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2021
年
第
27
卷
19
期
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封面故事
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经典名方
当归芍药散通过调控NLRP3/Caspase-1信号通路抑制AD大鼠神经炎症的作用
宋祯彦,夏小芳,王玉珂,郑雨珊,陈佩莹,罗德勇,贺春香,于文静,李平,成绍武
2021, 27(19): 1-8. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211802
摘要:目的研究当归芍药散对β淀粉样蛋白
1-42
(Aβ
1-42
)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠模型的神经保护作用及对NOD样受体3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)信号通路的调控作用。方法大鼠脑内注射Aβ
1-42
构建AD动物模型,给予不同浓度的当归芍药散治疗。实验分为假手术组,模型组,当归芍药散高、中、低剂量干预组。Morris水迷宫实验检测动物学习记忆能力;苏木素-伊红(HE)染色和高尔基染色检测神经元形态功能;免疫荧光共定位检测NLRP3炎症小体活化情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-18 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白的表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低(P<0.01);神经元形态功能受损;炎症因子IL-1β和IL-18 mRNA表达升高,NLRP3炎症小体活化增加,NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,给予当归芍药散中、高剂量干预后,AD大鼠学习记忆能力明显增加(P<0.05,P<0.01);神经元形态功能明显恢复;炎症因子IL-1β和IL-18 mRNA表达显著降低,NLRP3炎症小体活化减少,NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论当归芍药散可能通过调控NLRP3/Caspase-1信号通路抑制炎症小体活化,抑制神经炎症反应,从而发挥神经保护作用。
关键词:当归芍药散;阿尔茨海默病(AD);β-淀粉样蛋白(Aβ);NOD样受体3(NLRP3)炎症小体;半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)
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发布时间:2021-09-07
基于AngⅡ/TRPC6通路探讨当归芍药散对肾病综合征大鼠足细胞的保护机制
李曼曼,许钒,付士平,侯静,冯烨,许在平,倪良厚,王运来,宣自华
2021, 27(19): 9-18. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211936
摘要:目的探究当归芍药散(DSS)对肾病综合征(NS)大鼠血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)通路的影响和保护作用。方法动物实验,160只SD大鼠通过2次尾静脉注射阿霉素(第1周4 mg·kg
-1
,第2周2 mg·kg
-1
)诱导NS模型,分为模型组(给予生理盐水),氯沙坦组(30 mg·kg
-1
·d
-1
),DSS低、中、高剂量组(4.3,8.6,17.2 g·kg
-1
·d
-1
),同时设置正常组。给药4周干预后,透射电镜观察肾脏超微病理改变,试剂盒检测24 h尿蛋白;同时用放射免疫法检测血浆中AngⅡ,钙调神经磷酸酶(CaN)含量的变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾皮质中TRPC6,血管紧张素Ⅱ 1型受体(AT1R),足细胞裂孔隔膜特异蛋白(Nephrin),天冬氨酸半胱氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白表达,免疫组化检测狭缝隔膜中TRPC6,AT1R的表达分布情况。细胞实验,通过AngⅡ刺激MPC5足细胞,随机分为正常组,AngⅡ组,AngⅡ+TRPC6特异性抑制剂SAR7334组,AngⅡ+5%DSS组,AngⅡ+10%DSS组,AngⅡ+15%DSS组,Western blot检测细胞TRPC6,AT1R,Nephrin,Caspase-3蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白含量显著升高(P<0.01),血浆AngⅡ,CaN含量显著升高(P<0.01),肾小球结构不完整,足突广泛融合,足突融合率显著增加(P<0.01),肾皮质中AT1R,TRPC6表达分布增多,肾组织中AT1R,TRPC6,Caspase-3蛋白水平显著增高(P<0.01),Nephrin蛋白水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,氯沙坦组和DSS高剂量组24 h尿蛋白含量显著降低(P<0.01),血浆AngⅡ,CaN含量显著降低(P<0.01),肾小球结构改善,足突融合率显著降低(P<0.01),TRPC6,AT1R在肾皮质中的表达分布减少,肾组织AT1R,TRPC6,Caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.01),Nephrin蛋白水平显著升高(P<0.01);同时与正常足细胞比较,AngⅡ刺激后足细胞AT1R,TRPC6,Caspase-3的蛋白表达水平显著增加(P<0.01),Nephrin表达水平下降(P<0.01);而与AngⅡ组足细胞比较,SAR7334组足细胞AT1R,TRPC6,Caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.01),Nephrin蛋白水平升高(P<0.01)。结论DSS可以改善NS病理特征,可能是通过抑制足细胞内AngⅡ与TRPC6的相互作用,进而改善足细胞结构完整性,修复肾小球分子屏障损伤,减缓NS蛋白尿的发展进程。
关键词:肾病综合征;当归芍药散;足细胞;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ);瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)
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发布时间:2021-09-07
逍遥散促进小胶质细胞极化改善血管性痴呆伴抑郁小鼠髓鞘再生及抑郁表型
单楠,谭子虎,杨冰,马峥玲,尹茜茜
2021, 27(19): 19-27. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211803
摘要:目的探讨逍遥散对血管性痴呆(VaD)小鼠抑郁行为表型的作用及可能机制。方法3月龄雄性C57/BL6小鼠60只,分为正常组、模型组、氟西汀组及逍遥散低、中、高剂量组。除正常组外,其余5组小鼠采用双侧颈总动脉狭窄术,术后2周开始给予慢性束缚应激,每天6 h,构建VaD伴抑郁小鼠模型;逍遥散低、中、高组予逍遥散水煎剂(5,10,20 g·kg
-1
)灌胃,氟西汀组给予氟西汀(10 mg·kg
-1
)灌胃,正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,共计4周,给药期间给予束缚应激维持;糖水偏好试验、悬尾试验检测小鼠抑郁行为表型,免疫荧光法检测小鼠腹侧海马(vHIP)髓鞘碱性蛋白(MBP)荧光表达水平;透射电镜观察小鼠vHIP髓鞘超微结构;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MBP,少突胶质细胞糖蛋白(MOG),髓鞘相关醣蛋白(MAG),髓样细胞触发性受体-2(TREM2),诱导型一氧化氮合酶(iNOS),精氨酸酶1(Arg1),白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)蛋白表达水平。结果行为学检测结果显示:与正常组比较,模型组小鼠不动时间增加、糖水偏好百分比下降(P<0.01);与模型组比较,给予逍遥散干预后小鼠不动时间缩短(P<0.05),糖水偏好百分比增加(P<0.01);Western blot结果显示:与正常组比较,模型组小鼠vHIP中髓鞘相关蛋白(MBP,MOG,MAG)表达下降(P<0.01);与模型组比较,低剂量组小鼠vHIP中MBP,MOG,MAG蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01),iNOS蛋白表达降低(P<0.01),中、高剂量组MBP,MOG,MAG,TREM2,Arg1,IL-4,IL-10蛋白表达均增加(P<0.05,P<0.01),iNOS,IL-1β,TNF-α蛋白表达水平降低(P<0.01);免疫荧光结果显示:与正常组比较,模型组小鼠MBP平均荧光强度降低(P<0.01),低、中、高剂量组MBP平均荧光强度不同程度增加(P<0.01);透射电镜结果显示:模型组髓鞘结构松解,致密层分离,排列紊乱,给予逍遥散干预改善小鼠髓鞘结构完整性及板层结构松散度。结论逍遥散改善VaD小鼠的抑郁表型,其机制可能是通过上调TREM2诱导小胶质细胞M2型极化,增加其抗炎及吞噬能力,促进受损髓鞘再生。
