最新刊期
      2021 年 第 27 卷 11 期

        经典名方

      • 傅红敏,任秋月,常柏
        2021, 27(11): 1-8. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211005
        摘要：目的观察糖尿病大血管病变进程，探讨不同剂量抵挡汤对糖尿病大血管病变的影响。方法选取4周龄雄性载脂蛋白E敲除（ApoE-/-）小鼠，采用高脂喂养联合链脲佐菌素（STZ）诱导制备糖尿病大血管病变模型，并随机分为模型组、抵挡汤高、中、低剂量组和辛伐他汀组；并以同批次同周龄ApoE-/-小鼠仅高脂喂养，作为ApoE-/-组；取相同遗传背景的C57BL/6小鼠常规喂养作为正常组。分别于实验第8，20周取材。观察不同时期各组小鼠主动脉病理特点及斑块面积占比，比较各组小鼠血糖、血脂、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测主动脉NOD样受体3（NLRP3），半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）蛋白表达，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中白细胞介素-1β（IL-1β），白细胞介素-18（IL-18），白细胞介素-1α（IL-1α），肿瘤坏死因子-α（TNF-α）炎症因子。结果与正常组比较，ApoE-/-组、模型组内斑块占比显著增高（P<0.01），与模型组比较，各给药组能明显降低血管内斑块占比（P<0.05）；与正常组比较，ApoE-/-组、模型组主动脉NLRP3，Caspase-1蛋白表达水平显著升高（P<0.01），血清中IL-1β，IL-18，IL-1α，TNF-α显著升高（P<0.01），与模型组比较，各给药组能够明显抑制主动脉NLRP3，Caspase-1蛋白的表达，降低血清中IL-1β，IL-18，IL-1α，TNF-α等炎症因子水平（P<0.05），且以中剂量组抑制作用最强（P<0.05）。结论抵挡汤能独立于降糖、降脂之外改善糖尿病大血管病变，这可能与下调NLRP3，Caspase-1蛋白表达，减轻炎症级联反应相关。  
        关键词：糖尿病;大血管病变;NOD样受体3（NLRP3）炎症小体;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）   
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        发布时间：2021-05-17
      • 秦彬喻,彭冬,王逸雪,章时杰,王奇,关莉
        2021, 27(11): 9-18.
        摘要：目的探讨补阳还五汤（BDT）对神经干细胞（NSCs）糖氧剥夺/复氧（OGD/R）损伤后增殖、分化的影响。方法从SD大鼠海马区域分离培养NSCs，将细胞随机分为5组，分别为常氧组，模型组，BDT组，雷帕霉素（Rapa）组和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）联合BDT组，常氧组和模型组使用20%空白血清，BDT组使用20%含药血清，Rapa剂量1 μmol·L-1，3-MA剂量5 mmol·L-1。除常氧组外，其余各组进行糖氧剥夺/复氧。光镜观察细胞形态的变化；免疫荧光检测巢蛋白（nestin）表达，鉴定NSCs；细胞增殖与活性检测法（CCK-8）检测NSCs的存活率；5-乙炔基-2-脱氧尿嘧啶苷（EdU）标记法检测NSCs增殖；Ad-mCherry-GFP-LC3B检测自噬活性；蛋白免疫印记法检测BDT对自噬相关蛋白的影响；免疫荧光法检测脑源性神经营养因子（BDNF），β-微管蛋白Ⅲ（β-tubulin Ⅲ）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）。结果与常氧组比较，糖氧剥夺/复氧会显著降低大鼠NSCs的细胞活力，与模型组比较，20%BDT含药血清明显改善了大鼠NSCs存活（P<0.01）。BDT可以诱导OGD后NSCs自噬小体的产生，与常氧组比较，微管相关蛋白轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ），Beclin-1表达升高（P<0.05，P<0.01），p62变化不明显；与模型组比较，BDT组LC3Ⅱ，Beclin-1明显上调（P<0.05，P<0.01），p62表达下调（P<0.01）；Rapa组起到类似效果（P<0.05，P<0.01），3-MA组抑制了自噬的活性（P<0.01）。Ad-mCherry-GFP-LC3B结果显示，与常氧组比较，模型组荧光强度显著增加（P<0.01）；与模型组比较，20%BDT含药血清和Rapa组显著增加自噬荧光强度（P<0.01），3-MA抑制了自噬活性（P<0.01）。免疫荧光结果显示，与常氧组比较，EdU，β-tubulin Ⅲ，GFAP和BDNF阳性细胞数显著减少（P<0.01）；与模型组比较，20%BDT含药血清和Rapa起到了类似的保护和促进作用（P<0.05，P<0.01）；3-MA组可以部分阻断BDT的神经保护和分化能力（P<0.05）。结论BDT预保护可以通过上调自噬减少糖氧剥夺造成的大鼠NSCs损伤，促进增殖、分化。  
        关键词：补阳还五汤;糖氧剥夺/复氧（OGD/R）;神经干细胞（NSCs）;自噬;神经再生   
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        发布时间：2021-05-17
      • 张庚鑫,杜海洋,王平,杨光勇,涂小华,田维毅,王文佳,何光志
        2021, 27(11): 19-26. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211001
        摘要：目的采用16S rRNA技术研究葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠肠道菌群结构的影响。方法将60只健康SD大鼠随机分为6组，分别为正常组、模型组、葛根芩连汤高、中、低剂量组，丽珠肠乐组，每组10只。除正常组外，每日按头孢拉定178.6 mg·kg-1，硫酸庆大霉素31.25 mg·kg-1混合抗生素进行灌胃造模，造模成功后，葛根芩连汤高、中、低剂量组灌胃葛根芩连汤（7.02，3.51，1.755 g·kg-1），丽珠肠乐组按0.125 g·kg-1灌胃，正常组与模型组给予无菌蒸馏水灌胃，体积分数均为10 mL·kg-1，连续给药7 d，将大鼠麻醉后取大鼠结肠内容物，提取粪便DNA后进行16S rRNA高通量测序并分析其结果。结果葛根芩连汤明显调节菌群失调性腹泻模型大鼠的物种数量及Alpha与Beta多样性，提高菌群生物丰富度指数与多样性指数，正向调节菌群失调性腹泻模型大鼠的3种差异菌门（厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门）与14种差异菌属（拟杆菌属、狄氏副拟杆菌属、布劳特氏菌属等）。结论葛根芩连汤对菌群失调性腹泻模型大鼠肠道菌群有调节作用，揭示了肠道菌群与菌群失调性腹泻之间的生理病理机制。  
        关键词：16S rRNA;葛根芩连汤;肠道菌群;菌群结构;菌群失调性腹泻   
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        发布时间：2021-05-17

        药理

      • 吴丽娟,何晓艳,梁静涛,梁洁,张玉蝶
        2021, 27(11): 27-34. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211190
        摘要：目的运用中医经方大黄䗪虫丸干预小鼠硅肺纤维化模型，观察其对小鼠硅肺纤维化的影响并探讨其作用机制。方法选用SPF级雄性昆明种小鼠36只，分为正常组，模型组，大黄䗪虫丸高、中、低剂量（1.560，0.780，0.390 g·kg-1）组，汉防己甲素组（0.039 mg·kg-1），每组6只。除正常组外，其余组均用静式染毒法连续40 d吸入二氧化硅（SiO2）粉尘复制小鼠硅肺纤维化模型，并用相应药物进行干预28 d后处死小鼠，获得血清和肺组织样品，运用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-1β（IL-1β），IL-6和羟脯氨酸（HYP）的含量，运用肺组织样本进行病理切片观察，并采用蛋白免疫印迹法（Western blot），实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）方法检测肺组织中p38 丝裂原活化蛋白激酶（MAPK），核转录因子-κB（NF-κB），转化生长因子-β1（TGF-β1），α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA），Smad2，Smad3，Smad7的蛋白和mRNA的表达水平。结果与正常组比较，模型组中的TNF-α，IL-1β，IL-6和HYP的含量均明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，大黄䗪虫丸高剂量组能够明显降低小鼠血清中TNF-α，IL-6和HYP的含量（P<0.05，P<0.01），可见大黄䗪虫丸能够减轻硅肺小鼠肺部炎症。同时，与正常组比较，模型组中的p38 MAPK，NF-κB p65，TGF-β1，α-SMA，Smad2和Smad3蛋白和mRNA表达水平均明显升高（P<0.05，P<0.01），Smad7蛋白和mRNA表达水平均显著降低（P<0.01）；与模型组比较，大黄䗪虫丸高剂量组中的p38 MAPK，NF-κB p65，TGF-β1，α-SMA，Smad2和Smad3蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.05，P<0.01），Smad7蛋白和mRNA表达水平均明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论大黄䗪虫丸能改善硅肺小鼠肺泡炎症、细胞外基质沉积的情况，因而起到减轻纤维化的作用，这可能是通过调节p38 MAPK/NF-κB/TGF-β1通路来实现的。  
