最新刊期
      2023 年 第 29 卷 2 期

        中药材及其非药用部位的综合利用研究专题

      • 崔兵迪,郭辉,龚曼,刘晓谦,许二平,代丽萍,王智民
        2023, 29(2): 1-9. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220850
        摘要：目的基于蛋白激酶B（Akt）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路研究牛蒡根水提物（ALR-AE）对盐酸/乙醇（HCl/EtOH）诱导的大鼠急性胃溃疡的作用机制。方法雄性大鼠随机分为5组，分别为正常组、模型组、雷尼替丁组（35 mg·kg-1）和ALR-AE低、高剂量组（50、100 mg·kg-1），各给药组连续灌胃给药3 d，每天2次；末次给药30 min后，模型组及各给药组给予HCl/EtOH（以60% EtOH为溶剂，使HCl浓度为150 mmol·L-1）诱导大鼠急性胃溃疡。取各组胃组织样品，采用电子成像技术扫描溃疡面，ImageJ 1.8.0软件计算溃疡抑制率；分别采用苏木素-伊红（HE）和高碘酸-希夫（PAS）染色观察病理变化及糖蛋白的分布；比色法测定组织中氧化应激因子丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测组织样品中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素 （IL）-6、IL-1β的水平；通过蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测各组组织中磷酸化（p）-Akt/Akt、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-NF-κB抑制蛋白α（IκBα）/IκBα、p-IκB激酶α（IKKα）/IKKα和蛋白水平。结果与正常组比较，模型组胃组织损伤严重，胃溃疡面积显著增大（P<0.01）；MDA、TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著升高（P<0.01），GSH-Px和SOD水平显著降低（P<0.01），Akt、NF-κB p65、IKKα和IκBα的磷酸化水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，ALR-AE可显著降低HCl/EtOH诱导的胃组织损伤程度、提高溃疡抑制率（P<0.01），剂量依赖性地降低MDA、TNF-α、IL-6和IL-1β的水平（P<0.05，P<0.01），显著升高GSH-Px和SOD的水平（P<0.01），ALR-AE低剂量组可明显抑制Akt的磷酸化水平（P<0.05），ALR-AE高剂量组可明显抑制Akt、NF-κB p65、IKKα、IκBα的磷酸化水平（P<0.05，P<0.01）。结论ALR-AE对HCl/EtOH诱导的大鼠胃溃疡有显著的保护作用，其作用机制可能与抑制Akt/NF-κB信号通路介导的炎症介质表达及降低氧化应激水平有关。  
        关键词：牛蒡根水提物;盐酸/乙醇;急性胃溃疡;氧化应激;炎症介质;蛋白激酶B/核转录因子-κB（Akt/NF-κB）   
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        发布时间：2022-12-21
      • 王萍,梁少佳,张文文,冯伟红,易红,李春,郭凤倩,斯琴,符德静,龚曼,王峥涛,郑红初,刘晓谦,王智民
        2023, 29(2): 10-17. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220157
        摘要：目的建立杜仲叶药材中5种成分（桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、车叶草苷、芦丁）含量测定的一测多评法（QAMS），并验证其在杜仲叶药材含量测定中的可行性和适用性，为该药材质量标准的制定提供科学依据。方法采用高效液相色谱法（HPLC），Welch Boltimate™ C18色谱柱（4.6 mm×100 mm，2.7 μm），流动相甲醇（A）-0.2%磷酸水溶液（B）梯度洗脱（0~8 min，3%A；8~10 min，3%~11%A；10~26 min，11%A；26~27 min，11%~25%A；27~60 min，25%~32%A），流速0.6 mL·min-1，检测波长210 nm和254 nm。以绿原酸为内参物，建立其与另外4个指标成分之间的相对校正因子（f），并分别采用QAMS和外标法（ESM）测定14批杜仲叶药材中5种成分的含量。结果桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、车叶草苷和芦丁的f分别为3.13、1.45、2.64、0.56，在不同实验条件下重复性良好，相对标准偏差（RSD）<5.0%。测得14批杜仲叶中桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、车叶草苷、芦丁的质量分数分别为1.340~28.975、0.252~36.086、10.016~27.443、1.396~8.646、0.533~1.766 mg·g-1，QAMS与ESM比较，结果无明显差异（RSD<5.0%）。结论以绿原酸为内参物建立的QAMS可用于杜仲叶药材中5种成分的含量测定，该方法简便易行、结果准确。经综合评估，建议将绿原酸（质量分数不低于1.5%）、桃叶珊瑚苷（质量分数不低于1.0%）及京尼平苷酸（质量分数不低于1.0%）作为杜仲叶的质量控制指标，以较好地避免因2005—2020年版《中华人民共和国药典》指标成分（绿原酸）专属性差和含量限度过低而带来的潜在质量风险。  
        关键词：杜仲叶;一测多评法（QAMS）;桃叶珊瑚苷;京尼平苷酸;绿原酸;相对校正因子;质量标准   
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        发布时间：2022-12-21
      • 武少茹,冯伟红,杨立新,陈凯明,陈两绵,刘晓谦,高慧敏,王智民
        2023, 29(2): 18-26. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220553