关键词:血管性痴呆(VaD);抑郁症;逍遥散;小胶质细胞;髓鞘
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发布时间:2021-09-07
配伍
黄芪-白花蛇舌草抑制肺癌A549细胞增殖机制
孙海鹏,马山,庄贺,赵粤,孙平一,刘思远
2021, 27(19): 28-35. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211922
摘要:目的从细胞水平观察黄芪-白花蛇舌草对人肺腺癌A549细胞增殖及白细胞介素-6(IL-6),磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt),雷帕霉素靶蛋白(mTOR),缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),细胞周期蛋白D
1
(Cyclin D
1
)表达量的影响,并探讨其作用的分子机制。方法设立空白组(完全培养基),黄芪-白花蛇舌草低、中、高质量浓度组(20,40,60 mg·L
-1
),顺铂低、中、高质量浓度组(5,10,20 mg·L
-1
),采用噻唑蓝(MTT)比色法检测黄芪-白花蛇舌草(0,20,40,60 mg·L
-1
)和顺铂(0,5,10,20 mg·L
-1
)干预A549细胞24,48,72 h后的细胞活性,计算各组细胞增殖能力,筛选出各药物组最佳浓度;分别用完全培养基,黄芪-白花蛇舌草(40 mg·L
-1
),顺铂(10 mg·L
-1
),联合药物(40 mg·L
-1
+10 mg·L
-1
)干预肺腺癌A549细胞,设置为空白组、黄芪-白花蛇舌草组、顺铂组、联合组,计算各组在24,48,72 h后对A549细胞增殖抑制影响;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组72 h后细胞培养上清中IL-6的水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测HIF-1α,Cyclin D
1
mRNA水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组蛋白PI3K,Akt,p-Akt,mTOR,HIF-1α,Cyclin D
1
表达的变化情况。结果在作用细胞24 h后,各黄芪-白花蛇舌草组对细胞增殖未表现出明显抑制,作用48 h,与空白组比较,黄芪-白花蛇舌草组对肿瘤细胞有明显增殖抑制作用(P<0.05),表现出时间依赖性,在作用细胞72 h,黄芪-白花蛇舌草各浓度组未表现出明显差异,故选用40 mg·L
-1
为中药最佳浓度组,用于后续实验。与空白组比较,经过不同浓度顺铂干预后,细胞增殖均受到不同程度抑制(P<0.05),表现出明显的时间依赖性,基于细胞存活率考虑,选用顺铂10 mg·L
-1
为最佳浓度。与空白组比较,黄芪-白花蛇舌草与顺铂联合应用明显抑制肺腺癌A549细胞增殖,增殖抑制率表现出明显的时间依赖性(P<0.05),且药物作用72 h,联合组与其他两组比较差异更加显著(P<0.01);与空白组比较,各用药组细胞培养液IL-6分泌显著降低(P<0.01),以联合组下降更加突出。与空白组比较,黄芪-白花蛇舌草、顺铂均能降低HIF-1α,Cyclin D
1
mRNA水平(P<0.05,P<0.01),且联合用药降低幅度更加明显;各用药组PI3K,p-Akt,mTOR,HIF-1α,Cyclin D
1
蛋白均明显降低(P<0.05,P<0.01),且联合组各蛋白表达量明显低于顺铂组(P<0.01)。结论黄芪-白花蛇舌草对肺癌A549细胞增殖具有抑制作用,潜在机制可能与其抑制IL-6/PI3K/Akt/mTOR-HIF-1α轴的表达与分泌有关。
关键词:黄芪-白花蛇舌草;A549肺癌细胞;白细胞介素-6(IL-6);缺氧诱导因子-1α(HIF-1α);增殖
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发布时间:2021-09-07
药理
断藤益母汤对人脐静脉内皮细胞模型的作用机制
钱凯,郑雪霞,许舒迪,詹静怡,叶棠明,廖发杰,刘敏莹,林昌松
2021, 27(19): 36-45. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211706
摘要:目的探讨断藤益母汤(DTYM)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)模型细胞活化的作用,以及对相关活化蛋白与血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的作用。方法VEGF和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导HUVEC,DTYM (200,400 mg·L
-1
)作用后,采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8),5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)法,transwell鬼笔环肽荧光染色法及基质胶法检测细胞增殖活力、迁移和管形成能力,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测黏附因子E选择素(E-selectin),细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和脉管细胞黏附分子-1(VCAM-1) mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血管性血友病因子(VWF),血小板-内皮细胞黏附分子31(CD31),血管诱导生成因子61(CYR61),血管生成素-1(ANG-1),VEGF和VEGF受体2(VEGFR2)的表达,免疫荧光检测CD31的表达。结果与正常组比较,模型组HUVEC的增殖活力、迁移和管形成能力明显升高(P<0.05,P<0.01);E-selectin,ICAM-1,VCAM-1 mRNA表达升高(P<0.01);VWF,CD31,ANG-1,CYR61,VEGF-α,磷酸化(p)-VEGFR2蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),CD31免疫荧光强度升高(P<0.01);与模型组比较,DTYM两剂量组HUVEC的增殖活力、迁移和管形成能力明显降低(P<0.05,P<0.01);E-selectin,ICAM-1,VCAM-1 mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),VWF,CD31,ANG-1,CYR61,VEGF-α,p-VEGFR2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),CD31免疫荧光强度降低(P<0.01)。结论DTYM抑制HUVEC的增殖、迁移、黏附和管形成,与其调控HUVEC中CD31,VWF,CYR61,ANG-1的表达及VEGF信号通路有关。
关键词:断藤益母汤;人脐静脉内皮细胞;类风湿关节炎;血管内皮生长因子(VEGF)信号通路;内皮细胞活化;血管新生
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发布时间:2021-09-07
脑心安胶囊对慢性脑缺血致血管性认知障碍大鼠胶质细胞激活及炎性反应的调节作用
韩广卉,李东岳,余虹霓,甄伟哲,马涛
2021, 27(19): 46-55. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211806
摘要:目的以慢性脑缺血致血管性认知障碍(VCI)大鼠为模型,探讨脑心安胶囊对VCI大鼠脑内胶质细胞激活及炎性损伤的保护作用。方法150只大鼠随机分为假手术组(20只)和造模组(130只),采用双侧颈动脉结扎法(2-VO)造模。造模成功的87只大鼠,随机分为模型组、阳性药组(安理申,0.5 mg·kg
-1
),脑心安低、中、高剂量组(0.18,0.36,0.72 g·kg
-1
