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    2020 26 8

      益气活血药干预高糖诱导血管衰老的研究专题

    • 胡艳红,杨静,修成奎,王雪,方靖漪,王佳丽,刘奕清,刘逸南,雷燕
      2020, 26(8): 1-12. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200705
      摘要:糖尿病(DM)是以高血糖为特征的一种慢性代谢性疾病,其主要并发症如糖尿病血管病变现已严重影响患者的生活质量,成为患者致死、致残的重要原因。糖尿病血管病变基础的病理变化为大血管病变和微血管病变:大血管病变主要累及胸主动脉、冠状动脉、颈动脉、脑动脉和周围血管等大血管,临床常见疾病是冠心病、脑卒中、周围神经性病变、下肢动脉硬化等;微血管病变主要累及心、脑、肾等微血管。现今社会各种新型口服降糖药和胰岛素在临床不断涌现,并广泛应用于临床。但中医药疗效稳定,副作用小,并可改善糖代谢、改善脂质代谢、改善胰岛素抵抗、改善氧化应激、改善炎症因子表达、改善血管内皮损伤、改善微循环障碍、改善纤溶系统和凝血系统平衡、改善中医证候等,在防治糖尿病血管病变等方面也得到大家广泛认可和应用。中医学对糖尿病血管病变病因、病机、治法也有深刻的理解和认识,因此本文就中医学对糖尿病血管病变的认识及近3年来采用益气活血方治疗糖尿病血管病变的作用机制综述如下。  
      关键词:益气活血方;糖尿病血管病变;当归补血汤;丹蛭降糖胶囊;益气活血通络汤;气虚血瘀   
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      发布时间:2021-02-09
    • 胡艳红,杨静,修成奎,王雪,方靖漪,王佳丽,刘奕清,雷燕
      2020, 26(8): 13-20. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200701
      摘要:目的:从小鼠颈总动脉、胸主动脉中骨桥蛋白(OPN)和平滑肌22α蛋白(SM22α)表达及血管钙盐沉积程度,探讨人参-三七-川芎提取物对高糖诱导的小鼠血管钙化的保护作用。方法:130只雄性C57BL/6小鼠先随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)后,高脂饮食连续喂养7个月,之后再次随机分为模型组、人参-三七-川芎提取物低、高剂量组(0.819,1.638 g·kg-1)及二甲双胍组(150 mg·kg-1)。每组灌胃给药,每天1次,连续9周,并监测血糖变化。给药结束前7 d,购进一批4周龄雄性C57BL/6小鼠,正常喂养1周,作为青年组。全部给药结束后,收集小鼠颈总动脉和胸主动脉组织。分别采用冯库萨(Von Kossa)染色判断小鼠颈总动脉、胸主动脉钙盐沉积程度,免疫组化检测小鼠颈总动脉、胸主动脉中OPN与SM22α蛋白表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定小鼠颈总动脉中OPN与SM22α蛋白表达情况。结果:与青年组比较,正常组小鼠血糖升高无统计学差异,颈总动脉、胸主动脉结构染色均匀,未见黑色颗粒状沉淀;与正常组比较,模型组血糖显著升高(P<0.01),血管中内膜弹性纤维内有大量棕黑色颗粒沉积,钙盐沉积程度明显;与模型组比较,各给药组血糖明显下降(P<0.05,P<0.01),血管钙盐沉积程度明显减轻。与青年组比较,正常组小鼠颈总动脉、胸主动脉中OPN蛋白和SM22α蛋白表达无显著改变;与正常组比较,模型组颈总动脉、胸主动脉中内膜OPN蛋白表达呈阳性,SM22α蛋白表达呈弱阳性,颈总动脉中OPN蛋白表达灰度值显著升高(P<0.01),SM22α蛋白表达灰度值显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组颈总动脉、胸主动脉中内膜OPN蛋白和SM22α蛋白表达显著改善,颈总动脉中OPN蛋白表达灰度值明显降低(P<0.05,P<0.01),SM22α蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:高糖能够诱导小鼠颈总动脉、胸主动脉钙化,加速血管老化,这一形成过程可能与OPN与SM22α表达有关。人参-三七-川芎提取物可通过调节OPN与SM22α表达,减轻血管钙化,延缓血管老化。  
      关键词:血管钙化;骨桥蛋白(OPN);平滑肌22α蛋白(SM22α);高糖;人参-三七-川芎提取物;血管老化   
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      发布时间:2021-02-09
    • 胡艳红,方靖漪,王雪,杨静,修成奎,王佳丽,刘奕清,雷燕
      2020, 26(8): 21-29. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200702
      摘要:目的:为了研究人参-三七-川芎提取物(GNC)对高糖诱导小鼠血管老化后α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达的调控作用,阐明GNC延缓血管老化的保护作用机制。方法:C57BL/6小鼠,130只,雄性,随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ),造模成功后,喂食高脂饲料7个月,之后再次随机分为模型组,GNC低、高剂量组(0.819,1.638 g·kg-1)及二甲双胍组(150 mg·kg-1)。灌胃给药,每天1次,连续9周。取材前7 d,新购一批4周龄雄性C57BL/6小鼠正常喂养1周,为青年组。观察小鼠一般情况,实验结束后分别用苏木素-伊红(HE)染色结合透射电镜(TEM)观察小鼠颈总动脉形态学变化,马松(Masson)染色观察小鼠颈总动脉纤维化,免疫组化检测小鼠颈总动脉中基质金属蛋白酶-2(MMP-2),周期蛋白依赖激酶抑制因子2A(p16),周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21),α-SMA与Runx2蛋白表达。结果:HE,TEM,Masson 3个实验结果显示:与青年组比较,正常组小鼠颈总动脉中内外膜厚度、超微结构和血管壁中胶原和弹性纤维的相对含量几乎无变化;与正常组比较,模型组小鼠颈总动脉内膜不光滑,内皮细胞几乎完全脱落,胞质裂解,内弹性膜变薄、断裂、甚至脱离,可见增生的胶原纤维潜入中膜,中外膜增生明显且排列紊乱(P<0.01),血管平滑肌细胞变形、突起、分叉增多、甚至碎裂,并可见局灶性坏死,细胞内空泡和溶酶体等大量增多,并可见明显的自噬泡。血管壁中外膜胶原和弹性纤维的相对含量增加明显(P<0.01);与模型组比较,各给药组以上病理情况均有所改善(P<0.01)。免疫组化结果显示:与正常组比较,模型组小鼠颈总动脉MMP-2,p16,p21,Runx2高表达(P<0.01),α-SMA低表达(P<0.01);与模型组比较,各给药组各蛋白表达趋于正常(P<0.05,P<0.01)。结论:高糖能够诱导小鼠颈总动脉血管老化,改变α-SMA,Runx2蛋白表达。GNC可通过调节α-SMA,Runx2蛋白表达,延缓血管老化。  
      关键词:血管老化;α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA);runt相关转录因子-2(Runx2);高糖;人参-三七-川芎提取物;颈总动脉   
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      发布时间:2021-02-09
    • 胡艳红,王雪,方靖漪,杨静,修成奎,王佳丽,刘奕清,雷燕
      2020, 26(8): 30-37. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200703
      摘要:目的:从心肌纤维化程度及心肌组织中胶原蛋白Ⅰ型(Collagen Ⅰ),胶原蛋白Ⅲ型(Collagen Ⅲ)及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达,探讨人参-三七-川芎提取物(GNC)对糖尿病小鼠心肌纤维化的保护作用。方法:建立链脲佐菌素(STZ)联合高脂饲料诱导糖尿病小鼠模型,另设正常组,糖尿病小鼠按照随机数字表法分为模型组,GNC低、高剂量组(0.819,1.638 g·kg-1)及二甲双胍组(150 mg·kg-1)。各组均灌胃给药,正常组给与等剂量的去离子水,1次/d,连续9周。胶原纤维染色(Masson三色染色法)观察小鼠心肌间质纤维化程度,并用Image-pro plus 6.0分析软件计算胶原密度比值;免疫组化检测小鼠心肌组织Collagen Ⅰ,Collagen Ⅲ及TGF-β1蛋白表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心肌组织内Collagen Ⅰ,Collagen Ⅲ和TGF-β1的蛋白表达电泳及灰度值水平。结果:Masson实验结果显示,与正常组比较,模型组小鼠心肌细胞肥大、变形,心肌间质尤其是在微血管周围,有大量蓝染的胶原纤维沉积,相互连接交织成网状(P<0.01);与模型组比较,GNC低、高剂量组和二甲双胍组小鼠心肌细胞排列紊乱明显改善,心肌间质蓝染的胶原纤维也较模型组明显减少(P<0.05)。免疫组化和Western blot结果显示:与正常组比较,模型组小鼠心肌组织Collagen Ⅰ,Collagen Ⅲ和TGF-β1阳性表达,蛋白表达含量明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组蛋白阳性表达均降低,蛋白表达含量趋于正常(P<0.05,P<0.01)。结论:STZ联合高脂饲料能够诱导糖尿病小鼠心肌纤维化,诱导Collagen Ⅰ,Collagen Ⅲ和TGF-β1蛋白高表达。人参-三七-川芎提取物可通过调节Collagen Ⅰ,Collagen Ⅲ和TGF-β1蛋白表达,改善糖尿病小鼠心肌纤维化。  
      关键词:糖尿病;心肌纤维化;链脲佐菌素;人参-三七-川芎提取物;胶原蛋白Ⅰ型(Collagen Ⅰ);胶原蛋白Ⅲ型(Collagen Ⅲ);转化生长因子-β1(TGF-β1)   
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      发布时间:2021-02-09
    • 胡艳红,修成奎,杨静,王雪,方靖漪,王佳丽,刘奕清,刘逸南,雷燕
      2020, 26(8): 38-46. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200704
      摘要:目的:从AMP激活的蛋白激酶(AMPK) /哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路的活化及心脏病理形态学变化、相关衰老蛋白的改变,探讨人参-三七-川芎提取物(GNC)对糖尿病小鼠心脏老化的保护作用机制。方法:C57BL/6雄性小鼠,SPF级,随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合喂食高脂饲料,造模成功后再次随机分为模型组,GNC低剂量组(0.819 g·kg-1),GNC高剂量组(1.638 g·kg-1)及二甲双胍组(150 mg·kg-1)。每天1次,灌胃给药,连续9周,监测血糖变化。4周龄雄性C57BL/6小鼠正常喂养1周,为青年组。观察小鼠一般情况,苏木素-伊红(HE)染色结合透射电镜(TEM)观察小鼠心脏病理形态学变化,冯库萨(Von Kossa)染色判断小鼠心脏微血管钙盐沉积程度,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心脏组织中AMPK/mTOR信号通路活化状态,以及衰老相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2),抑癌基因p53(p53),磷酸化抑癌基因p53(p-p53)表达。结果:与正常组比较,模型组血糖显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组血糖明显下降(P<0.05,P<0.01)。HE,TEM,Von Kossa 3个病理形态学实验结果显示:与正常组比较,模型组小鼠心肌细胞肥大,心肌纤维排列紊乱、灶性溶解坏死,线粒体肿胀、变性、嵴断裂、空泡变,心脏微血管结构紊乱、染色不均匀、中内膜有大量钙盐沉积;与模型组比较,各给药组小鼠病理形态学变化均有不同程度的改善。与正常组比较,模型组MMP-2,p53和p-p53蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),p-肝激酶B1(LKB1)/LKB1,p-AMPK/AMPK蛋白明显降低(P<0.05,P<0.01),p-mTOR/mTOR,p-核糖体蛋白S6激酶p70S6K/p70S6k蛋白显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组MMP-2,p53和p-p53蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),p-LKB1/LKB1,p-AMPK/AMPK蛋白明显升高(P<0.05,P<0.01),p-mTOR/mTOR,p-p70S6k/p70S6k蛋白明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:STZ联合高脂饲料能够诱导小鼠心脏老化,GNC能够改善糖尿病小鼠心脏老化,其作用机制可能与调控AMPK/mTOR通路相关蛋白表达有关。  
      关键词:AMP激活的蛋白激酶(AMPK) /哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路;糖尿病;人参-三七-川芎提取物;高糖;心脏老化;p53;衰老   
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      发布时间:2021-02-09