        关键词：大黄䗪虫丸;小鼠硅肺模型;硅肺纤维化;p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/核转录因子-κB（NF-κB）/转化生长因子-β1（TGF-β1）信号通路   
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        发布时间：2021-05-17
      • 张星星,高雅婷,王小乐,杨勤军,刘桐,童佳兵,李泽庚
        2021, 27(11): 35-41. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211193
        摘要：目的探讨芪玉三龙方（QYSL）抑制A549肺癌细胞对微小RNA21（miRNA21）“成瘾”的分子机制。方法选择人A549肺癌细胞，常规传代培养，分别设置为空白组，空白血清组，含药血清组，干扰小RNA（siRNA）组。制备QYSL含药血清，以前期研究筛选的最佳药物浓度和作用时间进行干预。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测及实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR） miRNA21及其靶向信号通路第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）/磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）相关分子的蛋白及mRNA的表达。结果与空白血清组比较，含药血清组和siRNA组的miRNA21 mRNA表达显著降低，PTEN mRNA的表达显著升高，差异具有统计学意义（P<0.01）。与空白血清组比较，含药血清组和siRNA组的PI3K，雷帕霉素靶蛋白（mTOR） mRNA表达显著降低，差异具有统计学意义（P<0.01），但含药血清组蛋白激酶B（Akt） mRNA的表达无明显差异。与空白血清组比较，含药血清组和siRNA组的PTEN蛋白表达明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）；含药血清组磷酸化蛋白激酶B（p-Akt），磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达明显降低（P<0.05），总蛋白Akt，mTOR表达无明显降低，PI3K蛋白的表达降低，但差异无统计学意义。结论QYSL可抑制miRNA21的转录，使PTEN表达有所上升，下调PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子表达，从而温和抑制肺癌细胞对致癌基因的“成瘾”现象，阻断肺癌细胞增殖。  
        关键词：芪玉三龙方;A549肺癌细胞;微小RNA21（miRNA21）;第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）/磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）信号通路   
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        发布时间：2021-05-17
      • 崔轶凡,孙瑞英,王志平,曹娟
        2021, 27(11): 42-51. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211006
        摘要：目的探讨温经汤加味对子宫内膜异位症（EM）肾虚血瘀证大鼠的干预作用及其机制研究。方法SPF级雌性未孕大鼠随机选出正常组，其余大鼠采用“冰水浸泡+皮下注射盐酸肾上腺素法”进行肾虚血瘀证造模，造模结束后，仅开腹不进行内膜移植大鼠，设为假手术组，其余大鼠以自体内膜移植法进行EM造模，EM肾虚血瘀证造模成功大鼠随机分为阳性药组及温经汤加味（中药）低、中、高剂量组。中药低、中、高剂量组分别以5，10，20 g·kg-1灌胃，每日给药1次，连续4周；阳性药选取达那唑63 mg·kg-1灌胃，每日给药1次，连续4周。4周后，取各组大鼠内膜组织（异位、在位）进行苏木素-伊红（HE）染色，观察其组织病理学变化；免疫组化（IHC）法、蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8（Caspase-8），基质金属蛋白酶-9（MMP-9），上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）及神经钙黏蛋白（N-cadherin）蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测Caspase-8，MMP-9，E-cadherin，N-cadherin mRNA表达。结果经IHC法和Western blot法，与假手术组比较，EM肾虚血瘀证模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9，N-cadherin蛋白表达显著升高（P<0.01），Caspase-8，E-cadherin蛋白表达显著降低（P<0.01）；与模型组比较，达那唑组、中药低、中、高剂量组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9，N-cadherin蛋白明显降低（P<0.05，P<0.01），Caspase-8，E-cadherin蛋白表达明显升高（P<0.05，P<0.01）。经Real-time PCR法检测，与假手术组大鼠比较，模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9，N-cadherin mRNA表达显著升高（P<0.01），Caspase-8，E-cadherin mRNA表达显著降低（P<0.01）；与模型组大鼠在位内膜比较，达那唑组、中药高、中剂量组在位、异位内膜组织MMP-9，N-cadherin mRNA表达明显降低，Caspase-8，E-cadherin mRNA表达明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论温经汤加味能够通过调节Caspase-8，MMP-9，E-cadherin，N-cadherin等因子水平异常表达，改善EM肾虚血瘀证大鼠免疫抑制、阻断微血管新生，从而起到治疗EM的作用；以上微观指标的变化有望成为体现疾病（EM），证候（肾虚血瘀证）及病理机制（免疫抑制、微血管新生）的重要标志物。  
        关键词：子宫内膜异位症（EM）;肾虚血瘀证;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8（Caspase-8）;基质金属蛋白酶-9（MMP-9）;上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）;神经钙黏蛋白（N-cadherin）;温经汤加味   
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        发布时间：2021-05-17
      • 袁蓓,苏晓慧,郭婉怡,汪倩,刘春芳,韩岚,林娜
        2021, 27(11): 52-62. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211007
