键词：地龙（参环毛蚓）;配方颗粒;聚合酶链式反应   
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        发布时间：2022-08-05
      • 刘志浩,陈梓媛,李晓琳,蒋超,金艳,赵玉洋,袁媛
        2022, 28(17): 127-132. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221112
        摘要：目的基于特异性聚合酶链式反应（PCR）建立了一种中亚苦蒿药材的鉴别方法，可以准确、便捷地鉴别中亚苦蒿及其近缘种。方法利用Chloroplast Genome Information Resource（CGIR）数据库查找中亚苦蒿及其近源种叶绿体基因组序列，并筛选获得中亚苦蒿特异性单核苷酸多态性（SNP）位点，根据SNP位点设计一对中亚苦蒿特异性鉴别引物zykh1-F和zykh1-R。采集中亚苦蒿及其常见近缘种的原植物样本，建立中亚苦蒿特异性PCR鉴别方法并优化反应体系，对该方法进行耐受性和适用性考察。利用该方法对从新疆药材市场购买中亚苦蒿药材样本进行鉴别。结果中亚苦蒿特异性PCR鉴别方法采用鉴别引物zykh1-F和zykh1-R，退火温度为54 ℃、循环次数为33次。经PCR扩增和凝胶电泳后中亚苦蒿在210 bp处可观察到单一明亮条带，其余近缘种如艾、黄花蒿、白叶蒿、野艾蒿均无条带。结论该研究所建立的中亚苦蒿特异性PCR鉴别方法可准确鉴别中亚苦蒿及其常见近缘种，具有高度特异性，且该方法节约时间和成本，为中亚苦蒿资源引种和利用提供一种方便快捷的物种鉴别方法。  
        关键词：蒿属;中亚苦蒿;聚合酶链式反应;外来药用资源   
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        发布时间：2022-08-05
      • 刘亚男,华中一,赵玉洋,金艳,彭华胜,蒋超,蒲婧哲,袁媛
        2022, 28(17): 133-139. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221013
        摘要：目的冷背药材作为宝贵的药材资源，但因其本身的特殊性和复杂性，导致其鉴别成为中药鉴定中的难题，因此亟需建立冷背药材的鉴别方法。该研究利用DNA特征序列（DSS）标记，建立一种冷背药材木槿皮基原植物木槿及其混伪品的特异性聚合酶链式反应（PCR）鉴别方法。方法基于叶绿体基因组序列分析获得木槿皮的候选DSS标记，使用DNA测序手段对DSS标记进行验证，基于得到的可靠DSS标记设计木槿皮基原植物特异性鉴别引物，对PCR反应条件进行优化，并进行耐受性和适用性的考察。结果将扩增产物的测序结果与DSS比对后得到了1个可用于鉴定木槿的DSS标记，揭示了木槿正混伪品的区别特征，根据DSS标记设计出一对木槿正品特异性鉴别引物，使用该引物进行PCR扩增和凝胶电泳后木槿均出现约270 bp的单一明亮条带，而其4种混伪品均无此条带。结论该研究得到的1个DSS标记可用于木槿的真伪鉴定，基于此DSS标记设计的特异性鉴别引物可准确、简便的鉴别木槿皮的基原植物及其混伪品，为木槿正伪品的分子鉴定提供了新的方法与思路。  
        关键词：DNA特征序列标记;木槿皮;混伪品;特异性聚合酶链式反应（PCR）   
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        发布时间：2022-08-05

        药学基础

      • 郭延秀,曹后康,席少阳,刘立,马晓辉,马毅,林丽,郑贵森,晋玲
        2022, 28(17): 140-149. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220415
        摘要：目的了解甘肃省药用植物资源种类空间分布特征，分析造成该空间分异的原因、变化趋势及影响的驱动因子，为甘肃省药用植物资源的合理开发和可持续发展提供科学依据。方法运用全局空间自相关分析、趋势表面分析、局部空间自相关分析和热点分析等地统计分析技术，对第四次全国中药资源普查甘肃省87个县（区）药用植物资源种类丰富度及空间分布差异进行分析，并以植被类型、土壤质地、年平均气温、年平均降水量、海拔等为自然驱动因素，进一步分析本省药用植物资源空间分布格局与驱动因子的相关性。结果甘肃省药用植物资源种类丰富度高或低的县（区）表现出集中分布的空间格局，其中种类丰富度高且集中分布在东南部，种类丰富度低的县（区）聚集分布在西北部；影响冷热点区域的主导驱动因子有植被类型、土壤质地类型构成比例、年均降雨量等。结论甘肃省药用植物资源物种丰富度由西向东、由北向南呈递增趋势；自然驱动因子是影响药用植物资源多样性的重要因子，也是影响其空间分布格局的主导因子，其变化对药用植物资源的多样性及空间分布具有显著差异。  