      经典名方

    • 李陆杰,陈仁寿
      2020, 26(8): 47-52. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200148
      摘要:半夏为有毒中药,古今使用剂量相差甚大,在经典名方研发时难以确定。文献考证后发现,经典名方中半夏的剂量经历了由大变小的过程,本着“遵从经典,符合药典”为原则,并结合现代实际应用情况,拟确定《古代经典名方目录(第一批)》所载17首含半夏的方剂中合理的半夏剂量。通过对这17首经典名方的原书记载、历代演变、现在临床运用及其剂型、服用方法等进行考量,建议半夏厚朴汤与麦门冬汤中半夏剂量15.0 g,温胆汤和桑白皮汤中半夏剂量6.0 g,旋覆代赭汤、竹叶石膏汤、半夏泻心汤、甘草泻心汤、黄连汤、瓜蒌薤白半夏汤、厚朴麻黄汤、金水六君煎中半夏剂量均为7.5 g,竹茹汤中半夏剂量6.7 g,升阳益胃汤中半夏剂量4.5 g,养胃汤中半夏剂量5.0 g,半夏白术天麻汤与藿朴夏苓汤中半夏剂量均为5.6 g。  
      关键词:半夏;剂量;历史沿革;经典名方;剂型;中药炮制;服用方法   
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      发布时间:2021-02-09
    • 周雨慧,苗明三,芦锰,郭金栋,武博文,李晓宁,高维娟,武密山
      2020, 26(8): 53-61. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200836
      摘要:目的:观察地黄饮子加减方对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元的影响。方法:将84只SD雄性大鼠,按随机原则选出12只大鼠作为假手术组,其余72只大鼠采用两血管阻断法制备血管性痴呆模型,筛选60只模型大鼠,每组12只,随机分为模型组,尼莫地平组(0.011 g·kg-1),地黄饮子加减方高、中、低(4.54,2.27,1.14 g·kg-1)剂量组。连续灌胃30 d后,Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,苏木素-伊红(HE)观察海马CA1区神经元形态结构改变,透射电镜观察海马CA1区神经元超微结构变化,原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测海马CA1区细胞凋亡水平,免疫组化(IHC)检测海马CA1区组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著延长,穿越原平台次数显著减少(P<0.01),海马CA1区神经元形态均有不同程度地损伤,凋亡率显著增加(P<0.01),PI3K,Akt的积分吸光度和平均积分吸光度明显降低(P<0.01),Caspase-3的积分吸光度和平均积分吸光度显著增高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),穿越原平台次数增加(P<0.05,P<0.01),PI3K,Akt的积分吸光度和平均积分吸光度值显著增高(P<0.01),Caspase-3的积分光密度和平均积分吸光度不同程度降低(P<0.05,P<0.01)。结论:地黄饮子加减方可改善血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力和海马CA1区神经元损伤,潜在机制可能与PI3K/Akt信号转导途径的激活,抑制大鼠海马CA1区神经细胞的凋亡有关。  
      关键词:地黄饮子;血管性痴呆;神经元;凋亡;磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B   
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      发布时间:2021-02-09

