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最新刊期
2023
年
第
29
卷
10
期
本期电子书
封面故事
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经典名方
经典名方达原饮化学成分的UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS快速表征
增强出版
肖康宁,苏酩,侯玉洁,张新军,刘月程,李鑫蕊,孙丹丹,梁瑞雪,曹蕾,刘善新
2023, 29(10): 1-12. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220946
摘要:目的基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)对达原饮的化学成分进行定性分析。方法采用Thermo Acclaim™ RSLC 120 C
18
色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.2 μm),流动相选择乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~7.5 min,10%~19%A;7.5~12 min,19%~22.5%A;12~23 min,22.5%~27%A;23~27 min,27%~56%A;27~35 min,56%~84%A;35~36 min,84%~90%A),流速0.3 mL·min
-1
,柱温30 ℃,加热电喷雾离子源(HESI),正、负离子模式下采集数据,检测范围m/z 80~1 200。结合对照品保留时间、碎片离子、PubChem等数据库及相关文献信息,运用Xcalibur 3.0完成对达原饮中化学成分的定性鉴别。结果从达原饮中共表征出161个化学成分,包括生物碱类14个、黄酮类60个、萜类16个、皂苷类26个、苯丙素类18个、有机酸16个、其他类11个。结论建立的UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS能有效、快速识别达原饮中化学成分,明确其化学组成,可为该经典名方的中药复方制剂开发提供依据。
关键词:经典名方;达原饮;超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS);化学成分;黄酮类;皂苷类;裂解规律
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发布时间:2023-04-13
经典名方阳和汤基准样品的HPLC指纹图谱分析
增强出版
张泽康,王昌海,赵玥瑛,张晴,彭警,杜守颖,白洁,陆洋
2023, 29(10): 13-20. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220759
摘要:目的建立经典名方阳和汤基准样品的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,结合化学计量学方法对其质量进行评价,为阳和汤基准样品的质量控制提供参考。方法采用HPLC建立阳和汤基准样品指纹图谱,使用ZORBAX SB-C
18
色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相选择乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(含0.05%三乙胺溶液)(B)梯度洗脱(0~5 min,2%~3%A;5~15 min,3%~5%A;15~65 min,5%~30%A;65~90 min,30%~70%A),流速1.0 mL·min
-1
,柱温35 ℃,检测波长210、260 nm。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)并结合聚类分析、主成分分析与偏最小二乘法-判别分析对指纹图谱结果进行分析,评价不同批次阳和汤基准样品的质量差异,并寻找造成质量差异的主要化学成分。结果建立了阳和汤基准样品的HPLC指纹图谱,确定了13个共有峰,并对各共有峰进行归属,其中2、8号峰来自熟地黄,10、11号峰来自肉桂,1、3~6号峰来自炒白芥子,13号峰来自麻黄,7、9、12号峰来自甘草。通过对照品指认了8个成分,分别为2号峰5-羟甲基糠醛、4号峰芥子碱硫氰酸盐、7号峰甘草苷、8号峰毛蕊花糖苷、10号峰肉桂酸、11号峰桂皮醛、12号峰甘草酸、13号峰盐酸麻黄碱。15批阳和汤基准样品的HPLC指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均>0.80;3种化学计量学方法均可将样品分为两类;筛选出了8种主要差异性成分,其中已指认出的有5-羟甲基糠醛、芥子碱硫氰酸盐、毛蕊花糖苷、盐酸麻黄碱。结论建立的HPLC指纹图谱分析方法灵敏度高、稳定性强,基本体现了阳和汤基准样品的整体化学成分特征,可为该经典名方复方制剂的质量标准建立提供依据。
关键词:经典名方;阳和汤;基准样品;高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱;聚类分析;主成分分析(PCA);偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)
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发布时间:2023-04-13
古方黄芪散调控AMPK/mTOR自噬信号通路改善肝脏脂肪变性的机制
增强出版
冯雯敏,苏安宇,黄小玲,王春怡
2023, 29(10): 21-30. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230705
摘要:目的基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路,探讨古方黄芪散调节自噬减轻小鼠肝脏脂肪变性改善非酒精性脂肪肝(NAFLD)的作用机制。方法通过数据库收集黄芪散主要化学成分及NAFLD相关靶点,对交集靶点进行基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析、构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并进行体内实验验证。雄性C57BL/6J小鼠60只,适应性喂养1周后随机分为正常组、模型组、二甲双胍组(0.25 g·kg
-1
)、黄芪散低、高剂量组(0.5、1 g·kg
-1
),每组12只。采用高脂饮食(HFD)诱导小鼠NAFLD模型,造模的同时灌胃给药13周,每天1次。通过检测随机血糖、血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(NEFA)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平和肝脏中TG含量;称量肝脏湿重并计算肝指数;采用苏木素-伊红(HE)染色、油红O染色、透射电子显微镜(TEM)、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)对C57BL/6J小鼠进行动物体内药效验证和机制探讨。结果通过网络药理学分析,结合前期研究基础,预测黄芪散可能通过AMPK/mTOR自噬信号通路改善NAFLD。体内实验结果表明,与正常组比较,模型组小鼠随机血糖、体质量、血清中TC、LDL-C和NEFA、肝脏湿重、肝指数和肝脏TG含量显著升高(P<0.01),小鼠肝脏增大,HE染色可见小鼠肝脏脂滴(LDs)大量空泡化,油红O染色显示肝细胞脂肪堆积,透射电镜未见明显自噬体和自噬溶酶体,微管相关蛋白1轻链3(LC3)A、LC3B、AMPKα1 mRNA表达和AMPK、磷酸化(p)-AMPK、p-AMPK/AMPK蛋白表达显著下调(P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ、p-mTOR蛋白水平显著上调(P<0.01)。与模型组比较,黄芪散低、高剂量组小鼠体质量、肝脏湿重、血清TG、NEFA水平明显降低(P<0.05,P<0.01),HE染色和油红O染色显示肝脏病理改变得到改善,肝脏透射电镜可见少量自噬溶酶体和自噬小体;黄芪散低剂量组肝指数显著降低(P<0.01),黄芪散高剂量组随机血糖、血清TC水平、肝脏TG含量明显降低(P<0.05);Western blot和Real-time PCR结果显示,黄芪散低、高剂量组LC3A、LC3B mRNA和LC3Ⅱ/Ⅰ、p-AMPK、p-AMPK/AMPK蛋白表达显著上调(P<0.01),p62 mRNA和p62、p-mTOR蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论黄芪散可能通过AMPK/mTOR信号通路促进自噬和恢复自噬通量,减轻肝脏脂肪变性,从而改善NAFLD。
关键词:黄芪散;非酒精性脂肪肝;网络药理学;腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR);自噬
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发布时间:2023-04-13
经典名方乌药汤的历史沿革与现代临床应用分析
徐英,王小文,李娜,白建英,刘慧,吴丽梅
2023, 29(10): 31-38. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230411
摘要:经典名方乌药汤是国家中医药管理局发布的《古代经典名方目录(第一批)》一百首中的第49首,出自金代李东垣《兰室秘藏》,由当归、甘草、木香、乌药、香附5味药物组成,功效行气调经止痛,主要用于治疗气机郁滞、血行不畅证。笔者采用文献计量学的方法,对记载乌药汤的古籍,从处方来源、组成、用量、制法、用法、功效主治、制方原理、药物炮制及加减变化等方面进行系统梳理,探明其历史沿革,确定其关键信息内容。并对其现代文献进行统计分析,发现对乌药汤原方研究较少,主要是对加味乌药汤的临床研究,其治疗范围广泛,可用于月经病的痛经、月经后期、月经过少、经期发热,以及溃疡性结肠炎、脾脏扭曲证、坐骨神经痛、小儿肠痉挛等内、外、妇、儿科疾病,中医学病机总属“气机郁滞”。通过对记载乌药汤的古籍及现代文献分析研究,以期为经典名方乌药汤的临床应用、深入研究及研发提供科学依据。
关键词:经典名方;乌药汤;加味乌药汤;中医古籍,历史沿革;关键信息;现代应用;文献研究
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发布时间:2023-04-13
配伍
葛花、枳椇子及其配伍对小鼠急性酒精性胃黏膜损伤的保护作用及机制
廖文勇,李慕云,董肖,曹灿,霍敏,任彧娜,柳海艳,修琳琳,贺成,范盎然,陈绍红,钟赣生