        摘要：目的为了充分挖掘夏枯草药用部位果穗在采收加工、储存和运输过程中脱落的夏枯草种子的利用价值，对其进行性状、膨胀度和化学组成研究，并与市售的奇亚籽和兰香子进行比较。方法性状采用直接观察法；膨胀度按照2020年版《中华人民共和国药典》（四部）通则2101方法测定；采用超高效液相色谱法（UPLC）测定其中6种酚酸类成分（丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸）的含量，流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~7 min，2%~8%A；7~13 min，8%A；13~14 min，8%~17%A；14~30 min，17%A），检测波长280 nm；采用正己烷提取脂溶性成分，利用气相色谱-质谱法（GC-MS）鉴定其中的脂肪酸，并对5种含量较高的棕榈酸、油酸、硬脂酸、亚油酸和α-亚麻酸进行含量测定，DB-35MS毛细管柱（0.25 mm×60 m，0.25 µm），进样温度250 ℃，载气为高纯氦气，流速1.0 mL·min-1，分流比50∶1；采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，GC-MS鉴定其挥发性成分组成，WM-5MS毛细管柱（0.25 mm×30 m，0.25 µm），进样温度250 ℃，流速1.0 mL·min-1，分流比10∶1。结果夏枯草种子较奇亚籽、兰香子略小，三者种皮颜色明显不同；夏枯草种子具有较强的吸水膨胀特性，膨胀度17.4 mL·g-1，低于奇亚籽的25.2 mL·g-1和兰香子的35.6 mL·g-1。夏枯草种子含有丰富的酚酸和脂肪酸，挥发油含量极低，其中酚酸类成分以异迷迭香酸苷和迷迭香酸为主，二者质量分数分别为0.579%和0.392%；正己烷提取物中5种脂肪酸总量90.1%，总不饱和脂肪酸质量分数80.6%，其中α-亚麻酸质量分数50.0%，略低于奇亚籽的57.2%，与兰香子的50.0%相当。结论夏枯草种子吸水膨胀性好，酚酸和不饱和脂肪酸含量丰富，特别是具有高含量的α-亚麻酸，可对其进行功能食品开发，从而实现夏枯草废弃资源的综合利用。  
        关键词：夏枯草种子;奇亚籽;兰香子;膨胀度;酚酸;脂肪酸;挥发油   
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        发布时间：2022-12-21
      • 斯琴,高慧敏,李春,王智民,沈硕,闫利华,郭凤倩,向定华,王萍,符德静,刘晓谦,易红
        2023, 29(2): 27-36. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220646
        摘要：目的制备苦参碱脂质立方液晶纳米粒（MAT-LLCN）凝胶并考察其体外释放规律与经皮吸收行为。方法以包封率为指标，在明确单油酸甘油酯（GMO）与泊洛沙姆407（P407）最佳比例的基础上，以极端顶点混料设计法筛选MAT-LLCN最佳处方，并对其载药量进行考察。以预溶胀的卡波姆940为凝胶基质，与MAT-LLCN混合均匀，制得MAT-LLCN凝胶。采用偏光显微镜（PLM）及小角X射线散射（SAXS）对MAT脂质立方液晶（MAT-LLC）进行结构表征。采用改良Franz扩散池法比较MAT-LLCN凝胶及其普通凝胶的体外释放及透皮吸收特性，通过苏木素-伊红（HE）染色观察二者作用于皮肤不同时间所引起的皮肤结构变化情况。结果MAT-LLCN凝胶最佳处方为GMO-P407（9∶1）质量分数5.5%，MAT质量分数1%~6%，卡波姆940 0.6%，加水至足量。制得的MAT-LLC为体心型LLC。制备的MAT-LLCN凝胶体外释放符合Weibull方程（R2=0.954 0），释药机制为Fick扩散。体外透皮试验显示，MAT-LLCN凝胶中MAT的累积释放率、稳态释放速率及大鼠皮肤滞留量均明显高于普通凝胶（P<0.05）。皮肤HE染色结果表明，MAT-LLCN凝胶能够使皮肤角质层细胞排列疏松，同时能够维持真皮层细胞结构的稳定。结论制得的MAT-LLCN凝胶可通过快速打开皮肤角质层屏障，加快药物跨皮肤转运，并在真皮层中形成药物贮库，提示LLC在药物经皮给药领域具有良好的应用前景。  
        关键词：苦参碱;立方液晶纳米粒;凝胶;极端顶点混料设计;体外释放;体外透皮;滞留量   
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        发布时间：2022-12-21
      • 张阳,郭辉,连飞鹤,向西,李青霞,刘晓谦,王智民,代丽萍,许二平
        2023, 29(2): 37-44. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221249
        摘要：目的探讨中华雪胆醇提物（HC-EE）对盐酸/乙醇（HCl/EtOH）诱导的大鼠急性胃溃疡保护作用机制。方法采用脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7细胞体外评价HC-EE对炎症介质生成的抑制作用；采用HCl/EtOH（以60% EtOH为溶剂，使HCl浓度为150 mmol·L-1）诱导的大鼠急性胃溃疡模型评价HC-EE对急性胃溃疡的保护作用，雄性SD大鼠随机等分为5组，即正常组、模型组、HC-EE低剂量（30 mg·kg-1，HC-EE 30）组、HC-EE高剂量（60 mg·kg-1，HC-EE 60）组及雷尼替丁（35 mg·kg-1）组，各组连续灌胃给药7 d，每天2次，末次给药30 min后，模型组及各给药组给予HCl/EtOH诱导大鼠急性胃溃疡。对各组动物进行麻醉，分离胃组织，采用电子成像技术记录大鼠胃内壁溃疡面，运用ImageJ 1.8.0计算药物的溃疡抑制率，通过苏木素-伊红（HE）和高碘酸-希夫（PAS）染色观察大鼠病理组织学变化，利用Griess法测定细胞培养液中的一氧化氮（NO）含量，酶联免疫吸附试验（ELISA）测定大鼠血清（或细胞培养液）中白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-6、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、前列腺素E2（PGE2）的水平，通过蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠胃组织磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）/p38 MAPK、p-核转录因子-κB（NF-κB） p65/NF-κB p65蛋白表达水平。结果体外实验结果显示，HC-EE能明显下调模型细胞NF-κB信号介导的炎症介质NO，以及TNF-α、IL-1β、IL-6、VCAM-1的表达（P<0.05，P<0.01）。体内实验结果显示，与正常组比较，模型组大鼠胃组织损伤明显，溃疡面积显著增大，TNF-α、IL-6水平显著升高（P<0.01），PGE2含量显著降低（P<0.01），p38 MAPK、NF-κB p65的磷酸化水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，HC-EE呈剂量依赖性地改善HCl/EtOH诱导的胃组织损伤和炎细胞浸润，提高溃疡抑制率，显著减少TNF-α、IL-6的释放量（P<0.01），HC-EE 60组可以增加PGE2的含量（P<0.05）、显著抑制胃组织蛋白p38 MAPK、NF-κB p65的磷酸化水平（P<0.05，P<0.01）。结论HC-EE可改善HCl/EtOH诱导的大鼠急性胃溃疡，其作用机制可能与抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路介导的炎症介质表达有关。  
        关键词：中华雪胆醇提物;急性胃溃疡;炎症介质;p38丝裂原活化蛋白激酶;核转录因子-κB;白细胞介素;染色   
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        发布时间：2022-12-21