      药理

    • 李康乐,杨小蒨,张愉,杨硕,朱中博,窦建卫
      2020, 26(8): 62-67. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200424
      摘要:目的:以早期生长反应基因1(Egr1)/细胞周期蛋白依赖性抑制剂(p21)信号通路为基础,探讨古方阳和汤含药血清对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响。方法:制备阳和汤大鼠含药血清,体外培养三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞。设空白组,阳和汤高、中、低剂量组(23.4,11.7,5.85 g·kg-1),分别干预MDA-MB-231细胞24,48,72 h,细胞增殖检测(CCK-8)法检测各组细胞增殖情况。设空白组,阳和汤高、中、低剂量组(23.4,11.7,5.85 g·kg-1),干预MDA-MB-231细胞48 h,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况以及细胞周期分布情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组细胞Egr1,p21 mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞Egr1,p21蛋白的表达情况。结果:阳和汤干预MDA-MB-231细胞24,48,72 h,与空白组相比,阳和汤高、中剂量组能显著抑制MDA-MB-231细胞增殖(P<0.01)。阳和汤干预MDA-MB-231细胞48 h,与空白组相比,阳和汤高、中剂量组细胞的凋亡率明显增加(P<0.05,P<0.01);阳和汤高、中剂量组细胞周期G0/G1期所占比例降低,G2/M期所占比例升高(P<0.05,P<0.01);阳和汤高、中剂量组细胞Egr1,p21 mRNA和蛋白表达均增加(P<0.05,P<0.01)。结论:阳和汤可激活MDA-MB-231细胞中Egr1/p21信号通路,增加Egr1,p21的表达,引起G2/M细胞周期阻滞,从而诱导MDA-MB-231细胞凋亡。  
      关键词:三阴性乳腺癌;MDA-MB-231细胞;阳和汤;早期生长反应基因1(Egr1);细胞周期蛋白依赖性抑制剂(p21)   
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      发布时间:2021-02-09
    • 孙佳富,孙潇,罗云,高晔,王姗,南凤尾,孙晓波,孙桂波
      2020, 26(8): 68-74. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200821
      摘要:目的:探讨丹酚酸B对三氧化二砷(As2O3 )诱导的HepaRG人肝细胞损伤的保护作用及其机制。方法:采用5 μmol·L-1 As2O3孵育24 h建立HepaRG人肝细胞损伤模型。实验设置空白组、模型组(As2O3 5 μmol·L-1),单给药组(丹酚酸B 10 μmol·L-1),丹酚酸B高浓度组(丹酚酸B 10 μmol·L-1+ As2O3 5 μmol·L-1),丹酚酸B中浓度组(丹酚酸B 5 μmol·L-1+As2O3 5 μmol·L-1),丹酚酸B低浓度组(丹酚酸B 2.5 μmol·L-1+ As2O3 5 μmol·L-1)。丹酚酸B预孵育2 h,弃去含药培养基,继续用5 μmol·L-1 As2O3孵育24 h;实验终止,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,Hoechst33342荧光染色观察细胞凋亡,Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)双染色流式细胞术定量检测细胞凋亡率,JC-1荧光染色观察线粒体膜电位,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),蛋白激酶B(Akt),磷酸化Akt(p-Akt)表达对丹酚酸B的肝脏保护作用机制。结果:As2O3浓度依赖性的降低HepaRG细胞的存活率(P<0.01);丹酚酸B单独作用2 h对正常细胞活力无影响;丹酚酸B(5,10 μmol·L-1)预孵育2 h可显著增加由As2O3引起的细胞存活率下降(P<0.01)。As2O3导致肝细胞凋亡比例显著上升(P<0.01),丹酚酸B(10 μmol·L-1)预孵育可降低细胞凋亡率(P<0.01);As2O3孵育24 h引起线粒体膜电位下降,丹酚酸B可维持线粒体膜电位,提示丹酚酸B的抗凋亡作用与其抑制凋亡线粒体通路有关;与As2O3组比较,丹酚酸B预处理升高了Bcl-2/Bax水平(P<0.01),增加了p-Akt/Akt水平(P<0.01)。结论:丹酚酸B对As2O3诱导的肝细胞损伤具有保护作用,其作用机制与维持线粒体功能、抑制肝细胞凋亡有关。  
      关键词:丹酚酸B;三氧化二砷;肝细胞损伤;肝保护   
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      发布时间:2021-02-09
    • 李慧杰,胡熙文,齐元富,李秀荣,刘寨东
      2020, 26(8): 75-80. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200423
      摘要:目的:观察攻毒治法代表药物纳米雄黄靶向肺癌干细胞缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factors, HIF)效应分子驱动代谢重编程的作用,探究肺癌干细胞、代谢重编程在肺癌转移过程中的效应机制,验证攻毒治法防治肺癌转移的有效性。方法:体外培养肺癌A549细胞,分选肺癌干细胞并鉴定。按空白组,顺铂(5 mg·L-1)组,纳米雄黄低、中、高剂量(100,200,400 mg·L-1)组分别干预,采用葡萄糖氧化酶法检测纳米雄黄对肺癌干细胞糖代谢的影响,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot),酶联免疫吸附测定(ELISA)分别检测纳米雄黄对肺癌干细胞代谢重编程相关基因缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),C-myc,p53表达的影响,对相关蛋白HIF-1α,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的影响,对相关酶葡萄糖转运蛋白1(GLUT1),丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1),M型丙酮酸激酶(PKM),磷酸果糖激酶(PFK),丙酮酸脱氢酶(PDH),乳酸脱氢酶(LDH)表达的影响。结果:与空白组比较,纳米雄黄可降低肺癌干细胞葡萄糖消耗,随剂量增加葡萄糖消耗不断降低,呈时间剂量依懒性(P<0.01);纳米雄黄可抑制肺癌干细胞代谢重编程关键因子HIF-1α mRNA表达(P<0.05,P<0.01),并可下调C-myc mRNA,上调p53 mRNA表达(P<0.05,P<0.01),抑制相关蛋白PI3K,Akt,mTOR的表达(P<0.05,P<0.01),抑制相关酶GLUT1,PDK1,PFK,PKM,PDH,LDH的表达(P<0.05,P<0.01),且纳米雄黄随剂量增加调控能力不断增强。结论:攻毒治法可通过靶向HIF效应分子驱动肺癌干细胞代谢重编程,进而抑制肺癌侵袭转移。  
      关键词:肺癌;干细胞;代谢重编程;攻毒治法;纳米雄黄;缺氧诱导因子   
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      发布时间:2021-02-09
    • 冯小聪,黄唯,周世卿,谭希,刘华娜,陈海,夏纪严,李云英,罗秋兰
      2020, 26(8): 81-88. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200837
      摘要:目的:观察鼻敏方对肺脾气虚变应性鼻炎(AR)大鼠核转录因子-κB(NF-κB)信号通路及水通道蛋白5(AQP5)表达的影响,探讨鼻敏方治疗AR的作用机制。方法:56只SD大鼠随机分7组:正常组,AR组,肺脾气虚AR组,鼻敏方低剂量2周组和4周组、鼻敏方高剂量2周组和4周组。正常组不干预,AR组以卵清蛋白(OVA)为致敏原建立AR疾病模型;其余5组大鼠除了以烟熏及番泻叶冷服泻下建立肺脾气虚证候模型外,还与AR组同期接受OVA致敏建立AR疾病模型。造模成功后鼻敏方组分别予低剂量鼻敏方(11.3 g·kg-1)干预2周和4周,高剂量鼻敏方(22.6 g·kg-1)干预2周和4周。观察大鼠的一般情况,苏木素-伊红(HE)染色观察鼻黏膜病理改变,免疫组化(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB,AQP5蛋白的表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),AQP5 mRNA表达水平。结果:AR组大鼠出现典型AR症状,肺脾气虚AR大鼠同时出现典型AR症状及肺脾气虚症状,鼻敏方干预后AR症状及肺脾气虚症状表现明显改善;与正常组比较,AR组及肺脾气虚AR组出现典型的鼻黏膜组织病理改变,行为学评分明显升高(P<0.05),NF-κB和AQP5蛋白表达上升(P<0.05),IL-1β,TNF-α,IL-6和AQP5 mRNA表达上升(P<0.05);与AR组比较,肺脾气虚AR组鼻黏膜组织病理改变更严重,胞核NF-κB蛋白表达上升(P<0.05),TNF-α,AQP5 mRNA表达上升(P<0.05);与肺脾气虚AR组比较,鼻敏方干预组鼻黏膜组织病理损伤改善,NF-κB和AQP5蛋白表达下降(P<0.05),IL-1β,TNF-α,IL-6和AQP5 mRNA表达下降(P<0.05);与鼻敏方低剂量2周组比较,鼻敏方高剂量4周组胞核NF-κB蛋白表达下降(P<0.05)。结论:与AR大鼠比较,在相同致敏原刺激下肺脾气虚AR大鼠病情更严重;鼻敏方可治疗AR并能减轻腺体过度分泌,其机制可能与抑制NF-κB信号通路,进而降低AQP5表达有关。  
      关键词:肺脾气虚;变应性鼻炎;鼻敏方;核转录因子-κB信号通路;水通道蛋白5   
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      发布时间:2021-02-09
    • 张玉卓,尚奇,沈耿杨,任辉,敖海清,江晓兵,周本根
      2020, 26(8): 89-94. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200838
      摘要:目的:探讨龟甲水提液调控核转录因子-κB(NF-κB)炎症微环境促小鼠前成骨细胞系(MC3T3-E1)成骨分化的作用及机制。方法:体外培养MC3T3-E1细胞,并进行成骨诱导,龟甲水提液干预。实验分为空白组、成骨诱导组、龟甲水提液(20 mg·L-1)联合成骨诱导组。细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)法检测MC3T3-E1增殖能力,并确定最佳干预浓度;碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红(ARS)染色检测MC3T3-E1成骨分化能力;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测NF-κB p65,NF-κB p105,白细胞介素-6(IL-6),ALP和Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ) mRNA的表达。结果:CCK-8结果显示,随着时间的增长,MC3T3-E1增殖虽无统计学差异,但呈上升趋势,而在20 mg·L-1质量浓度时增殖较其他组明显;ALP和ARS染色结果显示,成骨诱导组和龟甲水提液联合成骨诱导组染色阳性率较空白组明显升高;Real-time PCR结果显示,龟甲干预第7天,与空白组比较,龟甲水提液联合成骨诱导组NF-κB p105和IL-6 mRNA的表达明显降低(P<0.01),ALP和COL-Ⅰ mRNA的表达明显升高(P<0.05);龟甲干预第14天,与空白组比较,龟甲水提液联合成骨诱导组NF-κB p65,NF-κB p105和IL-6 mRNA的表达明显降低(P<0.01),ALP和COL-Ⅰ mRNA的表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:龟甲水提液能够促进MC3T3-E1成骨分化,其机制可能与抑制NF-κB炎性微环境有关。  
      关键词:龟甲水提液;促小鼠前成骨细胞系(MC3T3-E1);成骨分化;核转录因子-κB;炎症微环境   
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      发布时间:2021-02-09

