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最新刊期
2021
年
第
27
卷
16
期
本期电子书
封面故事
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经典名方
探讨四神丸、白头翁汤、连理汤对溃疡性结肠炎大鼠的影响
巩子汉,张玲,刘丽梅,卢贺起,刘振丽,柏冬,王瑞海,岳广欣
2021, 27(16): 1-8. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211504
摘要:目的探讨温方(四神丸)、清方(白头翁汤)、温清并用方(连理汤)治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制,比较温、清、温清并用方对UC大鼠的作用差异。方法将90只清洁级SD大鼠随机分为正常组和造模组,造模组采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法复制UC模型,将造模大鼠按随机数字表法分为模型组,阳性药组(柳氮磺吡啶,SASP),四神丸组,白头翁汤组和连理汤组,共5组。正常组和模型组大鼠给予2 mL·d
-1
蒸馏水灌胃,四神丸、白头翁汤和连理汤组分别给予1.76,1.40及2.13 g·kg
-1
·d
-1
的对应中药灌胃,SASP组给予SASP 0.4 g·kg
-1
·d
-1
灌胃,各组给药量为2 mL·d
-1
,干预14 d。对各组大鼠结肠黏膜损伤程度评分及病理、细胞因子芯片进行检测,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血浆游离甲状腺激素(FT
3
),胰高血糖素样肽-1(GLP-1),皮质酮(CORT)及结肠组织神经降压素(NT),P物质(SP),血管活性肠肽(VIP),生长抑素(SST)含量。结果与正常组比较,UC大鼠结肠质量长度比及黏膜损伤评分显著升高(P<0.01);出现大量淋巴细胞浸润、肠绒毛紊乱甚至消失等现象;组织中性粒细胞趋化因子-1/2α/β/3(CINC-1/2α/β/3),白细胞介素-1α(IL-1α)及干扰素诱导蛋白10(IP-10)等因子含量显著升高(P<0.05);血浆CORT,GLP-1含量显著降低(P<0.05),组织SP含量显著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠结肠黏膜损伤减轻,连理汤、四神丸组大鼠IL-1α,IP-10,脂多糖诱导性C-X-C趋化因子(LIX),L选择素(L-selectin)等因子含量显著降低(P<0.05),白头翁汤组大鼠CINC-3,白细胞介素-17(IL-17)等因子含量显著降低(P<0.05),SASP组大鼠CINC-1/3,IL-1α,IP-10等因子含量显著降低(P<0.05);连理汤大鼠血浆FT
3
含量显著升高,连理汤、四神丸及白头翁汤大鼠血浆GLP-1含量显著升高(P<0.05);四神丸及白头翁汤大鼠结肠组织VIP含量显著降低(P<0.05),SASP大鼠结肠组织SST含量显著升高(P<0.01)。结论连理汤、四神丸、白头翁汤对UC的干预较为明显,其作用机制可能通过调控细胞因子网络实现对炎症反应的抑制及免疫平衡实现的,且连理汤作用较为明显,四神丸次之,白头翁汤再次之。
关键词:四神丸;白头温汤;连理汤;溃疡性结肠炎;细胞因子芯片;大鼠
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发布时间:2021-07-20
芍药汤通过抑制HIF-1
α
调节Th17/Treg平衡治疗溃疡性结肠炎
吴东升,曹晖,张彧,李梓菡,芦易
2021, 27(16): 9-15. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211503
摘要:目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在溃疡性结肠炎辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡中的作用及芍药汤的干预机制。方法将48只SD大鼠随机分为正常组,模型组,美沙拉嗪组(0.42 g·kg
-1
),芍药汤组(11.1 g·kg
-1
),抑制剂组(2-甲氧基雌二醇,0.015 g·kg
-1
),芍药汤+抑制剂组,采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导溃疡性结肠炎模型,各组分别对应给予生理盐水,美沙拉嗪,芍药汤,抑制剂及芍药汤+抑制剂治疗7 d,观察各组大鼠一般情况和疾病活动指数,采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理学改变,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中白细胞介素-10(IL-10),IL-17,IL-23水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织叉头状/翼状螺旋转录因子P3(FoxP3),维甲酸相关孤儿受体(RORγt),HIF-1α蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠疾病活动指数(DAI)评分,肠黏膜病理学评分显著升高(P<0.01),血清中的IL-10水平显著降低(P<0.01),IL-17和IL-23显著升高(P<0.01),结肠RORγt及HIF-1α蛋白水平显著升高(P<0.01),FoxP3蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,芍药汤组DAI评分,肠黏膜病理学评分降低(P<0.05,P<0.01),血清中IL-10水平升高(P<0.01),IL-17,IL-23降低(P<0.01),结肠RORγt及HIF-1α蛋白水平降低(P<0.01),FoxP3蛋白表达升高(P<0.01);与抑制剂组比较,芍药汤组及芍药汤+抑制剂组RORγt,FoxP3及HIF-1α蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论芍药汤可以有效治疗溃疡性结肠炎,其作用机制可能与抑制HIF-1α来调节Treg/Th17的重新平衡相关。
关键词:溃疡性结肠炎(UC);芍药汤;辅助性T细胞17(Th17);调节性T细胞(Treg);缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)
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发布时间:2021-07-20
葛根芩连汤三氯甲烷提取物缓解伊立替康所致肠毒性的作用机制分析
吴亿晗,成颜芬,王迪,杨晓琴,钟雪梅,林洁,傅超美,章津铭,胡一晨
2021, 27(16): 16-23. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210577
摘要:目的基于经典名方葛根芩连汤“解表清里、主协热下利”的功效,制备葛根芩连汤三氯甲烷提取物用于缓解伊立替康所致的肠毒性,为经典名方葛根芩连汤的开发与应用提供实验依据。方法60只小鼠随机分为正常组、模型组、洛哌丁胺组(阳性药盐酸洛哌丁胺胶囊,0.4 mg·kg
-1
)和葛根芩连汤三氯甲烷提取物高、低剂量组(2.3,1.16 g·kg
-1
)。采用盐酸伊立替康(CPT-11,剂量55 mg·kg
-1
)连续4 d腹腔注射制备小鼠迟发性腹泻模型,正常组注射等体积生理盐水;分别在第5天灌胃给予相应药物,正常组和模型组给予相应体积蒸馏水,连续给药5 d。观察各组小鼠的一般情况,计算腹泻指数。运用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠结肠组织病理变化,按试剂盒说明书检测结肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),环氧合酶-2(COX-2),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),一氧化氮(NO)的含量。同时,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠结肠组织的Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1),核转录因子E
2
相关因子2(Nrf2),紧密连接蛋白-1(ZO-1),血红素氧合酶-1(HO-1),紧密连接蛋白(Occludin)表达情况。结果与正常组比较,模型组经腹腔注射CPT-11造模后小鼠体质量显著降低(P<0.01),腹泻指数显著升高(P<0.01),结肠组织中TNF-α,IL-1β,COX-2,ICAM-1,MDA,NO含量显著升高(P<0.01),GSH-Px,SOD显著降低(P<0.01);HE染色显示,模型组小鼠结肠可见大量炎性细胞,结肠黏膜可见缺损、肿胀、出血及炎性渗出;结肠组织Keap1,Nrf2,ZO-1,HO-1与Occludin蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,洛哌丁胺组和葛根芩连汤三氯甲烷提取物高、低剂量组可缓解小鼠体质量降低,且腹泻指数明显下降;TNF-α,IL-1β,COX-2,ICAM-1,MDA,NO水平降低,GSH-Px和SOD含量显著上升;HE染色显示,葛根芩连汤三氯甲烷提取物高、低剂量组细胞紧密排列,胞核清晰;结肠组织屏障功能相关蛋白Keap1,Nrf2,HO-1,Occludin,ZO-1表达升高。结论葛根芩连汤三氯甲烷提取物可能通过调节炎症及氧化应激来增强肠道屏障功能,进而缓解CPT-11所致迟发性腹泻,可为中药缓解化疗药物的毒副作用提供参考,并且为经典名方的开发提供依据。