        经典名方

      • 王香香,王煜姣,李莉,贾庆玲,蒋凯林,杨珂鸣,凌江红
        2023, 29(2): 45-51. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221506
        摘要：目的基于线粒体自噬及PTEN诱导激酶1（Pink1）/E3泛素连接酶（Parkin）信号通路探讨柴胡疏肝散治疗功能性消化不良大鼠的作用机制。方法将40只SD大鼠按照随机分组原则分为正常组、模型组、柴胡疏肝散组、阳性药物组（多潘立酮），每组10只。正常组大鼠不予造模，其他各组采用夹尾刺激法制备功能性消化不良大鼠模型，每次造模结束后，正常组及模型组灌胃生理盐水，柴胡疏肝散组和多潘立酮组则分别用柴胡疏肝散（4.8 g·kg-1）及多潘立酮（4.5 mg·kg-1）灌胃。造模用药28 d后取材，检测每组大鼠胃排空率及小肠推进率；苏木素-伊红（HE）染色观察胃窦组织损伤情况；透射电子显微镜（TEM）观察胃间质细胞（ICCs）超微结构；免疫荧光共定位法观察细胞色素C氧化酶（COX Ⅳ）与Parkin的表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测微管相关蛋白1轻链3（LC3）、线粒体自噬相关蛋白PHB2、Pink1、Parkin、USP30的表达水平。结果与正常组比较，模型组大鼠胃排空率及小肠推进率均明显下降（P<0.05）；与模型组比较，柴胡疏肝散组胃排空率及小肠推进率均明显提高（P<0.05）。透射电镜结果显示，柴胡疏肝散可减轻胃窦组织线粒体肿胀程度。免疫荧光结果显示，与正常组比较，Parkin在线粒体的荧光表达显著提高（P<0.01）；与模型组比较，Parkin在线粒体的荧光表达显著减少（P<0.01）。Western blot结果显示，与正常组比较，LC3、Pink1、Parkin及PHB2蛋白表达均明显提高（P<0.05，P<0.01），USP30蛋白表达显著降低（P<0.01）；与模型组比较，LC3、Pink1、Parkin及PHB2蛋白表达均明显降低（P<0.05，P<0.01），USP30蛋白表达显著提高（P<0.01）。结论柴胡疏肝散治疗功能性消化不良的作用机制可能与抑制Pink1/Parkin信号通路的激活，从而抑制ICCs线粒体过度自噬有关。  
        关键词：柴胡疏肝散;功能性消化不良;线粒体自噬;PTEN诱导激酶1（Pink1）;E3泛素连接酶（Parkin）   
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        发布时间：2022-12-21
      • 李楠,杨海芯,曾珊,马庆宇,陈家旭
        2023, 29(2): 52-58. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221403
        摘要：目的研究桂枝芍药知母汤在胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠软骨破坏中的作用及其作用机制。方法取SPF级DBA/1小鼠36只，随机分组为正常组、模型组、甲氨蝶呤组（MTX）、桂枝芍药知母汤低、中、高剂量组6组。除正常组外，其余5组小鼠采用二次免疫法构建CIA模型，并在小鼠开始出现后肢肿胀当天分别予生理盐水，MTX（1.5 mg·kg-1，每周2次）和桂枝芍药知母汤低、中、高剂量（6.3、12.6、25.2 g·kg-1·d-1）灌胃，共给药4周。观察并记录各组小鼠足肿胀度变化，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、MMP-3、MMP-9、MMP-13含量，苏木素-伊红（HE）染色观察踝关节病理改变，番红固绿染色法观察软骨破坏，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠踝关节酪氨酸激酶2（JAK2）/转录激活因子3（STAT3）信号通路蛋白表达。结果与正常组比较，模型组足肿胀度，血清MMP-1、MMP-3、MMP-9和MMP-13含量和踝关节磷酸化（p）-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3的表达水平均显著上升（P<0.01），关节破坏加重。与模型组比较，MTX组和桂枝芍药知母汤低、中、高剂量组明显减轻小鼠足肿胀度（P<0.05，P<0.01），明显降低小鼠血清MMP-1、MMP-3、MMP-9和MMP-13含量（P<0.05，P<0.01），关节病理破坏减轻，明显降低踝关节p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3的表达水平（P<0.05，P<0.01）。结论桂枝芍药知母汤能减轻CIA小鼠的关节肿胀程度，抑制MMP-1、MMP-3、MMP-9和MMP-13的表达，改善关节软骨破坏，其作用机制与JAK2/STAT3信号通路有关。  
        关键词：桂枝芍药知母汤;类风湿关节炎;软骨破坏;胶原诱导性关节炎;酪氨酸激酶2（JAK2）/转录激活因子3（STAT3）信号通路   
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        发布时间：2022-12-21
      • 李沁园,代冬芳,吴佩锋,申继强,段方林,余瑶,李玉琴,李长兴
        2023, 29(2): 59-65. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221606
        摘要：目的探讨藏族药二十五味鬼臼丸通过经典Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路改善去卵巢大鼠的骨质疏松症的机制。方法将48只3月龄SD雌性大鼠随机分为模型组（OVX）、假手术组（Sham）、雌二醇组（E2）、二十五味鬼臼丸高、中、低剂量组，除假手术组大鼠摘取卵巢附近部分脂肪组织外，其余各组大鼠均摘取卵巢构建去卵巢骨质疏松大鼠模型。术后2周开始给药处理，雌二醇组给予戊酸雌二醇0.1 mg·kg-1，二十五味鬼臼丸组给予二十五味鬼臼丸高剂量800 mg·kg-1，中剂量400 mg·kg-1，低剂量200 mg·kg-1，模型组及假手术组给予同体积的生理盐水，连续灌胃12周，每日1次。取材后，苏木素-伊红（HE）染色法观察大鼠右侧股骨及腰椎的骨形态变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRAP5b）、Ⅰ型胶原C端肽（CTX-Ⅰ）、骨特异性碱性磷酸酶（BALP）、Ⅰ型前胶原氨基端原肽（PINP）、骨钙素（BGP）的水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测股骨中β-catenin、矮小相关转录因子2（Runx2） mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测β-catenin、Runx2和低密度脂蛋白受体相关蛋白-5（Lrp‐5）蛋白表达。结果与假手术组比较，模型组大鼠骨小梁紊乱且稀疏，骨小梁间连接较少，血清BALP、BGP、PINP水平显著下降（P<0.01），CTX-Ⅰ、TRAP5b水平显著升高（P<0.01）；股骨组织中β-catenin、Runx2 mRNA的表达水平下降（P<0.01）；Lrp‐5、β‐catenin和Runx2的蛋白表达显著下降（P<0.01）。与模型组比较，二十五味鬼臼丸高、中、低剂量组大鼠上述指标的异常改变得到不同程度的恢复（P<0.05，P<0.01）。结论藏族药二十五味鬼臼丸对于治疗去卵巢大鼠骨质疏松症具有较好的效果，其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关，通过上调信号通路中成骨相关基因的表达影响骨代谢。  
        关键词：藏族药;二十五味鬼臼丸;骨质疏松;Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路;植物雌激素   
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        发布时间：2022-12-21
      • 何莲花,栾慧杰,何娟,王小成,虎义平,王庆文
        2023, 29(2): 66-72. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222338
        摘要：目的观察古代经典名方二妙散（EMS）对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎（CIA）中辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）分化的影响。方法按体质量将20只DBA/1小鼠随机分为正常组、CIA组，EMS（5.4 g·kg-1）组及甲氨蝶呤（MTX，0.5 mg·kg-1）组。CIA组、EMS组及MTX组在第1天以等体积牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠，于第21天以等体积牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂于尾根部有别于第1次免疫部位免疫DBA/1小鼠建立CIA模型（此为第2次免疫），并于第2次免疫当天开始灌胃给药，除MTX为每周3次外，其余每天1次，共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分，第49天取材后，采用苏木素-伊红（HE）染色观察CIA小鼠关节滑膜炎症的情况；免疫荧光（IF）双标法检测CIA小鼠关节中CD4+T细胞中Th17细胞标志物白细胞介素-17（IL-17）和Treg细胞标志物叉头框转录因子P3（FoxP3）在关节滑膜中的表达情况；流式细胞术检测小鼠脾脏及淋巴结中Th17和Treg的细胞比例情况。结果与正常组比较，CIA组小鼠关节滑膜炎症情况明显，小鼠关节结构严重紊乱，关节软骨及骨破坏明显，骨侵蚀严重（P<0.01）；小鼠关节组织中Th17/Treg值显著升高（P<0.01）；小鼠脾脏及淋巴结中Th17的细胞表达比例显著增高（P<0.01），Treg细胞表达比例显著减少（P<0.01）；与CIA组比较，EMS组和MTX组两组小鼠关节结构均相对正常，骨侵蚀、骨破坏较轻，关节面相对完整光滑；EMS组和MTX组两组中Th17/Treg值显著降低（P<0.01）；小鼠脾脏及淋巴结组织中，EMS组、MTX组Th17细胞表达比例显著降低（P<0.01），Treg细胞的表达比例显著增加（P<0.01）。结论EMS通过调节Th17/Treg平衡，抑制CIA小鼠中Th17细胞的表达，促进Treg细胞的表达，进而治疗RA。  
        关键词：二妙散;胶原诱导型关节炎;辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）;分化   
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        发布时间：2022-12-21