        摘要：目的观察瘀血痹片对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的干预作用并探索抗炎相关机制。方法建立大鼠CIA模型，给药组和阳性药组分别灌胃给予低、中、高剂量瘀血痹片（0.1，0.2，0.4 g·kg-1）和甲氨蝶呤（0.4 mg·kg-1 ），每3 d检测发病率、机械痛敏阈值及冷刺激痛敏；给药30 d后取材，外周血检测血小板计数（PLT）及纤维蛋白原（FIB）含量；苏木素-伊红染色法分析CIA大鼠关节组织病理变化；免疫组化法（IHC）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测CIA大鼠关节组织中白细胞介素（IL）-1β，IL-8，核转录因子-κB（NF-κB） p65，磷酸化NF-κB p65（p-NF-κB p65），大鼠肉瘤（Ras）及Raf-1蛋白表达情况。此外，采用10 μg·L-1的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导人类类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（RA-FLS），转移小室法检测RA-FLS迁移及侵袭能力。Western blot检测RA-FLS中Ras，Raf-1，p-NF-κB p65蛋白表达水平。结果与正常组比较，CIA模型组发病率升高，机械痛阈值明显降低（P<0.05，P<0.01），冷刺激反应评分显著增高（P<0.01），外周血中PLT和FIB含量，大鼠关节组织病理评分，RA-FLS迁移和侵袭细胞个数及炎性相关因子的表达水平均显著升高（P<0.01）；与模型组比较，瘀血痹片低、中、高剂量组均能降低CIA大鼠发病率，提高其机械痛阈值并降低冷刺激痛敏反应评分（P<0.05，P<0.01）；降低CIA大鼠外周血中PLT和FIB含量（P<0.05，P<0.01），改善关节滑膜增生、骨及软骨破坏等病理变化（P<0.05，P<0.01），并抑制RA-FLS的迁移及侵袭。此外，瘀血痹片低、中、高剂量组均能不同程度地著抑制CIA大鼠关节组织中IL-1β，IL-8，Ras，Raf-1和p-NF-κB p65的含量，以及RA-FLS细胞中Ras，Raf-1及p-NF-κB p65等蛋白表达水平（P<0.05，P<0.01）。结论瘀血痹片具有降低大鼠CIA发病率、关节炎临床症状和改善关节组织病理变化、抑制滑膜生成等作用，并且这一作用可能与其对Ras/Raf-1/NF-κB信号通路的抑制有关。  
        关键词：类风湿关节炎（RA）;瘀血痹片;成纤维样滑膜细胞（FLS）;炎症因子;Ras/Raf-1/核转录因子-κB（NF-κB）   
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        发布时间：2021-05-17
      • 刘毓,张聪聪,胡永红,陈高峰,杨海琳,张定棋,陈佳美,刘平,刘伟,张华
        2021, 27(11): 63-75. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210627
        摘要：目的探讨不同剂量栀子苷对大鼠肝脏的毒性，以及对其血清、肝组织及粪便中胆汁酸的影响。方法60只SD大鼠，雌雄各半，按体质量随机分成空白组及栀子苷（50，100，200，400 mg·kg-1）组，共5组，每组12只，每天灌胃给药1次，连续7 d，于第8天收集大鼠血清、肝组织和盲肠内容物。检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT），门冬氨酸氨基转移酶（AST），碱性磷酸酶（ALP）活性，白蛋白（ALB），总胆红素（TBIL），总胆汁酸（TBA），肌酐（Crea），尿素（Urea）含量，肝脏组织切片分别作苏木素-伊红（HE）染色，免疫组化检测细胞角蛋白7（CK7），细胞角蛋白19（CK19）蛋白表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）测定肝组织CK7，CK19蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1），胆固醇27α-羟化酶（CYP27A1），胆固醇12α-羟化酶（CYP8B1） mRNA表达情况，采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS）测定血清、肝脏及盲肠内容物中18种胆汁酸含量。结果与空白组比较，各剂量栀子苷组TBIL水平显著升高（P<0.01）；400 mg·kg-1栀子苷组ALT，AST活性和TBA含量明显升高（P<0.05，P<0.01）；HE染色表明，与空白组比较，栀子苷200，400 mg·kg-1组肝组织的汇管区有胆管反应，胆管周围有炎症细胞的浸润，尤以栀子苷400 mg·kg-1毒性明显。栀子苷400 mg·kg-1栀子苷组肝组织中CK7，CK19表达较空白组明显增加（P<0.05，P<0.01）。与空白组比较，400 mg·kg-1栀子苷组肝组织中甘氨熊脱氧胆酸（GUDCA），甘氨猪去氧胆酸（GHDCA）含量明显下降（P<0.05，P<0.01），牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA），猪去氧胆酸（HDCA），胆酸（CA），鹅去氧胆酸（CDCA）含量显著升高（P<0.01），甘氨胆酸（GCA），甘氨鹅去氧胆酸（GCDCA），甘氨脱氧胆酸（GDCA），甘氨石胆酸（GLCA），牛磺熊去氧胆酸（TUDCA），GUDCA，GHDCA，熊去氧胆酸（UDCA），牛磺石胆酸（TLCA）的含量占比降低，TCDCA，HDCA，CA，CDCA，脱氧胆酸（DCA）的占比增加；血清中GHDCA，石胆酸（LCA）含量显著下降（P<0.01），牛磺猪去氧胆酸（THDCA），牛磺胆酸（TCA），GCA，TCDCA，UDCA，CA，CDCA，DCA含量明显增加（P<0.05，P<0.01），CA/DCA显著升高（P<0.01），且CA与CDCA含量占比分别上升19.60%和4.63%；与空白组比较，400 mg·kg-1栀子苷组盲肠内容物中所有的胆汁酸含量均下降，其中GCA，UDCA，HDCA，GCDCA，GDCA，TLCA，GLCA，CDCA，DCA，LCA含量明显下降（P<0.05，P<0.01）。Real-time PCR结果显示，与空白组比较，400 mg·kg-1栀子苷组肝组织中CYP7A1，CYP27A1 mRNA表达明显增加（P<0.05，P<0.01）。结论400 mg·kg-1栀子苷灌胃，可导致大鼠明显的肝损伤，其肝脏、血清与粪便中胆汁酸发生显著改变，且同一种胆汁酸在肝脏、血清与粪便中的变化不尽相同。然而，由栀子苷所导致的肝损伤与体内胆汁酸变化间的因果关系尚不清楚，仍有待后续进一步研究给予阐明。  
        关键词：栀子苷;肝脏毒性;肝组织;血清;粪便;胆汁酸   
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        发布时间：2021-05-17
      • 樊青,关建红
        2021, 27(11): 76-82. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211192
        摘要：目的检测不同浓度豨莶草水洗脱部位（SWEF）对MRC-5人肺纤维细胞的毒性作用及对MRC-5细胞α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）表达与炎症因子的影响，从而发现豨莶草毒效与药效作用物质基础。方法以MRC-5细胞为研究对象，采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法结合流式细胞术、台盼蓝染色判定SWEF（1，6，10，20，50 g·L-1）对MRC-5细胞的毒效作用；通过测定沉默基因前后α7nAChR的表达及炎症因子水平的变化探讨SWEF对MRC-5细胞的药效作用。结果SWEF（≥6 g·L-1）显著降低MRC-5细胞的存活率（P<0.01），促进MRC-5细胞凋亡与坏死（P<0.01），其半数抑制浓度（IC50）为6.03 g·L-1；MRC-5细胞α7nAChR表达与炎症因子检测显示SWEF含有α7nAChR激动剂样物质，该物质可增高α7nAChR基因和蛋白的表达（P<0.05，P<0.01），降低炎症因子水平（P<0.05，P<0.01），SWEF下调炎症因子的作用可能与其上调α7nAChR mRNA表达有关，二者呈负相关（P<0.01）。结论SWEF（≥6 g·L-1）对MRC-5细胞具有显著的毒性作用，药效作用研究证实SWEF含有α7nAChR激动剂样物质，该物质可增高α7nAChR的表达，降低炎症因子水平，推测过量的α7nAChR激动剂样物质可能为豨莶草的毒性成分之一。  
        关键词：豨莶草;水洗脱部位;MRC-5人肺纤维细胞;α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）;炎症因子;细胞毒性;基因表达   
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        发布时间：2021-05-17
      • 何艺韵,殷亦男,曾海荣,祁丽丽
        2021, 27(11): 83-88.