      临床

    • 易琼,戴飞跃,郭志华,王建湘,刘东亮,林泉成,丁灿
      2020, 26(8): 95-104. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200428
      摘要:目的:探讨清胰汤加减联合连续性血液净化辅助治疗腑实热结型重症急性胰腺炎(SAP)合并多器官功能障碍(MODS)的疗效。方法:选择2015年5月至2019年5月在湖南中医药大学第一附属医院重症医学科(ICU)住院,西医符合SAP合并MODS诊断标准,中医诊断符合腑实热结证的患者共100例,随机分为对照组和观察组,各50例。对照组患者予以禁食禁饮、胃肠减压、胰蛋白酶抑制剂、胃黏膜保护、早期空肠营养、减轻炎症反应、连续性床旁血液净化(CBP)、机械通气、循环支持等综合治疗,观察组患者在常规综合治疗的基础上,辨证论治经鼻空肠管注入清胰汤加减,疗程为7 d。记录患者腹痛腹胀缓解时间、首次排气排便时间、住ICU时间、样本脱落数、死亡原因和例数;治疗开始前、治疗第3,7天分别测定相关指标,包括胰腺炎评价指标血淀粉酶(AMS)、血脂肪酶(LPS)、改良的CT严重指数评分(MCTSI);炎症反应指标采用白细胞介素-6(IL-6)和超敏C反应蛋白(hs-CRP);器官功能和组织灌注评价指标包括急性生理与慢性健康评分(APACHE-Ⅱ)、血清乳酸(Lac)、中心静脉压(CVP)、动脉血氧分压(PaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2)、谷氨酸-丙酮酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(γ-GGT)、尿量、肌酐(CREA)、尿素氮(UREA)、肾小球滤过率(GFR)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌红蛋白(Mb);中医治疗评分采用急性胰腺炎腑实热结证证候评分。结果:观察组中医证候疗效总有效率为86.67%(39/45),高于对照组的73.91%(34/46)(χ2=13.524,P<0.01);治疗第7天,两组患者的症状和指标均得到改善;与本组治疗前比较,观察组和对照组治疗后第3,7天,AMS,LPS,IL-6,hs-CRP,MCTSI评分,APACHE-Ⅱ评分,Lac,CVP,PaO2,PaO2/FiO2,ALT,AST,ALP,γ-GGT,尿量,CREA,UREA,GFR,CK,CKMB,LDH,Mb的水平均显著改善(P<0.05);与对照组第3,7天比较,观察组相应时间点的AMS,LPS,IL-6,hs-CRP,MCTSI评分,APACHE-Ⅱ评分,Lac,CVP,PaO2,PaO2/FiO2,ALT,AST,ALP,γ-GGT,尿量,CREA,UREA,GFR,CK,CKMB,LDH,Mb明显改善(P<0.05)。与对照组比较,观察组患者腹痛、腹胀缓解时间、首次排气/排便时间、住ICU时间明显缩短(P<0.05),观察组患者的死亡率明显降低(P<0.05)。结论:SAP患者并发MODS时,使用血液净化联合清胰汤加减,可以促进胰腺修复,抑制炎症反应,改善脏器功能,对于改善症状,缓解中医证候,延缓病程进展,减少住院时间,降低病死率起到了重要作用。  
      关键词:重症急性胰腺炎;多器官功能障碍(MODS);血液净化;腑实热结;清胰汤加减   
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      发布时间:2021-02-09
    • 何望生,杨文明,汪瀚,汪美霞,董婷,金珊
      2020, 26(8): 105-111. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200427
      摘要:目的:观察肝豆灵汤对痰瘀互结型Wilson病患者肝脏功能的临床疗效。方法:将2015年1月至2017年12月安徽中医药大学第一附属医院脑病中心收治的Wilson病痰瘀互结型患者72例,随机分为治疗组和对照组,各36例。两组均予以二巯丙磺酸钠常规治疗,对照组予以口服护肝片,治疗组予以肝豆灵汤口服,治疗共6个疗程。在治疗前后分别进行中医证候疗效、肝脏功能血清酶学[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)],胆红素代谢指标[总胆红素(TBIL)],血清肝纤维化指标[层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)],凝血指标[纤维蛋白原(FBG)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)]等相关指标评估。结果:中医证候疗效总有效率治疗组为86.11%(31/36),对照组为63.89%(23/36),治疗组优于对照组(P<0.05);两组治疗后ALT,AST,AKP,TBIL水平均显著改善(P<0.01),其中治疗组优于对照组(P<0.01);两组治疗后肝纤维化指标显著改善(P<0.01),其中治疗组优于对照组(P<0.01);两组治疗后凝血指标均有不同程度改善(P<0.05,P<0.01),其中在降低PT,APTT,TT水平,提高FBG水平等方面优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:肝豆灵汤能显著改善Wilson病痰瘀互结型患者的肝脏功能,具体表现在改善血清酶学及胆红素指标,逆转肝纤维化,促进凝血因子产生,减轻出血倾向,从而延缓病情进展,提高患者生活质量。  
      关键词:肝豆灵汤;肝豆状核变性;痰瘀互结证;二巯基丙磺酸钠;肝脏功能   
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      发布时间:2021-02-09
    • 何诚,周婷,万文俊
      2020, 26(8): 112-117. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200522
      摘要:目的:探讨通窍活血汤联合针刺治疗卒中后认知障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)的临床疗效及其对患者神经递质和神经功能的影响。方法:选取2017年1月至2019年3月本院收治的122例PSCI患者,运用简单随机数字表法将其随机分成观察组与对照组,每组61例。两组患者均给予口服盐酸多奈哌齐片,对照组辅以针灸治疗,观察组予以通窍活血汤联合针刺治疗,所有受试者均连续治疗4周。比较两组临床疗效;治疗前后,运用简易精神状态检查(mini-mental state examination,MMSE)测试两组患者总体认知功能状况,分别使用美国国立卫生研究院卒中量表(national institutes of health stroke scale,NIHSS),Barthel指数(barthel index,BI)评估神经功能缺损程度和日常生活能力变化,采用酶联免疫吸附法测定血清神经递质[乙酰胆碱(acetylcholine,ACh),多巴胺(dopamine,DA),去甲肾上腺素(norepinephrine,NE),5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)]和神经损伤标志物[神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE),视锥蛋白样蛋白-1(visinin like protein-1,VILIP-1),髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)]水平;并汇总受试者副反应发生情况。结果:观察组总有效率为91.8%(56/61),高于对照组[78.7%(48/61),P<0.05]。与本组治疗前比较,两组治疗后MMSE,BI评分均明显升高(P<0.05),NIHHS评分均明显降低(P<0.05);且治疗后,观察组以上量表评分的改善效果均明显优于对照组同期(P<0.05)。两组治疗后血清ACh,DA,NE及5-HT含量均明显高于本组治疗前(P<0.05);且治疗后,观察组上述神经递质(ACh,DA,NE,5-HT)水平较对照组同期均明显更高(P<0.05)。与本组治疗前比较,两组治疗后血清NSE,VILIP-1,MBP水平均明显下降(P<0.05);治疗后观察组血清NSE,VILIP-1,MBP含量均明显低于对照组同期(P<0.05)。两组都未见严重不良事件。结论:通窍活血汤联合针刺能有效改善PSCI患者的认知功能,其机制可能与通过上调体内认知相关神经递质表达水平有关,此外本中医综合疗法可明显促进患者神经功能恢复,增强患者日常生活能力,整体疗效确切,且患者耐受性好。  
      关键词:卒中后认知障碍;通窍活血汤;针刺;神经递质;神经功能   
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      发布时间:2021-02-09
    • 刘显涛,郑心
      2020, 26(8): 118-123. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200131
      摘要:目的:评价肺抑瘤合剂辅助化疗和免疫支持对Ⅲb,Ⅳ期肺鳞状细胞癌(SQCC)患者无进展生存期(PFS),生存率的影响及对外周血肿瘤标志物和细胞因子的干预效果。方法:将132例患者随机按数字表法分为对照组和观察组各66例,均给予盐酸吉西他滨+顺铂的GP方案,替代方案为紫杉醇+顺铂,并给予注射用胸腺肽。观察组同期口服肺抑瘤合剂,对照组同期口服肺抑瘤合剂模拟药。两组患者均连续治疗4个周期。随访记录PFS和12个月生存率,进行治疗前后欧洲生命质量协作组癌症核心量表(EORTC QLQ-C30)评价;检测治疗前后CD3,CD4,CD8,CD4/CD8水平,检测治疗前后细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1),鳞状细胞癌抗原(SCC),糖抗原125(CA125),血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9;进行治疗前后实体瘤大小的评价。结果:观察组实体瘤疗效临床缓解率为(35/66)53.03%,高于对照组的(23/66)34.85%(χ2=4.286,P<0.05);观察组PFS为9.8个月(95% CI,4.58~22.37),长于对照组的5.7个月(95% CI,4.69~20.41)(P<0.05);观察组12个月的生存率为(30/36)45.45%,高于对照组的(18/48)27.27%(χ2=4.714,P<0.05);观察组躯体功能、社会功能和整体生活质量评分均高于对照组(P<0.01),疲乏、恶心呕吐、食欲丧失、便秘、腹泻评分均低于对照组(P<0.01);观察组CD3,CD4水平和CD4/CD8均高于对照组(P<0.05),CD8低于对照组(P<0.05);观察组CYFRA21-1,SCC,CA125,VEGF,MMP-2和MMP-9水平均低于对照组(P<0.01)。结论:采用肺抑瘤合剂配合化疗和免疫支持治疗Ⅲb,Ⅳ期SQCC患者可延长患者PFS,提高生存率,能稳定免疫功能,提高生活质量,并能抑制CYFRA21-1等肿瘤标志物和VEGF等细胞因子表达,起到改善预后的效果,值得进一步研究和使用。  
      关键词:非小细胞肺癌;鳞状细胞癌;肺抑瘤合剂;无进展生存期;生存率;生活质量;肿瘤标志物;细胞因子   
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      发布时间:2021-02-09
    • 赵萃,毕锋莉,崔静
      2020, 26(8): 124-129. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192332
      摘要:目的:评价基于络病理论指导的补阳还五汤加味对腰椎间盘突出症(LDH)经皮椎间孔镜(PELD)术后患者的康复效果及对炎症因子和致痛介质的影响。方法:将144例患者随机按数字表法分为对照组和观察组各72例。两组患者行PELD治疗,对照组术后给予脱水、抗炎等对症处理。观察组在对照组治疗的基础上给予补阳还五汤加味内服,1剂/d。两组疗程均连续治疗4周,随访12周。记录术前,术后3 d和1,4,16周的疼痛程度视觉模拟评分法(VAS),记录术前,术后1,4和16周的Oswestry功能障碍指数(ODI)评分;记录术后16周内LDH术后综合征(FBSS)发生情况;进行治疗前后日本骨科协会评估(JOA)和气虚血瘀证评分;检测治疗前后前列腺素E2(PGE2),血栓素B2 (TXB2),白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和5-羟色胺(5-HT)水平,采用改良Macnab进行疗效评价。结果:观察组在术后3 d和1,4,16周VAS评分均低于同期对照组(P<0.01);观察组在术后1,4和16周ODI评分均低于同期对照组(P<0.01);观察组FBSS发生率18.06%(13/72),低于对照组的37.5%(27/72)(χ2=6.784,P<0.01);观察组患者JOA总分及主观症状、客观体征、日常活动3个因子评分均高于对照组(P<0.01);治疗后观察组气虚血瘀证各症状评分及总分均低于对照组(P<0.01);治疗后观察组TNF-α,IL-1β,PGE2,TXB2,5-HT水平均低于对照组(P<0.01);经秩和检验分析,改良Macnab疗效,观察组优于对照组(Z=2.151,P<0.05)。结论:基于络病理论下,采用补阳还五汤加味用于腰椎间盘突出症PELD术后患者,可减轻疼痛等症状,促进腰椎功能恢复,抑制炎症因子和致痛介质表达,减轻近期术后残余症状,降低FBSS发生率,促进了术后患者康复,提高了治疗效果。  
      关键词:腰椎间盘突出症;内镜下椎间盘切除术;络病理论;补阳还五汤;炎症因子;致痛介质   
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      发布时间:2021-02-09