关键词:葛根芩连汤;盐酸伊立替康(CPT-11);肠毒性;氧化应激;炎症;迟发性腹泻;洛哌丁胺;肿瘤
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发布时间:2021-07-20
经典名方易黄汤物质基准的量值传递分析
毕嘉谣,田湾湾,张翼,杨麒琳,王迪磊,杜守颖,白洁
2021, 27(16): 24-31. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210488
摘要:目的以指纹图谱、指标成分含量及出膏率为评价指标探索饮片-物质基准的量值传递关系,考察15批易黄汤物质基准的关键质量属性,初步建立其物质基准的质量标准。方法制备15批易黄汤物质基准冻干粉样品,采用高效液相色谱法(HPLC)对15批饮片和物质基准进行指纹图谱、指标成分含量测定,流动相选择乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~6 min,97%B;6~12 min,97%~92%B;12~25 min,92%~90%B;25~35 min,90%~89%B;35~50 min,89%~82%B;50~75 min,82%~72%B;75~85 min,72%~35%B),检测波长230 nm,结合出膏率明确特征峰的归属及其与对照图谱的相似度范围,京尼平苷酸、盐酸小檗碱的含量范围及转移率范围,物质基准的出膏率范围及变化幅度等。结果建立的HPLC指纹图谱检测方法精密度、重复性和稳定性均良好,能同时适用于饮片、物质基准指纹图谱的检测。15批易黄汤物质基准指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均>0.99;共归属15个特征峰,经对照品比对后指认了8个特征峰信息,其中6个来自盐黄柏,1个来自酒车前子,1个来自炒山药。15批易黄汤物质基准中京尼平苷酸、盐酸小檗碱质量分数范围分别为0.10%~0.16%,0.63%~1.05%,转移率范围分别为20.91%~32.65%,19.60%~29.59%;物质基准出膏率范围8.45%~9.92%。结论采用指纹图谱、出膏率及指标成分含量测定相结合的模式,对经典名方易黄汤物质基准的量值传递过程进行分析,可初步拟定易黄汤物质基准的质量标准,可为该经典名方的质量控制及相关制剂开发提供依据。
关键词:经典名方;易黄汤;物质基准;量值传递;高效液相色谱法(HPLC);出膏率;指纹图谱
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发布时间:2021-07-20
经典名方济川煎的古代文献考证
陈橙,张博,蔡铁如,刘东亮
2021, 27(16): 32-39. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211111
摘要:济川煎出自《景岳全书》(明·张景岳),是国家中医药管理局2018年公布的《古代经典名方目录(第一批)》中的经典名方之一。笔者采用文献计量学方法,收集了相关古籍数据43条,涉及中医典籍26部,系统地梳理了济川煎的历史源流、主治病证、组成及方义衍变、剂量、炮制、煎服方法等,为经典名方的研发和临床应用提供了古代文献证据支持。归纳分析发现济川煎历代主治病证有所扩展,除原方记载的虚秘、产后便秘、气瘕之外,此方还可用于燥结、血瘕、阴结、小儿大便闭结、目病及肺(肠)。其方证的适应人群从成人、产妇扩展到了小儿,病证范围也从内科、妇产科延展到了儿科、五官科等。虽然历代医家记载了济川煎加减方,但当归、牛膝、肉苁蓉、泽泻、升麻、枳壳的配伍组成、相对恒定,煎服法也多沿用了水煎,食前服;同时,清医家对其进行了大量的方义论述,但鲜有争议。
关键词:经典名方;济川煎;方义衍变;文献考证
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发布时间:2021-07-20
酸枣仁汤治疗老年慢性睡眠剥夺大鼠的研究专题
酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠心肌线粒体能量代谢的影响
刘鑫,王平,丁莉,张舜波,石坤,杨忞旻,游秋云
2021, 27(16): 40-46. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211206
摘要:目的从去乙酰化酶沉默信息调节因子3(SIRT3)/超氧化物歧化酶2(SOD2)信号通路研究酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠心肌线粒体能量代谢的作用机制。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、舒乐安定组(0.18 mg·kg
-1
·d
-1
)、酸枣仁汤低、高剂量组(6.48,12.96 g·kg
-1
·d
-1
),除正常组外,其余各组均皮下注射D-半乳糖,于末次给药后进行多平台水环境睡眠剥夺,造模结束后各组开始灌胃给药,连续给药7 d。采用透射电镜观察心脏线粒体形态,采用比色法检测大鼠下丘脑三磷酸腺苷(ATP)含量的变化,采用分光光度法检测大鼠心肌丙二醛(MDA)含量,SOD活性,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心肌SIRT3,SOD2 mRNA和蛋白表达水平,采用免疫荧光染色法检测心肌SIRT3的定位表达。结果与正常组比较,模型组大鼠心肌组织肌丝排列紊乱,伴有肌丝断裂与溶解,线粒体肿胀明显,线粒体排列紊乱,多数线粒体嵴模糊甚至断裂,心肌ATP含量和SOD活性显著降低(P<0.01),MDA含量显著升高(P<0.01),SIRT3,SOD2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),SIRT3蛋白平均荧光强度显著降低(P<0.01);与模型组比较,酸枣仁汤高剂量组肌丝排列较整齐,线粒体损伤减轻,仅见部分嵴断裂,肿胀程度亦相对较轻,大鼠心肌ATP含量和SOD活性显著升高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),SIRT3,SOD2 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01),SIRT3蛋白平均荧光强度明显升高(P<0.05),舒乐安定组心肌线粒体损伤也具有一定的改善作用,大鼠心肌SOD活性显著升高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),SIRT3,SOD2 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01);酸枣仁汤低剂量组心肌线粒体损伤改善作用不明显,但大鼠心肌SOD活性显著升高(P<0.01),SOD2蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论酸枣仁汤可以改善老年慢性快动眼睡眠剥夺诱导的心肌线粒体所伤以及能量代谢异常,其机制可能与上调SIRT3,SOD2表达增加有关。
关键词:酸枣仁汤;睡眠剥夺;透射电镜;能量代谢
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发布时间:2021-07-20
酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠中枢下丘脑线粒体损伤及细胞凋亡的影响
杨忞旻,刘鑫,游秋云,张舜波
2021, 27(16): 47-52. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211304
摘要:目的探讨酸枣仁汤对线粒体介导的神经细胞凋亡的影响。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、舒乐安定组(0.18 mg·kg
-1
·d
-1
),酸枣仁汤低、高剂量组(6.48,12.96 g·kg
-1
·d
-1
),除正常组外,其余各组均皮下注射D-半乳糖,于末次给药后进行多平台水环境睡眠剥夺,造模结束后各组开始灌胃给药,连续给药7 d。采用透射电镜观察中枢下丘脑线粒体形态,采用分光光度法检测检测中枢下丘脑中Na
+
-K
+
-三磷酸腺苷(ATP)酶,Ca
2+
-Mg
2+