        摘要：目的探讨柴胡皂苷A（SSA）逆转人肺癌顺铂（DDP）耐药株A549/DDP的作用及机制。方法细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测A549和A549/DDP对DDP的耐药性及SSA对A549和A549/DDP细胞活力的影响；流式细胞术检测A549/DDP凋亡率和细胞中活性氧（ROS）的变化；实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测C-myc，B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3） mRNA的表达情况；TopFish双荧光素酶报告基因检测β-连环蛋白（β-catenin）的转录活性；蛋白免疫印迹法（Western blot）法检测A549/DDP细胞中β-catenin蛋白的变化。结果CCK-8检测结果显示，A549/DDP的耐药性是A549的12.82倍，差异具有统计学意义（P<0.05），SSA能够抑制A549的细胞活力，其半数抑制浓度（IC50）为34.9 μmol·L-1。SSA抑制 A549/DDP细胞的活力并具有浓度依赖性，在20 μmol·L-1浓度时，对A549/DDP的抑制率<10%，选择20 μmol·L-1作为逆转浓度；流式结果显示，与空白组比较，DDP组A549/DDP的凋亡比例明显升高，细胞内活性氧的累积明显增加（P<0.05），与DDP组比较，SSA+DDP组A549/DDP的凋亡比例明显升高，细胞内活性氧的累积明显增加；与空白组比较，DDP组A549/DDP细胞中C-myc，Bcl-2 mRNA表达明显降低，Caspase-3 mRNA表达明显升高（P<0.05），与DDP组比较，SSA+DDP组C-myc，Bcl-2 mRNA表达明显降低，Caspase-3 mRNA表达明显升高（P<0.05）；与空白组比较，DDP组β-catenin的转录活性明显降低（P<0.05），与DDP组比较，SSA+DDP组β-catenin的转录活性明显降低（P<0.05）；与空白组和DDP组比较，SSA+DDP组β-catenin蛋白表达明显降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论柴胡皂苷A可以提高A549/DDP细胞对DDP的敏感性，其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活有关。  
        关键词：柴胡皂苷A;A549/DDP细胞;Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）   
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        发布时间：2021-05-17
      • 杨凤文,高飞,陈素枝,袁国栋,张倩,檀金川
        2021, 27(11): 89-97. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211004
        摘要：目的观察益气养阴活血通络方对糖尿病肾病（DN）大鼠Janus酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）/信号传导及转录激活因子3（STAT3）信号通路及细胞凋亡的影响，探讨其干预DN的作用机制。方法SD大鼠100只随机分为造模组80只，正常组20只，高糖高脂饮食联合一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病肾病大鼠模型。造模结束后每组随机处死3只大鼠，光镜和电镜下观察肾脏组织病理学变化确认造模成功。将造模成功的大鼠随机分为模型组（生理盐水，等体积）、益气养阴活血通络方低中高剂量组（益气养阴活血通络方，5.775，11.550，23.100 g·kg-1）和厄贝沙坦组（厄贝沙坦片，0.016 g·kg-1），各组分别给予相应剂量药物灌胃，每日1次，连续干预16周。给药结束后检测大鼠24 h尿蛋白（UTP）水平，血清总胆固醇（TC），甘油三酯（TG），肌酐（SCr），尿素氮（BUN）水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测JAK2/STAT3信号通路关键蛋白的表达水平；免疫组化法（IHC）检测大鼠肾组织中B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax），B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2），紧密连接相关蛋白-1（ZO-1），肌动蛋白4（actinin-4）蛋白表达水平。结果与正常组比较，模型组大鼠UTP，血清中TC，TG，BUN，SCr水平均有明显升高（P<0.05）；大鼠肾组织病理损伤严重；磷酸化JAK2（p-JAK2），磷酸化STAT3（p-STAT3），Bax蛋白表达水平明显上调；肾组织细胞凋亡明显增多；Bcl-2，ZO-1，actinin-4蛋白表达水平下调（P<0.05）。与模型组比较，益气养阴活血通络方和厄贝沙坦组大鼠UTP，血清中TC，TG，BUN，SCr水平均有不同程度的下降（P<0.05）；大鼠肾组织病理损伤有所减轻；p-JAK2，p-STAT3，Bax蛋白表达水平不同程度的下降；肾组织细胞凋亡减轻；Bcl-2，ZO-1，actinin-4蛋白表达水平不同程度的升高（P<0.05）。结论益气养阴活血通络方药可通过抑制JAK2/STAT3信号通路的激活，减轻肾脏细胞凋亡，改善DN的预后。  
        关键词：益气养阴活血通络方;糖尿病肾病（DN）;Janus酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）/信号传导及转录激活因子3信号通路（STAT3）;细胞凋亡   
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        发布时间：2021-05-17

        临床

      • 姚玉红,张华,李健,张君普,孙新宇
        2021, 27(11): 98-105. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211195
        摘要：目的观察加味黄芪鳖甲汤联合耳穴压豆治疗糖尿病周围神经病变气阴两虚证的疗效及对髓样分化因子（MyD88）/核转录因子-κB抑制蛋白（IκB）信号通路的影响。方法140例患者随机分为观察组和对照组，各70例。均给予患者饮食指导，控制空腹血糖、血压等基础治疗，观察组给予加味黄芪鳖甲汤联合耳穴压豆治疗，对照组给予甲钴胺治疗，疗程均为4周。治疗前后分别观察两组多伦多临床神经病变量表（TCSS），中医证候，运动及感觉神经（正中神经、腓总神经、胫神经、尺神经）传导速度，糖代谢指标［空腹血浆葡萄糖（FPG），餐后2 h血浆葡萄糖（2 h PG），糖化血红蛋白（HbA1c）］，肠道菌群（毛梭菌、布劳氏菌、拟杆菌、粪杆菌），血清MyD88/IκB信号通路［MyD88，IκBα，磷酸化核转录因子-κB抑制蛋白α（p-IκBα）］的水平。比较两组临床疗效及安全性。结果观察组总有效率85.3%（58/68），高于对照组的48.5%（32/66）（χ2=6.143，P<0.05）。与对照组治疗后比较，观察组TCSS，中医证候，FPG，2 h PG，HbA1c，毛梭菌，布劳氏菌，MyD88，p-IκBα降低（P<0.05），运动及感觉神经（正中神经、腓总神经、胫神经、尺神经）传导速度加快（P<0.05），拟杆菌，粪杆菌，IκBα升高（P<0.05）。观察组不良反应发生率1.5%（1/68），低于对照组的12.1%（8/66）（χ2=4.328，P<0.05）。结论加味黄芪鳖甲汤联合耳穴压豆可明显改善糖尿病周围神经病变气阴两虚证患者的临床疗效，其作用机制可能与调节血清MyD88/IκB信号通路有关。  
        关键词：加味黄芪鳖甲汤;耳穴压豆;糖尿病周围神经病变（DPN）;气阴两虚证;髓样分化因子（MyD88）/核转录因子-κB抑制蛋白（IκB）信号通路   
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        发布时间：2021-05-17
      • 马俊杰,周春祥,王小龙
        2021, 27(11): 106-111. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211091
        摘要：目的从调节血管周围间隙（PVS）角度研究龟鹿二仙胶干预阿尔茨海默病（AD）的效应机制，进而探索“精生髓”的科学内涵。方法80 例西医诊断为AD，中医诊断为肾虚髓空证的患者随机分成两组，每组 40 例。两组患者均口服胆碱酯酶抑制剂盐酸多奈哌齐片，每次1片（5 mg），于晚上睡前服用，在此基础上对照组给予安慰剂，治疗组采用龟鹿二仙胶治疗，疗程为 60 d，两组治疗前（第0天），治疗第31天及第61天分别采用简易智力状态量表（MMSE），韦氏成人记忆表 （WMS）和生活功能量表（ADL）进行评分，并进行头颅核磁共振成像（MRI）检查，计数中脑、基底节区、岛叶深部白质、半卵圆中心PVS的数目总和并测量其直径，此外，第61天根据MMSE评分评价疗效。结果两组各项指标在第31天时差异无统计学意义；第61天时，与各组第0天相比，两组MMSE评分，WMS评分升高，ADL评分下降，差异有统计学意义（P<0.01），两组间上述3项指标及临床有效率比较，差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01），此外，两组患者PVS数目与治疗前及组间比较差异无统计学意义，两组患者PVS直径与治疗前及组间比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论龟鹿二仙胶治疗AD疗效确切，且具有改善患者PVS直径的作用，此可能与该方参与“精生髓”的机制有关。  