),每组17~18只大鼠。经灌胃给予脑心安8周后,采用Morris水迷宫和避暗箱实验检测脑心安对VCI大鼠记忆能力的影响,苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠大脑海马CA1区神经细胞结构变化,原位末端标记法(TUNEL)染色检测大鼠海马神经细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白(GFAP),离子钙结合衔接分子-1(Iba-1)表达水平,测定p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和核转录因子-κB(NF-κB)磷酸化水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定脑内炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力和记忆保持能力均明显下降(P<0.05,P<0.01),大脑海马CA1区神经元出现明显损伤,细胞凋亡率显著升高(P<0.01),GFAP,Iba-1表达均显著上调(P<0.01),p38 MAPK,NF-κB磷酸化水平显著增加(P<0.01),炎性因子IL-1β,TNF-α水平升高(P<0.01)。与模型组比较,脑心安各剂量组均能显著改善模型大鼠空间学习记忆能力和记忆保持能力(P<0.05,P<0.01),改善海马CA1区神经元损伤,降低神经细胞凋亡率(P<0.05,P<0.01),下调GFAP,Iba-1表达量(P<0.01),降低p38 MAPK,NF-κB磷酸化水平(P<0.05,P<0.01),降低TNF-α,IL-1β水平(P<0.01)。结论脑心安胶囊通过抑制慢性脑缺血诱发的大鼠脑内小胶质细胞和星形胶质细胞活化,抑制p38 MAPK和NF-κB激活导致的中枢神经炎性损伤,改善慢性脑缺血导致的VCI。
关键词:慢性脑缺血;血管性认知障碍;脑心安胶囊;胶质细胞;炎性反应
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发布时间:2021-09-07
基于“心受气于脾”探讨心痛泰调控p38 MAPK/AP-1对动脉粥样硬化兔的中医证候和VSMC胶原纤维的影响
易琼,李雅,郭志华,唐云,申思,齐婧,魏佳明
2021, 27(19): 56-65. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211799
摘要:目的基于“心受气于脾”探讨心痛泰调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/转录激活因子-1(AP-1)对动脉粥样硬化兔的中医证候积分和血管平滑肌细胞(VSMC)胶原纤维的影响。方法120只清洁级兔随机分为假手术组,痰瘀互结模型组,心痛泰低剂量组、中剂量组、高剂量组和瑞舒伐他汀组。采用高脂喂养+球囊损伤法,造成痰瘀互结病证结合动脉粥样硬化兔模型,造模后予以相应药物灌胃8周(心痛泰低、中、高剂量组和瑞舒伐他汀组的给药量分别为2.3,4.6,9.2 g·kg
-1
和0.55 mg·kg
-1
)。给药周期结束时取腹主动脉,苏木素-伊红(HE)染色观察易损斑块的情况;免疫组化法(IHC)测定基质金属蛋白酶-9(MMP-9),组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1);马松(Masson)染色观察平滑肌细胞胶原纤维分解情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定主动脉组织p38 MAPK,AP-1蛋白的表达;采用中医证候评分表评价痰瘀互结证中医证候积分。结果与模型组比较,心痛泰各剂量组、瑞舒伐他汀组MMP-9含量显著降低,TIMP-1含量显著升高,p38 MAPK蛋白的表达,AP-1的核转位显著降低(P<0.01);与心痛泰低剂量组比较,心痛泰中、高剂量组,瑞舒伐他汀组MMP-9明显降低,TIMP-1明显升高,p38 MAPK蛋白的表达,AP-1的核转位明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,心痛泰各剂量组、瑞舒伐他汀组的中医证候积分均明显改善(P<0.05,P<0.01);与心痛泰低剂量组比较,心痛泰中、高剂量组,瑞舒伐他汀组的中医证候积分均显著改善(P<0.01)。Masson染色显示,模型组平滑肌纤维排列紊乱,胶原分解增多,纤维帽变薄,斑块易损性增加;与模型组比较,心痛泰各组和瑞舒伐他汀组平滑肌细胞排列较为整齐,胶原纤维分解减少,斑块稳定性增加。结论心痛泰可下调p38 MAPK,MMP-9的表达,提高TIMP-1的水平,减少AP-1核转位,减少平滑肌细胞胶原纤维的分解,改善痰瘀互结证的中医证候评分。心痛泰可能通过调控p38 MAPK/AP-1信号通路及下游的细胞因子,稳定易损斑块,改善动脉粥样硬化之痰瘀互结证。
关键词:心受气于脾;心痛泰;动脉粥样硬化;p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/转录激活因子-1(AP-1)信号通路;中医证候积分
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发布时间:2021-09-07
加味升降散调控HIF-1
α
/NOX4信号通路对膜性肾病大鼠氧化应激和凋亡的影响
李绍慧,高飞,郝文霞,檀淼,杨凤文,陈素枝,檀金川
2021, 27(19): 66-72. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211937
摘要:目的探讨加味升降散对膜性肾病(MN)大鼠血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)信号通路的干预作用,研究其减轻肾组织氧化应激和凋亡的相关机制。方法采用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)尾静脉注射方法复制MN模型,将成功造模的大鼠随机分为模型组,加味升降散组和贝那普利组。各组根据相应的药物剂量灌胃(ig),每日1次。在给药的第4周末检测相关指标,检测24 h尿蛋白(UTP),尿素氮(BUN),肌酐(SCr)的变化情况,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠肾脏中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),活性氧(ROS)水平,原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠肾组织细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肾脏中HIF-1α,NOX4的mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾脏HIF-1α,NOX4蛋白表达水平,免疫组化(IHC)检测大鼠肾脏相关凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-xl(Bcl-xl),Bcl-2相关X蛋白(Bax),Bcl-2细胞死亡调节子抗体(Bim)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠UTP明显上升(P<0.05),SOD水平明显减少,MDA,ROS明显增多(P<0.05),HIF-1α,NOX4的mRNA及蛋白表达水平明显上升(P<0.05),Bax,Bim蛋白表达水平明显增高,Bcl-xl,Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05),肾组织细胞凋亡显著增多;与模型组比较,各给药组大鼠UTP水平均有不同程度下降(P<0.05),SOD水平明显上调,MDA,ROS含量显著下降(P<0.05),HIF-1α,NOX4的mRNA及蛋白表达量明显下降(P<0.05),Bax,Bim蛋白表达水平下降,Bcl-xl,Bcl-2蛋白表达水平明显上升(P<0.05),肾组织细胞凋亡显著减少。结论加味升降散的保肾作用可能与其通过抑制HIF-1α/NOX4通路,缓解MN大鼠肾组织氧化应激状态,减少肾组织细胞凋亡有关。
关键词:膜性肾病;氧化应激;细胞凋亡;血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)信号通路;加味升降散
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发布时间:2021-09-07
对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达的影响
林思,朱华,秦慧真,王孝勋,许立拔,邓玲玉
2021, 27(19): 73-79. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211921
摘要:目的研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法选择人肝癌SMMC-7721细胞,常规培养及传代,对叶百部总生物碱设置添加干预的质量浓度为50,75,112,167,250 mg·L
-1
,另设置仅添加10%胎牛血清作为空白组。采用噻唑蓝(MTT)比色法和细胞克隆实验观察细胞增殖的作用,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3种凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3的表达。结果对叶百部总生物碱可抑制SMMC-7721细胞增殖,与空白组比较,细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01),作用24,48,72 h的50%细胞抑制浓度(IC
