最新刊期
      2023 年 第 29 卷 4 期

        经典名方

      • 刘梦雅,成映霞,白敏,赵琳娜,李润法,安耀荣,段永强,李亚荣
        2023, 29(4): 1-8. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221804
        摘要：目的基于RAS同源基因家族成员A（RhoA）/Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2（ROCK2）/肌球蛋白轻链磷酸酶靶向亚基1（MYPT1）信号通路探讨香砂六君子汤对功能性消化不良（FD）大鼠胃动力障碍的干预机制。方法将60只SPF级雄性SD乳鼠随机分为正常组（n=10）和造模组（n=50），造模组大鼠采用综合造模法复制FD大鼠模型。模型复制成功后将造模组大鼠随机分为模型组、莫沙必利组和香砂六君子汤高、中、低剂量组，共5组，每组10只。正常组和模型组大鼠给予10 mL·kg-1·d-1生理盐水灌胃，莫沙必利组给予1.35 mg·kg-1·d-1莫沙必利灌胃，香砂六君子汤高、中、低剂量组分别给予12、6、3 g·kg-1·d-1香砂六君子汤汤剂灌胃，持续干预14 d。造模和给药前后观察大鼠一般生存状况，测定大鼠体质量、3 h平均进食量。给药干预结束后，测定大鼠肠推进率，采用苏木素-伊红（HE）染色观察胃组织病理改变，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定各组大鼠延髓和胃组织匀浆液中胆碱乙酰转移酶（ChAT）、血管活性肠肽（VIP）含量，采用冰冻切片染色技术观察各组大鼠胃窦平滑肌中腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）酶分布，采用蛋白免疫印迹法检测胃组织中RhoA、ROCK2、磷酸化（p）-MYPT1蛋白表达水平。结果与正常组比较，模型组大鼠毛发枯乱、倦懒怠动、行动缓迟，一般生存状况较差，体质量、3 h平均进食量以及肠推进率均明显下降（P<0.05）；胃组织病理未见明显异常；延髓和胃组织中ChAT含量减少，胃组织中VIP含量增多，胃窦平滑肌中ATP酶分布明显减少，胃组织中RhoA、ROCK2、p-MYPT1蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。与模型组比较，各给药组大鼠一般生存状况明显好转，体质量、3 h平均进食量及肠推进率明显增加（P<0.05）；胃组织病理未见明显差异；延髓和胃组织中ChAT含量明显增加，胃组织中VIP含量减少，胃窦平滑肌中ATP酶分布明显增加，胃组织中RhoA、ROCK2、p-MYPT1蛋白表达水平明显升高（P<0.05），上述指标香砂六君子汤组干预作用呈剂量依赖性。结论香砂六君子汤能够有效改善FD大鼠一般生存状况及胃动力，其具体机制可能与香砂六君子汤激活胃组织中RhoA/ROCK2/MYPT1信号通路调控平滑肌舒缩，促进胃动力有关。  
        关键词：香砂六君子汤;RAS同源基因家族成员A（RhoA）;Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2（ROCK2）;磷酸化肌球蛋白轻链磷酸酶靶向亚基1（p-MYPT1）;功能性消化不良   
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        发布时间：2023-01-17
      • 许洋,吴成林,郭德华,喻胤禛,张国福
        2023, 29(4): 9-17. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221805
        摘要：目的探讨补阳还五汤联合骨髓间质干细胞（BMSCs）移植治疗脊髓损伤（SCI）的作用机制。方法用不同浓度（12.5、25、50 g·kg-1）的补阳还五汤灌胃，通过改良Tarlov评分测定大鼠脊髓功能，筛选出补阳还五汤最合适的浓度。再将SD大鼠分为6组，即假手术组（灌胃等体质生理盐水）、模型组（灌胃等体质生理盐水）、补阳还五汤组（灌胃25 g·kg-1补阳还五汤）、BMSCs移植组（尾静脉注射BMSCs 1 mL）、补阳还五汤+BMSCs组（灌胃25 g·kg-1补阳还五汤同时尾静脉注射BMSCs 1 mL）、补阳还五汤+BMSCs+LY294002组（灌胃25 g·kg-1补阳还五汤，同时尾静脉注射BMSCs 1 mL和LY294002 40 mg·kg-1），各10只。改良Tarlov评分、斜板试验和皮层体感诱发电位波潜伏期测定大鼠脊髓功能；免疫组化法检测脊髓组织中5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）标记的阳性细胞数；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测脊髓组织中磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、糖蛋白130（gp130）、白细胞介素-6（IL-6）蛋白表达。结果与假手术组比较，模型组的Tarlov评分和倾斜平面临界角度明显降低（P<0.05），皮层体感诱发电位波潜伏期和p-Akt、gp130、IL-6蛋白表达均明显升高（P<0.05）。与模型组比较，假手术组和各治疗组的Tarlov评分和倾斜平面临界角度均明显升高（P<0.05），皮层体感诱发电位波潜伏期和p-Akt、gp130、IL-6蛋白表达均明显降低（P<0.05）。和BMSCs组比较，补阳还五汤+BMSCs组Tarlov评分和倾斜平面临界角度明显升高（P<0.05），皮层体感诱发电位波潜伏期和p-Akt、gp130、IL-6蛋白表达明显降低（P<0.05），移植5周后，补阳还五汤+BMSCs组Brdu标记阳性细胞数明显增多（P<0.05）。和补阳还五汤+BMSCs组比较，补阳还五汤+BMSCs+LY294002组Tarlov评分和倾斜平面临界角度明显升高（P<0.05），皮层体感诱发电位波潜伏期和p-Akt、gp130、IL-6蛋白表达明显降低（P<0.05），移植5周后，补阳还五汤+BMSCs+LY294002组Brdu标记阳性细胞数明显增多（P<0.05）。结论补阳还五汤通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/Akt信号促进BMSCs迁移进而恢复脊髓功能。  
        关键词：脊髓损伤;补阳还五汤;骨髓间充质干细胞;磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路   
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        发布时间：2023-01-17
      • 方雨潇,王淑美,刘伶俐,魏宁,潘豪尧,简广耀,李心仪
        2023, 29(4): 18-24. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230321
        摘要：目的基于缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/血管内皮生长因子A（VEGFA）信号通路探讨柴胡桂枝汤对三阴性乳腺癌（TNBC）细胞的影响。方法建立TNBC移植瘤模型，随机分为模型组，卡培他滨组（0.2 mg·kg-1），柴胡桂枝汤低、中、高剂量组（10.62、21.23、42.46 g·kg-1），每组10只，干预21 d。给药结束后，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中HIF-1α mRNA表达情况；免疫组化法（IHC）检测肿瘤组织中HIF-1α、TNF-α、VEGFA的表达水平及CD34染色检测肿瘤内血管生成情况并计算微血管密度（MVD）；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中HIF-1α、VEGFA、表皮生长因子受体（EGFR）蛋白的表达。结果与模型组比较，卡培他滨组、柴胡桂枝汤低、中、高剂量组TNF-α水平显著降低（P<0.01），HIF-1α mRNA显著降低（P<0.01），HIF-1α、TNF-α、VEGFA和CD34阳性细胞表达及MVD明显降低（P<0.05，P<0.01），HIF-1α、VEGFA、EGFR蛋白水平显著降低（P<0.01）。与卡培他滨组比较，柴胡桂枝汤中、高剂量组TNF-α水平显著降低（P<0.01），HIF-1α mRNA显著降低（P<0.01），HIF-1α、TNF-α和VEGFA阳性细胞表达显著降低（P<0.01），CD34表达及MVD显著降低（P<0.01），HIF-1α、VEGFA、EGFR蛋白水平均显著降低（P<0.01）。结论柴胡桂枝汤可能通过调控HIF-1α/ VEGFA信号通路，抑制TNBC细胞血管生成，从而发挥抗肿瘤作用。  
        关键词：柴胡桂枝汤;三阴性乳腺癌（TNBC）;缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/血管内皮生长因子A（VEGFA）信号通路;血管生成   
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        发布时间：2023-01-17
      • 柳荣,杨霞,高艳奎,王佳慧,梁永林,朱向东
        2023, 29(4): 25-32. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222437
        摘要：目的探讨加味葛根芩连汤对肥胖型2型糖尿病（T2DM）模型小鼠血糖血脂及胰腺组织中G蛋白偶联胆汁酸受体5（TGR5）相关途径的影响。方法将10只7周龄无特定病原体（SPF）级雄性m/m小鼠及50只7周龄SPF级雄性db/db小鼠在SPF级实验室适应性喂养1周。m/m小鼠作为空白组。成模后随机分为5组，每组10只，分别作为模型组、二甲双胍组（0.2 g·kg-1）、加味葛根芩连汤高、中、低剂量组（31.9、19.1、6.4 g·kg-1），灌胃体积均为10 mL·kg-1，模型组和空白组灌服等体积蒸馏水，1次/d，连续12周。定期检测小鼠空腹血糖（FBG）。药物干预12周后，检测血清中糖化血清蛋白（GSP）、血清葡萄糖（GLU）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平；采用苏木素-伊红（HE）染色观察各组小鼠胰腺组织病理改变，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胰腺组织TGR5、蛋白激酶A（PKA）、磷酸化（p）-PKA、环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）、p-CREB、前蛋白转化酶1/3（PC1/3）、胰高糖素样肽-1（GLP-1）蛋白的表达水平，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测胰腺组织环磷腺苷（cAMP）的含量。结果与空白组比较，模型组小鼠胰腺组织出现病理学改变；小鼠FBG、GSP、GLU、TC、TG、LDL-C水平显著增高（P<0.01），HDL-C水平明显降低（P<0.05）；胰腺组织中TGR5、p-PKA（Thr197）/PKA、p-CREB（Ser133）/CREB、PC1/3、GLP-1蛋白表达水平显著降低（P<0.01）；胰腺组织中cAMP的含量显著降低（P<0.01）。与模型组比较，治疗组胰腺组织病变程度减轻；加味葛根芩连汤高剂量组及二甲双胍组均能够明显降低db/db小鼠FBG、GSP、GLU、TC、TG、LDL-C水平（P<0.05，P<0.01），显著增高db/db小鼠HDL-C水平（P<0.01）；除加味葛根芩连汤中剂量组GLP-1蛋白外，加味葛根芩连汤高、中剂量组及二甲双胍组TGR5、p-PKA（Thr197）/PKA、p-CREB（Ser133）/CREB、PC1/3、GLP-1蛋白表达水平均有不同程度的增加（P<0.05，P<0.01）；加味葛根芩连汤高、中剂量组及二甲双胍组胰腺组织中cAMP的含量明显增高（P<0.05，P<0.01）。结论加味葛根芩连汤能够改善T2DM模型db/db小鼠的葡萄糖稳态，其机制可能与调控TGR5/cAMP/GLP-1信号通路相关蛋白表达有关。  
        关键词：2型糖尿病;加味葛根芩连汤;胆汁酸;G蛋白偶联胆汁酸受体5（TGR5）/环磷腺苷（cAMP）/胰高糖素样肽-1（GLP-1）信号通路   
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        发布时间：2023-01-17
      • 苗小雨,王亚静,赵鑫,张紫千,席素曼,赵森
        2023, 29(4): 33-42. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221906
        摘要：目的探究乌梅散对菌群失调性腹泻小鼠的乳糖酶活性和肠道菌群多样性的影响。方法将小鼠随机分为4组，分别为正常组、模型组及乌梅散低、高剂量组，每组8只。采用混合抗生素灌胃造模7 d，乌梅散低、高剂量组灌胃乌梅散（5.98、11.96 g·kg-1）连续给药7 d，正常组与模型组给予等体积无菌水。记录小鼠腹泻情况、体质量、摄食量的变化，末次给药后收集粪便采用比色法测定乳糖酶活性，并运用16S rRNA高通量测序技术检测并分析肠道菌群的变化。结果与正常组比较，模型组小鼠大便稀软，体质量减轻、摄食量减少，乳糖酶活性降低，肠道菌群多样性明显降低，菌群相对丰度门、属水平均发生明显变化。与模型组比较，乌梅散降低了小鼠的腹泻率并促使体质量及摄食量快速回升，升高了抗生素所降低的乳糖酶活性，提高菌群失调小鼠的群落丰富度、多样性，并促使物种组成向正常组靠近；乌梅散给药组回调了菌群失调性腹泻小鼠的3种差异菌门（拟杆菌门、变形菌门、疣微菌门）与9种差异菌属（臭气杆菌属、肠杆菌属、无害梭菌属等），其中norank f Muribaculaceae属、norank f norank o Clostridia UCG-014属、Lachnospiraceae NK4A136 group属、臭气杆菌属与体质量、乳糖酶活性呈显著正相关，大肠埃希菌-志贺菌属、肠杆菌属、肠球菌属、无害梭菌属与腹泻率呈显著正相关。功能预测发现，高剂量乌梅散能明显回调富集过高的新陈代谢、遗传信息处理、人类疾病等6个功能水平，对内分泌代谢病、免疫性疾病、寄生虫传染性疾病等有积极影响。结论乌梅散能缓解菌群失调性腹泻的症状，其机制可能是通过提高乳糖酶活性、调节肠道菌群结构而实现。  
        关键词：乌梅散;菌群失调性腹泻;肠道菌群;乳糖酶;高通量测序   
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        发布时间：2023-01-17