      药物代谢

    • 于栋华,宋明洋,王霄阳,周琦,于纯淼
      2020, 26(8): 130-137. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192346
      摘要:目的:对急性痛风性关节炎大鼠给予穿山龙提取物后的尿液代谢组学进行研究,寻找相关的潜在生物标志物及相关代谢通路。方法:采用尿酸钠(MSU)诱导的急性痛风性关节炎大鼠模型,将SD大鼠40只随机分为空白组、穿山龙提取物组、模型组、穿山龙提取物干预组,每组10只。给药组灌胃给予穿山龙提取物,给药剂量0.48 g·kg-1,每天1次,连续5 d,于末次给药后,收集大鼠尿液,运用UPLC-Q-TOF/MS结合模式识别方法分析,采用正、负离子扫描模式下电喷雾离子源,数据采集范围m/z 100~1 500,采用全扫描方式。结果:鉴别出了12个共同的潜在生物标志物,分别为肌氨酸,二甲基甘氨酸,脱氧胞苷,尿酸,5-HT,L-胱硫醚,4-吡哆酸,脱氧尿苷,褪黑激素,5-甲氧基色胺,富马酸和胞苷。与空白组比较,穿山龙提取物组中这12个潜在生物标志物均明显下调;与模型组比较,在穿山龙提取物干预组的潜在生物标志物中,有10个上调,2个下调,穿山龙提取物对肌氨酸,尿酸,L-胱硫醚,4-吡哆酸,脱氧尿苷,5-甲氧基色胺,胞苷,二甲基甘氨酸,褪黑激素,富马酸这10个标志物均表现出了纠正异常表达的趋势;与急性痛风性关节炎相关性最强的代谢通路为半胱氨酸和甲硫氨酸代谢、色氨酸代谢。结论:穿山龙提取物可能是通过促进半胱氨酸和甲硫氨酸代谢中胱硫醚向半胱氨酸的转化水平,上调色氨酸代谢中褪黑激素,实现对痛风性关节炎的防治作用。  
      关键词:穿山龙提取物;尿酸钠;急性痛风性关节炎;尿液代谢组学;半胱氨酸和甲硫氨酸代谢;色氨酸代谢;L-胱硫醚   
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      发布时间:2021-02-09
    • 荔淑楠,王引权,王富胜,樊秦,雒军,安培坤,张亚丽,李钦,彭桐
      2020, 26(8): 138-147. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200611
      摘要:目的:建立当归不同品种间差异代谢物,为当归新品种育种、引种、区划栽培和生态种植提供参考依据。方法:对同一产地、同期采收的5个当归品种岷归1号(MG1),岷归2号(MG2),岷归4号(MG4),岷归5号(MG5)和岷归6号(MG6)进行非靶向代谢组学综合分析。取各品种药材50%甲醇提取物,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术,结合软件Progenesis QI,通过主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)等方法找出各品种间差异代谢物;依据相对分子质量,二级碎片,KEGG数据库和HMDB数据库以及相关文献信息,对差异代谢物进行鉴定。结果:5个当归品种的代谢物存在明显差异(P<0.05),MG2,MG4,MG5和MG6中的绿原酸、阿魏酸、色氨酸、阿魏醛等含量显著低于MG1含量(P<0.05),而藁本内酯、香豆素、牛角苷、棕榈素、原儿茶醛、亚麻酸等含量显著高于MG1(P<0.05)。MG2,MG5及MG6中的代谢物相近,与MG4的代谢物差异较大,此外,还鉴定出38个显著差异代谢物,涉及7种潜在的靶向代谢通路,不同品种当归都可能通过苯丙素类生物合成、类倍半萜烯类化合物的代谢、脂质代谢、氨基酸代谢、碳水化合物代谢、核苷酸代谢、类胡萝卜素、亚麻酸、亚油酸等代谢途径调节代谢物的合成。结论:应用UPLC-Q-TOF-MS和Progenesis QI代谢组学技术从整体水平比较不同品种当归的化学成分,发现其中的差异性及其规律,为当归质量控制、引种、栽培及当归育种和生态种植提供参考依据。  
      关键词:当归;品种;超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱;代谢组学;绿原酸;阿魏酸;色氨酸   
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      发布时间:2021-02-09
    • 程再兴,蔡真真,林丽虹,郑宝玉,陈红
      2020, 26(8): 148-155. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200651
      摘要:目的:研究巴戟天、吴茱萸和远志3味中药采用不同比例甘草炮制后对细胞色素P450酶(CYP)中CYP3A探针氨苯砜在大鼠体内药动学的影响,进而探究中药采用甘草炮制的目的。方法:采用HPLC检测CYP3A体内探针氨苯砜的含量,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~5 min,10%~25%A;5~20 min,25%A),检测波长292 nm。采用PK Solution 2.0软件模拟药动学参数。结果:氨苯砜给药后300 min内,与空白组比较,巴戟天生品可使其在大鼠体内的消除减慢、血药浓度升高,随着炮制用甘草比例的增加氨苯砜的消除加快、药峰浓度降低;吴茱萸生品可使氨苯砜在大鼠体内的消除减慢,血药浓度升高,达峰时间延后,采用不同比例甘草炮制后均可改变氨苯砜的药峰浓度和达峰时间,进而改变氨苯砜的消除过程;远志生品可使氨苯砜在大鼠体内的消除减慢,血药浓度增加,采用不同比例甘草炮制后均可使氨苯砜的消除加快,血药浓度明显降低。结论:巴戟天、吴茱萸和远志3味中药生品均可减慢氨苯砜在大鼠体内的消除过程,采用不同比例甘草炮制后可使氨苯砜的消除加快,其中采用生品与甘草饮片比例为100∶6的甘草炮制后对氨苯砜的药动学过程影响均不明显。  
      关键词:巴戟天;吴茱萸;远志;甘草;炮制;细胞色素P450酶;氨苯砜   
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      发布时间:2021-02-09