        关键词：第四次全国中药资源普查;空间分布;药用植物;物种丰富度;自然驱动因子   
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        发布时间：2022-08-05
      • 施宇,刘晓峰,单丽倩,高慧
        2022, 28(17): 150-156. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212450
        摘要：目的对胆南星发酵过程中的微生物进行分离与鉴定，筛选优势菌种并对胆南星复合菌种发酵进行探索，以解决胆南星杂菌发酵工艺产品质量及稳定性不易控制的问题。方法取胆南星发酵过程中的深层培养物进行菌种分离与纯化，运用细菌、真菌多相鉴定检测方法及全自动微生物分析系统，比对DNA序列，鉴定微生物，将分离鉴定出的菌种分别进行纯种发酵并筛选优势菌种，将筛选出的优势菌种进行复合菌种发酵探索，比较复合菌种发酵胆南星与传统发酵胆南星的指标成分含量差异。采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法（UPLC-QqQ-MS/MS）对传统发酵胆南星和复合菌种发酵胆南星中的指标成分进行含量测定，流动相0.1%甲酸乙腈溶液（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~2 min，35%~45%A；2~10 min，45%~48%A；10~12 min，48%~100%A；12~12.01 min，100%~35%A；12.01~15 min，35%~65%A），流速0.35 mL·min-1，采用电喷雾电离源（ESI），负离子采集模式，扫描方式为多反应监测（MRM）模式，采集范围m/z 50~1 000。结果从胆南星深层培养物中共分离鉴定了8种微生物，筛选出肠球菌属Enterococcus sp.（厌氧）和铅黄肠球菌E. casseliflavus是胆南星发酵过程中的优势菌种，以二者作为复合菌种发酵制得的胆南星与传统发酵法样品比较，游离型胆酸中的鹅去氧胆酸、猪去氧胆酸和猪胆酸质量分数分别增加1.76、0.06、0.19 mg·g-1，结合型胆酸中的甘氨鹅去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、牛磺猪去氧胆酸、甘氨猪胆酸、牛磺猪胆酸含量较传统发酵胆南星分别降低0.63、0.23、0.26、0.16、0.03、0.04 mg·g-1。结论复合菌种（肠球菌属和铅黄肠球菌）发酵能够使胆南星发酵更加完全，缩短发酵周期，并能够提高产品的质量及其稳定性。  
        关键词：胆南星;发酵工艺;菌种鉴定;中药炮制;优势菌种;胆酸;超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法（UPLC-QqQ-MS/MS）   
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        发布时间：2022-08-05
      • 乌仁吉如拉,金淑杰,乌雅汉,青格乐,红鹰,呼和,阿如娜,吴七十三,包桂花,奥乌力吉,许亮
        2022, 28(17): 157-163. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221011
        摘要：目的应用核糖体基因内转录间隔区（ITS）2序列对乌头属12种药材进行DNA条形码（DNA barcoding）分子鉴定，并确定其亲缘关系。方法收集乌头属12种药材共计30份，运用离心柱型植物基因组试剂盒的方法提取DNA、使用ITS2序列通用引物进行聚合酶链式反应（PCR）扩增、电泳检测后双向测序，应用CodonCode Aligner 17.0软件对测序序列和峰图进行校对拼接，利用MEGA 7.0软件进行序列变异分析，采用ITS2 Database在线工具预测其二级结构，使用邻接法（NJ）构建系统聚类树。结果乌头属12种药材ITS2序列长度为220~221 bp，鸟嘌呤和胞嘧啶（GC）平均含量为64.09%；变异位点共140个，信息位点共137个，保守位点共81个，种内遗传距离（K2P）小于种间K2P；在ITS2序列二级结构和NJ聚类分析中，花葶乌头、西伯利亚乌头和高乌头的亲缘关系接近，其他9种药材的亲缘关系接近，其中华北乌头和阴山乌头的亲缘关系更为接近。结论ITS2序列在乌头属12种药材分子鉴定及确定亲缘关系方面具有较好的应用价值，为民族药的资源保护、开发应用方面提供新的思路、技术和方法。  