        药理

      • 夏尽力,蔡玥娇,吴新鸿,王中奇,邓海滨
        2023, 29(4): 43-51. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.2022002024
        摘要：目的观察肺岩宁方（肺岩宁）对非小细胞肺癌顺铂耐药的影响，并探究其可能存在的机制。方法细胞增殖与活性检测（CCK-8）法观察顺铂（0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mg⋅L-1）对A549和A549/DDP（顺铂耐药）细胞细胞增殖能力的影响，肺岩宁（0、100、200、300、400、500、600 mg⋅L-1）对A549/DDP细胞增殖能力影响；免疫荧光染色、蛋白免疫印迹法（WB）观察A549和A549/DDP组上皮间质转化（EMT）相关蛋白表达；将A549/DDP细胞分为空白组、肺岩宁组（200 mg⋅L-1）、顺铂组（6.0 mg⋅L-1）和联合用药组［肺岩宁（200 mg⋅L-1）+顺铂（6.0 mg⋅L-1）］，并进行相应处理，侵袭小室（transwell）实验比较各组侵袭能力；WB检测各组EMT相关蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和免疫荧光染色分别检测各组耐药因子mRNA和蛋白表达。结果与A549组比较，A549/DDP组对顺铂耐药性显著增高（P<0.01）；E-钙黏蛋白（E-cadherin）蛋白表达降低，波形蛋白（Vimentin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、锌指转录因子（Snail）蛋白表达升高（P<0.05，P<0.01）。经肺岩宁、顺铂处理后，与空白组比较，肺岩宁可浓度依赖性抑制A549/DDP细胞增殖（P<0.01）；肺岩宁组、顺铂组、联合用药组侵袭能力降低（P<0.01）；与顺铂组比较，联合用药组侵袭能力显著降低（P<0.01）。与空白组比较，肺岩宁组E-cadherin蛋白表达升高，N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达降低（P<0.01），顺铂组E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低，Snail蛋白表达升高（P<0.05，P<0.01）；联合用药组E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达降低（P<0.01）；与顺铂组比较，联合用药组E-cadherin蛋白表达升高，N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达降低（P<0.01）。与空白组比较，肺岩宁组肺耐药相关蛋白（LRP）、多药耐药因子1（MDR1）蛋白和mRNA表达降低，拓扑异构酶Ⅱα （TOPO Ⅱα）蛋白和mRNA表达升高（P<0.01）；顺铂组LRP、MDR1、TOPO Ⅱα蛋白和mRNA表达升高（P<0.01）；联合用药组LRP蛋白和mRNA表达无明显改变，MDR1、TOPO Ⅱα蛋白和mRNA表达升高（P<0.01）；与顺铂组比较，肺岩宁组、联合用药组LRP、MDR1蛋白和mRNA表达降低，TOPO Ⅱα蛋白和mRNA表达升高（P<0.01）；与肺岩宁组比较，联合用药组LRP、MDR1、TOPO Ⅱα蛋白和mRNA表达升高（P<0.01）。结论肺岩宁方能够逆转非小细胞肺癌顺铂耐药，其机制可能与调控EMT进程相关。  
        关键词：肺岩宁;非小细胞肺癌;耐药;上皮间质转化;顺铂   
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        发布时间：2023-01-17
      • 唐丽,牟珍妮,申思楠,雷磊
        2023, 29(4): 52-59. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222444
        摘要：目的观察助卵汤对环磷酰胺诱导的早发性卵巢功能不全模型大鼠卵巢储备功能的影响，并基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路探讨助卵汤对大鼠早发性卵巢功能不全的保护机制。方法60只雌性SD大鼠随机分为正常组10只，模型组50只，模型组采用环磷酰胺（第1天50 mg·kg-1负荷剂量+第2~15天8 mg·kg-1小剂量维持）腹腔注射进行造模，造模成功后随机分为模型组、阳性药物补佳乐组（0.1 mg·kg-1·d-1）、助卵汤低、中、高剂量组（14、28、56 g·kg-1·d-1），每组10只，模型组与正常组予以等体积蒸馏水灌胃，每日1次，连续给药21 d。检测各组大鼠动情周期、体质量，计算卵巢脏器指数与子宫脏器指数，苏木素-伊红（HE）染色检测卵巢组织病理情况及卵巢切面各级卵泡计数，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清抗苗勒激素（AMH）、促卵泡激素（FSH）、黄体生成素（LH）、抑制素-B（INH-B）激素含量，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠卵巢组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达，免疫组化检测大鼠卵巢组织微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）蛋白的表达。结果与正常组比较，模型组大鼠动情周期紊乱，体质量及卵巢脏器指数与子宫脏器指数减少，原始卵泡数量减少，次级卵泡和闭锁卵泡数量增多，FSH升高（P<0.01），LH升高（P<0.05），AMH水平下降（P<0.05），卵巢组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达量均降低（P<0.01），LC3B蛋白表达量显著增加（P<0.01）；与模型组比较，补佳乐和助卵汤各剂量组上述指标均改善，AMH含量升高（P<0.05），FSH降低（P<0.05），LC3B蛋白表达量显著降低（P<0.01），PI3K、Akt、mTOR蛋白表达量均有升高趋势，且补佳乐组和助卵汤低、中剂量组升高差异具有统计学意义（P<0.05）。结论助卵汤可能通过激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制卵巢颗粒细胞过度自噬的发生，从而逆转造模对大鼠卵巢储备功能的影响。  
        关键词：早发性卵巢功能不全（POI）;助卵汤;冰山论;磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路;自噬   
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        发布时间：2023-01-17
      • 楚信强,朱雅娜,苏坤,张婷,马云龙
        2023, 29(4): 60-68. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230495