2023, 29(10): 39-47. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230243
摘要:目的探讨葛花、枳椇子及其配伍对急性酒精性胃黏膜损伤的改善作用,为进一步开展葛花、枳椇子及其配伍防治酒精致多脏器损伤奠定基础。方法采用多次灌胃给予56%红星二锅头白酒(15 mL·kg
-1
)建立小鼠急性酒精性胃黏膜损伤模型,将120只ICR雄性小鼠随机分为空白组、模型组、奥美拉唑组(0.026 g·kg
-1
)、葛花-枳椇子(配伍)高、中、低剂量组(29.2、14.6、7.3 g·kg
-1
)、葛花组(19.5 g·kg
-1
)、枳椇子组(19.5 g·kg
-1
)共8个组,每组15只,动物适应性喂养1周后,按10 mL·kg
-1
预给相应药物3 d,从第4天开始,给药1 h后按15 mL·kg
-1
灌胃二锅头白酒,空白组给予相同体积去离子水,记录小鼠醉酒和醒酒时间,连续给药给酒3 d,末次给药1 h后摘眼球处死;气相色谱仪测定各组小鼠血清中乙醇体积分数,紫外-可见分光光度计检测各组小鼠胃黏膜中乙醇脱氢酶(ADH)活性;苏木素-伊红(HE)染色观察胃黏膜病理变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组小鼠血清中炎症因子含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测核转录因子-κB(NF-κB)p65和NF-κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA表达。结果与正常组比较,模型组血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量升高(P<0.05),胃黏膜组织NF-κB p65 mRNA表达升高(P<0.01),IκBα mRNA表达降低(P<0.01);与模型组比较,奥美拉唑组、配伍高、中剂量组、葛花组醉酒时间延长(P<0.05),配伍高、中剂量组醒酒时间缩短(P<0.05),配伍高剂量组血清中乙醇体积分数降低(P<0.05),奥美拉唑组、配伍高、中剂量组胃黏膜中ADH活性升高(P<0.05),配伍各剂量组、葛花组肉眼损伤评分降低(P<0.05),奥美拉唑组、配伍各剂量组、葛花组病理损伤评分降低(P<0.01),各给药组血清中IL-6表达降低(P<0.05),奥美拉唑组、配伍各剂量组、枳椇子组血清中IL-1β表达降低(P<0.05),配伍高、中剂量组血清中TNF-α表达降低(P<0.05),各给药组胃黏膜组织NF-κB p65 mRNA表达降低(P<0.05),奥美拉唑组、配伍各剂量组胃黏膜组织IκBα mRNA表达增加(P<0.05);与高剂量组比较,配伍低剂量组与枳椇子组醉酒时间缩短(P<0.01),葛花、枳椇子组醒酒时间延长(P<0.01),配伍中、低剂量组、葛花组、枳椇子组血清中乙醇体积分数升高(P<0.05),配伍中、低剂量组、枳椇子组肉眼损伤积分增加(P<0.05),配伍中、低剂量组、葛花组、枳椇子组病理损伤积分增加(P<0.01),配伍低剂量组、葛花组、枳椇子组血清中IL-1β含量升高(P<0.01),葛花组与枳椇子组胃黏膜组织IκBα mRNA表达量降低(P<0.05);与配伍中剂量组比较,枳椇子组醉酒时间缩短(P<0.05),葛花组醒酒时间延长(P<0.05),葛花组、枳椇子组病理损伤积分增加(P<0.01),配伍低剂量组、葛花组、枳椇子组血清中IL-1β含量升高(P<0.05);与配伍低剂量组比较,枳椇子组病理损伤积分增加(P<0.05)。结论葛花、枳椇子及其配伍能起到对小鼠急性酒精性胃黏膜损伤的防治作用,可能与抑制胃黏膜NF-κB信号通路的表达有关,且配伍高剂量组药效最佳。
关键词:葛花;枳椇子;急性胃黏膜损伤;乙醇代谢;炎症反应
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发布时间:2023-04-13
半夏泻心汤防治胃癌机制研究专题
半夏泻心汤含药肠吸收液对胃癌微环境中PMN-MDSCs迁移侵袭的影响
魏晶晶,朱中博,刘喜平,李沛清,陈启明,戴丽蓉,施丽娟,段海婧,王庆苗
2023, 29(10): 48-57. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.202202221
摘要:目的观察半夏泻心汤含药肠吸收液对胃癌微环境中多形核髓系来源抑制细胞(PMN-MDSCs)迁移侵袭的影响。方法制备含生药量0.63 g·mL
-1
的半夏泻心汤含药肠吸收液,以Transwell小室将胃癌细胞与PMN-MDSCs非接触共培养建立胃癌微环境模型,采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法筛选半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的最佳干预浓度及时间,用于后续实验,分为空白组、模型组、FAK抑制剂组及半夏泻心汤组(26%、18%、10%半夏泻心汤含药肠吸收液),采用细胞划痕实验和Transwell实验检测PMN-MDSCs的迁移和侵袭能力,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤微环境中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)细胞因子表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PMN-MDSCs通路相关蛋白局部黏着斑激酶(FAK)、磷酸化(p)-FAK、蛋白酪氨酸激酶(Src)、磷酸化(p)-Src蛋白表达水平。结果与24 h比较,作用48 h 5%、50%、75%、100%半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的抑制率均有升高(P<0.05,P<0.01),与作用48 h比较,培养72 h 50%半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的抑制率低于48 h(P<0.01),5%、100%半夏泻心汤含药肠吸收液略高于48 h(P<0.05,P<0.01),其余浓度抑制率差异无统计学意义,且48 h半数抑制浓度(IC
50
)为18.09%,说明18%半夏泻心汤含药肠吸收液在48 h为最佳干预浓度及时间;与空白组比较,模型组PMN-MDSCs迁移距离显著增大(P<0.01),迁移及侵袭数量显著增多(P<0.01);与模型组比较,FAK抑制剂组、半夏泻心汤含药肠吸收液组PMN-MDSCs的迁移距离均显著减小(P<0.01),迁移及侵袭数量显著减少(P<0.01),以26%含药肠吸收液组最为显著(P<0.01);与空白组比较,模型组PMN-MDSCs通路相关蛋白FAK、p-FAK、Src、p-Src表达显著升高(P<0.01),VEGF、MMP-9细胞因子表达均显著上升(P<0.01)。与模型组比较,FAK抑制剂组、半夏泻心汤含药肠吸收液组(26%、18%、10%)PMN-MDSCs FAK、p-FAK、Src蛋白表达降低(P<0.01),FAK抑制剂组、半夏泻心汤含药肠吸收液组(18%)p-Src蛋白表达显著降低(P<0.01),VEGF、MMP-9细胞因子表达显著降低(P<0.01)。结论半夏泻心汤含药肠吸收液通过下调胃癌微环境PMN-MDSCs FAK信号通路蛋白FAK、p-FAK、Src、p-Src的表达,抑制PMN-MDSCs迁移侵袭。
关键词:胃癌微环境;髓源性抑制细胞;半夏泻心汤;黏着斑激酶(FAK)信号通路
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发布时间:2023-04-13
半夏泻心汤含药肠吸收液对胃癌微环境中PMN-MDSCs凋亡的影响
魏晶晶,朱中博,刘喜平,李沛清,陈启明,戴丽蓉,施丽娟,段海婧,王庆苗
2023, 29(10): 58-64. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.202201725
摘要:目的观察半夏泻心汤含药肠吸收液对胃癌微环境中多形核髓系来源抑制细胞(PMN-MDSCs)凋亡的影响。方法制备半夏泻心汤含药肠吸收液,以Transwell小室将胃癌细胞与PMN-MDSCs非接触共培养建立胃癌微环境模型,采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法筛选0.63 g·mL
-1
复溶液制备而成的0~100%半夏泻心汤含药肠吸收液的最佳干预浓度及时间,分为空白组、模型组、奥沙利铂组(10 mg·L
-1
)及半夏泻心汤组(26%、18%、10%含药肠吸收液),采用CCK-8法检测PMN-MDSCs的增殖,流式细胞术检测PMN-MDSCs的凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PMN-MDSCs胃癌微环境凋亡相关蛋白,B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平。结果作用24、48 h,与空白组比较,5%、50%、75%、100%半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的抑制率均有升高((P<0.05,P<0.01),作用72 h,除50%半夏泻心汤含药肠吸收液对PMN-MDSCs的抑制率低于48 h(P<0.01),其余浓度各自抑制率差异无统计学意义,且48 h半数抑制浓度(IC
50
)为18.40%,说明18%半夏泻心汤含药肠吸收液在48 h为最佳干预浓度及时间。与空白组比较,模型组PMN-MDSCs的存活率明显升高(P<0.05),凋亡率明显下降(P<0.05);与模型组比较,半夏泻心汤组PMN-MDSCs存活率均明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.05),以半夏泻心汤组(26%含药肠吸收液)最为明显(P<0.05)。与空白组比较,模型组PMN-MDSCs促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达明显降低(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显上升(P<0.05)。与模型组比较,奥沙利铂组、半夏泻心汤组PMN-MDSCs Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),奥沙利铂组、半夏泻心汤组(10%含药肠吸收液)Bax蛋白表达升高(P<0.05)。结论半夏泻心汤含药肠吸收液能通过调控胃癌微环境PMN-MDSCs凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3及Bcl-2的表达,诱导PMN-MDSCs凋亡。