-ATP酶活性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测中枢下丘脑细胞色素C(Cyt C),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平的改变。结果正常组线粒体未见明显病理改变,大小适中,形态多呈椭圆或梭形,嵴排列较整齐。与正常组比较,模型组线粒体形态异常,线粒体发生明显肿胀并且伴有空泡化,出现了“髓鞘样”,嵴发生断裂且数量减少;与模型组比较,舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组线粒体损伤减轻,空泡化现象减少,部分嵴断裂,并未出现明显肿胀,其中酸枣仁汤高剂量组改善较为明显。与正常组比较,模型组Na
+
-K
+
-ATP,Ca
2+
-Mg
2+
-ATP酶活性显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Cyt C,Bax,Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组Na
+
-K
+
-ATP,Ca
2+
-Mg
2+
-ATP酶活性均显著升高(P<0.01),舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Cyt C,Bax,Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),酸枣仁汤低剂量组Na
+
-K
+
-ATP酶活性显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bax蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论酸枣仁汤可以改善下丘脑神经细胞线粒体功能,抑制神经细胞凋亡。
关键词:酸枣仁汤;睡眠剥夺;透射电镜;能量代谢
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发布时间:2021-07-20
酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠肝脏线粒体能量代谢及其机制的影响
刘鑫,游秋云,王平,丁莉,宁富楠,张舜波
2021, 27(16): 53-58. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211501
摘要:目的研究酸枣仁汤对老年慢性睡眠剥夺模型大鼠肝脏线粒体能量代谢的影响及作用机制。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组,模型组、舒乐安定组(0.18 mg·kg
-1
·d
-1
),酸枣仁汤低、高剂量组(6.48,12.96 g·kg
-1
·d
-1
),除正常组外,其余各组均皮下注射D-半乳糖,于末次给药后进行多平台水环境睡眠剥夺,造模结束后各组开始灌胃给药,连续给药7 d。采用透射电镜观察肝脏线粒体形态,采用比色法检测大鼠肝脏三磷酸腺苷(ATP)含量的变化,采用比色法检测大鼠肝脏线粒体呼吸链还原型辅酶Ⅰ(复合物Ⅰ),琥珀酸氧化还原酶(复合物Ⅱ),细胞色素C氧化还原酶(复合物Ⅲ),细胞色素C氧化酶(复合物Ⅳ)活性,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝脏柠檬酸合酶(CS),异柠檬酸脱氢酶(IDH),负责编码ATP合成酶F0亚基的一段核基因(ATP5F1)蛋白的表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠肝脏内线粒体损伤较严重,线粒体发生肿胀、变形,嵴断裂并且数量有一定的减少,与模型组比较,舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组线粒体损伤减轻,肿胀、变形情况显著减少,嵴断裂减少,其中酸枣仁汤高剂量改善较为明显。与正常组比较,模型组大鼠肝脏ATP含量显著降低(P<0.01),线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ活性均显著降低(P<0.01),IDH,CS,ATP5F1蛋白表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,酸枣仁汤高剂量组肝脏ATP含量显著升高(P<0.01),线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ活性均明显升高(P<0.05,P<0.01),IDH,CS,ATP5F1蛋白表达均显著升高(P<0.01),舒乐安定组肝脏ATP含量明显升高(P<0.05),线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅲ活性显著升高(P<0.01),CS,ATP5F1蛋白表达均显著升高(P<0.01),酸枣仁汤低剂量组肝脏线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅲ活性明显升高(P<0.05,P<0.01),ATP5F1蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论酸枣仁汤可以改善老年慢性睡眠剥夺引起的肝脏能量代谢异常,其机制可能与上调线粒体电子链酶活性,CS,IDH及ATP5F1蛋白表达有关。
关键词:酸枣仁汤;睡眠剥夺;透射电镜;肝脏;能量代谢
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发布时间:2021-07-20
酸枣仁汤通过影响脑、心、肝脏腑功能治疗失眠的研究进展
李子恒,刘鑫,王平,游秋云,程莉,丁莉,张舜波
2021, 27(16): 59-66. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211505
摘要:睡眠问题一直受到世界医药学界的广泛关注。一方面,睡眠不足会对人体多种器官造成损伤,与多种疾病的发生有关;另一方面,人体不同器官发生病变也是引发或加重失眠的因素之一。中医各家治疗失眠及其并发症时会注意脑心同调,治疗失眠是也多从五脏论治,且与心、肝的关系尤为密切。随着年龄的增长,睡眠时间和睡眠结构都会产生变化。相较于年轻人,老年人更易出现失眠,且更容易合并并发症。血亏阴虚型失眠是中医临床老年失眠的常见证型。酸枣仁汤是养血安神的经典名方,是治疗“虚劳虚烦不得眠”之要剂,有养肝血以宁心安神,清内热以除虚烦的功效,对于老年人气血不足,营卫之气运行失常所致的失眠有较好的疗效,且对失眠与心脑血管疾病共病也有一定的治疗作用。该文从睡眠剥夺对脑、心、肝的损伤;酸枣仁汤对脑、心、肝的影响作用;抑制睡眠剥夺是从脏器的损伤调节能量代谢等方面探讨酸枣仁汤发挥镇静催眠的作用机制,以期为酸枣仁汤治疗睡眠障碍等疾病提供新的思路和方向。
关键词:失眠;睡眠剥夺;酸枣仁汤;肝脏;心脏
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发布时间:2021-07-20
配伍
基于Nrf2/ARE信号通路探讨当归-川芎含药血清对H
2
O
2
致PC12细胞氧化损伤的保护作用
尹曼雪,林玉婕,黄文治,刘四军,周晓兰,吴庆光
2021, 27(16): 67-74. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211506
摘要:目的研究当归-川芎含药血清(Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma medicated serum,ASRCRS)对过氧化氢(H
2
O
2
)诱导高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)氧化损伤的保护作用及其分子机制。方法采用H
2
O
2
体外诱导PC12细胞氧化损伤,并以终体积分数为15%的ASRCRS低、中、高剂量组进行干预。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率;荧光倒置显微镜观察细胞形态;试剂盒检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH),丙二醛(MDA)含量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力及活性氧(ROS)分布水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子E
2
相关因子2(Nrf2),Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1),血红素加氧酶-1(HO-1),SOD1蛋白的表达水平。结果选择300 μmol·L
-1
H
2
O
2
刺激24 h作为氧化损伤造模的条件。与正常组比较,H
2
O
2
模型组细胞形态异常,细胞存活率显著降低(P<0.01);LDH,MDA含量升高(P<0.01),SOD活力降低,ROS在细胞内分布增加;Nrf2,HO-1,SOD1蛋白表达水平均明显下调(P<0.05,P<0.01),Keap1蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。与模型组比较,ASRCRS不同剂量组均能改善细胞形态,提高细胞存活率,抑制细胞凋亡;显著提高SOD酶活力(P<0.01),抑制LDH的释放(P<0.01)和ROS的生成,降低MDA含量(P<0.01);明显上调Nrf2,HO-1,SOD1蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),显著下调Keap1蛋白表达水平(P<0.01)。结论当归-川芎含药血清可能是通过上调Nrf2的蛋白表达,激活Nrf2/抗氧化反应元件(ARE)信号通路,增强细胞抗氧化损伤能力,抑制细胞凋亡,从而发挥保护H