        关键词：龟鹿二仙胶;阿尔茨海默病;血管周围间隙;精生髓   
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        发布时间：2021-05-17
      • 张芳,孙自学,邱荃,李鹏超,李新阳,赵沛沛
        2021, 27(11): 112-116. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210531
        摘要：目的观察益肾通络方治疗少弱精子型男性不育症肾虚瘀阻证的临床疗效及对血清性激素和精浆微环境的影响。方法将104例患者随机按数字表法分为观察组和对照组各52例。对照组口服复方玄驹胶囊，3粒/次，3次/d。观察组内服益肾通络方，1剂/d。两组疗程均为3个月，并随访3个月。记录6个月内配偶受孕情况；进行治疗前后精液参数检查和肾虚瘀阻证评分；检测治疗前后精浆锌、精浆果糖、精浆弹性蛋白酶、精浆酸性磷酸酶，精浆α葡糖苷酶水平及血清促卵泡生成素（FSH），促黄体生成激素（LH），泌乳素（PRT），睾酮（T）水平。结果在6个月观察期间，观察组配偶受孕率为22.00%高于对照组的10.00%，但差异无统计学意义（χ2=2.678，P>0.05）；观察组临床疗效优于对照组（Z=2.326，P<0.01）；观察组精子浓度、精子活率、精子活力、正常形态精子、直线运动速度均高于对照组（P<0.01）；观察组精浆锌、精浆果糖水平均高于对照组（P<0.01），肾虚瘀阻证评分低于对照组（P<0.01）；观察组血清FSH，LH，PRT水平均低于对照组（P<0.01），T水平高于对照组（P<0.01）；观察组精浆弹性蛋白酶低于对照组（P<0.01），精浆酸性磷酸酶，精浆α葡糖苷酶水平均高于对照组（P<0.01）。结论益肾通络方用于少弱精子型男性不育症肾虚瘀阻证患者可改善精子参数，调节性激素水平和精浆环境，有提高配偶受孕趋势，临床疗效值得进一步研究。  
        关键词：男性不育症;少精症;弱精症;肾虚瘀阻证;益肾通络方;性激素   
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        发布时间：2021-05-17
      • 白璐,苏锐,权兴苗,张晶晶,高东奇,王领弟,李青山,钟轩
        2021, 27(11): 117-122. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210431
        摘要：目的观察八珍汤加减对胃癌新辅助化疗（NAC）气血两虚证患者营养状况和免疫功能的影响。方法将110例患者按随机数字表法分为观察组和对照组各55例。两组患者均按FOLFOX6方案治疗。对照组口服健脾生血片，3片/次，3次/d；观察组内服八珍汤加减，1剂/d；两组疗程均为6周。进行治疗前后主观整体评估量表（PG-SGA），气血两虚证，Piper疲乏修订量表（PFS-R）评分；检测治疗前后血清总蛋白（TB），白蛋白（ALB），前白蛋白（PAB），CD4+，CD8+，辅助性T淋巴细胞17（Th17），调节性T细胞（Treg）和免疫球蛋白G（IgG），IgM，IgA水平；测量治疗前后体质量指数（BMI），去脂肪体质量指数（FFMI），记录体质量丢失量；进行抗癌药物急性或亚急性毒性反应评估。结果观察组营养不良程度低于对照组（Z=2.401，P<0.01）；观察组TB，ALB，PAB水平均高于对照组（P<0.01）；观察组CD4+，Treg和CD4+/CD8+均高于对照组（P<0.01），CD8+，Th17和Th17/Treg均低于对照组（P<0.01）；观察组IgM，IgA水平均高于对照组（P<0.01）；观察组PG-SGA评分和体质量丢失均低于对照组（P<0.01）；观察组BMI，FFMI均高于对照组（P<0.05），PFS-R和气血两虚证评分均低于对照组（P<0.01）；观察组恶心呕吐发生率45.45%（25/55），低于对照组的65.45%（36/55）（χ2=4.452，P<0.05）。结论八珍汤加减内服辅助用于胃癌NAC患者，可改善营养状况和免疫功能，促进免疫平衡，减轻临床症状和疲劳程度，降低化疗不良反应，值得临床使用。  
        关键词：胃癌;气血两虚证;新辅助化疗;八珍汤;营养状况;免疫功能   
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        发布时间：2021-05-17
      • 邓雄伟,乐海浪,陈德旺,胡和军
        2021, 27(11): 123-129. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211194
        摘要：目的探讨十全大补汤在气血两虚型高龄骨质疏松性股骨粗隆间骨折患者治疗中的应用价值，观察其对炎性指标及骨代谢指标的影响。方法所有病例均来自2018年4月至2020年4月于南昌市洪都中医院就诊的气血两虚型高龄骨质疏松性股骨粗隆间骨折患者，共98例，随机分为观察组（49例）和对照组（49例）。所有患者均行股骨近端防旋髓内钉（PFNA）内固定术治疗，对照组联合归脾丸口服治疗，观察组联合十全大补汤口服治疗，治疗4周后比较两组患者临床疗效、炎症及骨代谢指标、并发症发生情况等。结果治疗后观察组血清成纤维细胞生长因子-2（FGF-2），骨保护素（OPG），转化生长因子-β1（TGF-β1），β-内啡肽（β-EP），骨特异性碱性磷酸酶（BALP），骨钙素（BGP）等指标水平均明显高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）；治疗后观察组血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α），D-二聚体（D-D）明显低于对照组（P<0.05）；治疗后观察组中医症状积分低明显于对照组，髋关节功能评分（Harris评分）明显高于对照组（P<0.05）；观察组总有效率93.88%（46/49），高于对照组的75.51%（37/49），差异具统计学意义（χ2=6.376，P<0.05）；并发症方面，对照组切口感染、下肢深静脉血栓、肺部感染总发生率24.49%（12/49），高于观察组的6.12%（3/49），差异有统计学意义（χ2=6.607，P<0.05）。结论对于气血两虚型高龄骨质疏松性股骨粗隆间骨折患者而言联合十全大补汤口服有助于减轻炎症反应，调节骨代谢，促进骨质修复，降低并发症发生率。  
        关键词：十全大补汤;高龄患者;骨质疏松性股骨粗隆间骨折;气血两虚型;疼痛介质;炎性因子;骨代谢指标   
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        发布时间：2021-05-17

        药物代谢

      • 刘圣金,吴露婷,马瑜璐,房方,卞勇,单晨啸,杨文国,严辉,张志杰,奥乌力吉,段金廒
        2021, 27(11): 130-138. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210178
        摘要：目的研究青礞石对戊四氮（PTZ）点燃癫痫大鼠脑组织、血浆中金属元素的影响，探讨青礞石可能的效应物质基础。方法采用PTZ点燃法建立癫痫大鼠模型，运用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）和电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES）测定空白组、模型组、卡马西平组（0.1 g·kg-1）和青礞石组（2 g·kg-1）大鼠脑组织、血浆中的金属元素含量，实验数据用SPSS 18.0软件进行统计学分析。结果与空白组比较，模型组大鼠脑组织中Sr，Sb，Ba含量明显上升（P<0.05，P<0.01）；Zn，Fe，Cu，K，Li，Co，Sn，Pb含量明显下降（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，青礞石组大鼠脑组织中Zn，Fe，K，Li，Co，As，Pb含量明显上升（P<0.05，P<0.01）；Sr，Sb含量显著下降（P<0.01）。说明青礞石对大鼠脑组织中金属元素含量向正常水平的调节具有积极作用，干预效果明确，且总体效果优于卡马西平组。与空白组比较，模型组大鼠血浆中K，Sr，Cd含量明显上升（P<0.05）；Li，Al，Ti，Cr含量明显下降（P<0.05）。与模型组比较，青礞石组大鼠血浆中Ca，K，Li，Al，V含量明显上升（P<0.05，P<0.01）；Fe，Ti，Sr，Cd含量明显下降（P<0.05，P<0.01）。各组间金属元素相关性分析显示，大鼠脑组织中有17对元素存在显著正相关性，2对元素存在显著负相关性，大鼠血浆组织中有8对元素存在显著正相关性，6对元素存在显著负相关性。结论以Zn，Fe，K，Li，Co，As，Pb，Sr，Sb，Ca，Al，V，Ti，Cd为代表的金属元素群可能是青礞石干预PTZ点燃癫痫模型大鼠的效应物质基础，作用机制可能与这些金属元素群干预影响神经递质的释放及神经元的电平衡、调节离子（Na+，K+，Ca2+等）通道失常诱发的异常同步放电及干预癫痫相关代谢通路等有关，使兴奋与抑制活动相互牵制，最终达到神经元、细胞电平衡等趋于正常生理状态。青礞石组的干预作用总体优于卡马西平组。  
        关键词：矿物药;青礞石;癫痫;戊四氮（PTZ）;脑组织;血浆;金属元素;物质基础   