关键词:胃癌微环境;髓源性抑制细胞;细胞凋亡;半夏泻心汤
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发布时间:2023-04-13
半夏泻心汤防治GC作用机制研究进展
增强出版
张艳美,魏晶晶,朱中博,刘森雨,杨帆,刘喜平,李沛清
2023, 29(10): 65-72. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230830
摘要:胃癌(GC)是常见的恶性肿瘤之一,我国GC的发病率和死亡率居世界首位。目前,GC的发病机制尚未完全阐明。虽然手术、放化疗、靶向治疗及免疫治疗等在GC的治疗中获得较好的疗效,但仍会出现并发症多、敏感性降低、不良反应大等问题。半夏泻心汤源自《伤寒杂病论》,临床应用2 000余年,具有寒热平调、散结除痞之效,为后世治疗消化道疾病的经典名方。经临床观察和实验研究,发现半夏泻心汤及其中单味药在防治GC方面具有较好的效果。中药因具有多成分、多靶点的特点,可以通过多种作用机制治疗GC。因此,需要从分子生物学、网络药理学等层面进行系统深入的研究,全面揭示半夏泻心汤防治GC的作用机制。目前半夏泻心汤治疗GC的作用机制主要集中于诱导GC细胞凋亡,抑制GC细胞的增殖、迁移、侵袭,保护腹膜间皮细胞,阻抑GC细胞腹膜转移,调节GC微环境,抑制骨髓间充质干细胞(BMSCs)的恶性转化等。本课题组致力于半夏泻心汤防治GC的研究,旨在全面地揭示半夏泻心汤防治GC的作用机制及其药效物质基础,为半夏泻心汤的进一步临床应用提供重要科学依据。该文通过检索中国知网(CNKI)、PubMed、万方(Wanfang Data)、维普(VIP)等数据库,从方证基础、物质基础、网络药理学、临床与实验研究等方面对半夏泻心汤治疗GC进行归纳与梳理,为进一步研究半夏泻心汤的药理作用并将其应用于临床GC的治疗提供参考依据。
关键词:半夏泻心汤;胃癌;物质基础;作用机制;研究进展
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发布时间:2023-04-13
药理
双氢青蒿素调控神经-小胶质细胞缓解神经病理性疼痛
梁婷钧,张国鑫,刘莹,朱春燕,林娜
2023, 29(10): 73-82. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230440
摘要:目的该研究旨在L5脊神经结扎(SNL)模型及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)海马连续注射模型中,评价双氢青蒿素(DHA)对海马神经损伤的干预效果;在原代培养的小胶质细胞-海马神经元中,确认DHA对小胶质细胞-海马神经元相互作用的调控模式。方法实验小鼠分为假手术(Sham)组、SNL组、DHA组(16 mg·kg
-1
),每组3只,用腺相关病毒[(连接钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ) dTomato AAV]标记海马CA3谷氨酸能神经元,并以免疫荧光染色追踪其向海马CA1、前额叶皮质(Frc)、前扣带回(ACC)、伏隔核(Nac)及杏仁核(BLA)的投射;实验小鼠分为Sham组、TNF-α海马连续注射模型组、DHA低、中、高剂量(DHA-L、DHA-M、DHA-H)组(4、8、16 mg·kg
-1
)及普瑞巴林组(25 mg·kg
-1
),每组4只,以高尔基染色统计海马CA1和CA3区锥体神经元形态;分别诱导海马原代神经元、小胶质细胞的持续激活,并进行细胞共培养给予DHA干预,以免疫荧光法统计细胞胞体面积和神经元初、次级树突棘内外的突触后密度蛋白95(PSD95)的表达量。结果与Sham组比较,SNL组海马CA3谷氨酸能神经元向CA1区、Frc及ACC的投射减少(P<0.01),而向Nac及BLA的投射升高(P<0.01);与SNL组比较,DHA组海马CA3谷氨酸能神经元向CA1区、Frc及ACC的投射升高(P<0.01),而向Nac及BLA的投射显著降低(P<0.01)。与Sham组比较,TNF-α海马连续注射模型组小鼠CA1锥体神经元树突棘密度及树突分支数量均显著减少(P<0.01);与TNF-α海马连续注射模型组比较,DHA-M、DHA-H组海马CA1和CA3锥体神经元树突棘密度及树突分支数明显增多(P<0.05,P<0.01);与DHA-M组比较,DHA-H组海马CA1锥体神经元树突总长度显著增多(P<0.01),DHA-L组CAI神经元树突总长度和CA3神经元树突基部总长度则显著减少(P<0.01)。与空白组比较,甘氨酸组和谷氨酸组细胞胞体面积显著增大(P<0.01);与甘氨酸组和谷氨酸组比较,甘氨酸+谷氨酸组细胞胞体面积显著升高(P<0.01);与谷氨酸组比较,谷氨酸+DHA组细胞胞体面积显著减少(P<0.01);与甘氨酸+谷氨酸组比较,甘氨酸+谷氨酸+DHA组细胞胞体面积显著减少(P<0.01);与谷氨酸+DHA组比较,甘氨酸+谷氨酸+DHA组细胞胞体面积减少(P<0.05)。与空白组比较,谷氨酸组细胞胞体面积显著升高(P<0.01);与谷氨酸组比较,谷氨酸+DHA各剂量组细胞胞体面积显著降低(P<0.01)。与空白组比较,静息原代小胶质细胞+甘氨酸组神经元初、次级树突棘内、外PSD95表达量显著升高(P<0.01);与静息原代小胶质细胞+甘氨酸组比较,活化原代小胶质细胞+甘氨酸组神经元的初、次级树突棘内、外PSD95表达量显著降低(P<0.01);与活化原代小胶质细胞+甘氨酸组比较,活化原代小胶质细胞+甘氨酸+DHA组中神经元的初、次级树突棘内、外PSD95表达量显著升高(P<0.01);与活化原代小胶质细胞+DHA组比较,活化原代小胶质细胞+甘氨酸+DHA组神经元初、次级树突棘内、外PSD95表达量显著升高(P<0.01)。结论DHA对NP病理状态下,海马小胶质细胞及TNF-α过表达导致的锥体神经元损伤具有显著的修复效果,而该修复与DHA对神经元-小胶质细胞的双重抑制密切相关。
关键词:神经病理性疼痛;双氢青蒿素;神经兴奋性和可塑性;神经炎症;小胶质细胞;海马神经元
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发布时间:2023-04-13
丹皮酚减轻SIRT6/PARP1介导的DNA损伤抑制血管平滑肌细胞衰老的作用
蒋婷婷,刘雅蓉,施晓艳,杨宇龙,戴敏
2023, 29(10): 83-92. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230707
摘要:目的探讨丹皮酚(Pae)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)衰老的作用及对沉默调节信息因子6(SIRT6)/腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)信号通路的影响。方法建立AngⅡ(100 nmol·L
-1
)诱导的VSMCs应激性衰老模型,实验分为正常组、模型组、Pae低、中、高(30、60、120 μmol·L
-1
)浓度组。采用β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法检测细胞衰老阳性率;细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞增殖能力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SIRT6、PARP1、衰老相关基因p16、p21、p53、增殖细胞核抗原(PCNA)、脱氧核糖核酸(DNA)损伤蛋白磷酸化的组蛋白H2AX(即p-H2AX或γ-H2AX)的表达并采用EdU染色法检测VSMCs增殖变化;siRNA-SIRT6转染制备沉默的VSMCs,观察SIRT6沉默的VSMCs中Pae对SIRT6、PARP1及p16、γ-H2AX蛋白的表达。结果SA-β-Gal染色结果显示,与正常组比较,模型组SA-β-Gal染色衰老阳性率增加(P<0.01);与模型组比较,Pae给药组均有效降低SA-β-Gal染色阳性率(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组PCNA、SIRT6、PARP1表达下调、衰老相关蛋白p16、p21、p53、γ-H2AX的表达上调(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,Pae给药干预后,各浓度组促进了PCNA、SIRT6、PARP1的蛋白表达,抑制了p16、p21、p53、γ-H2AX的蛋白表达,且呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。EdU染色结果显示,与正常组比较,模型组EdU阳性细胞数减少(P<0.01);与模型组比较,Pae给药组EdU阳性细胞数明显增加(P<0.05,P<0.01)。SIRT6沉默后,Pae促进SIRT6、PARP1及抑制p16的作用被逆转(P<0.05,P<0.01)。此外加入SIRT6抑制剂IN-1可促进AngⅡ诱导细胞衰老的发生(P<0.05,P<0.01)。结论Pae能够有效抑制VSMCs的衰老,其机制作用可能与调控SIRT6/PARP1信号通路相关。
关键词:丹皮酚;沉默调节信息因子6(SIRT6);腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1);血管平滑肌细胞(VSMCs);衰老
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发布时间:2023-04-13
黄芩素抑制小胶质细胞活化及保护SH-SY5Y神经细胞的机制
尹梦霞,欧阳竞锋,崔拓拓,刘鑫,孙梦菲,荆志伟
2023, 29(10): 93-101. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230237
摘要:目的探讨黄芩素(BAI)对脂多糖(LPS)激活的BV-2细胞条件培养基下SH-SY5Y细胞损伤的干预作用及机制。方法用LPS 1 mg∙L
-1
激活BV-2细胞建立LPS组条件培养基,同时设置空白组、BAI低、中、高浓度组(4、8、16 μmol∙L
-1