2
O
2
损伤的PC12细胞的作用。
关键词:当归;川芎;含药血清;氧化损伤;核转录因子E
2
相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路
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发布时间:2021-07-20
药理
基于内质网应激探讨扶正解毒方联合5-Fu对胃癌荷瘤小鼠术后复发及转移的影响
冯颖,吴喆,李杰
2021, 27(16): 75-83. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211699
摘要:目的研究扶正解毒方联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对胃癌荷瘤小鼠术后复发转移的抑制作用,并通过肿瘤微环境中CD4
+
T细胞,CD8
+
T细胞,调节性T(Treg)细胞含量的改变,内质网应激途径及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路,探讨其可能的分子机制。方法40只615小鼠随机分为模型组,扶正解毒方(25 g·kg
-1
)组,5-Fu(25 mg·kg
-1
)组,联合组(扶正解毒方25 g·kg
-1
+5-Fu 25 mg·kg
-1
),每组各10只,将小鼠前胃癌细胞(MFC细胞)接种于左后肢内侧爪垫下,通过手术切除移植瘤建立术后复发模型。苏木素-伊红(HE)染色法观察术后复发胃癌荷瘤小鼠肺转移病理形态的改变;流式细胞术检测复发瘤中CD4
+
/CD8
+
T值及脾脏中Treg细胞[CD4
+
,CD25
+
,叉头框蛋白P3(FOXP3)
+
细胞]的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)及免疫组化法(IHC)检测内质网应激相关蛋白[葡萄糖调节蛋白78(GRP78),肌醇需求酶1α(IRE1α),激活转录因子6(ATF6),蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)]含量,以及PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达。结果与模型组比较,联合组复发抑制率明显升高(P<0.05);各治疗组复发瘤重均明显降低(P<0.05);各治疗组肺转移数均降低,转移率均有所降低,联合组肺转移总数最少,转移率最低,但差异无统计学意义;扶正解毒方组、联合组CD4
+
/CD8
+
T值明显升高(P<0.05),Treg细胞含量明显降低(P<0.05);5-Fu组Treg细胞含量明显升高(P<0.05)。IHC结果显示,与模型组比较,各治疗组ATF6蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01),IRE1α表达明显下降(P<0.05),Akt表达显著下降(P<0.01);5-Fu组及联合组mTOR表达明显下降(P<0.05)。Western blot结果显示,与模型组比较5-Fu组GRP78表达明显下降(P<0.05),5-Fu组及联合组PI3K,磷酸化Akt(p-Akt),mTOR表达明显下降(P<0.05)。结论扶正解毒方联合5-Fu可以抑制荷瘤小鼠术后复发转移,机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR的信号通路,下调内质网应激,改善肿瘤免疫抑制微环境有关。
关键词:扶正解毒方;5-氟尿嘧啶;胃癌;内质网应激;肿瘤免疫微环境
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发布时间:2021-07-20
补肾助孕方对黄体功能不全模型大鼠卵巢内质网应激的调节
史露露,周惠芳
2021, 27(16): 84-89. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211692
摘要:目的探讨补肾助孕方对米非司酮诱导的黄体功能不全(LPD)模型大鼠卵巢内质网应激(ERS)的调控机制。方法使用随机数表法将50只SD大鼠分为空白组,模型组,地屈孕酮(0.02 g·kg
-1
)组,补肾助孕方低(0.08 g·kg
-1
)、高剂量(0.24 g·kg
-1
)组。使用蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠卵巢免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP),蛋白激酶R样内质网激酶(PERK),肌醇必需酶-1(IRE-1),活性转录因子6(ATF6),C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白和mRNA表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清孕酮(P)和雌二醇(E
2
)水平。结果与空白组比较,模型组BIP,PERK,CHOP蛋白表达显著升高(P<0.01),PERK及CHOP mRNA表达明显下降(P<0.05);而IRE-1,ATF6蛋白表达,IRE-1,BIP,ATF6 mRNA表达,血清E
2
,P水平差异无统计学意义。与模型组比较,地屈孕酮组CHOP蛋白表达显著降低(P<0.01),而PERK,IRE-1,BIP,ATF6蛋白表达,PERK,IRE-1,BIP,ATF6,CHOP mRNA表达及血清E
2
,P水平差异无统计学意义;补肾助孕方低剂量组CHOP蛋白表达显著降低(P<0.01),CHOP mRNA表达水平明显升高(P<0.05),而PERK,IRE-1,BIP,ATF6蛋白和mRNA表达及血清E
2
,P水平差异无统计学意义;补肾助孕方高剂量组PERK,BIP,CHOP蛋白表达显著降低(P<0.01),CHOP mRNA表达水平显著升高(P<0.01),而IRE-1和ATF6蛋白表达,PERK,IRE1,BIP,ATF6 mRNA表达及血清E
2
,P水平差异无统计学意义。结论补肾助孕方可以改善黄体功能不全,其机制可能与缓解内质网应激作用有关。
关键词:内质网应激 (ERS);卵巢;补肾助孕方;黄体功能不全(LPD)
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1
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发布时间:2021-07-20
临床
补中益气汤加减对非小细胞肺癌术后化疗患者VEGF,IGF-1,TGF-
β
1
,免疫功能的影响及安全性分析
罗文,王涛,熊国江,李宗武,钱超,杨春银,范国宴,阮自良,余晓雯,王芮
2021, 27(16): 90-95. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211013
摘要:目的探讨补中益气汤加减在非小细胞肺癌术后化疗患者(肺脾气虚型)治疗中的应用价值,观察其对抗肿瘤血管生成、免疫功能、肿瘤指标、肺功能指标的影响。方法选取2018年3月至2020年2月于昆明市中医医院就诊的96例非小细胞肺癌术后化疗患者,入组时用随机数字表法分组。对照组48例单纯西医治疗,观察组48例则联合补中益气汤加减口服治疗,治疗结束后比较疗效。结果治疗后观察组血清癌胚抗原(CEA),细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1),血管内皮生长因子(VEGF),转化生长因子-β
1
(TGF-β
1
)均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组血清CD4
+
/CD8
+
,CD4
+
细胞及免疫球蛋白G(IgG)水平大于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组肺功能指标第1秒用力呼吸容积FEV
1
,FEV
1
/用力肺活量(FVC),均大于对照组(P<0.05);观察组总有效率56.25%(27/48),对照组35.42%(17/48),差异具有统计学意义(χ
2
=4.191,P<0.05);不良反应比较,观察组骨髓抑制(χ
2
=4.002)、胃肠道反应(χ
2
=7.069)、肝肾功能损伤(χ
2
=5.151)发生率低于对照组(P<0.05)。结论对于非小细胞肺癌术后化疗患者(肺脾气虚型)而言联合补中益气汤加减可改善免疫功能,促进肺功能恢复,提高临床疗效,降低化疗不良反应发生率。
关键词:补中益气汤;非小细胞肺癌术后;GP方案(吉西他滨+顺铂);新生血管;肿瘤转移;肺功能
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发布时间:2021-07-20