        摘要：目的探讨芪红通络方对深静脉血栓形成（DVT）大鼠血管内皮细胞的保护作用与机制。方法取66只SD大鼠采用随机数字表分为空白组（11只）、建模组（55只），后者通过减慢血流+损伤血管内皮建立DVT模型，并将建模成功大鼠按照随机数字表分为模型组，阿司匹林组，芪红通络方低、中、高剂量组。阿司匹林组予以200 mg·kg-1阿司匹林灌胃，芪红通络方低、中、高剂量组分别予以6.5、13、26 g·kg-1芪红通络方流浸膏灌胃，模型组和空白组分别予以生理盐水灌胃，每天1次，连续7 d。处死大鼠，取腹主动脉血采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清内皮素-1（ET-1）、白细胞介素-6（IL-6）水平；苏木素-伊红（HE）染色观察血管内皮组织病理改变；透射电镜观察血管内皮细胞超微结构；噻唑蓝（MTT）比色法检测血管内皮细胞活力、乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测血管内皮细胞LDH释放水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测血管内皮组织血小板活化因子（PAF）、核转录因子-κB（NF-κB）、Ras相关的C3肉毒素底物1（Rac1）、Ras相关的C3肉毒素底物2（Rac2） mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测血管内皮组织PAF、NF-κB、Rac1、Rac2蛋白表达。结果模型组血管内皮细胞严重损伤并大量脱落，细胞肿胀明显，有大量炎性细胞附着，电镜下可见胞核固缩变形，线粒体高度肿胀，胞质空泡化严重，内弹力膜暴露；芪红通络方各剂量组和阿司匹林组血管内皮组织及其超微结构损伤均有不同程度改善。与空白组比较，模型组血清ET-1、IL-6水平、血管内皮细胞活力、血管内皮组织PAF、NF-κB、Rac1、Rac2 mRNA和蛋白表达明显升高，血管内皮细胞LDH释放水平降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，阿司匹林组和芪红通络方各剂量组血清ET-1、IL-6水平、血管内皮细胞活力、血管内皮组织PAF、NF-κB、Rac1、Rac2 mRNA和蛋白表达均降低，血管内皮细胞LDH释放水平升高，差异均有统计学意义（P<0.05），其中芪红通络方的作用呈剂量依赖性。结论芪红通络方对DVT大鼠血管内皮细胞有保护作用，能防治血栓的形成，推测是通过抑制PAF、NF-κB、Rac1和Rac2的表达，降低血清ET-1、IL-6的水平实现的。  
        关键词：芪红通络方;深静脉血栓形成;血管内皮细胞;血小板活化因子;核转录因子-κB;Ras相关的C3肉毒素底物1;Ras相关的C3肉毒素底物2;补阳还五汤   
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        发布时间：2023-01-17
      • 林思,秦慧真,李泽宇,许立拔,邓玲玉,罗静,谢凤凤,张淼,朱华,王孝勋
        2023, 29(4): 69-76. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221724
        摘要：目的探讨对叶百部总生物碱对人肺癌A549细胞凋亡及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）和c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶（JNK/p38 MAPK）信号通路的影响。方法以人肺癌A549细胞为研究对象，设置空白组和不同质量浓度（100、150、200、250、300 mg·L-1）对叶百部总生物碱组。利用噻唑蓝（MTT）比色法、平板克隆实验观察对叶百部总生物碱对A549细胞增殖的影响；采用Hoechst 33258染色法和流式细胞术膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（AnnexinV-FITC）/碘化丙锭（PI）双染法观察细胞凋亡；蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白胱天蛋白酶-3（Caspase-3）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）和Bcl-2表达及PI3K、磷酸化（p）-PI3K、Akt、p-Akt、JNK、p-JNK、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白的表达。结果与空白组比较，对叶百部总生物碱组（150、200、250、300 mg·L-1）细胞增殖抑制率显著增高（P<0.01）；对叶百部总生物碱组（150、200、250、300 mg·L-1）细胞克隆抑制率显著升高，细胞克隆形成率显著降低（P<0.01）。与空白组比较，对叶百部总生物碱组细胞出现染色质凝聚，荧光反应加强等典型的细胞凋亡特征。与空白组比较，对叶百部总生物碱组细胞凋亡率显著升高（P<0.01）；对叶百部总生物碱（150、200、250、300 mg·L-1）能够明显上调Caspase-3、Bax蛋白表达（P<0.05，P<0.01），显著下调Bcl-2蛋白表达（P<0.01）；对叶百部总生物碱对PI3K、Akt、JNK、p38 MAPK总蛋白表达无明显影响，对叶百部总生物碱（150、200、250、300 mg·L-1）能够明显下调PI3K、Akt磷酸化水平（P<0.05，P<0.01）；明显上调p38 MAPK磷酸化水平（P<0.05，P<0.01）；对叶百部总生物碱（200、250、300 mg·L-1）能够明显上调JNK磷酸化水平（P<0.05，P<0.01）。结论对叶百部总生物碱可抑制人肺癌A549细胞的增殖，并能诱导A549细胞凋亡，其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路和激活JNK/p38 MAPK信号通路有关。  
        关键词：对叶百部总生物碱;肺癌;A549细胞;凋亡;磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路;c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶（JNK/p38 MAPK）信号通路   
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        发布时间：2023-01-17
      • 王珑静,张瑾,罗婕,李杨松,张桂荣,李彦志,龙飞,蒋运斌,吕光华,王张
        2023, 29(4): 77-85. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222342
        摘要：目的研究齐墩果酸（OA）对脾虚水湿内停模型小鼠的水液代谢功能的影响及其作用机制。方法将60只SPF级昆明种小鼠随机分为空白组（10只）和造模组（50只），造模组采用“久居湿地+饮食失节”的方法建立脾虚水湿内停模型。模型复制成功后将造模组小鼠随机分为模型组、自然恢复组和OA低、中、高剂量组，共5组，每组10只。空白组、模型组、自然恢复组给予10 mL·kg-1·d-1生理盐水灌胃，OA低、中、高剂量组分别给予50、100、200 mg·kg-1·d-1 OA灌胃，持续给药7 d。造模和给药前后观察小鼠的一般体征，测定小鼠体质量，使用烘干法测定小鼠粪便含水率和组织含水量，称量法检测水负荷指数和脏器系数，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测尿D-木糖排泄量、血清胃泌素（GAS）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、白细胞介素-6（IL-6）、抗利尿激素（AVP）、肾髓水通道蛋白1（AQP1）及肝脏Na+-K+-ATP酶等指标，并将OA与检测指标中的ALB、IL-6、AQP1和Na+-K+-ATP酶进行分子对接。结果与空白组比较，模型组小鼠毛发疏松、消瘦、倦怠懒惰、动作迟缓，体质量增长缓慢、自主活动次数减少、粪便含水率和组织含水量增加、水负荷小鼠体质量下降值减少、各脏器系数明显升高（P<0.05，P<0.01）；尿D-木糖排泄量明显减少，血清中GAS、TP、ALB和HDL-C的水平均明显降低，TC、LDL-C、AVP、IL-6的水平均明显升高，肝脏Na+-K+-ATP酶表达明显降低，肾髓AQP1表达明显升高（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，OA各剂量组的一般体征明显好转，体质量增长加快，自主活动次数增加，粪便含水率和组织含水量降低，水负荷小鼠体质量下降值增加、各脏器系数明显降低（P<0.05，P<0.01）；尿D-木糖排泄量增加，血清中GAS、TP、ALB和HDL-C的水平升高，TC、LDL-C、AVP、IL-6的水平降低，肝脏Na+-K+-ATP酶表达明显升高，肾髓AQP1表达明显降低（P<0.05，P<0.01）。OA各剂量组的各指标恢复效果均强于自然恢复组。分子对接结果也表明OA与ALB、IL-6、AQP1和Na+-K+-ATP酶具有较强的结合亲和力。结论OA能改善脾虚水湿内停小鼠的水液代谢异常，为其潜在临床新用途提供科学依据。  
        关键词：齐墩果酸;脾虚;水湿内停;水液代谢异常;小鼠   
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        发布时间：2023-01-17