        关键词：乌头属;内转录间隔区（ITS）2序列;二级结构和邻接法（NJ）聚类分析;DNA条形码;分子鉴定   
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        发布时间：2022-08-05

        数据挖掘

      • 梁鸿艺,刘志勇,刘晓菲,李静蔚
        2022, 28(17): 164-172. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221014
        摘要：目的利用网络药理学预测补肾活血汤干预乳腺癌内分泌治疗相关骨质疏松的潜在作用机制，并通过体外细胞模型进行实验验证。方法首先通过网络药理学筛选补肾活血汤的主要有效化学成分和作用靶点，进一步获取乳腺癌内分泌治疗相关骨质疏松相关的疾病靶点。将二者的共同靶点信息进行基因本体（GO）功能注释和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。其次利用生存分析网站（Kaplan-Meier Plotter）对关键靶点进行生存分析。最后通过体外实验噻唑蓝（MTT）比色法评估细胞增殖抑制活性，蛋白免疫印迹法（Western blot）验证关键靶点及通路，并使用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）评估关键靶点mRNA表达。结果网络药理学研究共获得补肾活血汤活性成分716个，关键靶点249个，补肾活血汤和乳腺癌内分泌治疗相关骨质疏松的共同靶点135个，其中蛋白激酶B（Akt）1、低氧诱导因子-1α（HIF-1α）是两个关键靶点，靶点共涉及生物过程531种，细胞组成62种，分子功能162种，参与乳腺癌、内分泌抵抗等细胞信号通路145条；靶点有效地富集在磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/Akt和低氧诱导因子（HIF）-1两条信号通路。体外实验中，MTT比色法显示，与空白组比较，22.5、45、90 g·L-1及45、90、180 g·L-1质量浓度的补肾活血汤作用48 h后分别能不同程度的降低人Luminal A型乳腺癌细胞系MCF-7和T47D细胞增殖率和细胞运动能力。将0、15、60 g·L-1的补肾活血汤干预MCF-7细胞48 h，Western blot实验表明，与空白组比较，不同质量浓度的补肾活血汤作用于MCF-7细胞中磷酸化（p）-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt和HIF-1α蛋白相对表达水平均降低（P<0.05，P<0.01），且呈浓度依赖性。采用Real- time PCR检测关键靶点HIF-1α的mRNA表达，结果显示，与空白组比较随浓度升高MCF-7细胞中HIF-1α的mRNA表达显著降低（P<0.01），且呈浓度依赖性。结论补肾活血汤通过PI3K/Akt/HIF-1信号通路作用于关键靶点Akt1、HIF1A，进而干预乳腺癌内分泌治疗相关的骨质疏松。  
        关键词：补肾活血汤;乳腺癌;骨质疏松;磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）;低氧诱导因子-1α（HIF-1α）   
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        发布时间：2022-08-05

        学术探讨

      • 白娟,宋亚刚,留甜甜,苗明三
        2022, 28(17): 173-179. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221222
        摘要：目的食管癌是一种常见的上消化道恶性肿瘤，在中国食管癌发病率和死亡率都较高，其发病率逐年攀升，生存率低，严重威胁人类生命健康。为了进一步探索食管癌的发病机制及其系统、高效的诊疗方法，笔者基于食管癌的中西医临床病证特点，根据团队前期建立的动物模型评价方法，开展食管癌动物模型的评价，提出模型完善建议。方法通过中国知网、万方等数据库，对现有食管癌动物模型进行归纳整理，并对模型相关指标赋值，与食管癌中西医临床诊断指南进行吻合度评价。结果除较少采用的自发性食管癌动物模型与临床吻合度较高外，甲基苄基亚硝胺诱发性动物模型与临床吻合度较高，该动物模型虽在一定程度上可模拟食管癌发病的病因病机，且部分体现西医临床诊断的部分指标，可反映中医形体消瘦，指甲发紫，饮水次数增加等整体表现，但对中医证候的区分仍有欠缺。结论甲基苄基亚硝胺诱发性动物模型和人食管癌细胞异种胃壁移植的小鼠模型在原有造模基础上，施加以痰气互阻证、血瘀痰滞证、阴虚内热证和气虚阳微证证型干预因素，并加以区分，体现出中医证候的表现，获得食管癌的中医药病证结合动物模型，使食管癌动物模型更能反映食管癌中医临床的病证表现，体现中医病证结合动物模型的特点，模拟中西医临床实际，更好的为基础研究提供确切的病理模型载体。  