黄连温胆汤合少腹逐瘀汤加减治疗痰瘀互结证多囊卵巢综合征致排卵障碍的临床疗效
周雨禾,刘婷,马宏博
2021, 27(16): 96-101. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210732
摘要:目的观察黄连温胆汤合少腹逐瘀汤加减治疗痰瘀互结证多囊卵巢综合征(PCOS)致排卵障碍的临床疗效及对慢性炎症状态的影响。方法将100例患者按随机数字表法分为对照组和观察组各50例。所有患者给予生活方式干预,并口服枸橼酸氯米芬(CC)胶囊促排卵。对照组口服桂枝茯苓丸,6 g/次,2次/d;观察组黄连温胆汤合少腹逐瘀汤加减内服,1剂/d。两组疗程均为6个月经周期;监测排卵情况,测量治疗前后子宫内膜厚度,A型子宫内膜比例、子宫动脉血流的搏动指数(PI)和阻力指数(RI);检测治疗前后空腹血糖(FBG),空腹胰岛素(FINS),黄体生成素(LH),卵泡刺激素(FSH),血清睾酮(T),雌二醇(E
2
)和硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);评价治疗前后卵巢体积和痰瘀互结证积分;检测治疗前后肿瘤坏死因子-α(TNF-α),超敏C-反应蛋白(hs-CRP),脂联素(APN)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果观察组临床疗效总有效率为(44/47)93.62%,高于对照组的(36/46)78.26%(χ
2
=4.802,P<0.05);观察组排卵率为(199/264)75.38%,高于对照组的(173/272)63.60%(χ
2
=8.714,P<0.01),观察组临床妊娠率(11/47)23.40%,高于对照组的(5/46)10.87%,但差异无统计学意义(χ
2
=2.564,P>0.05);观察组PI和RI均低于对照组(P<0.01),子宫内膜厚度,A型内膜比例高于对照组(P<0.01);观察组LH,T和DHEAS水平均低于对照组(P<0.01),E
2
和FSH水平均高于对照组(P<0.01);观察组双侧卵巢体积和痰瘀互结证积分均低于对照组(P<0.01);观察组FINS,FPG和HOMA-IR均低于对照组(P<0.01);观察组TNF-α,hs-CRP和IL-6水平均低于对照组(P<0.01),APN水平高于对照组(P<0.01)。结论在CC治疗的基础上,黄连温胆汤合少腹逐瘀汤加减内服可改善PCOS痰瘀互结证患者的排卵障碍,并能调节胰岛素抵抗(IR)和慢性炎症状态,为临床妊娠创造了条件,值得进一步的研究。
关键词:多囊卵巢综合征;慢性炎症;痰瘀互结证;黄连温胆汤;少腹逐瘀汤;胰岛素抵抗;慢性炎症
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发布时间:2021-07-20
复方黄柏液涂剂对深Ⅱ度烧伤创面的干预作用及机制
肖长栓,刘娅平,孙奎,杨景哲,陈红雨
2021, 27(16): 102-110. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211695
摘要:目的研究复方黄柏液涂剂外用对深Ⅱ度烧伤创面的干预作用及可能的机制。方法将2019年6月至2020年6月承德医学院附属医院烧伤整形科确诊的深Ⅱ度烧伤火毒伤津证患者采用随机数字表法分为对照组、低剂量治疗组和高剂量治疗组,每组各40例,对照组予1%体表面积创面外用碘伏溶液35 mL,低剂量及高剂量治疗组予1%体表面积创面分别外用复方黄柏液涂剂17.5,35 mL,每日换药1次。观察各组治疗后14 d病理学改变;各组于治疗前及治疗后7,14,21 d量化创面局部症状体征,于治疗后21 d评价临床疗效;治疗后7,14,21 d各组计算创面愈合率,分别按照酶联免疫吸附法(ELISA)测定创面组织中血管内皮生长因子(VEGF),成纤维细胞生长因子(FGF)-2,FGF-7,表皮生长因子(EGF),白细胞介素-10(IL-10),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及半胱胺酸天冬氨酸水解酶-3(Caspase-3)含量水平,免疫组化法测定创面组织核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的表达情况,采用原位末端标记法(TUNEL法)检测创面组织细胞凋亡率。结果治疗前各组局部症状体征评分差异无统计学意义。与对照组比较,低剂量及高剂量治疗组在治疗后7 d创面愈合率差异无统计学意义,在治疗后14,21 d创面愈合率明显增高(P<0.05);在治疗后21 d临床疗效明显优于对照组;在治疗后7,14,21 d局部症状体征评分均明显降低,创面组织中VEGF,FGF-2,FGF-7,EGF,IL-10水平显著增高,细胞凋亡率,Caspase-3,TNF-α及NF-κBp65表达水平明显降低(P<0.05),且高剂量组之间上述指标均优于低剂量组(P<0.05)。光镜下低剂量及高剂量治疗组在治疗后第14天均较对照组炎症细胞浸润减少,且高剂量组表现更显著。结论复方黄柏液涂剂外用对深Ⅱ度烧伤创面有明显治疗效果,可剂量依赖性的通过上调生长因子水平、改善炎症反应并抑制细胞凋亡促进创面愈合。
关键词:复方黄柏液涂剂;深Ⅱ度烧伤创面;临床疗效;创面愈合;量效关系
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发布时间:2021-07-20
身痛逐瘀汤加减治疗急性期椎间盘源性腰痛风寒瘀阻证的临床观察
范荣,刘玉金,白曼莫
2021, 27(16): 111-115. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210832
摘要:目的评价身痛逐瘀汤加减联合塞来昔布胶囊治疗急性期椎间盘源性腰痛(DLBP)风寒瘀阻证的疗效及抗炎、镇痛作用。方法将140例符合要求的患者按随机数字表法分为对照组和观察组各70例。两组患者均口服塞来昔布胶囊,200 mg/次,1次/d;对照组口服通络活血胶囊,6粒/次,3次/d;观察组口服身痛逐瘀汤加减,1剂/d;两组疗程均为3周。进行治疗前后简化McGill疼痛量表(SF-MPQ),SF-MPQ含疼痛分级指数(PRI),现时疼痛强度(PPI)和视觉模拟量表(VAS)3个因子;评价Oswestry功能障碍指数(ODI),风寒瘀阻证、日常生活能力(ADL)评分和Schober试验;检测治疗前后肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6,血栓素B
2
(TXB
2
)和6-酮-前列腺素F
1
α
(6-keto-PGF
1
α
)水平;进行安全性评价。结果治疗后,观察组SF-MPQ量表各维度(PRI,VAS和PPI)评分均低于对照组(P<0.01);观察组风寒瘀阻证和ODI评分均低于对照组(P<0.01),ADL评分和Schober试验均高于对照组(P<0.01);观察组TNF-α,IL-1β,IL-6和TXB
2
水平均低于对照组(P<0.01);6-keto-PGF
1
α
水平高于对照组(P<0.01);观察组临床的优良率为(51/63)80.95%,高于对照组的(39/63)61.90%(χ
2
=5.601,P<0.05);没有发现服用中药相关不良反应。结论身痛逐瘀汤加减联合塞来昔布胶囊治疗急性期DLBP风寒瘀阻证患者,具有抗炎、镇痛作用,能有效缓解腰痛程度,改善腰椎活动功能,提高了日常生活活动能力,临床优良率较高,且使用安全。
关键词:椎间盘源性腰痛;风寒瘀阻证;急性期;身痛逐瘀汤;抗炎;镇痛
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发布时间:2021-07-20
药学基础
基于UPLC-QE-Orbitrap-MS技术的芪蛭降糖胶囊化学成分分析
史静超,张淑蓉,柴智,陈相君,张维钲
2021, 27(16): 116-123. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210851
摘要:目的为系统分析芪蛭降糖胶囊的化学组成,采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-QE-Orbitrap-MS)对该复方的化学成分进行鉴定。方法采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0~13 min,1%~25%A;13~21 min,25%~35%A;21~28 min,35%~85%A;28~30 min,85%~100%A;30~32 min,100%~1%A),流速设定0.2 mL·min
-1
,柱温30 ℃,进样量3 μL;运用电喷雾离子源(ESI),扫描范围m/z 100~1 500,正、负离子全扫描模式采集数据。采用对照品比对、自建化合物数据库搜索、文献信息比对、诊断离子筛选及Compound Discoverer 3.0软件推测的方法快速鉴定各离子峰。结果共鉴定了芪蛭降糖胶囊中52个化学成分,并归属了化合物的来源药材,其中氨基酸类成分主要来源于水蛭,苯丙素类成分来源于黄芪和地黄,环烯醚萜苷类成分来源于地黄,香豆素和三萜类成分来源于黄芪,黄酮类成分来源于黄芪和黄精。结论建立的UPLC-QE-Orbitrap-MS分析方法能全面快速地分析和鉴定芪蛭降糖胶囊中的化学成分,其中多种成分经现代药理研究证明具有改善糖尿病及其并发症相关症状的作用,体现了芪蛭降糖胶囊多成分协同作用的特点,可为其药效物质基础和质量控制研究提供参考。