      药学基础

    • 赵小惠,刘霞,钟承赞,杨明,曾乐,向丽,陈士林
      2020, 26(8): 156-162. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200948
      摘要:目的:由于传统方法对发酵菌丝体鉴定困难,采用DNA条形码技术对金水宝胶囊原料菌种蝙蝠蛾拟青霉及相关产品进行快速鉴定。方法:采用内转录间隔区(ITS)序列对收集的蝙蝠蛾拟青霉及其易混淆物种共8种168份样品进行条形码鉴定,并基于ITS序列设计蝙蝠蛾拟青霉特异引物对相关产品进行快速鉴定。结果:44份不同来源蝙蝠蛾拟青霉的ITS序列长度均为499 bp,无变异位点。基于ITS序列可对蝙蝠蛾拟青霉及其7种易混伪品进行区别;通过ITS序列设计的蝙蝠蛾拟青霉特异性引物(ITS-BF/ITS-BR)可特异扩增得到长度102 bp的短片段,采用该片段可快速鉴别蝙蝠蛾拟青霉与其他虫草菌,并可区分市场上相关产品。结论:通过ITS序列及特异性引物可以实现蝙蝠蛾拟青霉及其相关产品的快速鉴定,为金水宝胶囊的生产及质量控制提供参考。  
      关键词:蝙蝠蛾拟青霉;DNA条形码;内转录间隔区(ITS);特异引物;冬虫夏草;金水宝胶囊;发酵   
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      发布时间:2021-02-09
    • 谢婧,余意,张晶,扶垭东,刘颖,胡明华,李丽,王光忠,肖永庆
      2020, 26(8): 163-169. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200449
      摘要:目的:考察黑豆汁炖制时间对制何首乌外观性状及各类有效成分含量变化规律的影响。方法:采用HPLC同时测定不同炮制时间制何首乌样品中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷的含量,选择Agilent ZORBAX Extend-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),甲醇(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0~30 min,5%~100%A;30~40 min,100%A),流速1.0 mL·min-1,柱温35 ℃,检测波长280 nm。结果:随炖制时间的增加,二苯乙烯苷含量逐渐降低,与8 h时相比,至64 h时含量降低76%;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷2种蒽醌苷含量先上升后下降,至24 h时达最高值,炖制40 h时降至与8 h近似的水平,之后略有波动;大黄素、大黄素甲醚2种蒽醌苷元含量先上升后下降,炖制32 h时达最大值,之后缓慢降低并趋于稳定。结论:炖制时间对制何首乌中各类成分含量的影响显著,且变化趋势不尽相同,应规范制何首乌饮片的炮制时间;同时,仅以二苯乙烯苷及蒽醌类成分作为制何首乌的指标性成分依据不够充分,应考虑增加多糖类等质量控制指标。  
      关键词:何首乌;炮制方法;黑豆汁;炖制;二苯乙烯苷;游离蒽醌;结合蒽醌   
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      发布时间:2021-02-09
    • 惠和平,金辉,杨晓燕,李秀壮,辛爱一,秦波
      2020, 26(8): 170-175. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200614
      摘要:目的:以兰州百合鳞茎中分离和纯化得到的多糖BHP-1为主要研究对象,综合运用仪器分析和化学反应等手段研究其初步的形貌特征和化学结构。方法:采用热重分析(TG)及扫描电镜(SEC)技术分别分析多糖BHP-1的热稳定性和形貌结构特征;通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,结合部分酸水解、高碘酸钠氧化-Smith降解以及核磁共振波谱(NMR)分析等方法对多糖BHP-1的化学结构进一步的进行解析。结果:BHP-1是以1,4连接的α-D-吡喃葡萄糖和1,4连接的β-D-吡喃甘露糖为基本骨架的甘露葡聚糖,在葡萄糖和甘露糖的2位和/或3位形成主要的分支,主链或支链的末端残基主要为T-α-D-吡喃葡萄糖,同时在其结构片段中含有少量的O-乙酰基。热重分析显示BHP-1在220 ℃开始发生降解,520 ℃基本结束,说明BHP-1热稳定性良好。形貌分析显示BHP-1表面光滑有大量凹陷,凹陷处多为片层结构错落紧密堆积而成,并交织下陷呈不规则的孔洞。结论:多糖BHP-1是一种热稳定性良好,表面光滑有大量的凹陷和孔洞,并含少量O-乙酰基的甘露葡聚糖,其化学结构为首次报道。  
      关键词:兰州百合;多糖;化学结构;热重与形貌分析;甘露葡聚糖   
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      发布时间:2021-02-09
    • 赵志莲,刘立敏,李海峰
      2020, 26(8): 176-181. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200416
      摘要:目的:探讨重楼属9种植物根茎中甾体皂苷有效成分和主成分的差异及相关性。方法:采用液质联用(LC-MS)技术定性分析重楼属9种植物根茎中甾体皂苷有效成分和主成分的差异及相关性。结果:滇重楼,金线重楼,毛重楼,滇重楼(阔瓣),南重楼,五指莲,黑籽重楼,多叶重楼8种重楼属植物根茎中均能检测到2015年版《中国药典》(一部)药材质量控制指标重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ,同时还检测到重楼皂苷Ⅴ;重楼皂苷H,薯蓣皂苷,纤细薯蓣皂苷3种主要甾体皂苷有效成分差异较大。根据重楼属9种根植物根茎正离子模式下液质数据的主成分分析(PCA)模型可将S1(滇重楼),S2(金线重楼),S3(毛重楼),S4[滇重楼(阔瓣)],S5(南重楼),S6(五指莲),S9(多叶重楼)7种重楼属植物聚为一类,S7(黑籽重楼),S8(长柱重楼)各自聚为一类,距离滇重楼最远。结论:滇重楼,金线重楼,毛重楼,滇重楼(阔瓣),南重楼,五指莲,多叶重楼根茎中甾体皂苷有效成分和主成分主要差异较小,但能否替代滇重楼入药还值得进一步深入研究。  
      关键词:重楼属;根茎;液质联用技术;甾体皂苷   
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    • 王梦涵,胡帅军,杨楚虹,刘霞,徐江
      2020, 26(8): 182-191. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200947
      摘要:目的:测定湖北麦冬、川麦冬及杭麦冬叶绿体基因组,分析其序列特征并完成特异性DNA条形码筛选。方法:通过高通量测序技术对湖北麦冬、川麦冬及杭麦冬叶绿体基因组进行测序、拼接及注释,利用生物信息学方法对叶绿体基因组结构特征及系统发育进行分析。结果:湖北麦冬的叶绿体基因组全长155 998 bp,鸟嘌呤与胞嘧啶(GC)总量37.7%,成功注释出85个蛋白编码基因,37个转运RNA(tRNA)基因和8个核糖体RNA(rRNA)基因,检测到274个简单重复序列(SSR),编码亮氨酸的密码子数量最多,编码色氨酸的密码子数量最少;川麦冬叶绿体基因组全长156 078 bp,GC总量37.8%,成功注释出85个蛋白编码基因,37个tRNA基因和8个rRNA基因,检测到265个SSR,编码亮氨酸的密码子数量最多,编码色氨酸的密码子数量最少;杭麦冬叶绿体基因组全长156 207 bp,GC总量37.7%,成功注释出85个蛋白编码基因,37个tRNA基因和8个rRNA基因,检测到274个SSR,编码亮氨酸的密码子数量最多,编码色氨酸的密码子数量最少。结论:系统发育树显示,与川麦冬相比,湖北麦冬与杭麦冬的亲缘关系更近。湖北麦冬、杭麦冬及川麦冬非编码区变异程度均大于编码区,叶绿体基因组可作为山麦冬属及沿阶草属植物物种鉴定的超级条形码。  
      关键词:叶绿体;湖北麦冬;杭麦冬;川麦冬;叶绿体基因组;分子鉴定;叶绿体转化   
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      发布时间:2021-02-09
    • 李若诗,袁会琼,刘江,赵飞亚,陶爱恩,段宝忠,王莹,夏从龙
      2020, 26(8): 192-198. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192449