        临床

      • 钱佳燕,黄子慧,孙佳玥,许费昀,王裕玲,余洋
        2023, 29(4): 86-96. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.202304091
        摘要：目的探讨复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效及对巨噬细胞极化的影响。方法①临床实验。将南京市中西医结合医院145例结核性溃疡患者按随机数字表法分为观察组、对照Ⅰ组和对照Ⅱ组。3组均予以基础抗结核化学治疗的同时，观察组予以复方五凤草液，对照Ⅰ组予以康复新液，对照Ⅱ组予以异烟肼液局部外用治疗，疗程4周。分别观察3组患者创面愈合总有效率、中医证候积分、创面组织病理学形态及创面组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶-1（Arg-1）的表达水平。②细胞实验。RAW264.7细胞在完全培养基DMEM（10%的胎牛血清，1%青-链酶素溶液）于37 ℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。经佛波酯（PMA）诱导后向巨噬细胞分化，分别用脂多糖（LPS）诱导成M1巨噬细胞、白细胞介素-4（IL-4）诱导成M2巨噬细胞，分别予康复新溶液、异烟肼液、复方五凤草液处理以上细胞模型36 h，收集细胞上清液并离心，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β（TGF-β）、iNOS和Arg-1的蛋白量的表达，流式细胞术（FCM）检测药物对CD86、CD206表达的影响。结果①临床实验。与对照Ⅰ组［87.5%（42/48），χ2=3.962，P<0.05］和对照Ⅱ组［83.3%（40/48），χ2=6.162，P<0.05］比较，复方五凤草液组的总有效率［98.0%（48/49）］明显较高；治疗28 d后，与对照Ⅰ组、对照Ⅱ组比较，复方五凤草液组的中医证候积分明显降低（P<0.05），复方五凤草液组创面组织病理学形态改善更为明显；免疫组化结果显示，治疗28 d后，与对照Ⅰ组、对照Ⅱ组比较，复方五凤草液组局部病灶组织样本中的iNOS表达量明显降低（P<0.05），Arg-1表达量显著升高（P<0.05，P<0.01）。②细胞实验。Western blot实验结果显示，与M0组比较，LPS组中iNOS、TNF-α表达升高（P<0.01）。与LPS组比较，LPS+异烟肼组、LPS+康复新液组、LPS+复方五凤草液组中iNOS、TNF-α表达下降（P<0.05）；与LPS+异烟肼组比较，LPS+康复新液组、LPS+复方五凤草液组中iNOS表达下降（P<0.05，P<0.01），LPS+复方五凤草液组TNF-α水平显著下降（P<0.01）；与LPS+康复新液组比较，LPS+复方五凤草液组中TNF-α表达下降（P<0.05）。与M0组比较，IL-4组中Arg-1、TGF-β表达升高（P<0.01）。与IL-4组比较，IL-4+异烟肼组、IL-4+康复新液组、IL-4+复方五凤草液组中Arg-1、TGF-β表达升高（P<0.05，P<0.01）。与IL-4+异烟肼组比较，IL-4+康复新液组、IL-4+复方五凤草液组中Arg-1、TGF-β表达升高（P<0.05，P<0.01）；与IL-4+康复新液组比较，IL-4+复方五凤草液组中Arg-1、TGF-β表达升高（P<0.05，P<0.01）。流式细胞术结果显示，与M0组比较，LPS组CD86表达升高，IL-4组中CD206表达升高（P<0.01）。与LPS组比较，LPS+异烟肼组、LPS+康复新液组、LPS+复方五凤草液组中CD86表达下降（P<0.01）；与LPS+异烟肼组比较，LPS+康复新液组、LPS+复方五凤草液组中CD86表达下降（P<0.01）；与LPS+康复新液组比较，LPS+复方五凤草液组中CD86表达下降（P<0.01）。与IL-4组比较，IL-4+异烟肼组、IL-4+康复新液组、IL-4+复方五凤草液组中CD206表达升高（P<0.01）；与IL-4+异烟肼组比较，IL-4+康复新液组、IL-4+复方五凤草液组中CD206表达升高（P<0.01）；与IL-4+康复新液组比较，IL-4+复方五凤草液组中CD206表达升高（P<0.05）。结论复方五凤草液能有效促进结核性溃疡愈合，其作用机制可能是通过抑制iNOS、TNF-α、CD86的表达并促进Arg-1、TGF-β、CD206的表达，从而调控M1/M2巨噬细胞极化平衡来完成。  
        关键词：复方五凤草液;结核性溃疡;巨噬细胞极化;慢性创面   
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        发布时间：2023-01-17
      • 张芳,赵沛沛,孙自学,陈建设,陈翔,李鹏超
        2023, 29(4): 97-103. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230493
        摘要：目的观察隔药灸脐法联合益肾通络方治疗肾阳虚络阻型特发性弱精子症不育的临床有效性及对精子DNA损伤和精浆超氧化物歧化酶（SOD）的影响。方法将112例符合纳入标准的患者随机分为观察组和对照组各56例，观察组给予隔药灸脐法联合益肾通络方，对照组给予左卡尼汀口服液，主要观察指标为配偶妊娠率，前向运动精子率、精子总活力，次要观察指标为精子DNA碎片指数（DFI）、精浆SOD及中医证候改善状况。治疗周期为12周，治疗前后检查记录患者前向运动精子活率、精子总活力、精子DFI、精浆SOD及中医证候评分，并随访12周，记录24周（半年）内配偶妊娠情况，评价两组临床疗效。结果观察组配偶受孕率15.69%（8/51），对照组3.85%（2/52），观察组配偶受孕率高于对照组，差异有统计学意义（χ2=4.118，P<0.05）；观察组总有效率88.24%（45/51），优于对照组的69.23%（36/52）（Z=-3.402，P<0.01）；与本组治疗前比较，两组患者治疗后前向运动精子活率、精子总活力、精子DFI、精浆SOD及中医证候改善有显著性差异（P<0.05），且与对照组治疗后比较，观察组优于对照组（P<0.05）。结论隔药灸脐法联合益肾通络方治疗肾阳虚络阻型特发性弱精子症不育患者，可提升前向运动精子百分率、精子总活力及精浆SOD水平，降低精子DFI，改善患者中医症状，提高配偶受孕率，这可能与该疗法通过升高患者精浆中的SOD水平，增强机体抗氧化功能，保护精子免受氧化应激损伤，进而降低精子DFI有关。  
        关键词：男性不育症;肾阳虚络阻;隔药灸脐法;特发性弱精子症;益肾通络方   
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        发布时间：2023-01-17
      • 庞延,林浩,卢健棋,黄舒培,彭志林,唐梅玲,黄溥玮
        2023, 29(4): 104-109. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230497
        摘要：目的慢性心力衰竭（CHF）是心血管疾病的终末阶段，CHF伴衰弱患者的心血管不良事件明显增加，传统中医治疗CHF具有良好疗效，然而中药联合传统养生功法治疗老年CHF伴衰弱患者的临床观察，目前鲜有相关报道。该研究拟探讨强心汤联合八段锦治疗老年慢性心力衰竭伴衰弱患者的临床疗效。方法选取2020年1月至2021年12月在广西中医药大学第一附属医院心血管科住院确诊为气虚血瘀水停证型的CHF患者60例，对照组遵循指南给予常规西药治疗，观察组在对照组基础上给予强心汤和八段锦锻炼。观察两组治疗前和治疗1个月后两组血清N末端B型脑钠肽前体（NT-proBNP）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、游离脂肪酸（FFA）、左室射血分数（LVEF）、左室舒张末期内经（LEVDD）、6 min步行试验（6MWD）、明尼苏达心力衰竭生活质量表（MLHFQ）和Tilburg衰弱量表评分，同时对比两组3个月内再住院情况。结果两组一般资料及治疗前各疗效指标比较差异均无统计学意义。与本组治疗前比较，两组患者治疗后NT-proBNP、CK、LDH、FFA、LVEDD、MLHFQ评分、Tilburg衰弱量表评分均明显降低（P<0.05，P<0.01），LVEF、6MWD水平均明显升高（P<0.05，P<0.01）。与对照组治疗后比较，观察组效果更优（P<0.05，P<0.01）。3个月内再住院率观察组（7.1%，2/28）明显低于对照组（30.8%，8/26）（χ2=4.897，P<0.05）。结论强心汤联合八段锦有助于改善老年CHF伴衰弱患者机体能量代谢、心功能、生活质量和衰弱水平，减少再住院率。  
        关键词：慢性心力衰竭;衰弱;强心汤;八段锦;临床观察   
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        发布时间：2023-01-17
      • 王伟,任君霞,王永争,韩建科,杨立民,汪卫东,连凤梅,艾长山,殷晓莉,王宝亮,孟毅,袁曙光,周德生,高学东
        2023, 29(4): 110-116. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221521
        摘要：目的确证益肾养心安神片治疗失眠症（心血亏虚、肾精不足证）的临床疗效和安全性。方法采用区组随机、双盲、安慰剂平行对照、多中心临床试验设计方法，共有7家临床试验机构（中国中医科学院广安门医院、吉林省中医药科学院第一临床医院、辽宁中医药大学附属第二医院、河南中医药大学第一附属医院、河南省中医院、河北省人民医院、湖南中医药大学第一附属医院）参加，纳入480例心血亏虚、肾精不足型失眠患者（治疗组-对照组为3∶1）。两组受试者分别口服益肾养心安神片或模拟剂，4片/次，3次/日，疗程4周，停药后随访4周。比较两组治疗前后睡眠障碍评定量表（SDRS）评分、匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）总分、中医证候等疗效指标，并选择4家中心（中国中医科学院广安门医院、河南省中医院、河北省人民医院、湖南中医药大学第一附属医院）进行多导睡眠图（PSG）各项指标客观比较两组疗效。通过一般体检、实验室检查指标、不良事件等观察用药后的安全性。结果治疗组和对照组基线各项指标差异均无统计学意义，两组具有可比性。与对照组比较，治疗后治疗组的SDRS总分显著降低（P<0.01），可以判断治疗组疗效优于对照组；与治疗结束时比较，停药4周后治疗组组内SDRS总分变化无统计学意义，表明疗效反跳变化不明显。与对照组比较，治疗后治疗组的PSQI总分显著降低（P<0.01）；与组内治疗结束时比较，停药4周后治疗组组内PSQI总分变化有统计学意义（P<0.05），但其变化较小，显示疗效反跳变化均不明显。与对照组比较，治疗后治疗组中医证候总有效率显著升高（χ2=137.521，P<0.01）；治疗后治疗组入睡困难、睡而易醒、早醒、睡眠时间短、多梦、心悸不安、健忘、头晕、神疲乏力、腰膝酸软等各单项指标消失率显著升高（P<0.01）；治疗后治疗组觉醒次数（AT）降低、总睡眠时间（TST）增加、觉醒比（ATA/TST）降低、睡眠效率提高（P<0.05）。试验期间治疗组与对照组的不良事件发生率分别为5.57%、8.40%，两组比较差异无统计学意义，两组均无严重不良事件及导致退出的不良事件发生。结论对于失眠症证属心血亏虚、肾精不足型患者，益肾养心安神片具有良好的临床疗效和安全性。  
        关键词：益肾养心安神片;失眠症;随机双盲;安慰剂对照;多中心临床试验   
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        发布时间：2023-01-17