关键词:芪蛭降糖胶囊;超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-QE-Orbitrap-MS);化学成分;裂解规律;黄酮类;环烯醚萜苷类;苯丙素类
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发布时间:2021-07-20
苦杏仁贮藏过程中走油变质机制分析
程云霞,于金倩,王凯,郭兰萍,王晓
2021, 27(16): 124-130. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211146
摘要:目的研究苦杏仁走油过程中含水量、细胞膜相对透性及脂肪油酸败度的变化规律,探讨苦杏仁的走油变质机制。方法对不同贮藏条件下的苦杏仁样品进行感官评价并分类;含水量变化以水分及水分活度表示,分别采用甲苯法和水分活度测定仪测定;细胞膜相对透性以丙二醛(MDA)含量和相对电导率为评价指标,分别采用硫代巴比妥酸比色法、电导仪测定;脂肪油酸败度的变化以脂肪油含量、酸值和过氧化值表示,脂肪油含量采用索氏提取法测定,酸值、过氧化值分别按2020年版《中华人民共和国药典》(四部)通则0713,2303所载方法进行测定。整理上述实验数据,应用化学计量学方法(聚类分析、主成分分析)建立不同走油程度苦杏仁样品的分类、判别模型,以验证分类结果的准确性。结果根据感官评价结果,苦杏仁样品被分为未走油、轻微走油、走油三类。与未走油样品相比,走油样品的表面及子叶颜色加深、表面显油性、质发软并产生酸败味,水分、水分活度、相对电导率和MDA含量均显著升高(P<0.01);脂肪油含量显著降低(P<0.01),酸值与过氧化值显著升高(P<0.01)。聚类分析与主成分分析结果表明,走油样品与未走油、轻微走油样品可以得到较好的区分。结论高温、高湿贮藏条件可加快苦杏仁走油变质,在这一变质过程中同时伴随着药材内部含水量升高、细胞膜通透性增加并有脂肪油酸败发生。建议苦杏仁药材应贮藏在低温、干燥的环境中,且贮藏时间不宜过长。
关键词:苦杏仁;走油变质;含水量;细胞膜相对透性;酸败度;水分活度;脂肪油
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发布时间:2021-07-20
基于UPLC-QTOF-MS/MS和TCMIP的续断治疗类风湿性关节炎活性成分筛选及作用机制分析
吴丹,陈鸿,江红,张美琴,时晨晶,焦园园,王萍,许海玉
2021, 27(16): 131-140. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211049
摘要:目的依托超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UPLC-QTOF-MS/MS)和中医药整合药理学研究平台(TCMIP),探讨续断治疗类风湿性关节炎(RA)的主要活性成分和作用机制。方法采用UPLC-QTOF-MS/MS,分别在正、负离子扫描模式下对续断醇提液中的化学成分进行定性分析,流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~10 min,0.2%~20%B;10~20 min,20%~40%B;20~25 min,40%~50%B;25~33 min,50%~98%B;33~35 min,98%~0.2%B),电喷雾电离源(ESI),扫描范围m/z 50~2 000;基于TCMIP,分别获取续断、肝肾阴虚证和RA的候选靶标群,进行“病-证-方”关联分析,富集得到主要药效成分及关键作用靶标,进一步进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络及生物功能富集分析。结果在正、负离子模式下共鉴定了续断醇提液中81个化学成分;利用TCMIP收集到这些化学成分对应的283个候选靶标,RA对应的7个疾病基因,以及肝肾阴虚证相关的215个基因。经“病-证-方”关联分析及网络拓扑特征值计算等方式最终确定了17个关键活性成分,主要为续断皂苷类、脂肪酸类成分;其主要涉及7个核心靶标,即肿瘤坏死因子(TNF),核转录因子-κB亚单位1(NF-κB
1
),肝细胞核因子4α(HNF4A),核受体亚家族3C组成员1(NR3C1),过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG),核受体亚家族1H组成员4(NR1H4)和核受体辅激活因子1(NCOA1),均与炎症相关,其中还有2个与胆汁酸途径相关;涉及的RA相关通路主要为PPARα激活基因表达等炎症通路,以及胆汁酸合成和代谢相关通路。结论液质联用技术联合中医药大数据平台初步阐明了续断多成分对多条炎症通路和胆汁酸相关通路的调控作用,为续断治疗RA作用机制的深入阐释奠定了基础。
关键词:续断;整合药理学;类风湿性关节炎;化学成分;作用机制;炎症;胆汁酸
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发布时间:2021-07-20
黑骨藤化学成分与生态因子和土壤因子的相关性
周环娟,安兰兰,付艳,王瑞鑫,刘刚,刘育辰,孙庆文,张永萍
2021, 27(16): 141-149. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211018
摘要:目的研究不同产地苗族药黑骨藤中8个化学成分含量与生态因子和土壤因子的相关性。方法采用超高液相色谱法(UPLC)同时测定新绿原酸,绿原酸,隐绿原酸,异绿原酸B,异绿原酸A,异绿原酸C,原花青素A
2
和杠柳毒苷的含量。收集各产地样品根系土壤,并进行多种土壤因子检测。利用ArcGIS软件提取气候数据,GPS记录地形数据。利用SPSS 24.0统计软件对不同产地药材中的8个化学成分含量与生态因子和土壤因子进行双变量分析和逐步回归分析。结果建立了8个化学成分含量与生态因子和土壤因子的逐步回归方程,分析其结果,新绿原酸与最冷季度降水量呈负相关;绿原酸与最干月降水呈负相关;隐绿原酸与最冷季度降水量和最暖季节平均温度呈负相关,与硒呈正相关;异绿原酸B主要受到土壤因子的影响,与有效铁和钼呈正相关,与全磷和有效磷呈负相关;异绿原酸A与钼呈正相关,与降水变异系数呈负相关;异绿原酸C与交换性镁呈正相关;原花青素A
2
与钼呈正相关,与速效钾呈负相关;杠柳毒苷与降水变异系数负相关。结论明确了黑骨藤中8个化学成分与生态因子和土壤因子之间的相关性,为黑骨藤引种栽培、规范化种植提供参考,以及进一步研究生态因子和土壤因子与黑骨藤品质形成机制提供理论基础。
关键词:黑骨藤;化学成分;生态因子;土壤因子;栽培;种植
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基于
CO
Ⅰ基因对东北林蛙、中国林蛙等蛙属24种的鉴定
王孟虎,孙一帆,许亮,康廷国,张腾腾,左亚锋,朱丽婷,孟祥松,汤建,徐倩
2021, 27(16): 150-158. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211015
摘要:目的利用DNA条形码线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因(COⅠ)技术对东北林蛙等24种进行鉴别,构建邻接(NJ)系统发育树,对24种进行系统聚类分析,为东北林蛙等蛙类的鉴别,分类及新种的发现提供一定的依据。方法收集东北林蛙、中国林蛙、黑龙江林蛙、徂崃林蛙、桓仁林蛙各10只,提取其DNA并进行聚合酶链式反应(PCR)扩增,将扩增成功的序列测序,共测得50条COⅠ基因序列;从GenBank数据库中获得蛙科蛙属24种163条COⅠ基因序列及蛙科侧褶蛙属,臭蛙属,琴蛙属,水蛙属,湍蛙属各一条COⅠ基因序列;利用MEGA X进行序列比对,分析各物种COⅠ基因序列简约性信息位点,计算种内,种间遗传距离,构建NJ树进行系统聚类分析。结果东北林蛙等24种COⅠ基因序列长度为554 bp,共有210个简约性信息位点,各物种种内遗传距离均<2%;除桑植蛙与明全蛙种间遗传距离为0.004外,其余各物种种间遗传距离范围为0.024~0.228;桑植蛙与明全蛙聚为一支,部分东北林蛙与Rana uenoi聚为一支,中国林蛙有2个独立的分支,其余各物种均独立聚为一支。结论DNA条形码COⅠ技术能够对东北林蛙等21种进行鉴定及鉴别,支持桑植蛙与明全蛙,韩国林蛙与昆嵛林蛙为同物异名,其中一支中国林蛙可能是蛙科蛙属未下载的4个种之一或新种。这表明DNA条形码COⅠ技术不仅可以鉴定及鉴别东北林蛙等24种蛙类,也可以为蛙科蛙属的分类,新种或亚种的发现提供一定的科学依据。
关键词:东北林蛙;中国林蛙;蛙科;蛙属;DNA条形码;线粒体细胞色素C氧化酶亚基I基因(COⅠ)
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22种樟科植物DNA条形码分子鉴定
许丹芸,张辉菊,李可心,杨全,高弘扬
2021, 27(16): 159-166. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211019