      摘要:目的:研究长柱重楼、滇重楼和南重楼的HPLC指纹图谱与其抗肝癌作用的谱效关系,为明确重楼抗肝癌作用的物质基础提供实验依据。方法:采用HPLC建立3种重楼提取物的指纹图谱,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~10 min,20%A;10~20 min,20%~25%A;20~30 min,25%~30%A;30~40 min,30%~35%A;40~50 min,35%~40%A;50~60 min,40%A;60~75 min,40%~45%A;75~80 min,45%~60%A),流速0.9 mL·min-1,检测波长203 nm;利用噻唑蓝(MTT)比色法测定3种重楼提取物对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50);运用聚类分析(HCA)和灰色关联度分析(GRA)研究3种重楼指纹图谱和抗肝癌作用的关系,找出对抗肝癌作用贡献较大的成分。结果:在3种重楼的HPLC指纹图谱中,确定其中11个色谱峰为共有峰。作用时间72 h时长柱重楼、滇重楼、南重楼的IC50分别为148.33,178.87,208.09 mg·L-1,其中长柱重楼的抗肝癌活性最强。灰色关联度结果显示,滇重楼共有峰中关联度较高的为1~10号峰,长柱重楼共有峰关联度较高的为1~7号峰,南重楼共有峰中关联度较高的为1~4,6~10,N1号峰,与IC50关联度均>0.7。各重楼变量的聚类分析结果显示,可与IC50聚为一类的色谱峰的关联度均>0.7。结论:建立了3种重楼的HPLC指纹图谱,重复性良好。3种重楼中的1~4,6和7号色谱峰对抗肝癌药效贡献最大。  
      关键词:重楼;指纹图谱;抗肝癌作用;聚类分析;灰色关联度;谱效关系;HepG2细胞   
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      发布时间:2021-02-09
    • 张诗雯,张凡,臧彬如,高慧
      2020, 26(8): 199-205. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200946
      摘要:目的:比较不同蒸制时长及压力对6种人参皂苷类成分总量的影响,确定红参的最佳炮制方法。方法:采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QqQ-MS/MS)对不同炮制工艺的红参中人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rb1,Rc,Rb2进行含量测定,选择Waters ACQUITY UPLC BEH C8色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱(0~4 min,81%~79%A;4~6.3 min,79%~75%A;6.3~6.5 min,75%~71%A;6.5~9.5 min,71%A;9.5~16.5 min,71%~68.5%A;16.5~16.6 min,68.5%~60%A;16.6~19 min,60%~100%A),流速0.4 mL·min-1,柱温35 ℃;质谱分析采用电喷雾离子源(ESI),负离子采集模式,毛细管电离电压2.5 kV,脱溶剂气温度350 ℃,脱溶剂气流量700 L·h-1,锥孔气流量50 L·h-1,以多反应监测(MRM)模式采集,采集范围m/z 100~1 500,其中人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rb1,Rc,Rb2的定量离子对分别为m/z 799.59~637.49,945.54~475.79,799.59~475.49,1 107.59~783.97,1 077.58~783.96,1 077.75~191.19。结果:蒸制时长为3 h时,各样品组6种人参皂苷类成分质量分数总和处于7.099 8~16.768 5 mg·g-1;常压蒸制时6种人参皂苷类成分总量为加压蒸制总和的2.5~12.6倍,明显优于加压蒸制。结论:在本实验条件下,红参的最佳炮制方式为鲜人参常压蒸制3 h。  
      关键词:鲜人参;生晒参;蒸制;人参皂苷;压力;时间;超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QqQ-MS/MS)   
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      发布时间:2021-02-09
    • 张博,孙秀丽,郭云龙,王洋,刘淑莹
      2020, 26(8): 206-212. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200315
      摘要:目的:对不同年限、不同产地人参的化学成分进行分析研究。方法:利用快速分离液相色谱-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF-MS)对样本进行检测,经过色谱峰提取、排列和归一化后,对得到的数据集进行数据统计分析,寻找差异成分,并观察其在不同人参样本中的变化趋势;使用一级质谱和二级质谱信息结合对照品比对进行化合物鉴定。结果:偏最小二乘得分图中不同产地和不同生长年限的人参被分开,说明不同产地和不同生长年限的人参中所含的化学成分存在差异,选择变量权重(VIP)值>1的变量作为对分类贡献较大的化学成分,然后进行t检验进一步筛选具有显著性差异(P<0.05)的化学成分。对比三年生和五年生人参的化学成分,人参皂苷Rb1,Rh4,Rk2等11种成分存在显著性差异,这些成分中大部分的含量会随着人参生长年限的增加而增加;人参皂苷Rg1,Rf,Rh1,Rb1等10成分在产地为吉林和黑龙江的人参样本中存在显著性差异。结论:液质联用技术可以快速、准确地对人参样品进行分析,结合多元统计分析方法,能够寻找不同样本间的差异成分。  
      关键词:人参;不同产地;不同生长年限;三年生;五年生   
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    • 朱希,陈佳,傅素华
      2020, 26(8): 213-218. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200613
      摘要:目的:建立液相色谱串联质谱法测定紫草中醇溶性成分和水溶性成分(左旋紫草素,β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁,β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁,紫草酸,咖啡酸,迷迭香酸)的含量,用于紫草的质量控制。方法:采用Agilent ZORBAX SB C18色谱柱(4.6 mm×50 mm,1.8 μm),以0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~3 min,5%~95%A;3~7 min,95%A;7~7.01 min,95%~5%A;7.01~8.50 min,5%A);流速0.2 mL·min-1,柱温35 ℃,进样量5 μL;采用负离子电离模式,MRM扫描模式进行定量。结果:左旋紫草素,β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁,β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁,紫草酸,咖啡酸,迷迭香酸分别在10.12~1 012 μg·L-1(r=0.998 1),10.88~1 088 μg·L-1(r=0.991 2),10.08~806.4 μg·L-1(r=0.997 6),20.32~1 016 μg·L-1(r=0.996 6),10.37~1 037 μg·L-1(r=0.999 6),10.26~1 026 μg·L-1(r=0.997 8)均有良好线性关系(r≥0.991 2);平均加样回收率分别为95.8%(RSD 3.2%),103.5% (RSD 2.3%),105.3%(RSD 2.1%),96.1%(RSD 3.3%),98.9%(RSD 2.7%),100.8%(RSD 3.4%)。13批次紫草样品中6个种成分含量存在较大差异。结论:所建立的方法合理可行,为综合评价紫草质量提供一定依据。  
      关键词:紫草;醇溶性成分;水溶性成分;左旋紫草素;β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁;β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁;紫草酸   
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      发布时间:2021-02-09