        药理

      • 田颖颖,李依林,田时秋,裴海鸾,于尚玥,王子健,左泽平,王志斌
        2023, 29(2): 73-80. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221626
        摘要：目的研究去氢木香内酯（DL）对人肺癌细胞A549增殖、凋亡、自噬的影响，以期阐明其作用机制。方法采用细胞增殖与活性检测法（CCK-8）研究0、5、10、15、20、25 μmol·L-1 DL对人肺癌A549细胞增殖能力的影响。通过细胞克隆形成实验研究DL对A549细胞克隆形成能力的影响。选择10、20 μmol·L-1作为DL低、高浓度组，采用荧光染料Hoechst 33258染色及蛋白免疫印迹法（Western blot）观察DL对A549细胞凋亡的影响。通过吖啶橙染色检测DL给药后自噬溶酶体的变化，利用免疫荧光实验和Western blot检测DL对微管相关蛋白1轻链3（LC3）表达水平的影响，通过对比DL单独给药及其分别与自噬抑制剂巴佛洛霉素-A1（BAF-A1）、3-甲基腺嘌呤（3-MA）联合用药对A549细胞自噬的影响。通过Western blot观察DL对A549细胞信号通路调控的作用。结果与空白组比较，10、15、20、25 μmol·L-1 DL组A549细胞存活率均显著降低（P<0.01）；5 μmol·L-1 DL可显著抑制A549克隆细胞形成（P<0.01），说明DL能够抑制人肺癌A549细胞的增殖能力。与空白组比较，DL组（10、20 μmol·L-1）凋亡细胞数目增多，DL组（20 μmol·L-1）中凋亡相关蛋白聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶（PARP）和B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）表达明显上升（P<0.05，P<0.01），Bcl-2表达显著下降（P<0.01）。吖啶橙染色结果显示，与空白组比较，DL组（20 μmol·L-1）橙色荧光增强，说明自噬溶酶体的生成数量增多。DL组（20 μmol·L-1）还能使细胞内LC3橙色荧光颗粒明显增高，LC3 Ⅱ的表达水平显著上升（P<0.01），且加入自噬抑制剂后，A549细胞对DL作用的敏感性显著下降（P<0.01），表明自噬参与了DL诱导的A549细胞死亡。与空白组比较，DL组（20 μmol·L-1）能够使自噬相关蛋白3（Atg3）、自噬相关蛋白5（Atg5）的表达增加并使蛋白激酶B（Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、信号传导与转录活化因子3（STAT3）的磷酸化水平下降（P<0.05，P<0.01）。结论DL能够激活凋亡与自噬从而抑制人肺癌A549细胞增殖和克隆形成能力，其机制可能与抑制Akt/mTOR/STAT3信号通路有关。  
        关键词：去氢木香内酯;肺癌;凋亡;自噬;蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/信号传导与转录活化因子3（Akt/mTOR/STAT3）信号通路   
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        发布时间：2022-12-21
      • 高薇,曾海荣,乐佳敏
        2023, 29(2): 81-87. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221628
        摘要：目的观察鸦胆子苦醇对人胃癌HGC-27细胞增殖的影响及其作用机制。方法采用细胞增殖与活性检测法（CCK-8）检测不同浓度鸦胆子苦醇对HGC-27细胞增殖的影响；鸦胆子苦醇（7.5、15、30 μmol·L-1）作用于HGC-27细胞24 h，分析细胞克隆形成情况；活性氧荧光探针（DCFH-DA）检测细胞内活性氧（ROS）水平，脂质过氧化荧光探针（C11-BODIPY）检测细胞内脂质过氧化水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族7成员11（SLC7A11）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族40成员1（SLC40A1）、转铁蛋白（TRF）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1） mRNA水平和蛋白表达情况。结果与空白组比较，随鸦胆子苦醇药物浓度增大，HGC-27细胞存活率逐渐降低，其半数抑制浓度（IC50）为15.34 μmol·L-1；鸦胆子苦醇组（7.5、15、30 μmol·L-1）细胞克隆形成明显减少（P<0.05，P<0.01），呈现浓度依赖性。与空白组比较，鸦胆子苦醇组（7.5、15、30 μmol·L-1）细胞内ROS，脂质过氧化水平，细胞内铁离子浓度及细胞乳酸脱氢酶（LDH）泄漏均明显升高（P<0.05，P<0.01），呈现浓度依赖性。与空白组比较，鸦胆子苦醇组（15、30 μmol·L-1）SLC7A11、GPX4、SLC40A1的mRNA水平和蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01），TRF mRNA水平及蛋白表达明显升高（P<0.05，P<0.01），且呈浓度依赖性。与空白组比较，鸦胆子苦醇组（15、30 μmol·L-1）Nrf2和HO-1 mRNA水平和蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01），且呈浓度依赖性。结论鸦胆子苦醇可能通过抑制Nrf2/HO-1通路诱导铁死亡抑制HGC-27细胞增殖。  
        关键词：鸦胆子苦醇;胃癌;铁死亡;活性氧;脂质过氧化   
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        发布时间：2022-12-21
      • 游绍伟,易旭,赵琦,王文素,杨玲,何典城,童平珍,王学勇,詹亚梅
        2023, 29(2): 88-97. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230499
        摘要：目的探析萎胃通调汤对大鼠慢性萎缩性胃炎（CAG）的干预作用及其可能的机制。方法90只SD大鼠随机分为正常组，模型组，萎胃通调汤高、中、低剂量干预组，胃复春组6组，每组15只，采用N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）多因素复合造模法制备CAG大鼠模型。经组织病理学检测鉴定模型制备成功后，给药组分别灌胃给予18、9、4.5 g·kg-1·d-1的萎胃通调汤及0.45 g·kg-1·d-1胃复春水溶液，12周后取大鼠胃黏膜组织经苏木素-伊红（HE）染色后，光学显微镜下观察胃黏膜CAG相关病理学表现；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、免疫组织化学法（IHC）及蛋白免疫印迹法（Western blot）分别分析大鼠胃黏膜组织核转录因子-κB（NF-κB）信号通路关键指标mRNA及蛋白表达水平。结果CAG大鼠胃黏膜固有腺体排列和形态极不规则，伴不同程度减少或消失，固有层可见炎性细胞浸润，约48.4%出现肠上皮化生表现。萎胃通调汤处理后显著改善CAG大鼠胃黏膜固有腺体减少与肠化生等病理改变，呈一定的剂量依赖关系。与正常组比较，模型组大鼠胃黏膜组织环氧合酶2（COX-2）、NF-κB p65、白细胞介素（IL）-1α、IL-1β、IL-10、IL-8α、IL-8β mRNA及COX-2、NF-κB p65、IL-10蛋白表达水平显著上调（P<0.01）。萎胃通调汤及胃复春干预后CAG大鼠胃黏膜组织COX-2、NF-κB p65、IL-1α、IL-1β、IL-10、IL-8α、IL-8β mRNA及COX-2、NF-κB p65、IL-10蛋白表达水平显著下调（P<0.01），其中萎胃通调汤高剂量组相应指标表达水平接近正常组。结论萎胃通调汤能改善甚至逆转CAG大鼠病变胃黏膜，其作用机制可能与萎胃通调汤下调CAG大鼠胃黏膜组织NF-κB信号通路相关指标mRNA及蛋白表达水平有关。  
        关键词：慢性萎缩性胃炎;萎胃通调汤;核转录因子-κB信号通路   
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        发布时间：2022-12-21
      • 巩子星,徐曌,刘远,魏春绿,任伊宁,张丽,王悦,兴伟
        2023, 29(2): 98-103. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222236
        摘要：目的探究三七总皂苷对乳腺增生大鼠乳腺组织细胞凋亡的影响及调控机制。方法将60只雌性未孕SD大鼠随机分为正常组、模型组、三七总皂苷低、中、高剂量（10、20、40 mg·kg-1）组及三苯氧胺组（1.8 mg·kg-1），每组10只。采用肌肉注射苯甲酸雌二醇和黄体酮构建乳腺增生大鼠模型。按照实验分组剂量进行灌胃给药。每日1次，连续30 d。正常组和模型组大鼠给予每日等量的生理盐水灌胃。给药结束后，游标卡尺测量大鼠第2对乳头直径；留取组织标本，苏木素-伊红（HE）染色观察乳腺组织病理形态变化；免疫组织化学法观察细胞凋亡调控蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）、Bcl-2表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关蛋白表达。结果与正常组比较，模型组大鼠第2对乳头直径明显增大（P<0.05），乳房小叶体积增大，腺泡数量增加，乳腺组织呈现弥散性增生，乳腺组织Bcl-2蛋白表达及磷酸化（p）-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR明显增加（P<0.05），Bax表达明显降低（P<0.05），与模型组比较，三七总皂苷低、中、高剂量组和三苯氧胺组大鼠第2对乳头直径明显减小（P<0.05），乳腺小叶数量、腺泡数、分泌物量均较少，乳腺增生减轻，乳腺组织Bcl-2蛋白表达及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR明显降低（P<0.05），Bax表达明显升高（P<0.05）。结论三七总皂苷能够改善大鼠乳腺增生，其机制与调控PI3K/Akt/mTOR通路，促进乳腺组织细胞凋亡有关。  
        关键词：三七总皂苷;乳腺增生;磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白;凋亡;大鼠   
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        发布时间：2022-12-21
      • 张桐,侯俊林,江煜,杨丽萍,杜志欣,刘岳轩,丁申奥,杨雪明,闫毅楠
        2023, 29(2): 104-112. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221619
        摘要：目的观察菟丝子对恐伤孕鼠所产子代学习记忆能力及海马N6-甲基腺苷（m6A）相关修饰酶和m6A总水平的影响。方法将45只孕鼠随机分为空白组、模型组和菟丝子组。在孕1 d~孕19 d，模型组和菟丝子组采用旁观电击法造模，菟丝子组5 g·kg-1·d-1菟丝子水煎剂灌胃，其余2组等量纯净水灌胃处理，所产仔鼠延续母代分组。仔鼠于21 d龄进行水迷宫实验观察行为学改变；采用透射电镜观察仔鼠海马神经元发育情况；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）、免疫组化法（IHC）分别检测仔鼠海马甲基转移酶样蛋白3（METTL3）、甲基转移酶样蛋白14（METTL14）、Wilms瘤1相关蛋白（WTAP）、脂肪量和肥胖相关蛋白（FTO）、Alk B同源蛋白5（ALKBH5） mRNA及蛋白表达水平；采用高效液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）检测仔鼠海马m6A总含量。结果与空白组比较，模型组仔鼠平均潜伏期延长，进入目标象限次数、目标象限停留时间及穿越平台次数均显著减少（P<0.01）；海马CA1、CA3神经元结构损伤严重，线粒体肿胀，内质网扩张，部分突触结构模糊，数量较少；METTL3、METTL14、FTO、ALKBH5表达水平下降，m6A总水平明显下降（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，菟丝子组仔鼠平均潜伏期缩短，进入目标象限次数、目标象限停留时间及穿越平台次数均显著增加（P<0.01）；海马CA1、CA3神经元损伤程度减轻，线粒体、内质网结构较好，突触结构清晰、完整，分布密集；METTL3、METTL14、FTO表达水平上升，m6A总水平明显上升（P<0.05，P<0.01）。结论菟丝子能够有效改善孕期恐伤肾所致的子代学习记忆能力下降，保护海马神经元，上调海马METTL3、METTL14、FTO表达水平及m6A总水平。  
        关键词：菟丝子;恐伤肾;学习记忆;海马;N6-甲基腺嘌呤（m6A）   
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        发布时间：2022-12-21