        关键词：食管癌;临床病证;动物模型;评价分析   
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        发布时间：2022-08-05
      • 王虎平,米彩云,周君
        2022, 28(17): 180-187. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221791
        摘要：阿尔茨海默病（AD）是一种年龄高度相关的神经系统疾病，是造成老年期痴呆的最主要原因，亦是导致老年人丧失日常生活能力的最常见疾病，将给患者、家庭及社会带来沉重的精神负担和经济压力。中医可将其归属于“痴呆”“呆门”“呆病”等疾患范畴，传统认为以肾虚为本，多从肾论治。课题组结合肝的生理病理特性，提出了“肝肾同调”是防治AD的重要思路。AD以β淀粉样蛋白（Aβ）沉积和神经原纤维缠结（NFT）为主要病理表现，其发病机制复杂。越来越多的研究表明，免疫炎症在AD的发病过程中起着重要作用，通过核转录因子-κB（NF-κB）/NOD样受体热蛋白结构域3（NLRP3）/胱天蛋白酶-1（Caspase-1）/白细胞介素-1β（IL-1β）信号通路调控神经免疫炎症将是治疗AD的重要靶点。该文基于“肝肾同调”的重要思路，遴选其代表名方黑逍遥散，从调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路进而抑制神经免疫炎症角度探析防治AD的作用与机制，以期进一步推进黑逍遥散防治AD的深入研究，亦为中医药防治AD的思路策略抛砖引玉。  
        关键词：阿尔茨海默病;黑逍遥散;研究思路;肝肾同调;免疫炎症;信号通路   
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        发布时间：2022-08-05

        药事管理

      • 郭东晓,于姗姗,郭衍珩,崔小菲,秦欢,崔伟亮,林永强,刘洪超
        2022, 28(17): 188-194. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220453
        摘要：中药配方颗粒试点工作结束后，国家和各省药监部门相继发布实施了约440个品种的配方颗粒标准。基于前期工作，笔者拟对山东省配方颗粒标准复核和审评中遇到的部分技术问题进行分析，主要涉及原料执行标准及区分技术、制法项辅料加入工序、质量控制方法合理性、特征图谱信息量及重复性、标准物质命名及可及性等方面内容，并对现阶段我国中药配方颗粒标准品种覆盖面、规格差异、质量控制项目完整性等共性问题进行深入探讨，提出了推动省级标准升国家标准、加速标准物质研发、倡导使用优质原料、探索优质产品评价路径、加强全过程质量监管等建议，以期为配方颗粒国家和省级标准的制定提供参考，促进配方颗粒标准体系不断完善，保障我国配方颗粒产业健康有序发展。  
        关键词：中药配方颗粒;标准制定;质量控制;生产工艺;全过程监管;技术问题;对策分析   
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        发布时间：2022-08-05

        综述

      • 伏江龙,杨雪,万宛若,张帆,侯小涛,邓家刚,郝二伟
        2022, 28(17): 195-208. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.202201004
        摘要：心血管疾病是当今世界上最主要的死因。动脉粥样硬化（AS）是一种动脉管壁增厚或功能退变的慢性炎症性疾病，病变后期斑块破裂发生血栓，进而引起组织或器官缺血，故也是导致各类心血管疾病发生的病理基础。核转录因子-κB（NF-κB）作为炎症反应中重要的核转录因子，被激活后可介导炎症因子的转录，能诱发AS发病或是加重病情。血管内皮细胞在炎症因子等刺激下相关机制被激活，NF-κB介导内皮细胞内相关调控基因，分泌黏附分子、趋化因子和凝血因子，促进单核细胞等选择性聚集，上调黏附分子的表达，使黏附分子黏附于细胞内皮并向内膜迁移，促进细胞外基质的降解，形成不稳定斑块等。近年来，中医药在防治AS上取得了一定成效，发现了许多中药可以抗AS，可作用于人体的多个靶点，在不同环节上影响AS发生和发展。该文章主要介绍了NF-κB通路及其与AS的关系，黄酮类、萜类和生物碱类等不同类型的75个中药单体成分在基于NF-κB通路抗AS中的研究现状，发现中药单体主要通过调节NF-κB通路起到调控胆固醇平衡、抑制炎症反应、减少细胞增殖、抑制细胞间黏附和抑制泡沫细胞形成等作用，以期为防治AS的研究提供参考。  