50
)分别为(173.36±8.75),(112.14±16.50),(96.41±2.60) mg·L
-1
,细胞集落形成抑制率显著升高(P<0.01),存在浓度依赖性。与空白组比较,对叶百部总生物碱可促进细胞凋亡,SMMC-7721细胞凋亡数目和凋亡率显著增加(P<0.01),在荧光正置显微镜下可观察到典型细胞凋亡形态,如亮蓝色细胞核染色,细胞质浓缩和细胞核固缩等。与空白组比较,抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著下调(P<0.01);与空白组比较,对叶百部总生物碱75,112,167,250 mg·L
-1
促凋亡蛋白Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论对叶百部总生物碱有很好的抑制SMMC-7721细胞增殖和促进凋亡的作用,其机制可能与抑制Bcl-2蛋白表达和促进Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达有关。
关键词:对叶百部总生物碱;人肝癌;SMMC-7721细胞;凋亡;B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2);Bcl-2相关X蛋白(Bax);切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)
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发布时间:2021-09-07
川芎嗪联合大黄素抑制腹水癌细胞HIF-1
α
通路相关因子表达的作用研究
毛应岚,赵美,胡娜,于娇妍,姜维
2021, 27(19): 80-87. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211893
摘要:目的从抑制癌细胞缺氧诱导因子(HIF)信号通路中核转录因子-κB(NF-κB),HIF-1α及血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的角度探讨川芎嗪和大黄素合用抑制腹水癌细胞新生血管的作用。方法50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、川芎嗪组、大黄素组、川芎嗪+大黄素组,各实验组采用原位注射法对正常大鼠肝脏注射大鼠腹水癌细胞(Walker-256细胞),假手术组注射同等体积生理盐水,并分组灌胃给药川芎嗪(10 mg·kg
-1
),大黄素(10 mg·kg
-1
),川芎嗪+大黄素(川芎嗪10 mg·kg
-1
+大黄素10 mg·kg
-1
),给药7 d后取实验组肝脏肿瘤接种组织样本制作病理切片,观察肿瘤细胞存留状态和VEGF的表达情况。分别构建Walker-256细胞体外氧糖剥夺模型(缺氧缺糖模型)、单缺氧模型和单缺糖模型。川芎嗪组、大黄素组及川芎嗪+大黄素组均选择不影响Walker-256增殖的3个连续浓度作为考察浓度,造模前给药,模型处理时间4 h,检测各组细胞培养上清液中HIF-1α,VEGF-C,NF-κB的水平。结果大鼠肝脏在接种Walker-256细胞后,肝脏总质量明显升高(P<0.05),川芎嗪组,大黄素组和川芎嗪+大黄素组肝脏总质量较模型组明显降低(P<0.05),组织病理学检测显示,各给药组肝脏组织中的VEGF表达响应均低于模型组;在细胞水平,川芎嗪组和川芎嗪+大黄素组缺氧缺糖模型的HIF-1α,VEGF-C,NF-κB水平均明显降低(P<0.05),呈一定的剂量依赖性,对单缺氧模型作用有一定降低作用;大黄素1×10
-2
,1×10
-3
mol·L
-1
组和川芎嗪+大黄素1×10
-2
,1×10
-3
mol·L
-1
组明显降低缺氧缺糖和单缺糖模型中HIF-1α,NF-κB的水平(P<0.05),而所有给药组对单缺糖模型中VEGF-C作用不显著,差异无统计学意义。结论川芎嗪和大黄素单用和川芎嗪+大黄素联合使用均可抑制大鼠肝脏在接种Walker-256细胞后重量的异常升高,并抑制肝脏组织的VEGF表达;川芎嗪和大黄素可以抑制NF-κB,HIF-1α的蛋白表达,从而减少了HIF-1α转录激活的转移相关靶基因蛋白VEGF的表达、限制肿瘤细胞新生血管的生成以达到抑制腹水癌细胞侵袭和扩散。其中川芎嗪对缺氧的作用最显著,葡萄糖对川芎嗪的作用有干预,与大黄素合用时葡萄糖的干预作用降低,合用对肿瘤细胞的作用更稳定。
关键词:川芎嗪;大黄素;缺氧诱导因子;血管内皮生长因子-C;核转录因子-κB;Walker-256细胞
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发布时间:2021-09-07
健脾补肺方对幼龄哮喘大鼠cAMP/PKA/CREB信号通路的影响
王雅娟,高华武,朱和平,王舒舒,邹莹莹,李泽庚
2021, 27(19): 88-96. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211805
摘要:目的观察健脾补肺方对卵蛋白(OVA)致敏并攻击复制的幼龄哮喘大鼠模型气道炎症、高反应性及环磷酸腺苷(cAMP)信号通路活性的影响。方法雄性SD大鼠75只,随机选取15只作为正常组,剩余大鼠随机分为哮喘模型组,健脾补肺方组(8.37 g·kg
-1
·d
-1
),氨茶碱组(40 mg·kg
-1
·d
-1
)和地塞米松组(0.1 mg·kg
-1
·d
-1
),每组15只。用0.2% OVA的氢氧化铝凝胶10点致敏,并以1% OVA生理盐水溶液雾化攻击复制幼龄大鼠哮喘模型,并给予相应的药物处理。小动物肺功能仪观察大鼠气道高反应(AHR)变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数及分类计数观察炎症细胞数量变化,苏木素-伊红(HE),马松(Masson)和碘酸雪夫氏(PAS)染色观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-4,IL-5,IL-13,γ干扰素(IFN-γ),肿瘤坏死因子(TNF)-α和血浆中cAMP水平变化;免疫组化法观察肺组织蛋白激A(PKA)蛋白表达变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)观察肺组织环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB) mRNA和蛋白表达变化。结果与正常组比较,模型组大鼠气道阻力(RL)明显增加而Cdyn明显降低(P<0.05),BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞比例显著升高,外周血IL-4,IL-5,IL-13,TNF-α水平显著升高而IFN-γ水平显著降低(P<0.01),肺组织病理改变明显;cAMP水平显著下降,肺组织中PKA和CREB的表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,健脾补肺方可以抑制AHR,降低BALF中的白细胞总数和嗜酸性粒细胞比例及RL(P<0.05),改善大鼠肺组织病理改变,增加Cdyn(Cdyn),上调大鼠血清中cAMP水平和肺组织中 PKA和CREB表达(P<0.01)。结论健脾补肺方能够改善幼龄哮喘大鼠的AHR,抑制气道炎症,减轻肺组织损伤,其机制可能与上调cAMP/PKA/CREB通路活性相关。
关键词:健脾补肺方;哮喘;气道高反应(AHR);环磷酸腺苷(cAMP);蛋白激酶A(PKA);环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)
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发布时间:2021-09-07
临床
冠心病心力衰竭气虚血瘀证严重程度与生物学指标的相关性
卫靖靖,李彬,彭广操,王新陆,赵齐飞,王建茹,于瑞,王永霞,朱明军
2021, 27(19): 97-103. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211694
摘要:目的探讨冠心病心力衰竭气虚血瘀证严重程度与心功能指标、能量代谢指标、凝血功能指标、炎性因子指标之间的相关性,为冠心病心力衰竭气虚血瘀证的生物学基础研究提供科学依据。方法连续收集200例冠心病心力衰竭气虚血瘀证患者作为研究组,根据气虚血瘀证评分划为轻、中、重3组,并纳入40例同期健康体检者作为对照组,完成各组心功能指标、能量代谢指标、凝血相关指标及炎性因子等生物学指标的采集。比较各组指标,采用Spearman分析差异指标与气虚血瘀证严重程度的相关性,同时使用有序Logistic回归分析气虚血瘀证严重程度的风险因素。结果冠心病心力衰竭气虚血瘀证患者存在能量代谢、凝血功能、炎性因子及心功能相关指标的差异,气虚血瘀证轻、中、重3组间N末端B型利钠肽原(NT-ProBNP),6分钟步行试验(6MWT),心肌型-脂肪酸结合蛋白(H-FABP),凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),一氧化氮(NO)水平差异具有统计学意义(P<0.05);气虚血瘀证严重程度与NT-proBNP(r=0.144),PT(r=0.173),APTT(r=0.144)水平呈正相关,与6MWT(r=-0.287)水平呈负相关;6MWT[比值比(OR)=0.995,95%置信区间(CI)0.991~0.998),P<0.01],APTT(OR=1.088,95%CI 1.021~1.157,P<0.01)指标是冠心病心力衰竭气虚血瘀证严重程度的独立影响因素。结论冠心病心力衰竭气虚血瘀证严重程度与NT-ProBNP,6MWT,H-FABP,PT,APTT,TNF-α,NO指标密切相关,且6MWT,APTT指标可作为独立影响因素,用于评估冠心病心力衰竭气虚血瘀证患者的严重程度。