        临床

      • 张梦,汪美霞,赵倩,张宇,陈一民,张艳云
        2023, 29(2): 113-118. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230195
        摘要：目的基于经颅多普勒超声（TCD）的血流动力指标，分析视觉模拟评分（VAS）、24项汉密尔顿抑郁量表（HAMD-24）评分与大脑前动脉（ACA）、大脑中动脉（MCA）和大脑后动脉（PCA）的平均血流速度（Vm）的相关性，以及头痛VAS评分与抑郁HAMD-24评分的相关性，同时探讨逍遥散联合帕罗西汀治疗肝郁血虚型偏头痛与抑郁共病的临床疗效。方法纳入62例2019年1月至2020年6月在安徽中医药大学第一附属医院脑病科门诊治疗的符合诊断标准的患者，随机分成观察组（32例）和对照组（30例），对照组给盐酸帕罗西汀片，观察组在其基础上加逍遥散汤剂服用，比较两组患者在治疗前后的相关指标变化。分析逍遥散对TCD指标（VmACA、VmMCA、VmPCA）和偏头痛、抑郁评分［包括VAS、头痛影响测验-6（HIT-6）、HAMD-24］及中医证候的影响。结果VAS评分、HAMD-24评分均与VmACA、VmMCA、VmPCA呈正相关（P<0.01）；VAS评分与HAMD-24评分呈正相关。与本组疗前比较，两组患者疗后的TCD指标VmACA、VmMCA、VmPCA水平均显著下降（P<0.01），两组患者HIT-6、VAS、HAMD-24评分均显著改善（P<0.01）。与对照组治疗后比较，观察组患者TCD指标（VmACA、VmMCA、VmPCA）水平显著降低（P<0.01），HIT-6、VAS、HAMD-24评分改善均优于对照组（P<0.01）。观察组患者有效率为90.6%（29/32），对照组患者有效率为63.3%（19/30），观察组患者有效率高于对照组，差异具有统计学意义（χ2=5.13，P<0.05）。两组患者不良反应发生情况差异无统计学意义。结论TCD血流动力学指标可有效地反映偏头痛与抑郁共病患者的脑部血流状态，且偏头痛与抑郁的发病及病情严重程度有一定的相关性。综合分析，逍遥散合帕罗西汀片治疗肝郁血虚型偏头痛与抑郁共病的疗效比单用帕罗西汀片更好，显著改善了患者脑部血流状态及偏头痛和抑郁障碍的症状和程度，可供临床参考。  
        关键词：偏头痛;抑郁;经颅多普勒超声（TCD）;逍遥散;帕罗西汀片   
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        发布时间：2022-12-21
      • 陆征宇,张倩茹,潘露茜,陆玲丹,朱冬雨,张弘菁,赵虹
        2023, 29(2): 119-124. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221826
        摘要：目的研究升陷汤治疗气虚型早期帕金森病自主神经功能障碍的安全性和有效性。方法将82例符合纳入标准的患者随机分为对照组和中药组，各41例，在西医规范化治疗基础上，中药组加用升陷汤，对照组加用安慰剂，连续治疗12周。治疗前后分别采用帕金森病自主神经功能评定量表、帕金森病统一评分量表、帕金森病中医气虚症状评分评估临床疗效，并对血清谷胱甘肽过氧化物酶和血清超氧化物歧化酶水平、每日普拉克索和多巴丝肼用量及安全性指标进行检测、评估。结果与本组治疗前比较，治疗后对照组帕金森病自主神经功能评定量表总分、消化系统症状评分、泌尿系统症状评分和体温调节功能评分显著升高（P<0.01），中药组帕金森病自主神经功能评定量表总分、消化系统症状评分、泌尿系统症状评分和体温调节功能评分明显降低（P<0.05，P<0.01），两组心血管系统症状评分、瞳孔调节功能评分、性功能评分无意义；治疗后与对照组比较，中药组帕金森病自主神经功能评定量表总分、消化系统症状评分、泌尿系统症状评分和体温调节功能评分明显降低（P<0.05，P<0.01），心血管系统症状评分、瞳孔调节功能评分、性功能评分差异无统计学意义。与本组治疗前比较，治疗后对照组帕金森病中医气虚症状评分总分、主证评分、次证评分无意义，中药组帕金森病中医气虚症状评分总分、次证评分降低（P<0.01），中药组主证评分差异无统计学意义。与本组治疗前比较，两组帕金森病统一评分量表积分、血清谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶水平、普拉克索和多巴丝肼每日用量差异无统计学意义；治疗后与对照组比较，中药组帕金森病统一评分量表积分、血清谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶水平、普拉克索和多巴丝肼每日用量差异无统计学意义。安全性指标未见异常。结论在西医规范化治疗基础上，给予升陷汤治疗可以有效改善气虚型早期帕金森病自主神经功能障碍患者的消化系统、泌尿系统和体温调节等自主神经症状及气虚症状，且具有良好的安全性。  
        关键词：帕金森病;自主神经功能障碍;中西医结合;升陷汤   
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        发布时间：2022-12-21
      • 王郁金,窦淑文,周源,王青瑛,谭从娥,王相东,邢文文,闫颖,苏衍进
        2023, 29(2): 125-132. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230196
        摘要：目的探讨湿热证、脾肾两虚证2型糖尿病腹泻（T2DD）患者肠道菌群的群落结构变化。方法选择2020年3月至2021年5月就诊于陕西中医药大学附属医院内分泌一科的2型糖尿病（T2DM）患者14例（T2DM组），湿热证T2DD患者12例（湿热证T2DD组）、脾肾两虚证T2DD患者13例（脾肾两虚证T2DD组），以及健康体检者12例（对照组）为研究对象，比较各组患者体质量指数（BMI）、空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2 h PBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）水平，收集粪便样本，粪便样本提取DNA建库，采用高通量16S rDNA测序技术，对4组患者肠道菌群群落组成及差异菌进行比较。结果与健康组比较，其余各组患者FPG，2 h PBG，HbA1c水平均明显增高（P<0.05）；Alpha多样性显示各组肠道菌群物种丰富度、均匀度和多样性差异无统计学意义；Beta多样性表明各组样本内部肠道菌群趋于一致，组间差异无统计学意义；在门水平下相对丰度前5的菌门分别为拟杆菌门（Bacteroidetes）、变形菌门（Proteobacteria）、厚壁菌门（Firmicutes）、放线菌门（Actinobacteria）和梭杆菌门（Fusobacteria），其中拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门为主要优势菌门。与对照组比较，3组T2DM患者的拟杆菌门的相对丰度均出现升高的趋势，厚壁菌门有下降的趋势；脾肾两虚T2DD组放线菌门的相对丰度显著高于其余各组；湿热证T2DD组厚壁菌门、梭杆菌门相对丰度显著低于其余各组；在属水平下相对丰度前10的菌属为Phocaeicola、拟杆菌属（Bacteroides）、Pseudescherichia、普氏菌属（Prevotella）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）、粪杆菌属（Faecalibacterium）、梭杆菌属（Fusobacterium）、罗氏菌属（Roseburia）、柠檬酸杆菌属（Citrobacter）、鲸杆菌属（Cetobacterium）；LEfSe分析结果显示在属水平，糖尿病患者的普氏菌属（Prevotella）、Mediterraneibacter、副拟杆菌属（Parabacteroides）、Fusicatenibacter相对丰度显著高于对照组；拟杆菌属（Bacteroides）、萨特氏菌属（Sutterella）可能是湿热证T2DD的特征肠道菌；Faecalibacterium、Limosilactobacillus、优杆菌属（Eubacterium）、Gemmiger、Enterocloster、别样杆菌属（Alistipes）、Parasutterella、Oscillibacter可能是脾肾两虚证T2DD的特征肠道菌。结论Bacteroides可能是湿热证T2DD的特征肠道菌，Parasutterella可能是脾肾两虚证T2DD的特征肠道菌，可为T2DD湿热证和脾肾两虚证患者的中医现代化机制研究、诊断及治疗提供参考。  
        关键词：2型糖尿病腹泻;湿热证;脾肾两虚证;肠道菌群;16S rDNA高通量测序   
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        发布时间：2022-12-21