        药物代谢

      • 代丹,陈艳华,何春燕,王烁,宋坪
        2023, 29(4): 117-125. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220749
        摘要：目的通过靶向脂质组学技术，从脂代谢角度探究开玄补肾法对寻常型银屑病的干预机制，为寻常型银屑病的诊断和治疗提供参考。方法选取2019年9月至2020年11月中国中医科学院广安门医院皮肤科门诊收治的26例寻常型银屑病患者作为研究对象（观察组），同期在该院预防保健科招募健康志愿者26例作为对照组，入组时予对照组及观察组采取静脉血以进行血脂指标和靶向脂质组学检测。观察组予开玄补肾法治疗，连续治疗12周后，比较治疗前后患者银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI）以评估疗效，同时再次静脉抽血检测以比较治疗前后患者血脂水平和脂质代谢情况。靶向脂质组学分析采用超高效液相色谱串联质谱法（UPLC-MS/MS），色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C8色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），流动相为乙腈-水（6∶4，含5 mmol∙L-1甲酸铵，A）和乙腈-异丙醇（1∶9，含5 mmol∙L-1甲酸铵，B）梯度洗脱，流速0.26 mL∙min-1；质谱条件为电喷雾离子源（ESI），正、负离子模式，扫描范围m/z 50~1 200。建立主成分分析（PCA）和偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）模型筛选差异代谢物，鉴定差异代谢物并进行相关通路分析。结果经开玄补肾法治疗12周后，26例寻常型银屑病患者中PASI评分的下降率达50%以上的有22人，总有效率84.62%。寻常型银屑病患者血清中甘油三酯含量明显高于健康人（P<0.05），经治疗后，甘油三酯水平明显降低（P<0.05）。靶向脂质组学分析共筛选出寻常型银屑病潜在生物标志物43个，其中42个上调、1个下调，涉及亚油酸代谢、不饱和脂肪酸的生物合成、甘油磷脂代谢等7条信号通路；开玄补肾法对寻常型银屑病疗效的潜在生物标志物14个，其中6个上调、8个下调，涉及鞘脂代谢、亚油酸代谢和甘油磷脂代谢等5条信号通路；在健康人和寻常型银屑病患者、寻常型银屑病患者治疗前后的对比中，得到共同差异代谢物磷脂酰胆碱（PC）38∶0和神经酰胺（Cer）42∶1、共同的信号通路是亚油酸和甘油磷脂代谢通路。结论寻常型银屑病脂质代谢紊乱主要涉及鞘脂、甘油磷脂和亚油酸代谢通路，开玄补肾法可以对其中的亚油酸和甘油磷脂代谢通路进行调节，从而改善银屑病皮损。  
        关键词：靶向脂质组学;寻常型银屑病;开玄补肾法;生物标志物;亚油酸代谢;甘油磷脂代谢   
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        发布时间：2023-01-17