关键词:冠心病;心力衰竭;气虚血瘀证;生物学指标;相关性
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发布时间:2021-09-07
黄芪桂枝五物汤合生脉饮治疗糖尿病心肌病心脏功能的临床疗效
韦玉娜,莫雪梅,王强,曲楠,钟润芬,韦斌
2021, 27(19): 104-109. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210334
摘要:目的观察黄芪桂枝五物汤合生脉饮治疗糖尿病心肌病心脏功能的疗效及抗心肌纤维化和抗炎作用。方法将96例患者按随机数字表法分为观察组和对照组各48例。两组均给予控制血糖、血脂、血压及抗心衰等综合措施。对照组口服通脉降糖胶囊,3粒/次,3次/d;观察组口服黄芪桂枝五物汤合生脉饮加减,1剂/d。两组疗程均为3个月。进行治疗前后超声心电图检查记录左室射血分数(LVEF),舒张早期峰值速度E峰/舒张晚期峰值速度A峰,计算(E/A),左心室舒张末期内径(LVEDd)和每搏输出量(SV),检测治疗前后心肌肌钙蛋白-I(cTn-I),cTn-T,肌酸激酶同工酶(CK-MB),乳酸脱氢酶(LDH),转化生长因子-β
1
(TGF-β
1
),基质金属蛋白酶-2(MMP-2),胰岛素样生长因子-1(IGF-1),白细胞介素-6(IL-6),IL-1,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),N末端B型利钠肽原(NT-proBNP),可溶性ST2(sST2)和半乳糖凝集素-3(Gal-3)水平;进行治疗前后心功能不全症状评价和中医证候评分。结果治疗后观察组LVEF,E/A均高于对照组(P<0.01);观察组cTn-I ,cTn-T,LDH和CK-MB水平均低于对照组(P<0.01);观察组TGF-β
1
,MMP-2,IGF-1,IL-6,IL-1,TNF-α,NT-proBNP,sST2和Gal-3水平均低于对照组(P<0.01);观察组临床疗效高于对照组(Z=1.974,P<0.05)。结论在西医常规干预的基础上,黄芪桂枝五物汤合生脉饮加减治疗DCM气阴两虚兼血瘀证患者,具有抗炎、抗心肌纤维化,抑制心肌重塑作用,可起到减轻心肌组织损伤,提高心室舒张功能的效果,从而保护心脏功能,有着较好的临床疗效,值得临床使用。
关键词:糖尿病心肌病;黄芪桂枝五物汤;生脉饮;心肌纤维化;炎症因子;心脏功能
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发布时间:2021-09-07
贞术调脂胶囊对2型糖尿病HbA1c疗效的真实世界研究
吴淼闻,黄晓强,詹会霞,杨进,彭柳芬,刘倩,金英花,陈滢宇,徐俊姣,李思莹,梅元珍,朴胜华,荣向路,郭姣
2021, 27(19): 110-117. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211991
摘要:目的基于真实世界数据探究贞术调脂胶囊(FTZ)对2型糖尿病(T2DM)患者糖化血红蛋白(HbA1c)的长期疗效特点。方法提取医院信息系统(HIS)中使用FTZ的T2DM患者(FTZ组)与使用常规降糖药物的T2DM患者(常规治疗组),运用倾向性评分匹配(PSM)法平衡组间混杂因素,以HbA1c为疗效评价指标,采用t检验,χ
2
检验比较两组间疗效差异;对同一患者的重复测量数据,采用广义估计方程(GEE)比较两组间疗效差异并评估对HbA1c疗效的稳定性;采用多元线性回归分析可能影响FTZ降低HbA1c效力的因素,并对相关因素分层后进行亚组分析。结果研究共纳入FTZ组患者46例与常规治疗组患者1 208例,经PSM得到组间协变量均衡的样本42对,在1年的观察期内,①FTZ组治疗后的HbA1c为6.51%±1.09%,自身前后比较及与常规治疗组间比较差异均无统计学意义;同时FTZ组治疗后HbA1c<7.0%的达标率为73.8%,自身前后比较及与常规治疗组间比较差异均无统计学意义;②GEE结果显示,对于重复测量的治疗后HbA1c水平,两组之间差异无统计学意义,且随着治疗时间的增加,组间HbA1c水平保持平稳;③多元线性回归及亚组分析结果显示,FTZ对HbA1c基线更高[β=-0.530,95%置信区间(CI) -0.850~-0.209,P<0.01]或合并高血压病(β=-0.918,95%CI -1.614~-0.222,P<0.05)的患者降低HbA1c的效力更强。结论在真实世界中FTZ具有控制血糖的作用,其效果与常规降糖药物相近,并且可以在较长时间内保持患者的血糖稳定。
关键词:2型糖尿病(T2DM);贞术调脂胶囊;真实世界研究;倾向性评分匹配(PSM);广义估计方程(GEE);临床疗效
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发布时间:2021-09-07
调脉合剂治疗气阴两虚兼血脉瘀热型冠心病室性期前收缩的临床疗效分析
韩垚,戴梅,刘红旭,张大炜,魏执真
2021, 27(19): 118-125. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210316
摘要:目的探讨调脉合剂联合酒石酸美托洛尔治疗气阴两虚兼血脉瘀热型冠心病室性期前收缩的临床效果。方法纳入冠心病合并室性期前收缩患者共95例,采用随机数字表法分为治疗组和对照组,脱落4例,完成随访91例,治疗组45例和对照组46例,对照组在冠心病常规治疗基础上应用酒石酸美托洛尔治疗,治疗组在对照组基础上联合调脉合剂治疗,观察两组治疗前后中医证候疗效和心电图,24 h动态心电图等疗效性指标及安全性指标,疗程4周。结果治疗后,治疗组心律失常疗效优于对照组(P<0.05);治疗后,治疗组室性期前收缩次数减少情况优于对照组(P<0.05),治疗组Lown分级改善较对照组具有显著性差异(P<0.01),治疗组心率变异性指标升高较对照组具有显著性差异(P<0.05),治疗组心电图QT离散度值改善较对照组具有明显差异(P<0.05),治疗组超敏C反应蛋白及同型半胱氨酸改善与对照组比较具有明显差异(P<0.05);同治疗前比较,两组均能改善中医证候,治疗组疗效显著优于对照组(P<0.01),其中治疗组气短、乏力、口干喜饮、舌象、脉象单项积分改善情况显著优于对照组(P<0.01)。结论调脉合剂不仅可以提高冠心病心律失常临床疗效,在调节心律失常患者心率变异性指标、抑制炎症细胞因子、降低同型半胱氨酸及改善患者临床症状方面也表现出明显优势,值得临床推广应用。
关键词:调脉合剂;室性期前收缩;凉血清热;心率变异性;超敏C反应蛋白
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发布时间:2021-09-07
加味生脉饮辅助化疗对气血两虚证急性淋巴细胞白血病患儿的影响
安娜,张古英,赵宜乐,曹利红,王婧,张雪,梁玉丽
2021, 27(19): 126-131. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210631
摘要:目的观察加味生脉饮辅助化疗对气血两虚证急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿营养情况和免疫功能的调节效果。方法将100例ALL化疗患儿按随机数字表法分为观察组和对照组各50例。两组患儿均给予长春新碱(泼尼松)+柔红霉素+左旋门冬酰胺酶(VDLD)方案进行诱导缓解治疗和环磷酰胺+阿糖胞苷+6-巯基嘌呤(CAM)方案进行早期强化治疗。对照组口服生脉饮,10 mL/次,3次/d。观察组口服加味生脉饮,1剂/d。两组疗程均为3个月。进行治疗前后微型营养评定(MNA),并检测治疗前后血清总蛋白(TB),白蛋白(ALB),前白蛋白(PAB),T细胞CD4
+
,CD8
+
,免疫球蛋白G(IgG),免疫球蛋白M(IgM),免疫球蛋白A(IgA)水平,计算CD4
+
/CD8
+
;进行治疗前后中医证候评分,Piper疲乏修订量表(PFS-R)和儿童生活质量普适性核心量表(PedsQL)评分;评价治疗前后白细胞(WBC),红细胞(RBC),血红蛋白(Hb)和血小板(PLT)变化。结果治疗后观察组营养状况高于对照组(Z=2.018,P<0.05);观察组疲乏程度低于对照组(Z=2.029,P<0.05);观察组MNA评分高于对照组(P<0.01),PFS-R和气血两虚证评分均低于对照组(P<0.01);观察组TB,ALB,PAB,CD4
+
水平和CD4
+
/CD8
+
均高于对照组(P<0.01),CD8
+