        药学基础

      • 朱畇昊,许姣,张梦佳,董诚明,时博
        2023, 29(2): 133-140. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221618
        摘要：目的为了鉴定地黄miR166基因家族的成员，明确其家族成员在逆境下的响应模式。方法采用高通量测序技术获得小RNA数据库，筛选地黄miR166家族成员，利用RNAfold分析其前体结构，DNAMAN和MEGA分别进行保守性和进化性分析；采用TargetFinder软件预测地黄miR166家族成员的靶基因；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）分析其家族成员在响应非生物胁迫中的表达模式。结果鉴定到5条miR166，前体都具有完整的茎环结构；序列比对结果显示前体和成熟体保守性均较高；预测到48个miR166的靶基因，主要注释到HD-ZIP Ⅲ家族转录因子；表达特性分析表明，地黄经过内生真菌侵染后，miR160均呈上调表达，在非生物胁迫下其家族成员的表达情况不同，其中rgl-miR166b-5p在旱涝处理组及高低温处理中表达量分别都较空白组显著下调，与在内生真菌侵染下表达模式相反。结论该研究结果初步明确了地黄miR166家族在响应生物胁迫和非生物胁迫下的表达模式，为地黄今后育种改良及相关研究提供理论依据。  
        关键词：地黄;miR166;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）;胁迫;表达   
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        发布时间：2022-12-21
      • 李柯帆,索晓雄,李晓兰,杜晨晖,闫艳,裴香萍
        2023, 29(2): 141-148. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221315
        摘要：目的优化并建立多重位点聚合酶链式反应（PCR）体系同时鉴别酸枣仁、枳椇子和理枣仁及不同掺伪量，解决酸枣仁药材商品及其制剂的掺伪难题。方法通过分析比对酸枣仁及其伪品的内部转录间隔区（ITS）序列差异找到特异性单核苷酸多态性（SNP）位点，设计特异性鉴别引物，通过优化退火温度、循环次数及引物浓度，评估不同聚合酶种类和不同PCR仪等扩增条件对不同来源的酸枣仁、枳椇子及理枣仁样品进行特异性扩增，根据特异性扩增条带大小进行鉴别，并对最低检测限和掺伪检出限进行研究。结果在退火温度为63 ℃，循环次数为23次时，酸枣仁、枳椇子和理枣仁分别扩增出549、169、389 bp的特异性条带。该方法对酸枣仁和理枣仁的最低检测限为0.24 ng，枳椇子为1.2 ng，对酸枣仁、枳椇子和理枣仁的掺伪检出限分别为0.5%、2%和2%。结论该文建立的多重位点特异性PCR鉴别方法能同时准确鉴别酸枣仁、枳椇子和理枣仁，对解决酸枣仁药材掺伪问题提供基础研究，为控制酸枣仁药材质量安全及临床应用提供参考。  
        关键词：酸枣仁;枳椇子;理枣仁;多重位点特异性聚合酶链式反应（PCR）;鉴别;掺伪   
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        发布时间：2022-12-21
      • 吴月峰,刘金玲,陈定芳,朱志飞,刘有志,袁筱,周晋,贺福元
        2023, 29(2): 149-158. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221214
        摘要：目的基于液质联用联合网络药理学和分子对接技术比较桑源药材不同部位改善胰岛素抵抗（IR）物质基础异同。方法利用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术分析桑源药材不同部位的成分差异；用Sybyl-X2.1软件将成分与IR核心靶标进行对接，以Total Score≥5为遴选条件，绘制成分-疾病-靶点网络图；计算单靶点-成分对接评分数据集与总靶点-成分对接评分数据集的总量统计矩标准相似度（TQSMSS），筛选TQSMSS较高的靶点，构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，利用R语言对其进行基因本体论（GO）功能和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果通过色谱-质谱技术共分析得到桑源药材的41种活性成分，总量统计矩（相似度）法筛选桑枝、桑白皮、桑椹、桑叶TQSMSS≥0.75的靶点数量分别为20、23、30、27，4味桑源药材中GO富集分析靶点功能排序为桑椹>桑叶>桑白皮>桑枝，涉及到血糖稳态、糖代谢过程、葡萄糖跨膜转运等生物过程；4味桑源药材KEGG通路富集排序为桑椹>桑枝>桑叶>桑白皮，涉及到单磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMPK）能量代谢信号通路、胰岛素调控相关的信号通路、抗炎及抗氧化应激的信号通路等。结论该研究表明了桑源药材不同部位改善IR的物质基础存在差异，为桑源药材不同部位的开发提供了依据。  
        关键词：桑枝;桑白皮;桑椹;桑叶;胰岛素抵抗;高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）;分子对接;物质基础   
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        发布时间：2022-12-21