        药学基础

      • 史启今,王潇晗,任广喜,姜丹,刘春生
        2023, 29(4): 126-133. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220748
        摘要：目的建立并优化根癌农杆菌介导的甘草内生真菌粉红粘帚菌的遗传转化体系，优选粉红粘帚菌定殖甘草的条件，为生物菌肥的开发及优质甘草的育种奠定基础。方法分别从乙酰丁香酮浓度、共培养时间和受体真菌分生孢子浓度3个方面对根癌农杆菌介导的遗传转化（ATMT）条件进行优化并优选转化子。采用正交试验，以共培养温度、共培养时间和孢子浓度为考察因素，定殖率为指标，优化粉红粘帚菌定殖甘草的条件。结果粉红粘帚菌最适转化条件为共培养时间60 h、孢子浓度1×107 cfu·mL-1、乙酰丁香酮浓度150 μmol·L-1，此条件下的转化效率为每1×107个受体真菌孢子可获得135个转化子。通过标记基因绿色荧光蛋白（GFP）的克隆和β-葡萄糖苷酸酶（GUS）染色结果检测转化的准确性与稳定性。粉红粘帚菌通过浸种法定殖甘草的最佳条件为共培养温度25 ℃、共培养时间36 h、孢子浓度1×106 cfu·mL-1，此条件下定殖率71.11%。结论本研究成功建立了稳定高效的粉红粘帚菌ATMT体系及其定殖甘草的技术体系，可为甘草生物菌肥的开发奠定基础。  
        关键词：粉红粘帚菌;根癌农杆菌介导的遗传转化（ATMT）;绿色荧光蛋白;β-葡萄糖苷酸酶（GUS）染色;甘草;转化子;正交试验   
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        发布时间：2023-01-17
      • 雷星,王小平,张艳,李风琴,高亚珍,温伟接,徐杨洋,管彦涵,杨明,王芳
        2023, 29(4): 134-143. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221048
        摘要：目的研究建昌帮砂仁陈皮制熟地黄炮制过程中差异代谢物和苷类分解产物还原糖的相对含量变化，为揭示该特色品种的炮制原理奠定基础。方法以建昌帮砂仁陈皮制熟地黄的0~54 h炮制过程样品为研究对象，运用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）检测其次级代谢产物，以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱（0~1 min，1%~3%B；1~10 min，3%~9%B；10~15 min，9%~12%B；15~22 min，12%~18%B；22~31 min，18%~24%B；31~35 min，24%~100%B；35~36 min，100%~5%B；36~40 min，5%~1%B；40~45 min，1%B），柱温40 ℃，进样量3 μL，流速0.3 mL·min-1；运用电喷雾离子源（ESI），在负离子模式下进行扫描并采集MS数据，扫描范围m/z 50~1 250，利用PeakView 1.2进行数据分析，结合文献信息及化学成分数据库对砂仁陈皮制熟地黄化学成分进行鉴定；MS数据通过MarkerView 1.2归一化处理后应用多元统计分析方法找出差异代谢物，分析差异代谢物相对含量随炮制时间不同的变化规律，最后对各差异代谢物之间进行相关性分析，并结合还原糖含量变化情况，确定建昌帮砂仁陈皮制熟地黄的最适宜炮制时间。结果从砂仁陈皮制熟地黄不同炮制时间样品中共鉴定121个化合物，通过多元统计分析筛选出梓醇、橙皮苷、异类叶升麻苷、毛蕊花糖苷、芸香柚皮苷、松果菊苷、异地黄苷、脱咖啡酰基毛蕊花糖苷、6-O-E-阿魏酰基筋骨草醇、二羟基-7-O-新橙皮苷、焦地黄苯乙醇苷D、地黄苦苷12个差异代谢物。随炮制时间的延长，这12个差异代谢物和还原糖的相对含量在52~54 h变化幅度较小。结论利用UPLC-Q-TOF-MS可以全面、精确地辨识不同炮制时间砂仁陈皮制熟地黄的化学成分，根据差异代谢物和还原糖相对含量变化确定其适宜炮制时间为52~54 h，为揭示该品种炮制原理的科学内涵提供了实验依据。  
        关键词：中药炮制;砂仁陈皮制熟地黄;超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）;差异代谢物;化学成分;炮制时间;相关性分析   
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        发布时间：2023-01-17
      • 刘晓柳,谢珍妮,钟灿,谢景,张水寒,金剑
        2023, 29(4): 144-152. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230111
        摘要：目的从茯苓中克隆参与茯苓三萜合成路径中的潜在关键限速酶鲨烯环氧酶（SE），并对其进行生物信息学及表达分析。方法采用试剂盒提取总RNA，反转录为cDNA，设计特异性引物，以cDNA为模板，进行SE基因的克隆，对该基因进行生物信息学分析。通过实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检查茯苓鲨烯环氧酶基因（PcSE）在茯苓神舟10号、湘靖28、5.78菌株中的表达。结果PcSE的基因全长为1 571 bp，包含4个外显子，3个内含子。获得编码区域（CDS）序列长为1 413 bp，编码470个氨基酸。该蛋白为疏水性蛋白，无信号肽，有2个跨膜结构域，具有FAD/NAD（P）结合域和鲨烯环氧酶结构域，定位于线粒体或质膜上。与多孔菌科真菌的同源序列比对一致性为80.92%；系统进化树显示PcSE蛋白与美国茯苓的亲缘关系最近。Real-time PCR结果显示，PcSE基因在3个菌株中均有表达，在5.78菌株中的表达量最高，3个菌株的PcSE表达差异不存在统计学意义。结论首次从茯苓中克隆并分析茯苓PcSE基因，为进一步研究茯苓PcSE的功能及解析茯苓三萜生物合成途径提供了基础。  
        关键词：茯苓;鲨烯环氧酶（SE）基因;基因克隆;生物信息学分析;基因表达   
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        发布时间：2023-01-17
      • 张明,陈泓志,李明
        2023, 29(4): 153-160. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221517
        摘要：目的研究一种微生物复合菌肥对穿心莲生长、品质及土壤性质的影响，旨在为穿心莲栽培生产中微生物复合菌肥的应用提供依据。方法通过盆栽的共5个处理试验，CK（不施肥）组、A处理（施化肥）组、B处理（施微生物菌肥，施用量为2.5 g·kg-1土）组、C处理（施微生物菌肥，施用量为7.5 g·kg-1土）组、D处理（施微生物菌肥，施用量为12.5 g·kg-1土）组，研究一种复合微生物菌肥对穿心莲的农艺性状、有效成分含量及根际土壤细菌、放线菌、真菌的数量和土壤理化性质的影响。结果施加一定量的复合微生物菌肥，穿心莲的株高、叶片数、叶面积、地上部、地下部鲜重较CK组和A处理组显著升高，不同生长期有差异。复合微生物菌肥对穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、新穿心莲内酯及14-去氧穿心莲内酯含量影响有差异，与CK组、A处理组比较，C处理组的穿心莲内酯分别明显升高26.13%、13.23%（P<0.05）；新穿心莲内酯的含量随微生物菌肥施加量的增加而增加，在D处理组下的效应最显著，与CK组、A处理组比较，分别明显升高9.06%、50.33%（P<0.05）；B处理组的14-去氧穿心莲内酯较A处理组明显升高42.04%（P<0.05），较CK组升高1.74%；C处理组的脱水穿心莲内酯的含量效应最显著，较CK组和A处理组的分别明显升高11.73%、27.74%（P<0.05）。B、C、D处理组的土壤pH均高于CK组及A处理组；B处理组的全氮、有效磷含量效应最显著；D处理组的速效钾的含量最显著。施加复合微生物菌肥可以提高根际土壤细菌、放线菌数量，明显高于CK组和A处理组（P<0.05），且随施加量的增加而升高，而真菌的数量随复合微生物菌肥施加量的增加而下降，均较CK组有明显差异（P<0.05），各处理真菌/细菌均明显低于CK组（P<0.05），且随微生物菌肥施加量的增加而降低。结论施加复合微生物菌肥使植物-土壤-微生物系统向良性方向转化，有利于穿心莲生长及有效成分的积累。  
        关键词：穿心莲;复合微生物菌肥;农艺性状;有效成分;土壤微生物   
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        发布时间：2023-01-17
      • 王漫青,程湘,王广,明玥,曾静怡,白小娜,张绍鹏,徐燃
        2023, 29(4): 161-166. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221313
        摘要：目的对当归中香豆酸-3-羟化酶基因（C3H）全长进行克隆，进行生物信息学与基因表达模式分析，结合当归根不同组织部位阿魏酸的含量，推测ASC3H基因功能。方法基于前期转录组测序结果，通过实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）克隆全长cDNA序列，运用生物信息学方法分析该序列特征，并利用Real-time PCR和高效液相色谱法（HPLC）分别测定当归不同组织中ASC3H基因表达量及阿魏酸含量。结果克隆获得当归ASC3H全长基因（登录号MN2550298），开放阅读框（ORF）长度为1 530 bp，编码509个氨基酸，理论相对分子质量为57.86 kDa，等电点8.36，为不含信号肽的亲水性不稳定蛋白，定位于叶绿体中，有跨膜区，具有多个磷酸化位点，含有细胞色素P450的保守结构域CGYDWPKGYGPIINVW_P450（383~399 aa）；多重氨基酸序列比对分析结果显示ASC3H与其他植物的C3H基因具有较高相似性，并与同科植物大阿米芹的同源性最高；Real-time PCR结果显示ASC3H基因在当归不同组织的表达量不同；HPLC结果表明阿魏酸成分在当归根皮层组织含量最高，周皮、中柱次之。结论成功获得当归C3H基因序列，分析了其蛋白结构与特异性表达特征，推测ASC3H可能参与当归阿魏酸的合成，为进一步研究C3H基因在当归阿魏酸生物途径中的功能提供了参考依据，也为遗传改良当归品质奠定了研究基础。  
        关键词：当归;阿魏酸;香豆酸-3-羟化酶;基因克隆;生物信息学分析;表达分析;含量测定   
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        发布时间：2023-01-17