低于对照组(P<0.01);观察组IgM和IgA水平均高于对照组(P<0.01);观察组RBC,Hb和PLT水平均高于对照组(P<0.01)。结论加味生脉饮内服辅助用于ALL化疗患儿,可提高营养状况,改善免疫功能,促进免疫平衡,减轻临床症状,促进造血系统的恢复,提高生活质量。
关键词:急性淋巴细胞白血病;气血两虚证;生脉饮;营养状况;疲乏程度;免疫功能
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发布时间:2021-09-07
药物代谢
基于药物动力学和多元统计方法解析瓜蒌祛痰止咳相关质量标志物
马建超,郭庆梅
2021, 27(19): 132-140. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211247
摘要:目的基于药物动力学对香叶木素-7-O-葡萄糖苷、香叶木素、芹菜素、香草酸和肉桂酸进行瓜蒌祛痰止咳相关质量标志物(Q-marker)的筛选,并利用多元统计方法对筛选出的候选Q-marker进行评价。方法随机选取6只健康大鼠,灌胃给予瓜蒌70%乙醇提取物(剂量20 g·kg
-1
)后,于不同时间点从眼眶静脉采血,采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法(HPLC-QqQ-MS/MS)同时检测血浆中5个瓜蒌活性成分(香叶木素-7-O-葡萄糖苷、香叶木素、芹菜素、香草酸、肉桂酸)的血药浓度,主要检测条件为流动相0.2%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~4 min,6%~23%B;4~5 min,23%~59.5%B;5~10 min,59.5%~60%B),流速0.5 mL·min
-1
,检测波长254 nm,电喷雾离子源(ESI),正离子模式检测,多反应监测(MRM)模式扫描,扫描范围m/z 50~1 500;选择药物动力学规律较为明确的成分为瓜蒌祛痰止咳相关候选Q-marker,测定这些成分在9批药材中的含量,主要检测条件与药物动力学研究相同,以含量测定的结果为基础,使用SPSS 21.0进行系统聚类分析和主成分分析(PCA)。结果药物动力学结果显示,香叶木素-7-O-葡萄糖苷、香叶木素、芹菜素、香草酸4个成分的药-时曲线下面积(AUC
0-
t
)分别为(111.28±9.94),(27.08±2.76),(1 376.12±101.86),(631.32±64.72) μg·h·L
-1
;系统聚类分析将9批瓜蒌聚为3类,聚类结果与瓜蒌的品种相关,但也受产地的影响;PCA结果显示,高唐瓜蒌、山西瓜蒌和河北笨瓜蒌的综合评分分别为1.919,1.356,0.299,在所有瓜蒌样品中位于前3位,农科院1号、河北瓜蒌和农科院2号的综合评分分别为-0.804,-1.085,-1.120,在所有瓜蒌样品中位于后3位。结论香叶木素-7-O-葡萄糖苷、香叶木素、芹菜素和香草酸4个成分在药物动力学特征和质量评价等方面符合瓜蒌祛痰止咳相关Q-marker的要求。
关键词:瓜蒌;药物动力学;高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法(HPLC-QqQ-MS/MS);系统聚类分析;主成分分析(PCA);质量标志物(Q-marker);指标成分
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发布时间:2021-09-07
药学基础
典型喀斯特地区石栽铁皮石斛岩土植物系统的重金属分析及评价
杜光映,严福林,谢仁权,何卫军,王勤,曾鉴,魏升华
2021, 27(19): 141-148. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211046
摘要:目的系统评价仿野生岩缝附生栽培铁皮石斛及其根际土壤、基岩中重金属的安全性;剖析研究区碳酸盐岩-黑色石灰土-铁皮石斛系统中重金属的分布特征。方法采集贵州喀斯特地区岩缝附生栽培2年生铁皮石斛、黑色石灰土和碳酸盐岩样品。采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定铁皮石斛中Cu,Pb,As,Cd含量,以及土壤和基岩中Cu,Pb,As,Cd,Cr含量,检测条件为等离子体功率1 550 W,反馈功率2 W,采样深度9 mm,雾化室温度2 ℃,分析模式全定量,双电荷<1.5%。运用原子荧光光谱法测定铁皮石斛中Hg含量,利用测汞仪测定土壤和基岩中Hg含量。使用SPSS 26.0软件对测试数据进行统计分析。结果铁皮石斛中Cu,Pb,As,Cd和Hg含量均在安全阈值内。黑色石灰土中Pb,As,Cd,Hg,Cr含量均高于相应的中国土壤背景值(P<0.05,P<0.01);黑色石灰土中Cd为轻度污染,Cr,Cu,As,Pb,Hg均为清洁水平。碳酸盐岩中Cu,As,Pb,Cd,Hg,Cr含量均显著低于黑色石灰土(P<0.01)。黑色石灰土中重金属受母岩影响强弱顺序为Hg>Cd>Cu>As>Cr>Pb。铁皮石斛中重金属的生物富集系数按大小排序为Cu>Cd>Pb=Hg>As,但5种重金属生物富集系数均较小(均<10%)。铁皮石斛中Cu,Pb,Cd,Hg含量随根际土壤中重金属含量的增加而略微增加,而As含量则随根际土壤中As含量的增加而减少。除Cu含量在铁皮石斛中表现出差异性外,碳酸盐岩-黑色石灰土-铁皮石斛系统中Pb,As,Cd,Hg的迁聚特征表现出一致性。结论研究区岩土植物系统中重金属分布特征呈明显的继承性。黑色石灰土中重金属较高含量、低活性、低污染风险的特征及铁皮石斛低生物富集系数是影响铁皮石斛中5种重金属在安全阈值内的主要因素。
关键词:铁皮石斛;重金属;根际土壤;碳酸盐岩;喀斯特地区;电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS);原子荧光光谱法
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发布时间:2021-09-07
基于UPLC-Q-TOF-MS技术分析不同变种来源葛花的化学成分差异性
谢璐欣,黄秋连,杨碧穗,葛菲,邓可众,吴波,吴志瑰,朱玉野,黄琦,张建华
2021, 27(19): 149-156. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210847
摘要:目的比较野葛花、粉葛花及葛麻姆花3个不同变种来源葛花的化学成分差异。方法采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱(0~20 min,10%~30%B;20~30 min,30%~55%B;30~35 min,55%~95%B;35~37 min,95%B;37~40 min,95%~10%B),流速0.25 mL·min
-1
;运用电喷雾离子源(ESI),在正、负离子模式下分别进行扫描并采集MS数据,扫描范围m/z 50~1 500。结合文献信息及化学成分数据库对葛花化学成分进行鉴定,并通过MarkerView
TM
1.2.1软件对所得数据归一化处理,应用SICMA-P 14.1软件对3个变种来源葛花的MS数据进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),筛选出不同变种来源葛花的显著差异性成分。结果从3个不同变种来源的葛花中共鉴定35个化合物,其中异黄酮类成分22种,黄酮类成分6种,皂苷类成分7种;野葛花、粉葛花及葛麻姆花分别包含了32,35,33个。正、负离子模式下筛选得到葛花苷,鸢尾苷,6"-O-木糖鸢尾苷,黄豆黄苷,4'-甲氧基鸢尾黄素-7-葡萄糖苷,6"-O-木糖黄豆黄苷,葛花苷元,槐花皂苷Ⅲ,6"-O-丙二酰基黄豆苷,次葛花苷,鸢尾苷元,芦丁,大豆皂苷BB,牡荆素,鹰嘴豆芽素A,染料木苷,葛花亭,赤豆皂苷Ⅱ共18个差异化合物。结论该研究首次对葛麻姆花中化学成分进行了较为系统的研究,发现葛麻姆花虽作为混伪品,但鸢尾苷和6"-O-木糖鸢尾苷的含量较高,具有较大的开发潜力。葛花苷、鸢尾苷等功效成分在3个变种来源的葛花之间具有显著差异,将这3个变种均作为葛花应用需谨慎考量。
关键词:葛花;野葛;粉葛;葛麻姆;超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS);化学成分;裂解规律
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发布时间:2021-09-07
基于“表里关联”的大黄酒蒸过程质量传递规律分析
宋亚南,王云,高雅,郑颖豪,刘天良,张村
2021, 27(19): 157-164. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211758
摘要:目的研究熟大黄炮制过程样品表观颜色与高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱色谱峰所表征成分的相关性,以揭示大黄酒蒸过程中的质量传递规律。方法运用视觉分析仪分析熟大黄不同炮制时间点样品粉末的颜色变化,采用HPLC指纹图谱进行共有成分指认及其相对峰面积计算,利用多元统计学和Pearson相关性分析进行表观颜色和HPLC指纹图谱中成分变量的聚类、判别和相关性分析。结果在熟大黄炮制过程中,样品粉末a
*
(红绿色值)变化幅度不大,L
*
(明度值),b
*
(黄蓝色值),E
*