        关键词：动脉粥样硬化;核转录因子-κB（NF-κB）;中药;炎症;中药单体   
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        发布时间：2022-08-05
      • 孔欠文,陈君君,胡玉洁,薛晓川,石美智,周阳云,张敏,胡九东,杨姣,韩永龙
        2022, 28(17): 209-216. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220928
        摘要：紫杉醇是多种癌症的一线化疗药物，但其耐药性的产生使得其后期治疗疗效大大降低，增加了癌症患者的死亡率及复发率，严重限制了其临床应用。目前，临床上的一些中药复方、中成药、中药注射液等辅助化疗药物治疗癌症患者的应用已十分广泛，中药在提高化疗药物疗效、降低化疗不良反应及改善预后等方面均展示出独特的优势，但其发挥逆转化疗药物耐药的作用机制及有效单体成分尚未明确，在不同癌症类型的应用方面也十分局限，值得进一步挖掘和探究。该文总结了近年与紫杉醇联用具备协同抗肿瘤疗效的中药单体成分，并分类列举了其发挥逆转紫杉醇耐药作用的具体机制及药理活性，发现中药单体不仅通过作用于膜转运蛋白促进紫杉醇在肿瘤细胞内的蓄积、抑制多药耐药相关蛋白及代谢酶表达抑制紫杉醇的代谢、调控细胞凋亡基因、因子水平及凋亡相关通路促进紫杉醇发挥细胞增殖抑制作用，还可通过调控微小RNA（microRNA）及长链非编码RNA（lncRNA）表达水平、抑制肿瘤干细胞特性及肿瘤代谢重编程、改善肿瘤微环境、触发肿瘤细胞死亡性自噬及氧化应激反应等方面显著提高紫杉醇的化疗敏感性，为明确中药单体联合紫杉醇抗肿瘤的具体机制提供理论基础，对中药新药开发及临床寻找紫杉醇的联合用药具有重要意义，也对中药与其他化疗药物联合应用的探究具有一定参考价值。  
        关键词：中药单体;紫杉醇;联合用药;逆转耐药机制   
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        发布时间：2022-08-05
      • 刘谊民,张黄琴,刘玉萍,陈彦
        2022, 28(17): 217-225. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212155
        摘要：肝癌是世界范围内的恶性肿瘤，发病率逐年上升，预后差且尚无有效治疗药物。淫羊藿用药历史悠久，临床可用于肝癌的治疗。现代研究表明，淫羊藿素、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ和朝藿定C等C-8位异戊烯基取代的黄酮醇及其苷类成分，以及淫羊藿多糖（EPS）具有良好的抗肝癌活性，是淫羊藿抗肝癌的主要活性成分。淫羊藿中黄酮类成分可以通过抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡、改善肿瘤免疫抑制微环境、抑制肝癌细胞免疫逃逸、抑制肝癌细胞侵袭和迁移、逆转肝癌细胞耐药性、抑制肝癌起始细胞干性特征、调节免疫系统功能等多种机制发挥抗肝癌作用；EPS则主要通过调节机体免疫而发挥抗肝癌作用。淫羊藿通过多成分、多靶点、多途径共同发挥抗肝癌作用，是具有较高研究价值的抗肝癌药物，但相关方面的综合分析尚有欠缺。基于此，笔者对淫羊藿抗肝癌的活性成分及作用机制进行了梳理。此外，经过文献梳理发现，目前淫羊藿抗肝癌的研究集中在几个单体成分，并且从整体上阐释淫羊藿抗肝癌活性成分及作用机制的研究不足，笔者针对这些问题提出了相应建议，以期为淫羊藿抗肝癌物质基础研究及其临床应用、合理开发提供参考。  
        关键词：淫羊藿;肝癌;活性成分;黄酮类;多糖;作用机制;耐药性   
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        发布时间：2022-08-05
      • 杜清,刘熠新,叶明方,吴光鹏,管咏梅,李慧婷,黄小英,杨明
        2022, 28(17): 226-234. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221722