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        发布时间：2021-05-17
      • 康立欣,许振鹏,刘艳,杨靖,杨炳友,匡海学
        2021, 27(11): 139-146. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211050
        摘要：目的应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱质谱法（UPLC-Orbitrap Fusion Lumos Tribrid-MS）分析关黄柏水提物在正常大鼠血清、尿液及粪便中的原型成分及其代谢物，探讨关黄柏在大鼠体内的药效物质基础。方法采用ACQUITY UPLC® CSHTM C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱（0~15 min，2%~25%B；15~25 min，25%~50%B；25~28 min，50%~98%B），流速0.3 mL·min-1，进样量10 μL，柱温40 ℃。运用加热电喷雾离子源（HESI），扫描范围m/z 100~1 000，正离子模式采集数据。通过比较给药后样品和空白样品的差异，对灌胃给予关黄柏水提物后大鼠血清、尿液和粪便中的原型成分及其代谢产物进行鉴定。结果灌胃给予关黄柏水提物后，从大鼠血清、尿液及粪便中鉴定和表征了70个外源性成分，包括15个原型成分和55个代谢产物。其中15个原型成分包括12个生物碱和3个柠檬苦素，55个代谢产物包括52个生物碱和3个柠檬苦素。关黄柏水提物在大鼠体内的代谢途径主要包括脱饱和、甲基化、氧化、硫酸化及葡萄糖醛酸结合等反应。结论生物碱在大鼠体内进行Ⅰ相代谢和Ⅱ相代谢，柠檬苦素类在大鼠体内主要进行Ⅰ相代谢，可为进一步解析关黄柏体内过程，阐明其药效物质基础提供实验依据。  
        关键词：关黄柏;生物碱;超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱质谱法（UPLC-Orbitrap Fusion Lumos Tribrid-MS）;原型成分;代谢产物;柠檬苦素类;大鼠   
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        发布时间：2021-05-17

        药学基础

      • 赵鑫,崔月莉,吴鹏,张智慧,王悦,张学兰
        2021, 27(11): 147-154. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210151
        摘要：目的比较远志与炆远志对心肾不交型失眠大鼠学习记忆、下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）功能及神经递质的调控作用。方法多因素共同刺激致大鼠心肾不交失眠模型，造模结束后，给药组灌胃给予远志与炆远志提取物（给药剂量8 g·kg-1·d-1），正常组和模型组给予等体积生理盐水，连续灌胃7 d。采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力的变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定各组大鼠血清中促肾上腺皮质激素释放激素（CRH），促肾上腺皮质激素（ACTH），皮质醇（CORT）水平；超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定大鼠下丘脑中5-羟色胺（5-HT），多巴胺（DA），γ-氨基丁酸（GABA）及谷氨酸（Glu）的含量。结果与正常组比较，模型组大鼠空间学习记忆能力下降，在目标象限停留的次数和时间明显减少（P<0.05，P<0.01）；血清中CORT，CRH，ACTH水平显著升高（P<0.01）；下丘脑组织中GABA，DA，5-HT含量显著降低（P<0.01），Glu含量显著升高（P<0.01）。与模型组比较，远志与炆远志组大鼠空间学习记忆能力提高，在目标象限停留的次数和时间显著增加（P<0.05，P<0.01）；血清中CORT，CRH，ACTH水平明显降低（P<0.05，P<0.01）；下丘脑组织中GABA，DA，5-HT含量明显升高（P<0.05，P<0.01），Glu含量明显降低（P<0.05）；炆远志组各指标恢复程度均优于远志组。结论远志与炆远志均可提高心肾不交型失眠大鼠的学习记忆能力，改善HPA轴功能，调节中枢神经递质水平，从而起到安神益智的功效，且炆远志作用优于远志。  
        关键词：远志;炆远志;失眠;下丘脑-垂体-肾上腺轴;神经递质;超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）   
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        发布时间：2021-05-17
      • 卢雪蕊,史中飞,滕宝霞,倪琳,杨平荣,宋平顺
        2021, 27(11): 155-161. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210448
        摘要：目的由于中药材传统真伪鉴别方法的局限性，本研究拟通过位点特异性聚合酶链式反应（PCR）建立一种能够快速鉴别桃仁中掺有苦杏仁的方法。方法通过比对苦杏仁与桃仁的核糖体DNA内转录间隔区（ITS）基因序列，寻找单核苷酸多态性（SNP）位点并设计特异性鉴别引物。利用不同的苦杏仁和桃仁样品进行PCR扩增，对影响PCR反应体系的退火温度、引物浓度、循环数等条件进行优化，并对该方法的专属性和检出限进行了考察。另外，利用建立的PCR鉴别方法对不同来源和不同产地桃仁中掺有不同比例苦杏仁的样品进行检测，以验证该方法的稳定性和准确性。结果建立了桃仁中掺混苦杏仁的特异性PCR鉴别方法，在退火温度63 ℃和引物循环数30个时仅有苦杏仁能扩增得到432 bp的特异性条带，桃仁样品则无此条带。该方法对苦杏仁的最低检出限为0.2 ng，其对桃仁中掺入苦杏仁的检出限为1%，可用于日常桃仁中掺混苦杏仁的检测。结论建立的位点特异性PCR方法能够准确地检测桃仁中是否掺有苦杏仁，可为桃仁的质量控制提供实验依据，以保障其临床用药安全。  
        关键词：桃仁;苦杏仁;核糖体DNA内转录间隔区（ITS）;基因序列;聚合酶链式反应（PCR）;单核苷酸多态性（SNP）位点;特异性引物   
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        发布时间：2021-05-17
      • 郭宁,赵雍,孙奕,王安琪,徐凌川,梁爱华
        2021, 27(11): 162-170. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210499
        摘要：目的建立朱砂莲块根中马兜铃酸类成分的定性与定量测定方法。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法（UPLC-QTOF-MS/MS）对朱砂莲块根进行定性与定量分析，检测条件ACQUITY UPLC-BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相梯度洗脱（0~1 min，10%B；1~9 min，10%~30%B；9~11 min，30%~50%B；11~15 min，50%~90%B），流速0.45 mL·min-1，柱温35 ℃，检测波长250 nm；电喷雾电离源（ESI），正离子模式检测。同时，建立了21批朱砂莲样品中马兜铃酸类成分的UPLC指纹图谱，根据指纹图谱分析结果，测定了不同产地和不同采收期朱砂莲样品中5个马兜铃酸类成分的含量。结果结合文献信息和质谱数据，一共鉴定了朱砂莲中17个马兜铃酸类化合物，包括8个马兜铃酸，7个马兜铃内酰胺和2个4，5-二羰基阿朴菲类生物碱。UPLC指纹图谱中指认了10个共有峰，分别为朱砂莲苷，马兜铃内酰胺Ⅰa-N-β-D-葡萄糖苷，马兜铃酸Ⅳa-O-β-D-葡萄糖苷，马兜铃内酰胺Ⅲa-N-β-D-葡萄糖苷，马兜铃内酰胺Ⅰ-N-β-D-葡萄糖苷，马兜铃酸C，马兜铃酸D，马兜铃酸Ⅱ，马兜铃内酰胺Ⅰ，马兜铃酸Ⅰ。定量分析结果显示，马兜铃酸Ⅰ，Ⅱ，C，D及马兜铃内酰胺Ⅰ在线性范围内呈良好的线性关系，精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<3.0%，加样回收率范围在97.06%~101.84%（RSD<3.0%）。21批朱砂莲中马兜铃酸Ⅰ，马兜铃酸Ⅱ，马兜铃酸C，马兜铃酸D，马兜铃内酰胺Ⅰ的质量分数范围分别为0.938 6~3.567 5，1.377 6~3.688 1，0.056 3~0.527 7，0.108 8~0.305 5，0.021 0~0.081 7 mg·g-1。结论朱砂莲中马兜铃酸类成分的含量存在一定差异，马兜铃酸Ⅰ和Ⅱ的含量要高于其他马兜铃酸类成分。建立的分析方法快速简便、准确可靠，可为朱砂莲的质量控制与评价提供参考。  
        关键词：朱砂莲;马兜铃酸类成分;超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法（UPLC-QTOF-MS/MS）;指纹图谱;马兜铃内酰胺;4，5-二羰基阿朴菲类生物碱   
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        发布时间：2021-05-17
      • 罗传红,廖维,袁瑞芳,谭鹏,高继海,魏夕川,黄浩洲,贺亚男,林俊芝,韩丽,张定堃