        数据挖掘

      • 李硕,孙悦阳,樊景春,李越峰,赵林华,杨秀娟,仝小林
        2023, 29(4): 167-175. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221712
        摘要：目的了解国内外在中医药治疗便秘这一领域的研究现状及热点，为今后的研究提供参考和方向。方法该研究通过运用数据分析软件CiteSpace 5.8.R3C对中国知网（CNKI）和Web of Science核心数据库中2000年1月1日至2021年12月31日关于中医药治疗便秘的相关文献进行计量学分析，并进行可视化展示。结果经筛选，CNKI数据库纳入文献2 133篇，Web of Science核心数据库纳入文献224篇。年发文量统计分析显示国内外在该研究领域整体均呈现上升趋势，但国内发文量近两年连续下降；作者共现分析显示国内外发文量最多的作者分别是刘春强和CHUNGWAH CHENG；机构共现分析显示国内外发文量最多的机构分别是上海中医药大学附属龙华医院肛肠科和北京中医药大学；关键词分析显示国内外对于该领域的研究主要集中在中药疗法、临床研究、病因病机等方面。结论对于中医药治疗便秘的研究主要集中在国内，但未形成联系较为紧密的科研团队；国内外对于该领域的研究仍处于发展时期，随着研究的不断深入，各研究机构应注重学科交叉，突出技术创新，争取做到在该领域的更大突破。  
        关键词：中医药;便秘;Citespace;文献计量学;可视化分析   
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        发布时间：2023-01-17

        学术探讨

      • 张泽帅,谢茂梅,李正,卢红委,奚萌,王海霞
        2023, 29(4): 176-184. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220551
        摘要：安全性是中药产品质量的核心，由中药材、饮片及中间品等造成的微生物污染会给中药产品质量安全带来一定影响。究其原因，既有药材本身的问题，也有生产制造过程中引入的外源性污染。如何有效运用微生物检测技术，建立适当的中药生产全过程微生物质量控制策略，对于提升中药产品品质具有重要意义。据此，笔者提出基于质量源于设计（QbD）理念指导的中药生产全过程微生物质控策略，强调内部与外部微生物质量控制体系的科学联动，共同保障各环节产品质量。其中，内部微生物质量控制体系包括对“中药材-饮片-中间品-辅料-包材-终产品”全链条的控制，要按阶段、有特点展开，而外部质控体系包括对“人员-设备设施-制药用水-环境”的控制，强调要遵循质量风险管理原则，分类制定监控方案，旨在将微生物质量风险管理与中药生产过程密切结合，分类制定微生物控制策略，以最大程度降低污染微生物对中药产品质量的影响，切实保障中药产品质量。  
        关键词：质量源于设计（QbD）;微生物;质量控制;中药生产;快速检测;安全性;饮片   
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        发布时间：2023-01-17
      • 李旭萍,马海兰,马鸿斌,魏锦慧
        2023, 29(4): 185-191. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230498
        摘要：肾纤维化是慢性肾脏疾病进展为终末期肾病的主要病理特征，致病因素繁杂、病程迁延难愈，严重影响患者生存质量并伴随沉重医疗负担。当肠道微生物组群失调时，机体内环境稳态被打破，显现出各类“偏态”，而“态靶结合”理念下重建肠道菌群与恢复微生物多样性可为肾纤维化的辨证施治赋予新的科学内涵。此外，中医学“异病同治”原则下中医药靶向干预肠道微生态具有独特优势，可为肾纤维化的诊疗策略提供理论指导，具体包括：①重视宏观调态与微观打靶；②针对肾纤维化过程中的炎症反应、内毒素积累及细胞外基质（ECM）过度沉积等确立了肾纤维化治湿、治浊毒、治虚瘀的诊疗策略；③古籍名方或中药复方、经典方药配伍、中药单体或活性组分靶向干预肠道微生态等。因此，该文将中医学基础理论与现代医学发病机制相结合，以肾系疾病（肾纤维化）共同致病因素或病理产物-肠道微生态失衡为切入点，梳理中医药调控肠道微生态干预肾脏纤维化的研究现状与科学内涵，以期为相关制剂产品开发及更深层次分子生物学研究提供新思路与新方法。  
        关键词：态靶结合;肾纤维化;肠道菌群;异病同治;慢性肾脏疾病;中医药   
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        发布时间：2023-01-17
      • 黄大智,陈昊
        2023, 29(4): 192-201. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230113
        摘要：该文以《伤寒杂病论》和《金匮要略》中的290个方剂及《方剂学》中的191个正方作为中药经典名方的代表，制作方剂中日文翻译表，以方剂名称为关键词并进行相关拓展，检索截至2022年6月的专利申请数据，检索结果通过数据清洗和人工降噪，以重点申请主体为切入点，根据中药经典名方技术改进特点进行关键技术的划分和标引，深度挖掘两国中药经典名方专利申请的情报信息，并进一步比较我国与日本申请主体在中药经典名方专利申请及布局策略上的差异。该文拟定了准确并具有针对性的检索策略，对中日两国具有代表性的专利申请主体的经典名方专利数据进行了更准确和全面的检索、梳理、统计，同时深度挖掘日本本国汉方专利申请的情报信息，以中日两国具有代表性的申请主体的中药经典名方专利布局作为切入点，针对我国中药经典名方与日本汉方在专利申请策略和专利保护方面的差异进行了比较。一方面有助于准确把握目前两国中药经典名方的专利申请状况，另一方面也可为国内企业、高校和研究机构的经典名方二次开发研究及专利申请和布局提供一定的参考。  
        关键词：中药经典名方;专利分析;中国;日本;申请策略   
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        发布时间：2023-01-17