        数据挖掘

      • 黄湘宁,姚心怡,谭艳,喻嵘
        2023, 29(2): 159-165. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221511
        摘要：目的研究2型糖尿病（T2DM）动物模型的造模要素及检测指标，为建立经济易行且符合发病机制的动物模型提供参考，为相关发病机制、药效机制研究提供更佳的研究基础。方法通过在中国知网、万方、PubMed等数据库中检索近10年收录的T2DM动物实验文献，整理归纳实验动物种类、性别、造模方式、检测指标、方法等建立数据库，用Excel、SPSS 18.0进行数据分析。结果筛选纳入文献共249篇，T2DM动物实验造模多选用雄性SD大鼠；造模方式多为化学加饮食诱导，化学诱导药物以链脲佐菌素（STZ）为主，饮食诱导以高脂高糖饲料为主；检测指标包括血清生化指标、组织病理学、相关指数等。结论T2DM动物实验通常选用雄性SD大鼠，以高脂高糖饲料（含猪油10%、20%蔗糖）或高脂饲料（含40%~60%脂肪）喂养加小剂量STZ（30~40 mg·kg-1）单次腹腔注射诱导造模，具有操作简便、成模率高且符合疾病发病过程等优点，结合血糖、血脂谱、血清胰岛素、葡萄糖耐量试验或胰岛素耐量试验及组织病理学等指标，可为T2DM基础动物实验研究提供参考。  
        关键词：2型糖尿病;动物模型;数据挖掘;造模要素;检测指标   
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        发布时间：2022-12-21
      • 范星宇,廖晓倩,王梓仪,黄淑敏,胡思远,胡志希
        2023, 29(2): 166-174. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221616
        摘要：目的研究原发性痛经动物模型造模特点，为原发性痛经动物模型的规范化提供参考。方法通过检索原发性痛经动物模型的文献，建立数据库，归纳实验动物种类、造模方法、造模周期、药物剂量、药物注射方式、高频检测指标、阳性药种类等，并进行分析。结果纳入符合标准的171篇文献，原发性痛经动物模型以SD大鼠、Wistar大鼠和昆明种小鼠为主，大部分采用雌二醇+缩宫素联用制备大（小）鼠痛经模型，周期一般在9 d≤t≤12 d，大鼠剂量以苯甲酸雌二醇第1天和第10天0.5 mg·d-1，第2~9天0.2 mg·d-1，缩宫素为2 U·d-1的用法最为常见，在小鼠实验中，以己烯雌酚2 mg·kg-1·d-1、缩宫素20 U·kg-1·d-1的用法最为常见，注射方式中，缩宫素基本以腹腔注射为主，雌二醇（苯甲酸雌二醇、己烯雌酚）以皮下注射为主，检测指标偏重于扭体反应的相关行为学指标，或通过酶联免疫吸附测定检测检测子宫或血清中的相关生化指标，阳性药以西药布洛芬为主，中药以痛经宝为主。结论原发性痛经动物模型虽已成为热点，但现有综述阐述或不全面，比较笼统，相关实验文献的模型成膜标准、中医证型评价不够完善，此次通过对动物模型的大数据总结分析，并提出一些针对性看法，为建立规范、理想的原发性痛经动物模型提供指导和参考依据，以便开展此疾病的研究。  
        关键词：数据挖掘;原发性痛经;动物模型   
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        发布时间：2022-12-21

        学术探讨

      • 刘艳,邸继鹏,郭丛,章军,代云桃,宋宗华,刘安
        2023, 29(2): 175-180. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20220552
        摘要：经典名方复方制剂开发是最近几年研究的热点，承载着政府、学术界和产业界的殷切盼望。在其研发过程中，反映出很多中医药行业的相关问题，值得学术界深思。该文基于目前经典名方开发现状，梳理关键问题并进行深入剖析，结果表明存在三方面因素影响其发展应予以重视。一是中医药基础研究薄弱，影响了其健康发展；二是对经典名方复方制剂开发的理解不够深入，相关政策的制订需要更加合理；三是对经典名方开发的期望过高，影响了复方制剂研发进程。希望中医药行业能以此为契机，面对问题，提出解决方案，形成新的突破，推动中医药事业发展和进步。  
        关键词：经典名方;复方制剂;开发热潮;冷思考;影响因素;中医药;政策   
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        发布时间：2022-12-21
      • 张津铖,石英初,张林,徐春霞
        2023, 29(2): 181-185. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20230293
        摘要：石膏解肌之说由来已久，但限于矿物药的溶出及研究手段有限等现实问题，其临床推广及应用不足，深入探讨亦不足。该文通过梳理解肌法的脉络，总结出解肌法所针对的病机为“津液不足，兼表不和”，而石膏解肌的核心内涵为“清火存液，兼透表邪”；通过梳理解肌法的古今运用，结合配位化学的现代研究，从配伍角度入手，主以《伤寒论》和《金匮要略》中的经方为例，拓展了石膏解肌之内涵，总结出石膏的解肌作用不仅可以治疗外感后的肌肉不适症状，还可能影响脏腑功能，进而治疗内伤杂病，并由此提出“石膏配伍解肌法”，认为石膏与麻黄、葛根、防己、知母、人参、芍药、竹茹、生地黄、麦冬和葳蕤等药物配伍后，通过调整透散和清热的力度来更好地发挥解肌作用。该文附临床验案一则予以阐发，以期为石膏的临床运用提供参考，为其配伍使用的药物机制研究提供方向。  
        关键词：解肌;石膏;配伍;经方   
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        发布时间：2022-12-21
      • 李建省,王英明,闫燕顺,程建林,张雯年,康桂兰
        2023, 29(2): 186-194. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221526
        摘要：肾间质纤维化（RIF）是由多种病因导致慢性肾脏疾病的主要病理特征，结合中医“络病学说”“癥瘕理论”与现代医学肾脏病理特征，“肾虚络瘀，肾络癥瘕”是RIF的主要病机，正气亏虚，累及肾气，肾虚气化不利，痰热瘀毒等实邪阻滞肾络，相互胶结，形成癥瘕，积聚于肾络导致了RIF。自噬是细胞体内将受损或衰老的细胞器、变性的蛋白质等代谢产物进行降解与重吸收的过程，自噬参与了RIF发生的诸多环节，与RIF发生发展关系密切，将自噬与中医学结合研究发现，机体内生痰热瘀毒等实邪的代谢与自噬降解和重吸收功能相关，自噬在一定程度上是消除痰热瘀毒等实邪的方式，正气不足，累及肾气，肾虚气化不利，自噬功能不足，会引起痰热瘀毒等实邪累积，瘀阻肾络则易形成肾络癥瘕造成RIF，肾虚络瘀是自噬不足的基础，肾络癥瘕是自噬不足的微观病理表现，自噬不足与肾络癥瘕形成具有相同的病机演变，该文就RIF“肾虚络瘀，肾络癥瘕”病机，结合RIF-自噬病理机制，深入探讨“肾虚络瘀-自噬不足-肾络癥瘕”在RIF的相关性，全面诠释“肾虚络瘀，肾络癥瘕”病机的科学内涵，以期从中医理论阐述自噬在RIF中的作用研究奠定基础，为RIF的治疗及其机制研究提供新的研究思路和科学依据。  
        关键词：肾间质纤维化;自噬不足;肾虚络瘀;肾络癥瘕   
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        发布时间：2022-12-21
      • 林陶秀,张文娟,张悦健,孙新慧,霍超越,何甜甜,马小娜
        2023, 29(2): 195-202. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221505
        摘要：基于血清药理学为理论基础的体外细胞实验是研究中药药效机制的一种常见的研究方式，实验过程中筛选中药含药血清最佳干预浓度是整个实验的关键步骤。中药含药血清若稀释太过，或浓度太大，均可能导致出现假阴性或假阳性结果，最佳中药含药血清体积分数也可以减少后续实验分组数量，减少操作失误，因此筛选最佳干预血清体积分数对于研究中药药效机制的体外细胞实验具有重要意义。但筛选方法目前尚无统一的标准，查阅近20年国内外文献，从中药灌胃剂量、采血时间、血清稀释程度3个方面进行整理及分析，进而总结出最佳含药血清体积分数的筛选方法，为中药药效机理研究提供指导方向。筛选方法主要有“同剂量灌胃，同采血时间，不同体积分数” “不同剂量灌胃，同采血时间，同体积分数” “同剂量灌胃，不同采血时间，同体积分数” “不同剂量灌胃，不同采血时间，不同体积分数” “血清冻干粉干预法” “血清模拟西药体积分数梯度法”“纯血清干预法”。前2种筛选方法是目前相关实验研究较为常用的方式，以上筛选方法各有利弊，研究者应该根据实验的具体需求及实际情况进行合理选择。  
        关键词：细胞实验;含药血清;中药血清药理学;体积分数   
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        发布时间：2022-12-21