ab(总色度值)呈下降趋势,颜色由亮转暗,由黄色到棕褐色转变。在254 nm和280 nm处,指纹图谱中共指认了46个色谱峰,经对照品比对鉴定出了其中18个成分。L
*
,b
*
,E
*
ab的变化趋势与鞣质类(儿茶素、表儿茶素和没食子酸乙酯),二苯乙烯苷类(反-3,5,4′-三羟基苯乙烯基-4′-O-β-D-葡萄糖苷),4′-羟基苯基-2-丁酮-4′-O-β-D-[2ʺ-O-没食子酰基-6ʺ-O-(4ʺ-羟基)-桂皮酰基]-葡萄糖苷(苯丁酮苷类),结合蒽醌类(芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄酸-8-O-葡萄糖苷和大黄素-8-O-葡萄糖苷)及ω-羟基大黄素的含量呈显著或极显著正相关(P<0.05,P<0.01),与游离蒽醌类(大黄素、芦荟大黄素和大黄素甲醚)的含量则呈负相关。与254 nm相比,280 nm的过程样品色谱峰的相似度变化较为明显,检测到的共有峰数目也更多,该波长可反映更多大黄酒蒸过程中化学成分组成上细微的差异。结论鞣质类、二苯乙烯苷类、苯丁酮苷类成分主要与L
*
的相关性较强,蒽醌类成分则与b
*
的相关性较强;E
*
ab的下降与游离蒽醌类成分含量升高及儿茶素、二苯乙烯苷类、结合蒽醌类、苯丁酮苷类和ω-羟基大黄素等成分的下降密切相关。过程样品颜色指标的变化一定程度上可反映熟大黄药效成分含量的变化趋势。
关键词:大黄;酒蒸;表里关联;高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱;质量控制;色度值;多元统计分析
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发布时间:2021-09-07
杜仲TIFY转录因子鉴定与表达分析
刘俊,陈玉龙,刘燕,司富春
2021, 27(19): 165-174. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211211
摘要:目的从全基因组水平对杜仲(Eucommia ulmoides)TIFY基因家族进行鉴定与表达分析,以期为EuTIFYs基因功能深入研究奠定基础。方法以杜仲基因组数据库为基础,通过美国国立生物技术信息中心(NCBI),MEME,PlantCare,白质分析专家系统(ExPASy)及TBtools等生物信息学分析软件,对杜仲TIFY基因家族进行鉴定,系统分析该基因家族的理化性质、系统进化、基因结构、启动子顺式作用元件及其在叶片发育及杜仲胶形成中的表达模式。结果该研究从杜仲基因组中共鉴定到14个EuTIFYs(EuTIFY1~EuTIFY14),氨基酸数目介于102~357,理论等电点分布在4.99~10.06,相对分子质量区域为10.8~39.14 kDa,亚细胞定位预测在细胞核中,均为亲水性蛋白,14个EuTIFYs分布在13条染色体上。系统进化分为TIFY,JAZ,ZML和PPD 4个亚家族,分别包含3个,4个,5个和2个EuTIFYs蛋白。EuTIFYs启动子区域含有多种光周期及非生物胁迫响应元件,参与植物杜仲生长发育和非生物胁迫。表达模式分析显示,EuTIFYs在杜仲叶片不同发育时期存在表达差异,大部分基因在叶片发育的早期阶段表达量较高,正调控杜仲胶的形成,EuTIFYs蛋白间存在多种互作关系。结论该研究从杜仲全基因组水平鉴定到14个EuTIFYs,对其结构特点和表达模式进行全面的生物信息学分析,为进一步研究杜仲TIFYs基因功能提供参考。
关键词:杜仲;TIFY转录因子;系统进化;表达分析
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发布时间:2021-09-07
数据挖掘
基于真实世界的喜炎平注射液治疗支气管炎的复杂网络分析
董可欣,吴蔚,王志飞,李利寻,杨云云
2021, 27(19): 175-184. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211213
摘要:目的探究在真实世界中喜炎平注射液治疗支气管炎患者的中西药群组模块,为临床中西药治疗支气管炎提供参考。方法从全国29家医院信息系统(HIS)提取应用喜炎平注射液治疗支气管炎患者共13 874例,运用禁忌(Tabu)搜索算法进行复杂网络分析,获得喜炎平注射液治疗支气管炎核心联用药物的子结构及关联信息,分析临床用药方案。结果支气管炎针对病原体治疗方案,①细菌感染可选择喜炎平注射液+头孢呋辛;②病毒感染可选择喜炎平注射液+干扰素;③支原体感染可选择喜炎平注射液+阿奇霉素。针对支气管炎临床表现分型及并发症选择适宜用药方案,①单纯型支气管炎可考虑喜炎平注射液+氨溴索+肺力咳合剂+布洛芬;②喘息型支气管炎可考虑喜炎平注射液+异丙托溴铵+布地奈德+沙丁胺醇;③支气管炎并发病毒性脑炎:喜炎平注射液+甘露醇+呋塞米+苯巴比妥+神经节苷脂+免疫球蛋白;④支气管炎并发病毒性心肌炎:喜炎平注射液+磷酸肌酸钠+维生素C。结合支气管炎中医特点选择联用中药治疗。结论该研究数据来源于真实世界,提取总结出喜炎平注射液治疗支气管炎临床表现分型及并发症的联合用药方案,但临床上需要针对其具体情况,个体化制定治疗方案。
关键词:真实世界;喜炎平注射液;支气管炎;禁忌(Tabu)搜索算法;联合用药
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发布时间:2021-09-07
远志散人参方和党参方对记忆障碍的影响分析
王佳敏,刘凯丽,李建丽,程艳刚,王艳,王颖莉
2021, 27(19): 185-192. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211215
摘要:目的运用网络药理学和实验药理学方法探讨远志散人参方(YZSR)和党参方(YZSD)对记忆障碍的影响。方法利用成分数据库和文献获取远志散(YZS)成分靶点,通过疾病数据库检索记忆障碍疾病靶点,用韦恩图取交集进行通路分析。对YZSR与YZSD共有成分与核心靶点进行分子对接。采用氢溴酸东莨菪碱盐造记忆障碍模型,通过行为学实验综合评估YZSR与TZSD对记忆障碍的影响。结果筛选了33个人参化学成分,31个党参化学成分,其中有4个共有成分,380个共有靶点,合计YZSR有85个化学成分790个药物靶点,YZSD有81个化学成分,781个药物靶点。记忆障碍疾病靶点425个,与YZSR有133个交集靶点,YZSD有130个交集靶点,代谢通路均涉及钙离子信号通路、缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路等。分子对接中共有成分与靶点结合能呈现负值,且灌木远志酮A结合效果最佳。行为学实验结果表明YZSR与YZSD对记忆障碍均有改善作用,跳台实验中YZSD错误次数较模型组显著减少(P<0.01),水迷宫实验中YZSD运动距离较模型组明显缩短(P<0.05),开场实验中YZSR和YZSD运动距离较空白组明显减少(P<0.05)。结论远志散对记忆障碍有一定的影响,YZSR与YZSD在治疗记忆障碍存在着共性和异同。
关键词:远志散;人参;党参;学习记忆;通路机制
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发布时间:2021-09-07
石淋复方治法和用药规律分析
刘菡,张耀圣,商建伟,王杰
2021, 27(19): 193-199. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211212
摘要:目的运用数据挖掘和文献研究的方法研究中医治疗石淋复方的治法及用药规律。方法检索中国期刊全文数据库(CNKI),自有记录以来至2020年11月10日期间收录的中医复方治疗石淋的临床研究,提取纳入文献中的治法、处方,统计治法频数,以及复方使用药物的频数、功效分布,并运用关联规则和聚类分析探究高频药的用药规律。结果共纳入文献247篇,处方247首。①247首处方共使用209味中药。使用频数较高的中药有金钱草、鸡内金、海金沙、牛膝、石苇、车前子、滑石等。使用频数较高的中药功效类别主要以利水渗湿、活血化瘀为主,其次为补虚、理气、攻下。鸡内金、威灵仙、琥珀可作为对证专药。②关联规则分析药物配伍,以金钱草、鸡内金、海金沙三药间的两两组合或三者共用最为普遍,其次为金钱草分别与牛膝、石苇、车前子的配伍。③高频药聚类分析可将药物聚为4类。④247首处方共使用31类治法,使用频数较高的治法为清热利湿、化瘀利水、补益肾气。结论①利水渗湿是石淋的核心治法;②活血化瘀是石淋的重要治法;③补益是石淋的潜在治法;④石淋用药具有专科特点。
关键词:石淋;中药复方;治法;用药规律;数据挖掘
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发布时间:2021-09-07
药事管理
苦杏仁及其制剂的质量控制体系探讨
陈霞,李计萍
2021, 27(19): 200-205. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211651