        综述

      • 张喜武,刘安然,窦金金
        2023, 29(4): 202-211. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221707
        摘要：血管性痴呆（VaD）是影响老年人健康的常见疾病，由于社会人口老龄化逐渐加重，VaD的发病率也在逐年上升，而对于此疾病一直没有官方批准的治疗药物，主要是因为其发病机制复杂、有效药物治疗的作用机制尚未明确阻碍了治疗VaD的药物研究。因此，文章通过查阅与VaD相关的国内外文献，从中医学和西医学2个层面梳理VaD的发病机制，总结得出中医学均围绕脾肾亏虚为虚，痰瘀互结为实这一体系，而西医学认为VaD的发病机制主要为炎症反应、氧化应激、相关蛋白的异常表达和信号通路的功能障碍等。在此基础上，文章也总结了近年来常用单味中药及中药复方、西药及中西药联合治疗VaD的作用机制研究，常用的单味中药银杏叶及中药复方地黄饮子等具有多成分、多靶点及不良反应少的治疗优势，常用西药多奈哌齐、美金刚等具有靶点明确、见效快的特点，中西药联合效果更佳。文章通过对VaD发病机制及治疗的研究梳理和总结，旨在将VaD发病机制与有效药物治疗的作用机制联系起来，为今后治疗VaD的药物研发提供重要参考。  
        关键词：血管性痴呆;作用机制;发病机制;中医药;综述   
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        发布时间：2023-01-17
      • 高亚珍,邹俊波,杨明,李风琴,雷星,温伟接,刘海珍,卢昊,张艳,王芳
        2023, 29(4): 212-220. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230247
        摘要：三七为名贵大宗药材，笔者通过查阅历代本草著作、现代法典等相关文献资料，梳理三七炮制历史沿革，厘清三七炮制发展脉络。在此基础上，以三七炮制品的现代研究为切入点，分别从炮制工艺、炮制前后化学成分和药理作用变化等方面进行文献分析。根据三七炮制研究现状，分析其存在的问题，如三七古代炮制方法多样但现代沿用较少；炮制工艺缺乏规范化研究；皂苷类、多糖类、氨基酸类及黄酮类成分在三七炮制前后会发生不同程度的变化，这是造成三七炮制前后药效差异的主要原因，而目前关于三七的药理作用研究主要集中在生品方面，比较三七炮制前后药效变化的研究较少，致使三七生熟差异转换机制研究不深，“生消熟补”的科学内涵未能阐述清楚，不利于临床的规范用药。因此，有必要进一步分析三七及其炮制品的药效物质基础，探究炮制前后化学成分的变化规律及其与药效活性的相关性，以阐明炮制机制，为其规范化炮制、质量控制及临床合理用药提供科学依据。  
        关键词：三七;生熟异用;历史沿革;炮制方法;《中华人民共和国药典》;物质基础;作用机制   
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        发布时间：2023-01-17
      • 周恩慧,许二平,张楠,康丽杰,张明远,龙天键,马征
        2023, 29(4): 221-227. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230396
        摘要：胃癌是世界上发病率较高的恶性肿瘤之一，香砂六君子汤是防治胃癌常用方，具有行气止痛、燥湿健脾之功，尤宜于胃癌脾胃气虚证。笔者通过检索知网、万方、PubMed等数据库，对香砂六君子汤防治胃癌的临床疗效和实验研究进行整合与梳理，阐述香砂六君子汤防治胃癌的作用机制，以期为今后开展香砂六君子汤在胃癌领域的临床和基础研究方面提供有益参考。在临床中，香砂六君子汤具有治疗胃癌前病变、提高胃癌患者机体免疫、改善胃癌术后脾胃虚弱症状、减轻胃癌化疗后消化道不良反应等作用，无论与西药联用或单独使用，临床疗效均优于单纯西药治疗。在实验研究中，香砂六君子汤具有调节炎症因子、抑制胃癌细胞增殖、促进胃癌细胞凋亡、提高胃蛋白酶活性等作用。现代药理学研究表明，香砂六君子汤可通过多成分、多靶点综合干预，其单味药主要成分包括皂苷类、多糖类、内酯类、挥发油类、有机酸类等，具有保护胃黏膜、调节内分泌、促进胃黏膜异型增生的上皮细胞凋亡等作用，体现了中医药防治胃癌的优势与价值。  
        关键词：胃癌;香砂六君子汤;临床疗效;实验研究;药理作用   
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        发布时间：2023-01-17
      • 姜晓雪,金智生,金彩云,陈彦旭,张博玲,伏瑶琴
        2023, 29(4): 228-235. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222341
        摘要：糖尿病肾病（DN）作为常见的糖尿病慢性微血管并发症之一，现已成为我国终末期肾病肾衰竭的主要病因，严重增加糖尿病患者肾透析及肾移植风险，成为糖尿病患者死亡的主要原因。最新研究表明关于对糖尿病肾病的研究早已步入基因层面，微小核糖核酸（miRNA）是一类内源性可获得的非编码短链RNA分子，通过作用于某一靶点，激活或抑制其介导的信号通路及相关分子，在DN发生发展中发挥重要作用，成为防治DN的重要微观因素。传统中医药诊疗DN历史悠久，具有疗效显著、不良反应少等独特优势。大量研究证明，中医药能够靶向干预miRNA影响多条信号通路，参与调控机体炎症反应、细胞焦亡及间充质转分化等病理改变，延缓了DN病程的进一步发展。因此，作者将基于中医药诊疗途径，以miRNA为新关注点，讨论miRNA的生物发生机制及在疾病相关信号通路中的作用机制，归纳总结中医药靶向miRNA调控疾病相关信号通路对DN的影响，以期为从基因角度出发挖掘中医药干预DN进展方面提供一定的理论参考依据。  
        关键词：糖尿病肾病;微小核糖核酸（miRNA）;信号通路;中医药   
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        发布时间：2023-01-17
      • 张梦婷,李昱颖,张兰
        2023, 29(4): 236-245. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.202201723
        摘要：糖尿病肾病典型表现为早期肾脏高滤过和蛋白尿漏出，随后是进行性肾功能下降、球管系统上皮细胞肥大及间质纤维化，是慢性肾病的主因之一。目前，现代医学缺少较好的治疗手段，主要以控制原发疾病来降低肾脏损伤风险为主，而中医药通过辨证合参，利水消肿以治标、补虚培元以调本，能起到一定治疗和延缓肾病进展的作用，具有综合调理患者体质和不良反应小等优势。肾脏线粒体含量位居脏腑第二，参与水液代谢等生理过程，为人体元阴元阳之本。线粒体是细胞能量生产器，具有细胞呼吸、活性氧生成和氧化磷酸化产生三磷酸腺苷的功能。线粒体质量控制是维持线粒体动态平衡的有效方式，其失调与糖尿病肾病的发生发展密切相关，包括线粒体氧化应激、线粒体自噬、线粒体动力学改变及钙调节异常等，一般认为机体代谢异常下的线粒体结构破坏是其成因。近年来，中医药因在糖尿病肾病治疗中标本兼治、多靶点协同作用的独特优势使其疗效机制研究受到国内外学者关注，但具体作用机制并不明朗。多项研究显示线粒体可能是中医药治疗糖尿病肾病的作用靶点之一，目前有关中医药通过干预线粒体质量控制治疗糖尿病肾病综述尚且缺乏，因此拟对近10年中医药通过调节线粒体质量控制治疗糖尿病肾病进行总结梳理，以期为中医药治疗糖尿病肾病提供新的方向。  
        关键词：糖尿病肾病;线粒体;中医药;综述   
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        发布时间：2023-01-17
      • 白姣姣,阿丽亚·依拉木,阿布都艾则孜·艾尔肯,木巴拉克·伊明江
        2023, 29(4): 246-252. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221525
        摘要：结肠癌（CRC）是全世界至今未攻克的消化系统常见的恶性肿瘤之一。目前治疗CRC的临床手段均具有一定局限性，疗效不尽人意，从而导致治疗中途被迫停止或疗效欠佳。因此，寻找和研发具有治疗潜力、针对性强、不良反应小、经济性的新型候选药物迫在眉睫。中医药在改善上述症状方面具有西医不可替代的优势，并且中医药学历史悠久，君臣佐使、辨证用药具有调节人体状态的实践基础。近年来中医药在CRC的临床治疗领域有着显著的成效，尤其已有临床应用实践基础的中药复方及单体为干预治疗CRC提供了新的治疗方案，疗效确切、优势突出。具体体现在提高生活质量、改善临床症状，减轻化疗不良反应、延长生存期等方面。因此该文从CRC的现状、中医辨证论治基础上以“结肠癌”“中医药”“复方”及“单体”等为关键词，检索查阅近些年中英文相关文献。主要从“益气健脾”“清热解毒”“滋补肝肾”“补气养血”4个方面较为系统地介绍了中药复方及单体在治疗CRC领域的新进展。但因中药多组分、多靶点、多途径的特点，在今后仍然需要不断地深入探索中药复方及单体在治疗CRC领域的应用，以期使患者病痛和不良反应最小化、治疗效果最大化。为CRC治疗提供更宽广的前景和思路，为基于物质基础深入研究药效作用与机制提供参考。  
        关键词：结肠癌;中医证型;辨证论治;中药复方;中药单体   
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        发布时间：2023-01-17
      • 周芷聿,师伟
        2023, 29(4): 253-262. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230112
        摘要：胚胎植入是生殖过程中最关键的步骤之一，植入失败的胚胎无法继续发育，是导致不孕的重要原因之一。胚胎植入的成功依赖于子宫内膜的高容受性和具有植入能力的胚胎。自噬是细胞质、细胞器和内含物被双膜囊泡吸收并运输到溶酶体进行降解和再循环的过程，是一种维持内环境稳态的方式。大量证据表明，自噬在胚胎植入的各个环节有着重要的作用。基于此探讨了自噬与子宫内膜容受性和胚胎植入能力的关系，并根据最新的研究进展，梳理了大黄素、梓醇、芍药苷、白藜芦醇、叶酸、玉米赤霉烯酮、姜黄素、汉黄芩素、槲皮素、白杨素、小檗碱、芹菜素、菲西汀、山柰酚在内的14种中药单体调控自噬干预胚胎植入的不同环节的5个机制，包括促进子宫内膜基质细胞蜕膜化、促进细胞凋亡、调节激素水平、协调炎症、促进排卵，希望对今后中药单体提高胚胎植入的成功率提供参考及思路。  
        关键词：胚胎植入;自噬;中药单体;影响机制;综述   
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        发布时间：2023-01-17
      • 杨鹏,刘铜华,吴丽丽,秦灵灵,张程斐,彭川,张秋娥
        2023, 29(4): 263-271. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222337
        摘要：糖尿病肾病（DN）是糖尿病最严重的微血管并发症，也是糖尿病最常见和最严重的并发症之一，是世界范围内终末期肾病的主要原因，是糖尿病患者发病和死亡的主要原因，也是全球最大的非传染性死亡原因。皂苷类化合物种类众多，是许多中草药的主要生物活性成分，具有降血糖、降脂、改善胰岛素抵抗、抗炎、抗氧化应激、抗肿瘤、调节免疫等多种药理活性。近些年来，许多实验研究显示，中药皂苷类活性成分调控DN疗效明确。中药皂苷干预糖尿病肾病具有多靶点、多信号通路、多系统、多效应的特点和作用。在防治DN上具有广阔前景。目前体内外关于中药皂苷类成分干预DN的研究众多，但是缺乏系统的、全面的对中药皂苷类成分干预DN的研究的整理、概括、综述，所以对近年来国内外关于中药皂苷类干预DN模型的实验研究进行总结，对其通过改善糖脂代谢、抑制氧化应激、抗炎、抗细胞凋亡、调节自噬、抗纤维化、保护足细胞等途径缓解DN的机制进行阐述，以期为DN相关防治药物的研发提供思路和参考。  
        关键词：中药皂苷;糖尿病肾病;信号通路：作用机制   
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        发布时间：2023-01-17
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