),使用各组条件培养基培养SH-SY5Y细胞。通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)试剂盒测定干预后各组BV-2细胞的细胞活力,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组BV-2细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量;采用免疫组化(IHC)观察SH-SY5Y细胞中α-突触核蛋白(α-syn)、酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达情况,免疫荧光(IF)法观察SH-SY5Y细胞中核转录因子-κB p65蛋白(NF-κB p65,以下简称p65)核转移情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SH-SY5Y细胞Toll样受体4(TLR4)、p65、磷酸化(p)-p65、髓样分化因子88(MyD88)蛋白表达情况。结果与空白组比较,LPS组中BV-2细胞活力显著降低(P<0.01),细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量均显著升高(P<0.01);与LPS组比较,BAI低、中、高浓度组细胞活力显著升高(P<0.01),细胞上清液中TNF-α均显著降低(P<0.01),BAI高浓度(16 μmol∙L
-1
)组细胞上清液中IL-6含量明显降低(P<0.05),BAI中、高浓度组细胞上清液中IL-1β含量显著降低(P<0.01)。条件培养基处理SH-SY5Y细胞的结果显示,与空白组比较,LPS组SH-SY5Y细胞中p65蛋白表达向核内聚集,TH蛋白表达显著下降(P<0.01),α-syn、TLR4、MyD88、p-p65蛋白表达均明显升高(P<0.05,P<0.01);与LPS组比较,BAI低、中、高浓度组SH-SY5Y细胞中p65蛋白表达逐渐分散至细胞质中,TH蛋白表达均显著升高(P<0.01),α-syn蛋白表达均显著降低(P<0.01),BAI高浓度组TLR4、MyD88、p-p65蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),BAI中浓度组p-p65和MyD88蛋白表达均明显降低(P<0.05),BAI低浓度组MyD88蛋白表达明显降低(P<0.05)。各组p65蛋白表达差异无统计学意义。结论BAI能够抑制BV-2细胞激活,从而抑制LPS造成的炎症反应,进而进一步抑制炎症对SH-SY5Y细胞的损伤,其作用机制可能在于调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,减轻炎症反应,发挥神经保护作用。
关键词:帕金森病;脂多糖(LPS);黄芩素(BAI);Toll样受体4(TLR4)
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发布时间:2023-04-13
左归降糖清肝方对2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病MKR小鼠糖脂代谢的影响
王一阳,邹俊驹,陆源源,向琴,喻嵘
2023, 29(10): 102-109. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230341
摘要:目的探讨左归降糖清肝方改善2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病骨骼肌特异性胰岛素样生长因子-1受体功能缺失(MKR)小鼠糖脂代谢的作用机制。方法以MKR小鼠为研究对象,高脂饲料喂养8周诱导形成NAFLD,随机分为模型组、二甲双胍组(0.067 g·kg
-1
)、左归降糖清肝方高、低剂量组(14.8、7.4 g·kg
-1
),同龄FVB小鼠10只作为正常组。分别药物治疗8周后,予以糖耐量测试(OGTT),取血清检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),称取小鼠肝脏湿重,取肝组织进行苏木素-伊红(HE)染色、油红O染色观察组织病理形态变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织叉头框蛋白O1(FoxO1)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖6磷酸酶(G6Pase)、载脂蛋白C3(ApoC-Ⅲ)的mRNA表达及其蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组小鼠空腹血糖、肝脏指数、血清TG、血清TC、OGTT水平显著上升(P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组及左归降糖清肝方组小鼠空腹血糖、肝脏指数显著下降(P<0.01),左归降糖清肝方高剂量组血清的TG、TC水平均明显下降(P<0.05,P<0.01),二甲双胍组及左归降糖清肝方高剂量组可以降低OGTT水平(P<0.05);在组织病理上,与正常组比较,模型组小鼠可见肝组织脂滴及肝细胞内空泡减少,体积变大;与模型组比较,左归降糖清肝方组和二甲双胍组可见肝组织脂滴减少,肝细胞内空泡减少,体积变小;在分子层面,与正常组比较,模型组小鼠肝组织FoxO1、PEPCK、G6Pase、ApoC-Ⅲ的mRNA水平显著上调(P<0.01),FoxO1、PEPCK、G6Pase、ApoC-Ⅲ的蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型组比较,左归降糖清肝方组FoxO1、PEPCK、G6Pase、ApoC-Ⅲ的mRNA水平显著下调(P<0.01),FoxO1、PEPCK、G6Pase、ApoC-Ⅲ的蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论左归降糖清肝方能改善T2DM合并NAFLD糖脂代谢并能修复肝脏病理损伤,可能是通过调控肝组织FoxO1、PEPCK、G6Pase、ApoC-Ⅲ相关蛋白的表达,达到调脂、降糖及延缓肝脏脂肪病变的作用。
关键词:左归降糖清肝方;MKR小鼠;2型糖尿病(T2DM);非酒精性脂肪性肝病;糖脂代谢
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发布时间:2023-04-13
基于
β
-arrestin1沉默探讨益肾达络饮对EAE小鼠Rho/ROCK信号通路的影响
丁文婧,王忠敏,任嘉彦,王响,尚晓玲
2023, 29(10): 110-116. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20231090
摘要:目的基于β-抑制蛋白(β-arrestin1)基因沉默,研究益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠Ras同源基因家族蛋白(Rho)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响。方法60只C57BL/6雌性小鼠随机平均分为空白组、模型组、病毒组、益肾达络饮组(中药组)、病毒加益肾达络饮组(病毒加中药组)、醋酸泼尼松组(激素组)6组。除空白组外,每只小鼠均制备EAE模型,于免疫第4天病毒组、病毒加中药组每只小鼠尾静脉注射腺相关病毒(AAV)病毒溶液150 μL(1×10
11
vg·mL
-1
)。造模的第8天给药,空白组、模型组、病毒组给予生理盐水10 mL∙kg
-1
,激素组给予醋酸泼尼松混悬液(3.9 g∙kg
-1
),其他组给予益肾达络饮(20 g∙kg
-1
),连续给药14 d并每日进行称重评分。免疫后每天记录各组小鼠的神经功能评分;苏木素-伊红(HE)染色测定小鼠脑组织、脊髓组织的炎症反应和病变位置;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定EAE小鼠脊髓组织及脑组织中β-arrestin1、RhoA、ROCKⅠ的蛋白表达。结果与模型组比较,病毒组、病毒加中药组的神经功能评分显著降低(P<0.01),中药组明显降低(P<0.05)。HE结果显示,模型组中枢神经系统(CNS)存在明显炎症反应,其他各组与模型组比较均有不同程度的减轻。Western blot结果显示,与空白组比较,模型组小鼠脊髓组织中β-arrestin1、RhoA及ROCKⅠ蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,病毒组、中药组、病毒加中药组、激素组小鼠脊髓组织中β-arrestin1、RhoA及ROCKⅠ蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠脑组织中β-arrestin1、RhoA、ROCKⅠ蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,病毒组、中药组、病毒加中药组、激素组小鼠脑组织中β-arrestin1蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);病毒组、中药组小鼠脑组织中RhoA、ROCKⅠ蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);病毒加中药组和激素组小鼠脑组织中RhoA、ROCKⅠ蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。结论益肾达络饮可以改善EAE小鼠的临床症状,改善CNS的炎症反应,其机制可能为益肾达络饮抑制CNS中β-arrestin1的表达,从而降低Rho/ROCK信号通路中RhoA、ROCKⅠ蛋白的表达,并且益肾达络饮与抑制β-arrestin1的基因表达可能存在协同效果。
关键词:实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE);多发性硬化症(MS);益肾达络饮;β-arrestin1;Ras同源基因家族蛋白A(RhoA);Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶Ⅰ(ROCKⅠ);地黄饮子
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发布时间:2023-04-13
益气活血法通过miR216b/Beclin1介导萎缩性胃炎癌前病变自噬的机制
赵唯含,周莹,许雨晴,艾亚楠,文雯,穆恒
2023, 29(10): 117-122. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230990
摘要:目的通过观察益气活血法对萎缩性胃炎癌前病变(PLGC)模型小鼠微RNA216b(miR216b)/自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)信号通路的影响,探讨其干预PLGC的自噬作用机制。方法将75只健康雄性SPF级昆明种小鼠随机分为空白组(12只)及造模组(63只),造模组小鼠每日采用1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)溶液(150 mg·L
-1
)自由饮用及灌胃,同时每日灌胃雷尼替丁溶液(0.03 g·kg