摘要:苦杏仁为大宗常用中药材品种,药食同源,应用历史悠久。其有小毒,除生品苦杏仁外,还有燀苦杏仁和炒苦杏仁等炮制品。笔者通过分析2020年版《中华人民共和国药典》(一部)收载的含有苦杏仁的中药制剂的处方、工艺和质量标准等情况,讨论其质量控制和安全性方面的问题,并提出了几点建议:①加强药材源头质量控制,包括苦杏仁基原、产地、炮制、储存等方面,从源头保障苦杏仁制剂质量;②生产工艺是影响制剂安全性和有效性的关键因素,需加强生产过程控制;③加强苦杏仁制剂质量研究,制定有关安全性质量控制项目,进一步完善提高苦杏仁制剂的质量标准;④完善苦杏仁制剂的安全性提示内容,规范苦杏仁制剂药品说明书。上述建议可为科学认识和评价含有苦杏仁的中药制剂提供参考,以促进含苦杏仁及其炮制品的中药制剂质量控制水平的提升,保证临床用药的安全有效。
关键词:苦杏仁;中药材;生产工艺;质量标准;安全性;苦杏仁苷;中成药
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发布时间:2021-09-07
综述
穿透血脑屏障靶向给药纳米载体的研究进展
李新健,张冰冰,欧则民,严林,王艳静,张瑶,仝燕,刘德文,王锦玉
2021, 27(19): 206-215. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211151
摘要:纳米制剂具有体积小、载药适中、可靶向等诸多特性,是药物、基因或蛋白质等跨越细胞或血脑屏障(BBB)的良好传递工具。目前,利用纳米给药系统促进药物透过BBB被认为是预防、诊断和治疗中枢神经系统(CNS)疾病的一种战略途径。然而,随着研究的不断深入,纳米载体的不良反应和毒性也逐渐受到研究者们的重视。基于此,笔者拟从纳米载体的种类及性质分类角度,总结了近年来国内外穿透BBB的靶向纳米制剂的研究情况,分析每种载体的优点和缺点。结果发现以中药有效成分为载体的纳米制剂是一种非常有前景的癌症治疗方式,但中药成分复杂多样,这在一定程度上限制了其应用,后续应加强相关方面的研究,为中药纳米制剂在CNS疾病领域的应用与开发奠定基础。
关键词:纳米制剂;血脑屏障;靶向给药系统;载体材料;中枢神经系统(CNS);脂质体;中药
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发布时间:2021-09-07
基于NF-
κ
B信号通路探讨中医药治疗脓毒症的研究进展
胡超,朱平,姜淼,张谦,徐文秀,欧阳礼平,邵晓,沈康,陈赛龙
2021, 27(19): 216-224. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211994
摘要:脓毒症(sepsis)是重症医学科常见的急危重症,具有高发病率和高病死率的特点。目前,临床上针对脓毒症的治疗用药多以西药为主,长期使用存在抗生素耐药、激素不良反应和费用高昂等问题。因此,探寻新型、高效、安全、廉价的药物和治疗模式是现阶段研究的重点方向。中医药凭借其“整体观念、辨证论治、一人一方”的独特优势,在脓毒症的预防和治疗中积累了相当丰富的临床经验。近年来,中医药与脓毒症核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的研究较多。该文通过筛选相关临床研究与文献,从脓毒症的病因病机,辨证论治,发病机制,NF-κB信号通路和中医药对脓毒症的干预等方面进行系统归纳整理,研究发现一些单味中药及其提取物、中药复方和中药注射液可以通过调控NF-κB信号通路的激活,调节巨噬细胞的免疫功能,有效抑制NF-κB介导的肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1(IL-1),IL-6等炎症因子及其蛋白的表达,显著减轻全身炎症反应和各脏器损伤,改善预后。但囿于客观条件的限制,部分研究也存在促炎-抗炎平衡机制模糊、药代动力学不明及药物安全性评价较低等问题,有待进一步研究与探索,以期为中医药治疗脓毒症提供新的理论基础和诊疗思路。
关键词:核转录因子-κB(NF-κB)信号通路;中医药;脓毒症;炎症因子
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发布时间:2021-09-07
中医药干预银屑病Th17/Treg平衡的研究进展
曹爽,周妍妍,杨素清,赵珊珊,闫景东
2021, 27(19): 225-232. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211992
摘要:银屑病表现出炎症背景下自身免疫性疾病的特征,角质形成细胞增殖分化缺陷和异常的免疫反应是其发病的主要因素,但某些细胞和分子机制仍未明确。尽管使用了各种药物和物理疗法来控制病情,但由于其短暂的疗效、高昂的成本和严重的不良反应,这些策略仅限于短期使用,使银屑病的治疗难以收获令患者满意的远期疗效。随着网络药理学、分子生物学领域的发展及中医药现代化的推进,中医药的多成分、多靶点作用效果凸显,各医家学者针对中医药领域的研究逐渐深入,但目前尚未有针对中医药干预辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡防治银屑病的详尽机制进行整理。该文通过检索近几年文献数据资料发现,中药单体、中药有效成分和中药复方对银屑病发病机制中Th17/Treg轴有明显调节作用,Th17细胞具有促炎作用,Treg细胞有助于维持外周耐受,他们在效应发挥上相互排斥,维系二者的平衡关系可有效减轻炎症反应、调节免疫稳态。因此,中医药领域基于银屑病Th17/Treg轴开展了一系列临床及实验研究,包括降低Th17细胞百分率,增加Treg细胞百分率,以及调节二者相关细胞因子、转录因子水平,以缓解银屑病炎症病情,重建免疫环境稳态,为银屑病病理机制的进一步阐明提供新切入点,为开发银屑病新治疗手段提供备选方案。
关键词:中医药;银屑病;辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg);作用机制
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发布时间:2021-09-07
自噬在青光眼视神经损伤中的作用及中医药的干预研究进展
袁安琪,彭麟景,杜红彦
2021, 27(19): 233-242. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211898
摘要:青光眼是一组以视网膜神经节细胞(RGCs)及其轴突数目进行性丢失、视野逐渐丧失和视神经萎缩为特征的常见致盲性眼病。青光眼的病理改变主要是RGCs及其轴突的变性、萎缩、丧失,最终导致视功能的永久性损害,其具体发病机制尚未明确。细胞自噬是将细胞内受损、变性或衰老的蛋白质及细胞器运输到溶酶体内进行消化降解以不断更新重塑再利用细胞的过程。通过临床案例分析和动物实验发现,中成药和一些中医疗法可能有靶向调控自噬通路的作用,该文从眼部组织对高眼压的应激反应、小梁网功能障碍、免疫调节及瘢痕调控等方面阐述自噬在青光眼眼压升高和视神经损伤机制中所起作用及部分中药成分影响自噬调节相关研究进行论述,探讨中西医结合调控自噬以防治青光眼视神经损害、预防早期视野丢失的可能性,发现各中药单体或中药提取物存在多通路、多作用靶点的特点,主要涉及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)两条经典自噬信号通路,且目前中药的神经保护作用研究多集中于中枢神经受累的脑和脊髓病变,对于青光眼视神经损伤的保护机制仍需更深入的研究,此外,自噬在不同的实验动物模型和实验方法中展现出“双刃剑”一般的作用形式,怎样人为干预自噬能阻止RGCs凋亡、发挥保护效应仍是未来研究亟待解决的问题。
关键词:青光眼;自噬;视网膜神经节细胞;视神经损伤;中医药治疗
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发布时间:2021-09-07
青藏高原药用植物甘松研究进展
于素玲,叶霄,贾国夫,何正军,孙佩,张昌兵,赵文吉
2021, 27(19): 243-250. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211214
摘要:甘松为败酱科植物甘松(Nardostachys jatamansi)的干燥根和根茎,药用历史悠久,应用范围广泛。甘松传统上具有理气止痛、开郁醒脾、外用祛湿消肿的功效,主治脘腹胀满,食欲不振,呕吐,外用治牙痛,脚气肿毒;同时也是古印度阿育吠陀(Ayurveda)和尤纳尼(Unani)医学体系的常用药材,亦常作香料、食品和化妆品的原料。现代药理研究表明,甘松具有镇静、抗癫痫、抗惊厥、抗抑郁、抗心律失常、抗疟、抑菌抗炎、抗氧化、改善血糖代谢等多方面的药理活性,含有萜类、黄酮类、香豆素类、木脂素类等多种化合物,主要活性成分是以甘松新酮为代表的倍半萜类化合物。国内外学者对甘松的药理作用、化学成分、临床应用等方面进行了大量的研究,而甘松的资源及地理分布情况、药材质量控制、栽培现状及应用未见系统研究报道。甘松作为青藏高原地区重要的道地药材,长期以来主要依靠采挖野生资源,其资源保护和可持续利用已引起国内外的广泛关注。该文结合甘松的资源调查和实际栽培研究,总结国内外相关文献,对甘松资源和地理分布、化学成分和药理作用、药材质量控制、栽培和应用进行了综合论述,并对今后研究和利用方向进行了展望,以期为其资源保护及开发利用提供了参考。
关键词:甘松;资源;化学成分;质量控制;应用
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发布时间:2021-09-07
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