        2021, 27(11): 171-179. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210715
        摘要：目的为余甘子商品规格等级划分提供科学依据。方法收集当前市场流通余甘子共计30批，提取直径、厚度、粒重、表皮颜色L*，a*，b*值为外观指标进行量化测量，采用高效液相色谱法测定没食子酸、柯里拉京、诃黎勒酸、鞣花酸的含量，利用描述统计分析、方差分析、主成分分析确定各鉴别主征重要程度，探索外观指标与内在成分的相关性，制定余甘子商品等级划分标准，运用肝癌HepG2细胞实验验证其科学性。结果相关性分析结果表明，表皮颜色L*，a*，b*值与柯里拉京、诃黎勒酸、鞣花酸呈极显著负相关（|r|>0.5，P<0.01），与没食子酸相关性不强（|r|<0.1），综合考虑各指标的变异系数、主成分分析结果及没食子酸作为《中华人民共和国药典》余甘子质控指标，最终确定表皮颜色L*，a*，b*值、没食子酸含量作为分级指标；根据K-均值聚类分析结果，当同时满足表皮颜色L*<44，a*<7，b*<10，没食子酸含量>1.6%可判定为一等品；当不能同时满足上述条件判定为二等品。肝癌HepG2细胞实验表明一等品半抑制浓度（IC50值）低于二等品。此外，利用表皮颜色L*，a*，b*值制定比色卡，为余甘子商品等级的现场评价提供了可视化工具。结论该研究初步建立了余甘子商品等级标准，有利于引导余甘子商品市场流通分档议价、优质优价。  
        关键词：余甘子;商品等级;品质评价;比色卡;没食子酸   
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        发布时间：2021-05-17
      • 陈巧环,苗玉焕,王铁霖,郭兰萍,刘大会
        2021, 27(11): 180-186. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210713
        摘要：目的探究患枯萎病菊花与健康菊花根际土壤微生物群落的差异。方法以患病菊花植株和健康菊花植株根际土壤为研究材料，采用高通量测序技术对患病植株和健康植株样本的细菌16S rDNA和真菌内部转录间隔区（ITS）基因进行序列测定并进行数据分析。结果枯萎病的发生降低了菊花根际土壤中细菌种群的丰富度和多样性程度，但对根际土壤中的真菌α-多样性无明显影响。菊花健康植株根际土壤细菌微生物中酸杆菌门、芽单胞菌门、硝化螺旋菌门占比高于患病植株，而变形菌门、拟杆菌门占比低于患病植株（P<0.05）。菊花患病植株根际土壤中镰刀菌属（Fusarium）真菌占比分别为27.49%，14.53%，11.94%，而健康植株镰刀菌属真菌占比分别为0.47%，1.01%，0.67%。菊花患病植株根际土壤中会出现细菌性致病菌果胶杆菌属（Pectobacterium）和菊迪基氏菌属（Dickeya），而健康植株根际土壤中硝化类细菌、解毒类细菌、光合细菌等丰度高于患病植株。结论患有枯萎病地块菊花植株根际土壤微生物中细菌的物种多样性和丰富度降低，并大量富集镰刀菌属致病真菌和积累果胶杆菌属与菊迪基氏菌属致病细菌，而健康菊花植株根际土壤微生物有益菌占比明显高于患病植株。  
        关键词：菊花;枯萎病;根际土壤;微生物群落;高通量测序   
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        发布时间：2021-05-17
      • 冯美茹,施文广,李佳琪,陈丹婷,付英豪,邓祖军
        2021, 27(11): 187-194. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210714
        摘要：目的分析白花曼陀罗各部位内生真菌的类群结构与多样性，并筛选出具有抗皮肤真菌的活性菌株，为寻找新的抗皮肤真菌先导化合物提供菌株资源。方法采用组织块法对白花曼陀罗根、茎、叶3个部位的内生真菌进行分离，结合形态学和rDNA-内转录间隔区（ITS）序列分析法对内生真菌进行鉴定，利用琼脂扩散法分析其抗皮肤真菌活性。结果该研究从白花曼陀罗中分离到292株内生真菌，隶属于34个属，其中根部内生真菌的优势类群为镰刀菌属（Fusarium）占72.97%，茎部以镰刀菌属（37.25%）和Plectosphaerella（28.43%）为主要类群，而炭疽属（Colletotrichum）在叶部的比例最高，达39.66%；叶部内生真菌的分离率（89.23%），定殖率（84.62%）和多样性指数（1.82）明显高于根（70.48%，70.48%，1.23）和茎（69.39%，68.03%，1.64）。35代表性内生真菌发酵液的抗皮肤真菌活性结果表明，它们对犬小孢子菌，黏性毛孢子菌，红毛癣菌、白色念珠菌等皮肤致病真菌的具有抑制作用的菌株分别占总数的97.14%，71.43%，45.71%，25.71%，其中有6株（17.14%）对4种皮肤致病真菌均具有抑制活性，它们分别是Fusarium sp. R1，Penicillium sp. R5，Aspergillus sp. R7，Metarhizium sp. S18，Diaporthe sp. S19和Glomerella sp. L57。结论白花曼陀罗内生真菌具有丰富的物种多样性，其中存在较高比例的具抗皮肤真菌活性菌株，为寻找新的抗皮肤真菌药物提供了菌株资源。  
        关键词：白花曼陀罗;内生真菌;多样性;抗皮肤真菌活性   
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        发布时间：2021-05-17

        数据挖掘

      • 赵丽君,马艳苗,梁凯,吴梦雪,崔亚新,范建新,李震宇,彭涛
        2021, 27(11): 195-204. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210416
        摘要：目的通过芯片分析联合网络药理学及其实验验证，阐明淫羊藿干预乳腺癌干细胞（BCSCs）的潜在分子标志物和药物-化合物-靶点机制。方法在中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）检索相关药物信息，获得淫羊藿的活性成分和潜在靶点。在基因表达综合（GEO）数据库检索“Breast Cancer Stem Cells”，通过分析与筛选，获取GSE98239芯片数据，使用GEO2R在线分析工具获取其差异基因，绘制差异基因热图和火山图。通过Cytoscape 3.8.0构建淫羊藿干预乳腺癌干细胞差异基因网络图，并进行药物与疾病基因的基因本体（GO）和京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析。将人乳腺癌MDA-MB-231细胞分为20%，40%，60%淫羊藿含药血清组和对照组，通过细胞增殖与活性检测（CCK-8），蛋白免疫印迹法（Western blot）检测淫羊藿含药血清干预MDA-MB-231后，对其活性和乳腺癌细胞中靶蛋白表达量的影响。结果获得淫羊藿含有的黄酮、甾醇、生物碱及倍半萜类活性成分23个，发现其与乳腺癌干细胞中的B细胞淋巴瘤-2样蛋白1（BCL2L1），基质金属蛋白酶2（MMP2），人前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2），血管内皮生长因子（VEGF）A，转化生长因子β受体Ⅰ（TGFBR1）等枢纽基因相互作用，参与诱导新的血管生成、细胞迁移，使BCSCs持续自我更新而凋亡减少并发生细胞迁移，从而促进乳腺癌的复发和转移。KEGG结果显示，淫羊藿干预pathway in cancer信号通路中转化生长因子β（TGF-β），VEGF，胞内磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt），丝裂原活化蛋白激酶（MAPK），哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）亚通路的多个差异表达基因（DEGs）来发挥其干预乳腺癌干细胞的功效。实验表明，淫羊藿含药血清干预后乳腺癌细胞存活率显著降低，乳腺癌细胞中TGFBR1和Smad2表达量显著降低（P<0.01）。结论淫羊藿不同浓度含药血清中的多个组分，能够协同作用于乳腺癌干细胞的目标差异表达基因，并通过下调TGF-β通路中关键分子TGFBR1及下游信号Smad2蛋白的表达水平，从而发挥抑制乳腺癌细胞增殖的作用。  
        关键词：网络药理学;芯片分析;淫羊藿;乳腺癌干细胞;作用机制   
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        发布时间：2021-05-17
      • 贾丽阳,邓冬,屈瑶,孙丽华,卜建宏,陈振翼,叶苗青,方邦江
        2021, 27(11): 205-212. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210613
        摘要：目的评价中药方剂内服治疗耐药细菌性肺炎的临床疗效及安全性。方法计算机检索国内外常用数据库共8个，由2名研究者独立筛选文献、提取资料，并对纳入研究的文献进行方法学质量评价后，采用RevMan 5.3软件对结局指标进行Meta分析。结果共纳入24项研究，涉及病例1 818例。Meta分析结果显示，中药方剂内服联合西医常规疗法组在总有效率［相对危险度（RR）=1.27，95%置信区间（CI）（1.21，1.34），P<0.000 01］，耐药菌清除率［RR=1.49，95% CI（1.33，1.66），P<0.000 01］，临床肺部感染评分（CPIS）变化［均数差（MD）=-1.64，95%CI（-1.87，-1.41），P<0.000 01］方面均优于单纯西医常规治疗组，在不良反应发生率方面两者差异无统计学意义［RR=0.72，95% CI（0.48，1.07），P=0.1］。此外，与单纯西医常规治疗相比，中药方剂内服干预在总有效率，CPIS变化方面也有一定优势。结论从目前的研究结果来看，中药方剂内服或联合西医常规疗法比单纯西医常规方法治疗耐药细菌性肺炎有更好的临床疗效，且不会增加不良事件发生率。受纳入研究数量和质量限制，上述结论尚待更多高质量研究予以验证。  