-1
),造模12周。按照随机对照表将造模小鼠分为模型组、益气组(黄芪3.5 g·kg
-1
)、活血组(三七粉0.7 g·kg
-1
)、益气活血组(黄芪3.5 g·kg
-1
+三七粉0.7 g·kg
-1
)及叶酸组(2 mg·kg
-1
)。予相应药物灌胃8周后取材,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠胃黏膜病理改变,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胃组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin1蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组胃黏膜Beclin1及miR-216b的mRNA表达情况。结果与空白组比较,病理学观察显示模型组胃黏膜固有腺体减少,出现萎缩伴肠上皮化生;与模型组比较,各治疗组均有改善,其中益气活血组改善最为明显。与空白组比较,模型组小鼠胃组织LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及Beclin1蛋白含量均明显降低(P<0.05)。与模型组比较,各治疗组胃组织LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及Beclin1蛋白含量均有升高(P<0.05,P<0.01),其中益气活血组升高最为明显。与空白组比较,模型组小鼠Beclin1 mNRA表达下降(P<0.05),miR216b mNRA表达上升(P<0.05)。与模型组比较,各治疗组小鼠Beclin1表达升高(P<0.05),miR216b表达下降(P<0.05),尤以益气活血组最为明显。结论以黄芪、三七为代表的益气活血法治疗PLGC的作用机制可能为通过抑制miR216b的表达,激活Beclin1,从而促进自噬,发挥修复胃黏膜的作用。
关键词:益气活血法;萎缩性胃炎癌前病变;微RNA216b(miR216b);自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1);黄芪;三七
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发布时间:2023-04-13
波形蛋白与肝细胞癌的关系及健脾益气方的干预作用
王超,音金萍,蒋筱,卓少元
2023, 29(10): 123-133. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221614
摘要:目的研究波形蛋白(Vimentin)与肝细胞癌(HCC)的关系及健脾益气方通过Vimentin调控肝癌的分子机制。方法利用基于肿瘤基因组图谱计划(TCGA)和临床蛋白质组肿瘤分析协作组(CPTAC)数据库在线分析平台、STRING数据库及Cytoscape软件分析Vimentin与肝细胞癌的关系。随机将SD大鼠分为正常组、模型组、健脾益气方低、中、高剂量组(5.25、10.5、21 g·kg
-1
)、信号转导蛋白及转录激活子3(STAT3)抑制组(C188-9,4.5 mg·kg
-1
)和糖蛋白130(gp130)抑制组(SC144,4.5 mg·kg
-1
),每组10只。除正常组外,其余各组大鼠按照70 mg·kg
-1
体质量腹腔注射二乙基亚硝胺(DEN)复制肝癌模型。造模成功后,正常组和模型组大鼠生理盐水灌胃,健脾益气方低、中、高剂量组分别给予对应剂量中药灌胃,2个抑制组分别腹腔注射对应抑制剂,每日1次,连续4周。末次处置后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测大鼠肝组织中Vimentin mRNA水平;比色法检测肝组织胱天蛋白酶-3(Caspase-3)酶活性;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织中Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)、Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶2(ROCK2)、aurora激酶B(AURKB)、锌指蛋白148(ZNF148或者ZBP-89)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、总Vimentin、磷酸化Vimentin(p-Vimentin)及肝组织细胞核中Vimentin蛋白含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中Vimentin的含量。结果VIM mRNA在肝癌患者不同病理分期(Ⅰ~Ⅳ期)、不同病理分级(G
1
~G
3
级)、无区域淋巴结转移患者(N0)和肝癌不同亚型患者组织中表达水平均显著升高(P<0.01);Vimentin蛋白水平在肝癌组织中显著降低(P<0.01);VIM基因有4处突变可以导致Vimentin蛋白一级结构的改变,这些遗传突变可降低患者无病生存期(P<0.01);VIM mRNA的表达水平与HCC纯度呈负相关(P<0.01),而与微环境中肿瘤相关成纤维细胞、M2型巨噬细胞和髓系树突状细胞等的浸润水平呈正相关(P<0.01)。关联分析结果显示Vimentin与STAT3在HCC患者肝癌组织中的表达存在一定相关性(P<0.01)。动物实验结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝组织中VIM mRNA、总Vimentin、p-Vimentin和核Vimentin蛋白水平、血清中分泌型Vimentin水平、肝组织中ROCK2、AURKB、STAT3和p-STAT3蛋白水平均显著上调(P<0.01);负调控分子ZBP-89蛋白水平显著降低(P<0.01);Caspase-3酶活性升高、ROCK1蛋白表达水平增加,但是差异无统计学意义。STAT3抑制剂和gp130抑制剂及中、高剂量健脾益气方均可显著降低大鼠血清中分泌型Vimentin水平,肝组织中总Vimentin、p-Vimentin和核Vimentin蛋白水平,及STAT3/Vimentin信号通路主要相关分子STAT3、p-STAT3、ROCK2、AURKB的蛋白水平,上调负调控分子ZBP-89蛋白水平和Caspase-3酶活性(P<0.05,P<0.01),且中剂量或高剂量健脾益气方对VIM mRNA水平、STAT3蛋白、ZBP-89蛋白、ROCK2蛋白和AURKB蛋白水平,Caspase-3酶活性的干预结果,与STAT3抑制剂比较差异均不具有统计学意义。结论Vimentin是肝癌组织中一种重要的炎症分子,其表达、细胞定位和功能可能受肿瘤相关成纤维细胞、M2型巨噬细胞和髓系树突状细胞浸润水平,以及白细胞介素(IL)-6/STAT3信号通路、特别是STAT3分子的影响;而健脾益气方可能通过干预STAT3/Vimentin信号通路调控Vimentin而防治肝癌。
关键词:健脾益气方;波形蛋白(Vimentin);信号转导蛋白及转录激活子3(STAT3);生物信息学;肝细胞癌
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发布时间:2023-04-13
基于HIF-1
α
/NF-
κ
B/NLRP3信号通路探讨黄芪百合颗粒对高原低氧模型大鼠急性脑损伤的保护作用
曾元丁,苏韫,龚红霞,曹旺杰,刘永琦,黄勇,冷光现,李莉霞
2023, 29(10): 134-141. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222105
摘要:目的观察黄芪百合颗粒对高原低氧模型大鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响。方法60只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(5 mg·kg
-1
)、黄芪百合颗粒高、中、低剂量组(4.1、2.05、1.025 g·kg
-1
)。其中各中药组连续灌胃给药14 d,1次/d,连续3 d腹腔注射地塞米松作为阳性药物组;第15天将模型组、地塞米松组、黄芪百合颗粒高、中、低剂量组至动物低压模拟舱中模拟高海拔低压低氧环境进行暴露,持续暴露3 d,腹主动脉采血并分离血清,处死后摘取脑组织;苏木素-伊红(HE)染色法观察脑组织病理变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠HIF-1α、NLRP3、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)、NF-κB、消皮素D(GSDMD)和胱天蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠HIF-1α、NLRP3、NF-κB p65、GSDMD和Caspase-1 mRNA的表达水平。结果HE结果显示,与正常组比较,模型组大鼠脑组织病理切片可见锥体细胞排列松散且分布紊乱,大小不一;与模型组比较,地塞米松组及黄芪百合颗粒高、中剂量组锥体细胞病理改变减轻。ELISA结果显示,与正常组比较,模型组大鼠血清中TNF-α、IL-6和IL-1β的含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组及黄芪百合颗粒高、中剂量组大鼠血清中TNF-α、IL-6和IL-1β的含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组大鼠脑组织中HIF-1α、NLRP3、p-NF-κB p65、GSDMD、Caspase-1蛋白相对表达水平均显著升高(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组及黄芪百合颗粒高剂量组大鼠脑组织中HIF-1α、NLRP3、p-NF-κB p65、GSDMD、Caspase-1蛋白相对表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),黄芪百合颗粒中剂量组大鼠脑组织中HIF-1α、NLRP3、p-NF-κB p65、Caspase-1蛋白相对表达均显著降低(P<0.01),黄芪百合颗粒低剂量组大鼠脑组织中HIF-1α蛋白相对表达降低(P<0.05)。Real-time PCR分析显示,与正常组比较,模型组大鼠脑组织HIF-1α、NLRP3、NF-κB p65、GSDMD和Caspase-1 mRNA表达水平显著增加(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组大鼠脑组织中HIF-1α、NLRP3、NF-κB p65、GSDMD和Caspase-1 mRNA表达水平显著降低(P<0.01);黄芪百合颗粒高剂量组大鼠脑组织中HIF-1α、NF-κB p65、GSDMD和Caspase-1 mRNA表达水平显著降低(P<0.01);黄芪百合颗粒中剂量组大鼠脑组织中HIF-1α、NLRP3和Caspase-1 mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论黄芪百合颗粒对低压低氧大鼠急性脑损伤的保护作用可能与HIF-1α/NF-κB/NLRP3信号通路相关。