        摘要：乳腺癌是一种多致病因子作用产生的全身性恶性肿瘤，病理发生机制复杂且迄今为止尚未明确，已日渐成为威胁女性生命健康的第一大杀手。现代医学治疗乳腺癌的常用手段以外科手术切除病灶并结合放射及化学疗法、内分泌治疗、靶向治疗等的综合疗法为主，但西医疗法局限性大，实际临床中仍有相当一部分乳腺癌患者的病情控制不佳、肿瘤复发率高，同时这些方法产生的一系列不良反应和并发症也较大程度地影响患者的生活质量。故开发新的药物或寻找安全有效的替代疗法对抗乳腺癌刻不容缓。中药挥发油作为一类独具特色的挥发性中药材组分，在抗炎、抗病毒、抗肿瘤等方面具有显著的药理活性，通过发挥扶正祛邪、行气化瘀、温阳化瘀、疏肝解郁的独特疗效，其在乳腺癌的干预治疗领域得到应用并取得一定的成效。近年来国内外诸多学者证实中药挥发油及其化学成分能通过多途径的作用机制防治乳腺癌，但缺乏系统性梳理归纳，笔者通过查阅近年中外文相关文献，发现其可通过调节体内雌激素水平、抑制癌细胞增殖与诱导其凋亡、增强机体免疫、抗炎和调控情绪等机制途径有效抑制乳腺癌的发生发展。基于此，该文通过综述乳腺癌的发病机制、中药挥发油防治乳腺癌的优势和特色及中药挥发油干预乳腺癌的作用机制3个方面，以期为中药挥发油治疗乳腺癌的相关研究拓展新的思路与方法。  
        关键词：中药挥发油;乳腺癌;病因病机;优势特色;作用机制   
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        发布时间：2022-08-05
      • 徐季轩,马晓静,陈泓颖,高小力,佟海英,屠鹏飞,安超,柴兴云
        2022, 28(17): 235-247. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220355
        摘要：我国缺血性心脏病发病率逐年增加，给家庭和社会造成了严重的负担，亟待寻找更好的治疗手段和医疗方案。基于象数思维、整体观等思维方式和临床经验，我国主要少数民族医药逐渐发展出独特的理论体系与治疗特色，在防治缺血性心脏病方面具有极大的应用潜力及研究价值。其中藏族医药（以下简称“藏医药”）、蒙古族医药（以下简称“蒙医药”）、傣族医药（以下简称“傣医药”）均可归属于以自然观与生命观为哲学基础的医学系统，各自发展出“三因”“三根”“四塔五蕴”理论，形成了对缺血性心脏病的独特认识并提出了相应的治法治则，产生了以三味檀香散、八味沉香散、肉蔻五味丸、雅叫哈顿散为代表的经典方剂，并具有以广枣、红景天、血竭为代表的特色民族药资源。笔者拟以藏医药、蒙医药为主，归纳民族医药防治缺血性心脏病的相关研究，并探讨开展该类研究所面临的机遇和挑战，以期为民族药防治缺血性心脏病的临床应用及新药开发研究提供参考。  
        关键词：民族医药;缺血性心脏病;藏族药;蒙古族药;傣族药;基础研究;临床研究   
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        发布时间：2022-08-05
      • 娄原,姜雅楠,徐浩群,王媛
        2022, 28(17): 248-257. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221641
        摘要：脑缺血再灌注损伤（CIRI）是缺血性脑卒中血流供应恢复后出现的脑组织结构和功能进一步损伤的现象，严重影响患者生存质量。CIRI的病理机制复杂，主要涉及兴奋性氨基酸毒性、细胞凋亡、炎症及氧化应激损伤等。研究发现，中药材及其活性成分在CIRI的防治方面显现出独特优势和良好应用前景。槲皮素为植物性黄酮类化合物，广泛存在于多种中药，已有研究证实其可通过抗炎、抗氧化、抑制细胞凋亡、保护血脑屏障、激活线粒体自噬等多种途径改善CIRI，减轻脑损伤，但对于其具体作用机制及分子靶点的研究略有不足。此外，研究人员针对槲皮素生物利用度低和溶解性差的问题，研制出多种改善槲皮素生物活性成分分散状态，提高化学稳定性，增加临床应用率的递送系统；并针对槲皮素长期使用的安全性进行了实验评价，证实低剂量使用槲皮素具有较好的耐受性及安全性。综上，笔者通过对近年来国内外相关文献进行分析，对槲皮素治疗CIRI的作用靶点及机制研究、药物递送及安全性评价等予以综述，以期为槲皮素的进一步开发和推广应用提供理论依据。  
        关键词：槲皮素;脑缺血再灌注损伤;作用机制;药物递送;安全性评价   
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        发布时间：2022-08-05
      • 颉玙,张金梅,张敏,雷霆
        2022, 28(17): 258-266. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221004