      数据挖掘

    • 官扬,曾文雪,胡慧明,马越兴,赵斌,陆子杰,钟起泓,黄丽萍
      2020, 26(8): 219-227. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200125
      摘要:目的:基于网络药理学进行数据挖掘,探讨甘草-枳壳的抗乳腺癌的潜在活性成分和可能作用机制。方法:从中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选的甘草-枳壳活性成分与药物数据库Therapeutic Target Databas(TTD)数据库检索的乳腺癌靶点进行了对比分析,归纳总结出甘草-枳壳中活性成分抗乳腺癌作用的主要潜在靶点,利用Cytoscape 3.7.1软件构建甘草-枳壳活性成分-靶点-疾病网络并进行分析。结果:根据类药性(DL)及口服生物利用度(OB)相关条件筛选获得甘草-枳壳活性成分-乳腺癌靶标网络图,该网络总共包括133个节点,化学成分116个,乳腺癌药物靶点有17个;与乳腺癌药物靶点相互作用的甘草活性成分有109个;与乳腺癌药物靶点相互作用的枳壳活性成分有6个;与乳腺癌药物靶点相互作用的枳壳、甘草共有的活性成分有1个;网络图中有400个乳腺癌靶点-相互作用靶标对。结论:甘草-枳壳抗乳腺癌作用的发挥是基于多成分、多通路和多靶点的整体药效效应,挖掘了抗乳腺癌的潜在作用机制,为进一步实验研究提供了理论基础。  
      关键词:网络药理学;甘草;枳壳;乳腺癌;机制   
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      发布时间:2021-02-09

      学术探讨

    • 宁康,董林林,李孟芝,赵庆贺,陈华,王磊,陈士林
      2020, 26(8): 228-240. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200348
      摘要:非精神活性药用大麻即四氢大麻酚(THC)质量分数<0.3%且大麻二酚(CBD)含量高(原则上应>2.0%),主要用于药用的大麻植物。大麻的药用性历史悠久,笔者基于大麻的本草考证以及国际药用历史,阐述了大麻素类化合物特别是CBD在开发抗癫痫药品、精神疾病药品、镇痛抗炎药品及抗肿瘤药品上的应用,并对其在食品、保健品、化妆品等领域的应用情况进行总结。基于目前高CBD含量药用大麻的新品种匮乏、基础研究薄弱等问题,建议应加强CBD等有效成分的基础研究,推动药用大麻五类新药及保健品等的开发,通过挖掘药用大麻遗传信息,建立其综合鉴定体系并加快高CBD含量新品种选育,保障药用大麻的安全性及有效性,促进药用大麻产业的可持续发展。  
      关键词:药用大麻;本草考证;药用历史;大麻二酚(CBD);四氢大麻酚;药品应用;CBD油   
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      发布时间:2021-02-09
    • 王玉,杨雪,夏鹏飞,杨蕊菁,王玉霞,杨飞霞,樊秦,武晓玉,彭雪晶,赵磊
      2020, 26(8): 241-250. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20200513
      摘要:由于中药作用的整体性、成分和作用机制的复杂性,化学成分(群)作为中药及其复方制剂发挥治疗作用的物质基础,因此,采用多种方法分离分析中药及其复方中的化学成分一直是中药治病防病研究中一个有待解决的关键重要问题。传统方法存在操作繁琐、耗时耗事、浪费溶剂和样品的不可逆吸附等缺陷,并且分离过程中无法给出药理参数的基本信息,因而无法对活性成分进行高效准确定位。近年来从细胞层次研究药物成分与受体的结合为中药活性成分的筛选研究提供了一种新的途径。目前研究二者相互作用的方法之一—细胞膜色谱法(CMC),将现有色谱及质谱技术、细胞生物学与受体药理学结合起来,能够正确反映活性部位、活性成分与细胞膜及膜受体的相互作用,对复杂中药体系中有效部位筛选、活性成分的分离和高通量筛选具有独特优势。该文综述了CMC的原理、特点、中药活性成分筛选领域中的细胞膜模型及其与气相色谱-质谱(GC-MS)及液相色谱-质谱(LC-MS)联用的研究现状,并对其今后研究方法和未来的开发前景进行了探讨,为CMC在中医药领域的深入研究和开发利用提供理论依据和实践指导。  
      关键词:细胞膜色谱;质谱;联用;中药;活性成分;筛选   
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      发布时间:2021-02-09
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