关键词:黄芪百合颗粒;高原低氧;脑损伤;缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路;炎症反应
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发布时间:2023-04-13
转录组测序分析昆仑雪菊醇提物黄诺玛苷对胰岛素抵抗小鼠小肠类器官的影响
增强出版
麦麦提亚森·多力昆,依米妮古丽·麦麦提,古丽那孜·别克达吾来提,陈龙,陈航宇,郑梦竹,李琳琳,骆新
2023, 29(10): 142-151. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230418
摘要:目的探讨黄诺玛苷对胰岛素抵抗小鼠小肠类器官转录组的影响。方法首先建立C57BL/6J和db/db小鼠小肠类器官;采用免疫荧光法检测细胞核核抗原(ki-67)和上皮细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达;将小肠类器官分为3组,分别是以C57BL/6J小鼠小肠类器官为正常组、db/db小鼠小肠类器官为模型组和db/db小鼠小肠类器官黄诺玛苷干预组为给药组(FM组);采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3组小肠类器官胰高血糖素样肽-1(GLP-1)蛋白的表达;并对3组样本进行转录组测序。结果小肠类器官培养第6天形成围绕管腔周围的环状结构,初步建立了小肠类器官培养模式;免疫荧光检测结果显示小肠类器官均表达ki-67和E-cadherin;Western blot结果显示黄诺玛苷可增加GLP-1蛋白的表达;差异基因表达分析中,模型组与正常组相比差异表达基因共有1 862个,FM组与模型组相比差异表达基因共有2 282个;通过蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析2组共同表达的差异基因,得到Nr1i3、Cyp2c44、Ugt2b1、Gsta1、Gstm2、Ptgs1、Gstm4、Cyp2c38、Cyp4a32和Gpx3 10个Hub基因,这些基因在正常组中高表达,模型组中表达降低,黄诺玛苷干预后回调上述基因的表达。结论黄诺玛苷可能通过逆转Nr1i3、Cyp2c44、Ugt2b1、Gsta1、Gstm2、Ptgs1、Gstm4、Cyp2c38、Cyp4a32和Gpx3 10个Hub基因的表达水平与相应的信号通路来发挥其改善胰岛素抵抗的作用。
关键词:胰岛素抵抗;黄诺玛苷;小肠类器官;转录组测序;差异表达基因;Hub基因
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发布时间:2023-04-13
临床
启宫丸对痰湿证PCOS不孕患者卵子质量和胚胎发育潜能的影响
潘静,刘鹏飞,刘金星,于潇,张建伟
2023, 29(10): 152-159. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20231591
摘要:目的观察启宫丸对痰湿证多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者卵泡颗粒细胞(GCs)中增殖与凋亡相关因子程序性细胞死亡蛋白4(PDCD4)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的调控,探讨启宫丸对卵子质量和胚胎发育潜能的影响。方法选取行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的痰湿证PCOS患者66例,按照随机数字表法分为观察组(启宫丸+西药)和对照组(西药),每组33例,均行拮抗剂方案促排卵。观察组于IVF前1周期始在服用西药的基础上联合启宫丸进行治疗,对照组则不予中药干预。观察两组患者痰湿证候改善、促性腺激素(Gn)使用天数和用量、注射人绒毛促性腺激素(HCG)日血清黄体生成素(LH)、雌二醇(E
2
)、孕酮(P)水平、双原核(2PN)受精率和优质胚胎率。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测GCs中PDCD4和PCNA的表达。结果与本组治疗前比较,两组患者痰湿证候评分均显著降低(P<0.01);与对照组治疗后比较,观察组痰湿证候评分降低更明显,差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组比较,观察组HCG日血清LH、E
2
和P水平均升高,但只有E
2
水平差异有统计学意义(P<0.01);观察组2PN受精率[82.25%(556/676)/69.92%(365/522),χ
2
=25.172,P<0.01]和优质胚胎率[44.19%(190/430)/34.23%(102/298),χ
2
=7.266,P<0.01]均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);观察组卵巢GCs中PDCD4 mRNA和蛋白表达量均下调,PCNA mRNA和蛋白表达量均上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论启宫丸可能通过下调PDCD4的表达和上调PCNA的表达来干预卵泡发育过程,调节激素水平,改善痰湿证PCOS患者证候表现,抑制GCs凋亡并促进生长,以改善卵子质量和胚胎发育潜能。
关键词:启宫丸;多囊卵巢综合征;颗粒细胞;卵子质量;胚胎发育潜能
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发布时间:2023-04-13
黄芩贝母汤治疗儿童慢性鼻-鼻窦炎的临床疗效
四霄雪,韩雪,赵闪闪
2023, 29(10): 160-165. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20231697
摘要:目的观察黄芩贝母汤治疗儿童慢性鼻-鼻窦炎的临床疗效。方法采用随机、对照的临床研究方法,将70例符合要求的慢性鼻-鼻窦炎患儿随机分为中药组和西药组,每组各35例。西药组患儿采用糠酸莫米松鼻喷雾剂喷鼻,每侧鼻孔1喷,每日1次,疗程为2周;小剂量口服阿奇霉素干混悬剂(4 mg·kg
-1
·d
-1
),每日1次,每周服用3 d,停药4 d,疗程为2周;中药组患儿采用口服黄芩贝母汤进行治疗,每日1剂,疗程2周。评估治疗前后中医主证及体征评分、症状视觉模拟量表(VAS)评分、鼻窦计算机断层扫描(CT)疗效评分,以及2组患儿中医证候临床疗效,记录不良反应事件的发生情况。结果中药组中医证候临床疗效总有效率为88.57%(31/35),西药组为71.43%(25/35),中药组总有效率高于西药组,差异有统计学意义(χ
2
=8.458,P<0.05)。与本组治疗前比较,2组患儿VAS评分、中医主证鼻塞及流涕评分、体征评分均显著降低(P<0.01);与西药组治疗后比较,中药组上述指标优于西药组(P<0.05,P<0.01)。与本组治疗前比较,西药组患儿头痛无明显改善,而中药组头痛评分显著降低(P<0.01)。2组CT评分均有降低趋势,但差异无统计学意义。2组患儿治疗过程中均未出现不良反应。结论黄芩贝母汤可有效改善慢性鼻-鼻窦炎患儿临床症状,且安全有效。
关键词:黄芩贝母汤;儿童;慢性鼻-鼻窦炎;疗效观察
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发布时间:2023-04-13
药物代谢
脾胃湿热证大鼠模型的尿液代谢组学分析
于静波,韩越,谢新,周梓洋,陈静梅,王韦轶,邱靖淞,王宇红
2023, 29(10): 166-173. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230566
摘要:目的以脾胃湿热证模型大鼠为研究对象,基于尿液代谢组学寻找潜在生物标志物及相关代谢通路,从内源性小分子代谢物层面探究脾胃湿热证候本质。方法将16只SD大鼠随机分为正常组及模型组,正常组给予普通饲料喂养,模型组在此基础上每日增加200 g·L
-1
蜂蜜水自由饮用,猪油与白酒隔日交替灌服,共喂养17 d,第10天起每日相同时间将大鼠置于温度30~34 ℃、相对湿度95%的环境中2 h,共7 d,建立脾胃湿热证大鼠模型,并通过观察一般体征,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆胃动素(MTL)、胃泌素(GT)含量及胃肠组织病理学检查对模型进行评价;利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)进行尿液代谢组学分析,检测条件为ACQUITY™ UPLC BEH C
18
色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱(0~3 min,1%~18%B;3~8 min,18%~40%B;8~10 min,40%~100%B),流速0.4 mL·min
-1
,电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式检测,扫描范围m/z 50~1 000。利用单变量与多变量统计分析筛选组间差异离子,根据精确相对分子质量计算其元素组成,将碎片离子信息与人类代谢组数据库(HMDB)等数据库匹配以鉴定生物标志物。通过京都基因和基因组百科全书(KEGG)数据库获得代谢物的生物信息,采用MetaboAnalyst 5.0软件分析其相关代谢通路。结果与正常组比较,模型组肛温显著上升(P<0.01),血浆MTL和GT水平均明显下降(P<0.05,P<0.01),胃及结肠组织出现充血、出血及炎性浸润等病理性变化;尿液代谢组学研究发现L-组氨酸、柠檬酸、异柠檬酸等25个差异代谢物可作为脾胃湿热证的生物标志物,其中13个代谢物为内源性物质的Ⅱ相代谢产物(葡萄糖醛酸结合物、硫酸结合物和乙酰基结合物),涉及组氨酸代谢、三羧酸循环、乙醛酸和二羧酸代谢等代谢通路。结论脾胃湿热证主要引起组氨酸代谢、三羧酸循环、乙醛酸和二羧酸代谢3条代谢通路的紊乱,以及内源性代谢物的活性/失活状态失衡,可能涉及机体免疫应答、物质及能量代谢、炎症反应和肠道菌群等方面,可为脾胃湿热证模型的建立和应用提供依据。
关键词:脾胃湿热证;动物模型;超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS);代谢组学;尿液;生物标志物;代谢通路