        关键词：中药方剂;耐药细菌性肺炎;系统评价;Meta分析;随机对照试验   
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        发布时间：2021-05-17
      • 李飞飞,李颉,崔庆科,李华
        2021, 27(11): 213-221. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210612
        摘要：目的采用网络药理学方法全面系统筛选缩泉丸治疗小儿遗尿的作用靶点及相关信号通路，并通过动物实验进一步明确其作用机制。方法利用中药系统药理学数据库TCMSP筛选缩泉丸的有效化学成分，整合多种系统生物数据库构建“活性成分-疾病-靶点”网络关系，对共有蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络基因进行功能富集分析，对核心靶点进行动物实验验证。结果缩泉丸包含32个活性成分，包括波尔定碱、去甲波尔定、乌药醇、谷甾醇等，这些活性成分与遗尿症相关的131个潜在靶点蛋白发生相互作用，其中包含14个核心靶点基因，抗利尿激素2型受体V2R（AVPR2），神经营养酪氨酸受体激酶1（NTRK1），多巴胺D2受体（DRD2），μ阿片受体（OPRM1），5-羟色胺受体1A（HTR1A），5-羟色胺受体1B（HTR1B），5-羟色胺转运体蛋白基因（SLC6A4），α2A肾上腺素能受体（ADRA2A），前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2），胆碱能毒蕈碱M2受体（CHRM2），多巴胺转运体蛋白基因（SLC6A3），5-羟色胺受体6（HTR6），去甲肾上腺素转运体基因（SLC6A2）和细胞色素P450 2C19（CYP2C19）等。富集分析主要涉及G蛋白偶联受体信号通路、跨突触信号调节、神经递质转运调节、神经活性配体-受体相互作用。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹分析结果显示，缩泉丸能显著增强大鼠肾脏内AVPR2 mRNA和蛋白的表达，而减弱肾上腺组织中DRD2 mRNA和蛋白的表达。结论缩泉丸中主要化学成分可能通过调节AVPR2，DRD2等关键基因，参与G蛋白偶联受体信号通路、跨突触信号调节、神经递质转运等生物过程来改善小儿遗尿。  
        关键词：缩泉丸;小儿遗尿;网络药理学;抗利尿激素2型受体V2R;多巴胺D2受体   
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        发布时间：2021-05-17

        综述

      • 林王敏,翁倩倩,邓爱平,赵佳琛,张悦,王海洋,任亚风,张水利,俞冰,詹志来,黄璐琦
        2021, 27(11): 222-232. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210165
        摘要：通过查阅古籍及现代文献，对淡豆豉的历史演变、古今发酵工艺对比和关键环节控制进行了系统的梳理，分析并总结了淡豆豉的品质影响因素及其控制方法，以期为淡豆豉质量控制研究提供参考依据。经分析后发现，在淡豆豉的发酵过程中，发酵菌种、杂菌、温度和湿度等均为影响其品质的重要因素，“后酵”过程的条件控制更是被历代本草重点关注。此外，古代认可的“香美之豉”是以霉菌为优势菌发酵而成，发酵霉菌的选育和使用应是解决淡豆豉品质问题的要点。因此，基于历代本草所载 “香”和“美”的评价指标深入研究和优化菌种、温度、湿度等工艺条件对提高淡豆豉的品质具有重要意义。  
        关键词：淡豆豉;发酵工艺;历史沿革;品质评价;过程控制;霉菌;基因工程   
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        发布时间：2021-05-17
      • 刘巧,郭延丽,董泰玮,高峰,李敏,欧莉,张磊,卫培峰
        2021, 27(11): 233-239. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210626
        摘要：补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia的干燥成熟果实。性温，味辛、苦，归肾、脾经。主要功效为温肾助阳、纳气平喘、温脾止泻等；外用可消风祛斑。临床上主要用于治疗肾虚阳痿、腰膝酸软冷痛、白癜风等。目前已有的研究表明补骨脂具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗炎、促进骨骼生长、保护心血管等多种药理作用。但同时，较多的国内外研究发现，长时间或大剂量服用补骨脂及其复方可导致肝损伤、光损伤、肾损伤等，其中最为常见的则是补骨脂致肝损伤，关于补骨脂致损伤的临床报道大部分均为致药物性肝损伤事件，这使得补骨脂在临床中的使用受到了限制，从而不能很好地发挥其应有的治疗作用。因此，充分了解补骨脂产生肝损伤的机制及减毒方法尤为重要。该文通过查阅近年来国内外报道补骨脂产生肝损伤的相关文献，对补骨脂致肝损伤临床报道、肝损伤成分、毒理机制及减毒方法4个方面进行综述，分别从胆汁酸淤积、氧化应激反应、线粒体损伤、肝脂肪变形等方面对补骨脂的肝损伤进行了论述，并从配伍减毒与炮制减毒等方面对补骨脂致肝损伤的减毒方法进行总结，旨在全面客观地阐明补骨脂致肝损伤的潜在机制和减毒方面的研究进展，以期为补骨脂致肝损伤的进一步研究及临床合理用药提供理论依据。  
        关键词：补骨脂;肝损伤;毒性成分;机制研究;减毒方法   
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        发布时间：2021-05-17
      • 李艳春,李嘉鑫,杨宇峰,石岩
        2021, 27(11): 240-245. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211196
        摘要：“五行相生相克理论”是中医学的基本理论之一，究其根本即治病必求于本。该理论始于《黄帝内经》，在《金匮要略》多个篇章中均有所运用，后世医家在此基础上继续探索，不断加以充实和完善，目前已应用于临床多个学科。糖尿病肾病作为糖尿病最常见的并发症之一，其病程长，症状繁多，同时也是糖尿病致死、致残的主要原因之一。目前西医治疗存在一定的局限性，尚无特效药物，其中医病因病机十分复杂且与五脏密切相关，医治糖尿病肾病不仅仅局限于肾脏本身，更要兼顾其他脏器对糖尿病肾病影响。基于此本文从“五行相生相克理论”理论出发，认为糖尿病肾病发生的基础因素为肾虚，脾虚是中心环节，肺失通调是重要条件。此外，心火过旺，肝失疏泄与本病的发生亦有一定的关系，临床上应根据糖尿病肾病患者所处不同证型所表现出的不同证候采用相生相克的治法进行治疗，即脾肾阳虚证时用益火补土法、肝肾阴虚用滋水涵木法、肺肾阴虚用金水相生法、肺脾气虚用培土生金法、心肾不交用泻南补北法、脾虚水盛用培土制水法，从而给予及时有效的治疗与干预，延缓其向终末期肾脏病的发展，提高临床疗效。本文从中医传统理论角度对五行相生相克理论在糖尿病肾病中的应用进行了论述，以期为今后临床应用提供理论依据，以及新的诊疗思路。  
        关键词：五行相生相克;糖尿病肾病;辨证论治   
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        发布时间：2021-05-17
      • 谢逸轩,王赛,刘浩哲,朱飞鹏,苗明三
        2021, 27(11): 246-250. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211003
        摘要：膀胱炎是泌尿系统最常见的疾病之一，临床患者主要表现为尿频、尿急、尿痛，也被称为“膀胱刺激三联征”，尤以女性多见。近年来，随着人们生活方式改变，我国膀胱疾病患病率逐年递增，该文根据膀胱炎中西医病因病机及临床病症的特点，查阅相关文献整理出临床诊断标准，通过对现有膀胱炎动物模型的分析，评价模型与临床表现吻合度，总结优缺点。发现“腹腔注射环磷酰胺”以及“弗氏完全佐剂+膀胱插管”具有较高吻合度，但也存在耗时长，费用高等不足之处。目前膀胱炎模型中诊断标准大多以西医检测指标为主，有关类型明确诊断依据还需依赖于膀胱镜检查+组织活检，因中医证候模型的缺乏也给中医药研究带来了局限性，且中医动物模型评价方法“四诊”因其易受主观因素影响，不能够很好的应用在动物模型上，可通过一些行为学测试来判定模型指标，制定相关行为参数评分量表。因此建立既符合西医临床病症特点也符合中医辨证的膀胱炎动物模型是当下所需，以更好地促进膀胱炎的研究。  
        关键词：膀胱炎;临床病症;动物模型   
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        发布时间：2021-05-17
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