        摘要：截止2020年我国糖尿病患者总人数超过1.2亿，糖尿病创面是糖尿病最常见的并发症之一，其患病率逐年上升且具有一定的致残率和致死率。中草药治疗糖尿病创面历史悠久，具有良好的疗效和安全性。近年来，越来越多的学者以各中草药的多糖活性成分为研究重点，探讨中药多糖对糖尿病创面的修复机制。中药多糖被认为是中药的主要活性成分，几乎每种中药多糖都具有一种或多种降糖机制。然而现研究大多集中于探索单味中药多糖的修复机制，鲜有对其进行深入探讨及归纳总结，因此该文通过检索并整理相关文献，归纳中药多糖修复糖尿病创面的作用机制，从调控创面炎症反应，改善炎症微环境、降血糖机制及促进成纤维细胞迁移与增殖、调控创面生长因子促进血管新生、抑制氧化应激反应、调节免疫功能等方面对中药多糖修复糖尿病创面的作用机制展开综述，并对未来可能的研究方向提出一些建议，以期开发出符合国际标准又具有中医特色的糖尿病创面修复新疗法，同时为糖尿病创面的治疗提供临床参考。  
        关键词：糖尿病;糖尿病创面;中药多糖;作用机制;研究进展   
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        发布时间：2022-08-05
      • 张晓婷,张英,张戴英,孟江,孙悦,王淑美,曹晖
        2022, 28(17): 267-274. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20212053
        摘要：陈皮是我国常用的传统中药，笔者通过查阅历代本草专著及相关研究文献资料、比较历版《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）及各地方炮制规范，对陈皮炮制历史沿革、现代炮制规范、炮制前后化学成分及药理作用研究进行了梳理，发现陈皮的历代炮制方法以净制、切制和炒制为主；历版《中国药典》中收录的陈皮炮制方法均为净制、切制；现代各地方炮制规范中主要有炒、蒸、制炭等炮制方法。陈皮主要成分为挥发油和黄酮类化合物，经炮制后挥发油总量普遍降低，挥发性及黄酮类成分种类及含量发生了不同变化，这可能是造成陈皮炮制前后药效差异的主要原因。目前关于陈皮炮制工艺的优化主要集中在蒸制、醋制及烘烤。关于陈皮的药理作用研究主要集中在生品降血脂、止咳平喘化痰及抑制肺纤维化等方面，比较陈皮炮制前后药效变化的研究较少，尚需深入阐释陈皮炮制前后的物质基础和作用机制，以规范其炮制方法、建立专属性质量标准。  
        关键词：陈皮;中医药;炮制规范;化学成分;挥发油;黄酮类;药理作用   
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        发布时间：2022-08-05
      • 何志军,魏晓涛,张玉昌,刘涛,王威威
        2022, 28(17): 275-282. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221794
        摘要：糖尿病神经痛（DNP）是最常见的糖尿病周围神经系统并发症之一，具有治疗难度大、迁延难愈的特点，在临床上多表现为疼痛阈值降低、肢体末端神经性疼痛、异常性疼痛。既往研究表明，核转录因子-κB（NF-κB）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、Toll样受体4（TLR4）、核转录因子E2相关因子2（Nrf2）、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）等信号通路作为最经典细胞信号通路，可通过抑制炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）的释放和活性、调控炎症介导因素［如活性氧（ROS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、环氧合酶-2（COX-2）、NF-κB抑制蛋白（IκB）］、抑制神经源性炎症、破坏周围神经持续病损状态、修复病损的周围神经达到治疗DNP的效果。通过查阅大量现代医学研究文献发现，无论是中药单体、中药复方治疗DNP均与所述信号通路有着直接或间接的关系，并通过调控相关信号通路的关键蛋白分子表达，达到控制神经源性炎症，保护糖尿病周围神经病理性损伤，治疗DNP的作用。该文通过对国内外研究现状进行总结，旨在为中医药治疗DNP的深入研究提供参考依据，也为临床中医药保护病损的糖尿病周围神经、治疗DNP提供新的思路。  
        关键词：糖尿病神经痛（DNP）;信号通路;中医;中药;综述   
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        发布时间：2022-08-05
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