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发布时间:2023-04-13
药学基础
花椒多糖抗阿尔茨海默病作用及其糖谱法结构特征分析
胡美变,孟祥龙,王璞,张朔生,刘玉杰
2023, 29(10): 174-182. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220947
摘要:目的建立阿尔茨海默病(AD)小鼠模型,评价花椒多糖对AD的治疗作用并采用糖谱法分析其结构特征。方法采用腹腔注射D-半乳糖联合灌胃三氯化铝建立快速衰老的AD小鼠模型,通过Morris水迷宫实验评价小鼠的学习记忆能力,苏木素-伊红(HE)染色和尼氏染色观察小鼠脑组织病理学状况和神经元损伤情况。对花椒多糖进行酸水解和不同糖苷酶酶解后,采用高效薄层色谱法(HPTLC)和荧光辅助凝胶电泳法(PACE)分析水解产物的结构特征。HPTLC色谱条件为采用硅胶60高效薄层色谱板,点样量5 μL,展开剂乙酸乙酯-冰乙酸-水(2∶2∶1),展开2次,苯胺-二苯胺-磷酸溶液显色,在105 ℃加热10 min后日光下检视。PACE检测条件为34%分离胶和8%浓缩胶,电泳缓冲液为0.1 mol·L
-1
三羟甲基氨基甲烷(Tris)-硼酸缓冲液(pH 8.2),电泳在0 ℃环境下进行,上样量3~6 μL,用15 mA恒流跑至样品达凝胶前端,紫外灯365 nm下检视。结果Morris水迷宫实验结果表明,花椒多糖明显改善了AD模型小鼠的学习和记忆能力,逃避潜伏期缩短,穿梭平台次数和目标象限停留时间明显增加。组织病理学实验结果表明,花椒多糖能改善AD小鼠海马组织CA1、CA3区的病理情况和神经元的损伤,且尼氏小体数量明显增加。糖谱法分析结果表明,HPTLC和PACE分析结果基本一致,花椒多糖主要能被纤维素酶和果胶酶催化酶解成小分子糖类,表明其主要含有β-1,4-葡萄糖苷键和α-1,4-半乳糖醛酸苷键,能被葡聚糖酶、β-半乳糖苷酶和β-甘露糖酶少量酶解,表明其含有少量α-1,6-葡萄糖苷键、β-吡喃半乳糖苷键和β-1,4-甘露糖苷键。结论花椒多糖对AD小鼠有明显治疗作用,其结构中主要含有β-1,4-葡萄糖苷键和α-1,4-半乳糖醛酸苷键,可为中药多糖的结构解析提供有益借鉴。
关键词:花椒多糖;阿尔茨海默病(AD);糖谱法;糖苷酶;高效薄层色谱法(HPTLC);荧光辅助凝胶电泳法(PACE)
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发布时间:2023-04-13
痛泻要方水煎液化学成分的UPLC-LTQ-Orbitrap-MS分析
增强出版
彭苏芹,严志宏,向汝群,熊庆,张臣,宁静,张雪冰婷,朱根华
2023, 29(10): 183-191. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221146
摘要:目的采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)快速鉴定痛泻要方水煎液中的化学成分。方法色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C
18
色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~4 min,5%~15%B;4~10 min,15%~25%B;10~15 min,25%~60%B;15~20 min,60%~90%B;20~25 min,90%~100%B;25~27 min,100%B;27~30 min,100%~5%B;30~32 min,5%B),流速0.3 mL·min
-1
,进样量3 μL,柱温35 ℃。质谱条件为电喷雾离子源(ESI),扫描范围m/z 100~1 250,正、负离子模式下分别采集MS、MS/MS数据。结合对照品、数据库和文献信息,运用TraceFinder 4.1和Xcalibur 2.1软件对痛泻要方水煎液进行化学成分鉴定。结果在正、负离子模式下,从痛泻要方水煎液中共鉴定出90个化合物,主要为黄酮类、香豆素类、单萜糖苷类、色原酮类、内酯类。通过对所有化合物的药材来源进行归属,发现其中9个化合物来源于白术,21个化合物来源于白芍,24个化合物来源于陈皮,29个化合物来源于防风,另有7个化合物来源于至少2味药材。结论该方法能快速、有效、全面地识别痛泻要方水煎液中的化学成分,明确了痛泻要方化学组成。鉴定出的化合物涵盖了4味组方药材的主要活性成分且丰度较高,说明痛泻要方提取方法和药材配比具有一定科学性,可为该方物质基础和质量评价研究提供参考。
关键词:痛泻要方;超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS);化学成分;药效物质基础;经典名方;水煎液;黄酮类
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发布时间:2023-04-13
不同栽培模式对粗茎秦艽根际土壤微生物多样性与次生代谢产物含量的影响
增强出版
加多五尼,甲使阿咪,马鸿宇,叶更生,陈晨,苟恺军,任艳,拉目加,曾锐
2023, 29(10): 192-201. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230419
摘要:目的探讨不同栽培模式对粗茎秦艽产量及其根际土壤微生物多样性和次生代谢产物含量的影响。方法以不同栽培模式粗茎秦艽及其根际土壤为研究对象,采用高通量测序技术,分析根际土壤中细菌和真菌群落组成及优势菌群和差异微生物;采用高效液相色谱法测定不同栽培模式粗茎秦艽中环烯醚萜类成分含量。结果相较于地膜种植,采取无地膜种植与间作牡丹、白芸豆、土豆和玉米等作物后,粗茎秦艽鲜品增产16.11%~17.68%、22.48%~26.34%、29.37%~32.19%、34.82%~36.57%和35.34%~39.71%,干品增产19.75%~23.17%、25.86%~29.32%、30.18%~34.94%、35.22%~39.87%和39.72%~43.73%,龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苷和獐牙菜苦苷4种环烯醚萜类成分总含量分别提高10.17%~37.83%、5.93%~47.44%、9.09%~28.84%和10.71%~28.57%。根际土壤中细菌和真菌群落多样性明显增高(P<0.05),其中粪壳菌纲(Sordariomycetes)、锤舌菌纲(Leotiomycetes)、银耳菌纲(Tremellomycetes)、散囊菌纲(Eurotiomycetes)、镰刀菌属(Fusarium)和支孢甁霉属(Cladophialophora)等致病菌群相对丰度降低,变形菌门(Proteobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteria)和放线菌门(Actinobacteriota)等有益菌群比例增高且逐渐成为优势菌群。结论粗茎秦艽不同栽培模式可影响其产量和根际土壤微生物群落多样性及环烯醚萜类成分的累积,无地膜种植和间作模式具有一定优势,可为粗茎秦艽种植提供理论参考。
关键词:粗茎秦艽;间作;根际土壤;微生物多样性;环烯醚萜
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发布时间:2023-04-13
基于电子眼技术和化学指纹图谱的陈皮与蒸陈皮质量差异分析
陈晓旭,刘聪,王丽霞,杨晓芸,高佩云,吴宏伟,唐力英,王祝举
2023, 29(10): 202-208. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230248
摘要:目的探究蒸陈皮与陈皮2种饮片间的质量差异。方法基于15批陈皮及15批蒸陈皮的自身对照样本,利用电子眼技术从外观角度测定陈皮和蒸陈皮的颜色,通过明度值(L
*
)、黄蓝值(b
*
)、红绿值(a
*
)和总色值(E
*
ab
)客观表征陈皮及蒸陈皮的质量差异;在此基础上,采用超高效液相色谱法(UPLC)建立指纹图谱评价方法,流动相乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~5 min,5%A;5~30 min,5%~20%A;30~60 min,20%~52%A),检测波长270 nm,流速0.3 mL·min
-1
,柱温30 ℃,从化学成分角度比较陈皮及蒸陈皮间的质量差异,并利用相关性分析揭示外观颜色差异与内在化学成分差异之间的相关性。结果陈皮蒸制后整体颜色加深,其中L
*
、b
*
和E
*
ab
整体呈下降趋势,说明陈皮蒸制后颜色变暗加深且由黄向蓝转变但仍偏向黄色,a
*
整体呈上升趋势,说明陈皮蒸制后颜色更偏向红色。在陈皮和蒸陈皮的指纹图谱中共确定了24个色谱峰,并对其中13个主要色谱峰进行了鉴定。精密度、稳定性、重复性考察显示,与参照峰(峰14,橙皮苷)比较,其余色谱峰相对峰面积及相对保留时间的相对标准偏差(RSD)均<3.0%。指纹图谱化学计量学统计分析结果表明,陈皮与蒸陈皮之间存在一定差异,并确定了7个主要差异性成分,其中5-羟基麦芽酚和5-羟甲基糠醛为蒸陈皮特征成分;相关性分析结果表明,除以上2种特征成分外,峰4、峰10(维采宁-2)、峰23(桔皮素)和峰24(5-去甲基川陈皮素)4个成分与样品颜色变化(E
*
ab
)亦存在明显相关性(P<0.05,P<0.01)。结论陈皮蒸制前后不仅化学成分发生了变化,颜色也发生了改变。将陈皮蒸制前后的化学成分差异特征峰与颜色差异特征峰比较后发现,5-羟基麦芽酚、5-羟甲基糠醛和峰4为共有的特征差异成分,可为建立蒸陈皮特征性质量控制方法、快速评价陈皮和蒸陈皮饮片质量差异提供参考。
关键词:陈皮;蒸制;电子眼技术;色度值;饮片;超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱;相关性分析
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发布时间:2023-04-13
数据挖掘
296例尿石症患者中医证候特征
增强出版
刘菡,张耀圣
2023, 29(10): 209-215. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230417