摘要:目的筛选适合樟科植物的DNA条形码,对采集的22种樟科植物进行鉴定分类。方法以22种樟科植物为实验材料,提取其DNA,使用不同的DNA条形码引物进行聚合酶链式反应(PCR)扩增,电泳检测后进行双向测序。采用Codon Code Aligner软件对测序峰图和序列进行校对、拼接并去除正反向引物序列。将序列导入DNAMAN,进行多序列对比,查看并分析碱基变异位点。用MEGA计算不同种植物的遗传距离(K2P),根据遗传距离分析变异程度,基于邻接法构建系统进化树。结果采用3对DNA条形码通用引物对22种樟科植物的DNA进行扩增测序后通过比较基因序列的特异碱基位点成功鉴别出其中20种植物。结论matK序列能鉴定4个木姜子属植物;rbcL除粗脉桂外,对实验材料中楠属的3个物种都能进行区分;matK+rbcL+rpoB序列结合可鉴别20种樟科植物。其中matK序列对樟科植物鉴定效果最好,结果也表明将DNA条形码对植物进行组合鉴定,效果更佳。从分子角度研究樟科植物之间的亲缘关系,同时也为药用植物资源调查、栽培种植、开发保护利用提供依据。
关键词:樟科;DNA条形码;鉴别;matK;rbcL;rpoB
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数据挖掘
脉络学说理论分析不稳定型心绞痛医案证治规律及网络药理学机制分析
王康,李雅文,常丽萍,尹玉洁,朱垚,吴晨,贾振华
2021, 27(16): 167-176. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211017
摘要:目的以脉络学说营卫理论为指导系统分析整理不稳定型心绞痛(UAP)现代医案,探析UAP证治规律,并利用网络药理学对证治规律中核心药对治疗UAP的分子机制进行分析。方法通过PubMed,中国期刊全文数据库(CNKI),万方数据库(Wanfang Data),维普数据库(VIP),中国生物医学文献服务系统(SinoMed)数据库检索自建库至2020年11月所有中药复方治疗UAP相关医案,基于脉络学说营卫理论医案证候判定标准对医案进行证候判定,运用频数统计、系统聚类分析,FP-Growth加强关联分析等数据挖掘方法挖掘UAP证治规律,并利用网络药理学对证治规律中核心药对治疗UAP的分子机制进行分析。结果研究显示UAP高频证候前4位依次为络气虚滞、瘀血阻络、络气郁滞及痰浊阻络,高频药物有丹参、甘草、川芎、黄芪等,主要药物以化瘀通络、益气固卫、理气解郁及祛痰通络药为主;药物关联规则得到UAP治疗核心药对丹参-川芎-黄芪;药物系统聚类共得到4组药物组合;网络药理学分析显示核心药对丹参-川芎-黄芪治疗UAP的关键成分有槲皮素、木犀草素、丹参酮Ⅱ
A
等,其中关键靶点有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B1(Akt1),丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1),Jun,白细胞介素-6(IL-6),丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)。京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析显示磷脂酰肌醇-3激酶-丝氨酸/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路可能是其发挥治疗作用的主要途径。结论UAP以络气虚(郁)滞、痰瘀阻络为基本病机;治疗以益气化瘀通络为基本治法,兼以理气化痰通络;核心药对丹参-川芎-黄芪治疗UAP的机制具有多成分、多靶点、多通路特点,研究结果为后续脉络学说指导UAP相关分子水平研究提供了思路。
关键词:脉络学说营卫理论;不稳定型心绞痛(UAP);数据挖掘;网络药理学;证治规律
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基于谱效关系和网络药理学的淫羊藿抗骨质疏松物质基础及作用机制
刘谊民,许婷,张黄琴,马程遥,刘玉萍,陈彦
2021, 27(16): 177-184. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210917
摘要:目的研究淫羊藿抗骨质疏松的物质基础并预测其作用机制。方法应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析14批淫羊藿的化学成分;以成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)活性为药效指标,采用偏最小二乘法回归分析(PLSR)建立UPLC-Q-TOF-MS/MS谱峰与ALP活性的谱效关系模型,筛选淫羊藿抗骨质疏松的药效物质基础;综合利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),比较毒物基因组学数据库(CTD),DAVID等在线平台及Cytoscape 3.6.1软件预测淫羊藿抗骨质疏松的可能作用机制。结果UPLC-Q-TOF-MS/MS分析共指认谱峰61个,鉴定化合物56个。PLSR分析显示淫羊藿苷,宝藿苷Ⅰ,朝藿定A,箭藿苷A和宝藿苷Ⅱ与ALP活性的相关性较强,为淫羊藿发挥抗骨质疏松作用的潜在物质基础。基于网络药理学对上述5个成分的抗骨质疏松机制进行预测,共得到肿瘤坏死因子(TNF),雄激素受体(AR),雌激素受体1(ESR1)等7个关键靶点和内分泌及其他因素调节的钙吸收、血管内皮生长因子(VEGF)信号通路、瞬时受体电位(TRP)通道的炎性介质调节等8条关键通路。结论借助UPLC-Q-TOF-MS/MS,谱效关联和网络药理学方法可以实现淫羊藿抗骨质疏松物质基础挖掘和机制研究,为淫羊藿抗骨质疏松的科学解释和临床应用提供实验依据。
关键词:淫羊藿;超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS);抗骨质疏松;谱效关系;网络药理学
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优势病种
中医药临床优势病种探讨——膜性肾病
刘宝利,钟逸斐,刘伟敬,王明,杨波,陈洪宇,毛志国,周亦伦,孙芳,芮宏亮,段亚娟,刘文虎,杨洪涛,张霄潇
2021, 27(16): 185-190. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211691
摘要:中医药是一座伟大的宝库,在治疗某些疑难病、危重病中具有独特优势。膜性肾病近些年来发病率逐年升高,已发展成为原发性肾小球疾病的首位病因,但其发病机制不清,现代医学常使用免疫抑制疗法,但往往面临着不良反应大、复发率高的问题。中华中医药学会邀请各位中西医临床一线专家对膜性肾病进行充分讨论后认为:膜性肾病属于中医药临床优势病种之一。该共识基于会议讨论,将中西医对膜性肾病发病机制、临床诊治的认识进行总结,并具体阐释了中医药对膜性肾病的认识及辨证治疗方案,以期提高膜性肾病的临床缓解率,为临床医师治疗膜性肾病提供参考。
关键词:肾内科;膜性肾病;中西医结合;优势病种;专家指导建议
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发布时间:2021-07-20
综述
泽泻汤的研究现状
严林,李新健,张冰冰,欧则民,王艳静,张瑶,刘德文,马振山,王锦玉,仝燕
2021, 27(16): 191-197. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210648
摘要:泽泻汤出自《金匮要略》,该方由泽泻和白术2味中药配伍而成,具有利水除饮、健脾制水的功效。相较于西药治疗有关病证,泽泻汤不仅可以提高疗效,还能降低不良反应的发生,实现长期稳定给药。笔者通过整理泽泻汤的近些年研究情况,对其化学成分、药理作用及临床应用等方面进行整理与分析,发现泽泻汤中的主要活性成分为泽泻醇A和B,23-乙酰泽泻醇B和C,白术内酯(白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)和多糖等,具有利尿、降血脂、降血压、抗炎等药理作用,可加味配伍用于高血压病、高血脂症、眩晕病、脑血管供血不足等疾病的治疗,且疗效明显。通过对近些年泽泻汤的研究概况进行总结,可进一步明确其活性成分和药理作用机制,为泽泻汤的临床应用提供依据,并为下一步的研究指引方向。
关键词:泽泻汤;化学成分;药理作用;临床应用;经典名方;利尿;降血压
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发布时间:2021-07-20
我国鸡血藤属和崖豆藤属药用植物的研究现状及比较
张庆熙,金晨,陈康,程玉瑶,李洵珣,田晓丹,陈志,项沁,曹光照,张凌
2021, 27(16): 198-208. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20210856