摘要:目的分析尿石症患者的中医证候特征。方法制定证候调查表,收集2021年9月至2022年9月就诊的296例尿石症患者的一般资料、四诊信息,统计舌象、脉象、症状体征,通过关联规则分析、因子分析和聚类分析探究证候特点。结果①舌象分布中,出现频率在20%以上的单一舌象为白苔、红舌、厚苔、腻苔、黄苔。脉象分布中,出现频率>20%的单一脉象为细脉、弦脉、滑脉、沉脉。出现频率在10%以上的症状体征共27项,腰腹部疼痛及恶心、尿频、血尿、小便不畅等急性发作期特征症状相对较多,其余以寒热、二便和消化类症状较为常见。②14条强关联规则中,5条为阳虚、寒湿类证候表现,4条为阴虚、热证类证候表现,1条为肾虚类证候表现,3条为肾绞痛及伴随症状。③因子分析共提取16个公因子,代表的病位证候要素以脾肾为主,病性证候要素以阴虚、阳虚、湿、热为主,并常见虚实夹杂。聚类分析共获得6类证候,代表的主要证型分别为肾虚湿瘀、气滞热结、阴虚湿热、脾肾阳虚、脾虚湿热、湿热内蕴。结论尿石症患者证候表现以寒热、二便、汗出和消化道症状常见,虚证类证候主要为阴虚、阳虚、肾虚、脾虚,实证类证候主要为湿、热,虚实类证候常相兼存在,脾虚是当前尿石症患者除肾虚外的重要病机。
关键词:尿石症;证候要素;证候特征;数据挖掘
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发布时间:2023-04-13
综述
细辛的化学成分、药理及毒理研究进展
增强出版
刘美婷,王连嵋,孟晶,郑宝鑫,秦莎莎,梁爱华
2023, 29(10): 224-234. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230828
摘要:细辛是我国的一味传统中药,已有2 000多年的用药历史,历代本草多有收录,具有解表散寒、祛风止痛、通窍、温肺化饮的功效,至今仍在临床上广泛用于治疗感冒、新型冠状病毒肺炎、哮喘、过敏性鼻炎、目痛、头痛、牙痛、口腔溃疡、湿疹等病证。现代药理研究显示细辛具有解热、抗炎、止痛、抗菌、抗病毒、止咳平喘、抗过敏等多种作用。细辛具有多种化学成分,其中挥发油,既与散寒解热、止痛抗炎、抗过敏等功效相关,也是其毒性成分。细辛中还含有木脂素类、黄酮类、酰胺类、生物碱、菲类等非挥发油类成分在调节免疫、抗炎止痛、强心扩血管等方面发挥重要作用。其中的菲类化合物主要为马兜铃酸类物质,如马兜铃酸Ⅳ
a
和马兜铃内酰胺Ⅰ,马兜铃酸Ⅳ
a
具有显著抗炎作用。细辛的毒性和黄樟醚和马兜铃酸类成分有关,还受制备方法、剂量、产地、采集时间、药用部位、煎煮时间等多种因素影响,临床应用时应综合考虑。笔者通过检索国内外相关文献,针对细辛的化学成分-药理作用-毒理作用相关性,马兜铃酸、黄樟醚等成分的安全性研究进行了综述,旨在探究细辛的化学成分、药理毒理作用,提供客观认识细辛安全性的新视角,为细辛的临床合理用药、产品风险防控、药品科学监管等提供参考。
关键词:细辛;马兜铃酸;化学成分;挥发油;毒理学研究;药理作用
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发布时间:2023-04-13
基于机械力离子通道Piezo1的中药生物力药理学研究进展
刘陆,王贻琳,肖顺丽,宫平,冯建涛,许静,廖福龙,游云
2023, 29(10): 235-244. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230404
摘要:缺血性脑卒中是全球致死和致残的主要原因之一。东汉名医华佗提出“血脉流通,病不得生”的原创预防医学思路,为血脉相关的力学因素与药理学的交叉研究开创了广阔空间。在缺血性脑卒中的发病过程中,力学因素贯穿始终,影响血小板与内皮细胞功能及其分子通讯。近年来血流力学因素对于血栓形成及脑卒中的影响,无论是阐释缺血性脑卒中的发病机制,还是作为潜在的治疗靶标,都受到了越来越多的关注。机械力离子通道Piezo1广泛存在于多种细胞表面,除了受到化学物质及内源性物质的调控,还能够感受不同力学条件,调控通道的开启与关闭,激活下游不同信号通路。Piezol被视为力学与生化信号之间的重要连接。多种中药能够影响Piezo1通道蛋白活性,可能通过Piezo1蛋白防治缺血性脑卒中等血栓性疾病。该文综述了Piezo1通道蛋白在不同力学条件下对内皮细胞、血小板生理病理功能的影响,Piezo1在血栓形成过程中的角色,以及靶向Piezo1通道的中药、化药及内源性物质的效应;为进一步探索活血化瘀中药效应机理及新药研发提供新的思路,并逐步深化生物力药理学研究。
关键词:Piezo1;内皮细胞;血小板;血栓形成;生物力药理学
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发布时间:2023-04-13
中药单体抗胰腺癌研究进展
李慧敏,李艳,陈洁欣,赵雨晴,王秋红
2023, 29(10): 245-253. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230622
摘要:胰腺癌是一种致死率很高的疾病,其5年生存率不超过10%,且每年死亡率明显升高。胰腺癌常见发病因素多为家族遗传、饮食、胰腺炎、肥胖等,其中,胰腺癌家族遗传是其主要原因,有7%~10%的患者具有家族遗传史。手术治疗是治疗胰腺癌患者和提高其生存率的有效方法,但大多数人确诊时已是中晚期,由于病变位置无法进行切除,失去了手术治疗的最佳时机。故而临床多使用放射治疗、介入治疗、支持治疗、免疫治疗等治疗方法从多方面缓解患者症状,延长生存期。临床常用药物为吉西他滨,但吉西他滨抑制肿瘤生长缓解病情的同时易产生骨髓抑制、皮疹、消化道不良反应、耐药等问题。这些不良反应对于人体的损害是全身性的,而中药既可单独入药也可联合其他治疗手段应用,降低化疗不良反应,恢复患者的体能,减轻其相关并发症。中药含有大量的活性成分,包括生物碱类、黄酮类、皂苷类、酚酸类、有机酸类等有效成分,具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤等疗效。中医许多肿瘤临床研究验证了中医药在肿瘤防治中起到积极作用,尤其是在改善和控制临床症状,对放化疗也起到很好的解毒作用,在改善骨髓抑制、提高免疫力、提高生存质量、延长生存期等各个方面,都取得了良好的效果。该文通过检索国内外文献对中药单体抗胰腺癌机制综述,旨在为胰腺癌的治疗提供新的潜在药物候选。
关键词:中药;胰腺癌;通路;机制;研究进展
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发布时间:2023-04-13
薏苡附子败酱散治疗溃疡性结肠炎的研究进展
米刘悦,张双喜,陈双,常艺
2023, 29(10): 254-263. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230303
摘要:薏苡附子败酱散出自《金匮要略》,为治疗肠痈代表方,全方由薏苡仁、附子、败酱草3味药配伍而成,具有健脾温阳、清热祛湿解毒之效,是临床上治疗溃疡性结肠炎(UC)的常用方剂。UC是一种病变累及结直肠黏膜的慢性非特异性炎症性疾病,病因病机尚未十分明确,多与遗传、外界及肠道环境、免疫、感染等多种因素相关。动物实验及临床研究均表明薏苡附子败酱散治疗UC具有多靶点、多方位的优势。薏苡附子败酱及其中单味药的提取物均有防治UC的作用,目前薏苡附子败酱散治疗UC的作用研究机制主要集中于减轻肠道炎症反应、抗结直肠癌作用、缓解氧化应激、修复肠上皮细胞屏障、改善肠道菌群紊乱、抑制细胞凋亡、维持肠道免疫平衡等。临床上薏苡附子败酱散加减联合西药效果满意,能明显改善UC患者相关临床症状,并能延缓病情,提高患者生存质量,并具有安全性高、不良反应小等优势。其相关研究为UC的临床防治及薏苡附子败酱散对UC作用机制的后续探索提供了理论支持和数据支撑,同时也对中医药治疗UC的研究有重大意义。该文就薏苡附子败酱散对UC的防治及作用机制进行综述。
关键词:薏苡附子败酱散;溃疡性结肠炎;作用机制;临床研究;研究进展
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发布时间:2023-04-13
中药多糖治疗骨质疏松症和骨关节炎作用机制的研究进展
冯晨曦,殷澳,侯相竹,刘凯青,冷向阳,高阳,徐多多
2023, 29(10): 264-273. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230236
摘要:骨质疏松症(OP)和骨关节炎(OA)是临床常见的骨病,OP是一种全身性骨骼疾病,OA是一种慢性退行性关节疾病,均具有患病率高、致残率高等特点。随着人口老龄化的到来,OP和OA的发病率逐年上升,成为老年人的常发疾病,严重影响了患者的生活质量和身心健康。中药治疗骨病历史悠久,在预防和治疗OP和OA等骨病上具有临床疗效好、不良反应小等优点,是治疗骨病的常用方法之一。多糖作为中药的活性物质之一,具有多种药理活性,且来源广泛,不良反应小,其作用不容忽视。多糖在骨病治疗中的作用研究越来越深入,人们发现中药多糖治疗OP和OA的作用机制涉及多层次、多靶点、多通路。通过对中药多糖治疗OP和OA作用机制的相关文献的分析归纳,发现中药多糖主要通过调控成骨细胞与破骨细胞的骨动态平衡、影响骨髓间质干细胞和骨微结构治疗OP;通过调控软骨细胞生长、提高软骨基质中蛋白聚糖和胶原含量、降低氧自由基含量和炎症介质水平治疗OA,旨在进一步探讨中药多糖治疗不同骨病作用机制之间的内在联系,为中药多糖治疗骨病的研究提供相关思路。
关键词:多糖;骨质疏松症;骨关节炎;研究进展
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发布时间:2023-04-13
高尿酸血症肾病中医与中西医结合研究进展
罗佳,李统宇,农复香,许文聪,梁静妍,周雁,孙一铭,黄国东
2023, 29(10): 274-282. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20231693
摘要:高尿酸血症肾病(HN)是一种临床常见的继发性肾损害,具有早期隐匿性、持续进展性等特征。中医认识HN,多从宏观角度出发,认为HN是因为感受外邪的同时机体内伤,二者合而发病,其病机多为本虚标实、虚实夹杂。西医认识HN则更多的从微观角度出发,认为HN的发生是炎症反应、氧化应激、肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)激活、代谢异常等共同作用的结果。在中医辨证分型上,HN可分为4型,即湿热内蕴证、湿浊中阻证、脾肾两虚证和肾阴亏虚证,拟方用药时需根据所辩证型分别施以清热利湿、袪湿化浊、补益脾肾或补肾滋阴等相关治法。除了中药方剂之外,中药单药及其提取物、中成药、中医外治等均在HN的治疗过程中发挥了显著的疗效,有效推动了中医药治疗HN的进程。与此同时,中西医结合的方式在治疗HN上亦发挥了良好的作用,丰富了HN的治疗方案。由于HN同普通肾病如急慢性肾小球肾炎、肾病综合征比较,具有其特殊性,因此在临床过程中应做到谨慎鉴别、明确诊断。该文系统整理了中医、中西医结合关于高血酸血症肾病的研究成果,对HN的机制及治疗进行综述,以期为HN治疗的系统化、理论化提供一定的依据,进一步指导临床。
关键词:高尿酸血症肾病;中医;中西医结合;研究进展
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发布时间:2023-04-13
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