摘要:鸡血藤属与崖豆藤属系豆科多年生藤本植物,物种多、分布广,既可药用又可杀虫,还可用于观赏。随着对鸡血藤的需求量不断增加,野生药材蕴藏量濒临枯竭,造成市场上鸡血藤混用品和代用品不断增多,使鸡血藤药材的基原研究较为迫切。经查阅相关资料发现,目前鸡血藤药材主要以密花豆属、鸡血藤属与崖豆藤属三属存在,而鸡血藤属又是由崖豆藤属分出,这两属经历多次分与合的过程,现《中国植物志》官方网站接受将二者修订为两属。笔者拟对这两属药用植物的化学成分和药效作用等进行比较,旨在探索鸡血藤属与崖豆藤属的异同点,以确定从崖豆藤属分出鸡血藤属的合理性与必要性。通过比较后发现,这两属化学成分和药效作用各有不同,支持鸡血藤属从崖豆藤属分出,不建议混用。
关键词:鸡血藤属;崖豆藤属;历史沿革;分子鉴定;化学成分;药理活性;质量控制
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发布时间:2021-07-20
泄泻证候相关肠道菌群的研究进展
李玉丽,袁振仪,谭周进
2021, 27(16): 209-217. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211698
摘要:泄泻是一种以大便次数增多,粪质稀薄,甚至清稀如水为主证的中医病证,现代研究已证实其发生发展与肠道菌群失调密切相关。中医治疗泄泻尤其注重把握证候的准确性。泄泻证候研究对制订泄泻中医临床诊疗方案具有重要的指导意义,且与其临床疗效密切相关。基于中医理论与微生态理论存在许多共同的认知基础,以及随着肠道菌群研究的深入,肠道菌群在中医证候研究中的意义益加凸显。肠道菌群与泄泻发生发展密切相关,证候相关肠道菌群研究为“以菌测证、以菌施方”探究提供了思路。该文总结了泄泻中医证候与免疫反应、神经递质、脑肠肽和蛋白质等微观指标的联系,着重梳理了泄泻6种常见中医证候相关肠道菌群特征的最新研究进展,同时基于中医“以方测证”理论,即依据方剂的功效或其组成药物的功效,反证其对应证候的属性,从而间接探究泄泻中医证候与肠道菌群的相关性,以期归纳提出今后证候相关肠道菌群的研究方向。众多研究表明泄泻中医证候的物质基础与炎症细胞因子、神经递质和蛋白质等微观指标有高度的相关性。证候和菌群失调都是致病因素作用于机体的表现,从不同的角度归纳了疾病的表现。不同的中医证候对应特异的肠道菌群客观指标。肠道菌群是未来揭示泄泻证候的内在物质基础的一个有力结合点。
关键词:泄泻;证候;肠道菌群;研究进展
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发布时间:2021-07-20
抑郁症神经元自噬机制及中医药调节作用研究进展
刘燕,刘俊,吴耀松,陈玉龙,任闪闪,尚艺婉,贺倩文,桑亚洲
2021, 27(16): 218-226. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211502
摘要:抑郁症是以情绪持续低落为主要特征的精神疾病,严重威胁人们的健康。近几年来神经元自噬作为应激反应的一个重要方面也被视为抑郁症发病机制假说而提出。相关研究综合表明,自噬不足或过度均会引起神经元损伤,抑郁症动物模型表现出神经元自噬激活或受抑两种状态,因此,神经元自噬可能是参与抑郁症发病的一把双刃剑。中医认为本病的发生与肝郁脾虚密切相关,而中药对抑郁症神经元自噬的调节也呈现出多种多样的方式,其中调节神经元自噬的中药单体均具有保护神经或穿透血脑屏障的功能,而中药复方从其功效来看,多属于疏肝或健脾类方剂,与抑郁症的核心病机肝郁和脾虚相契合。从中医药对抑郁症模型神经元自噬的综合调节作用来看,其治疗抑郁症可能是多靶点、多通路和多系统共同作用的结果。该文基于神经元自噬参与抑郁症的病理学和治疗的新证据对当前研究的局限性进行了讨论,以期为后期同类研究及中医药抗抑郁研究提供思路和借鉴。
关键词:抑郁症;神经元自噬;发病机制;治疗机制;中医药治疗
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发布时间:2021-07-20
蛋白质组学在阿尔茨海默病早期诊断及中医药防治中的研究进展
王洋,赵福红,宫铭海,杨波,郑时嘉,周忠光
2021, 27(16): 227-236. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211696
摘要:阿尔茨海默病是目前最常见的神经退行性痴呆症,起病隐匿,进展缓慢,严重危害着老龄人口的身心健康,因此疾病早期诊断、积极预防、治疗就显得具有极其重要。生物标志物是疾病诊断的重要依据,寻找有价值的理想生物标志物有助于疾病早期识别。中医药防治阿尔茨海默病一直是科学研究的热点,以安全性高、不良反应小等优势受到广泛关注。蛋白质组学是一种识别蛋白质和研究蛋白质表征的先进组学技术,具有高通量、动态性、全面性特点,这与中医药诊疗的整体观念较为一致,为识别具有诊断潜力的生物标志物及中医辨证论治客观化、开发中药方剂精准靶向治疗提供了新的技术平台。尽管蛋白质组学技术日趋成熟,但在阿尔茨海默病诊疗领域应用中仍面临着挑战,存在蛋白质组学结果具有异质性、可复制性差,需要联合其他先进组学技术应用,通量测序成本较高等不足,未来需要不断更新、优化蛋白质组学技术,从而推进精准医疗、促进疾病防治和药物研发。该文通过对中国知网(CNKI),Pubmed数据库检索,就近年来蛋白质组学在阿尔茨海默病早期诊断及中医、中药防治方面的应用展开综述,以期为阿尔茨海默病诊断深入研究提供参考依据,为拓展中医药防治阿尔茨海默病研究提供重要思路。
关键词:蛋白质组学;阿尔茨海默病(AD);生物标志物;中药单体;中药复方;研究进展
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发布时间:2021-07-20
大黄䗪虫丸抗多器官纤维化作用机制的研究进展
梁静涛,霍之瀛,王敏,何晓艳,吴丽娟
2021, 27(16): 237-244. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211693
摘要:大黄䗪虫丸出自于张仲景的《金匮要略》,具有补虚缓中、生新祛瘀的功效。该方已经广泛运用于多种疾病的临床治疗,并取得了肯定的疗效。多器官纤维化的研究表明大黄䗪虫丸能够减缓心、肝、肾、肺等器官纤维化的发展进程,在临床和实验研究中均收获了良好的效果。该文通过综述大黄䗪虫丸治疗多器官纤维化的实验机制研究发现,虽然各器官纤维化发病部位不同,但其发病机制联系紧密,从中医角度来讲,这类疾病存在着共同病机,即均为“虚劳”状态,疾病日久导致病理产物“干血”的形成。从现代医学的角度来看,这类疾病均出现细胞外基质(ECM)沉积的病理改变,其发生发展都落脚在某些效应细胞[如肝星状细胞(HSC),胰腺星状细胞(PSC)等],并有着相同的细胞 [如肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),IL-1β,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)等]及某些关键通路[转化生长因子-β
1
(TGF-β
1
)/Smad,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt),脂多糖(LPS)旁分泌和自分泌机制等]参与其中。大黄䗪虫丸作为仲景治疗“虚劳干血”的经典方剂,治疗纤维化的作用可能是通过对上述机制的干预起到抑制ECM沉积,从而缓解疾病进程的作用。希望通过该综述为阐明大黄䗪虫丸治疗多器官纤维化的科学内涵提供文献支持,同时为进一步实验及临床研究奠定基础。
关键词:大黄䗪虫丸;多器官纤维化;实验研究;综述
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发布时间:2021-07-20
基于胃微环境探讨中医药防治胃癌前病变的机制
吴皓萌,黄绍刚,王凤云,温艳冬,唐旭东
2021, 27(16): 245-250. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211697
摘要:当前我国胃癌发病率为10.26%,死亡率为12.45%,分别位居我国恶性肿瘤发病和死亡的第2位与第3位,医疗资源消耗巨大,防控形势严峻。癌症发生发展一般经历癌前病变、原位癌和浸润癌3个阶段,将防治关口提前至癌前病变阶段的主动策略具有重要意义。随着消化内镜诊疗技术普及,胃早癌和重度异型增生的“早诊早治”得到一定程度解决,但多数胃癌前病变既不适宜内镜下黏膜切除,又缺乏有效治疗药物,加上长期临床动态监测,给患者带来巨大身心负担。胃肠道微环境主要是由胃肠道菌群、胃肠道化学屏障、机械屏障、免疫屏障和胃肠道神经等构成的动态平衡系统,新近研究表明胃微环境失衡是引起胃癌前病变发生发展的关键机制。中医认为胃癌前病变是正虚和邪实长期相互作用的结果,临证时常将其置于慢性胃炎背景下,结合Correa提出的炎-癌转化模式及中医病机演变规律辨证论治;其基本治则是扶正祛邪,基本治法是健脾清热化湿,并根据辨证结果,联合运用疏肝理气、化痰散结、活血化瘀、清热解毒和补益虚损等治法干预。该文论述了胃微环境失衡与胃癌前病变的相关性,从调节胃微环境方面总结归纳了中医药干预胃癌前病变的方法和机制,认为中医药通过调节胃内菌群紊乱、消退胃黏膜炎症和改善异常免疫反应等,改善胃微环境从而防治胃癌前病变。
关键词:胃微环境;胃癌前病变;中医药疗法
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发布时间:2021-07-20
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