        综述

      • 杜一峰,刘元禄,郑浩,侯殿东,关雪峰
        2023, 29(2): 212-221. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221303
        摘要：右归丸作为补肾阳之剂，契合骨关节炎的中医病机。辽宁中医药大学附属医院国医堂刘元禄教授在临床使用中药保守治疗骨性关节炎疼痛时，发现由右归丸加减疗效显著，右归丸的骨关节炎机制在国内尚有团队研究，但复方的深入研究需要其中各成分单体的作用机制作为支撑。右归丸方中包含熟地黄、附子、肉桂、山药、山茱萸、菟丝子、当归、杜仲、鹿角胶、枸杞子10味中药，随着中药单体研究逐渐被重视，相关领域的研究在不断增加，故将其归纳总结对此方治疗骨性关节炎的机制研究有着重要意义。该文以此方组成中药的君臣佐使为纲领，利用中国知网（CNKI）、《中华人民共和国药典》2020年版第1部及ChemicalBook平台了解各中药的有效成分，并利用PubMed检索，归类综述与骨关节炎机制相交集的有效单体最新研究进展，主要包括抗炎、抑制疼痛、抗软骨细胞凋亡、抗氧化应激、抑制细胞外基质降解五种药理作用，涉及若干信号通路，将君臣佐使理论与分子机制相互渗透，分别评述，最后结合中医理论进行探讨，为今后关于此方向研究的学者提供理论参考。  
        关键词：右归丸;有效成分;骨关节炎;信号通路   
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        发布时间：2022-12-21
      • 刘亚鑫,魏雪娇,黄惠铭,欧阳里山,谢锦欣,王龙燕,刘东晓,屠鹏飞,胡仲冬
        2023, 29(2): 222-234. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.202201821
        摘要：癌症患病率和死亡率逐年上升，已成为当今世界上造成死亡的主要原因之一。癌症的诱因多种多样，遗传、辐射、致癌物等都可能诱发癌症，细胞周期调控的异常也是诱因之一。细胞周期是一个复杂的事件序列，细胞通过该事件重复其内容并分裂。细胞周期有高度的组织性和条理性，以确保遗传物质的完整性。该过程依赖于许多基因和蛋白的共同调节，当这些物质发生改变时，细胞周期出现异常，导致细胞增殖失去管控，细胞凋亡被抑制，最终导致肿瘤的发生。目前，肿瘤的治疗手段有传统的手术切除、放射治疗和化学药物治疗及靶向治疗等。中药来源广泛、不良反应小，是中医药文化的瑰宝，值得进一步地研究和开发。越来越多的研究发现，多种中药能够通过诱导细胞周期阻滞发挥抗肿瘤作用，从而提升肿瘤中晚期患者的生存质量，延长患者生存期。该文首先介绍了细胞周期各时期的特点和相关调控因子，列举了细胞周期异常导致肿瘤发生的临床和实验实例，接着综述了国内外靶向细胞周期抗肿瘤热点药物，如周期蛋白依赖性激酶（CDK）抑制剂、细胞分裂周期因子25（CDC25）抑制剂、ATR丝氨酸/苏氨酸激酶（ATR）抑制剂和细胞周期检查点激酶1（CHK1）抑制剂等，最后从细胞周期G0/G1期、S期和G2/M期3个方面切入，总结了近些年来中药通过诱导细胞周期阻滞发挥抗肿瘤作用的相关研究，以期为中药抗肿瘤作用研究提供一定的参考。  
        关键词：中药;抗肿瘤;细胞周期;研究进展   
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        发布时间：2022-12-21
      • 刘洁,范婧莹,何兰,程博,何迎春
        2023, 29(2): 235-243. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221727
        摘要：鼻咽癌（NPC）发病部位隐匿，早期不易被发现，因此诊断时多为中晚期且伴有转移。NPC侵袭和转移是一个复杂的生物学过程，受到多种因素的影响，研究发现基因的表达调控参与了鼻咽癌侵袭和转移，这是当前研究领域的热点。微小核糖核酸（miRNAs）是一种短小（约22个核苷酸）的非编码RNA分子，通过调控靶基因的转录和翻译，参与了恶性肿瘤细胞侵袭和转移的各个环节并发挥重要作用。在NPC中也发现了miRNAs的异常表达，而这些表达的变化对NPC的侵袭和转移发挥了重要的调控作用，基于目前的研究，总结了不同miRNAs作为抑癌基因在NPC细胞迁移和侵袭中的调控机制，主要包括其对靶基因、迁移和侵袭相关蛋白及重要信号通路的调节，涉及了上皮间质转化（EMT）、新生血管和淋巴管、肿瘤干细胞和放化疗抵抗等生物学过程；另一方面，中医药在NPC的防治，特别是放化疗后改善不良反应、降低转移率等方面疗效显著，因此，该文总结了中医药及中药活性成分经miRNAs发挥抑制NPC细胞迁移和侵袭的作用及机制，以期为后续深入研究和开发抗NPC新药提供一定的理论基础。  
        关键词：抑癌微小核糖核酸（miRNAs）;鼻咽癌;迁移;侵袭;中医药   
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        发布时间：2022-12-21
      • 朱利,吴鸿飞
        2023, 29(2): 244-252. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20221406
        摘要：动脉粥样硬化（As）是脂质沉积于血管壁引起的一种慢性血管疾病，以脂质代谢紊乱、氧化应激和炎症为主要特征，为冠心病、心力衰竭和中风等心脑血管疾病的病理基础。铁死亡是一种新型调节性细胞死亡方式，其本质为铁依赖性脂质过氧化物累积引起的细胞死亡，在形态学、生物化学和遗传学方面与其他类型的细胞死亡不同。铁死亡发病机制复杂，其机制主要与谷胱甘肽/谷胱甘肽过氧化酶4抗氧化系统活性、铁代谢、铁自噬、脂质过氧化程度等多个途径有关。铁死亡在As过程中起着重要作用，参与As血管内皮细胞损伤、巨噬细胞炎症、泡沫细胞形成及血管平滑肌细胞增殖迁移等多个病理过程，已成为As研究的新靶点。中医药是我国独有且富有价值的医学科学，具有深厚的理论沉淀和实践积累。研究表明中药复方、中药单体及活性成分可调控血管相关细胞铁死亡，对As的防治具有独特优势。该文主要对铁死亡在As各病理环节中的作用及相关中医药干预进行综述，旨在从铁死亡角度为中医药防治As提供新方向。  
        关键词：铁死亡;动脉粥样硬化;脂质过氧化;氧化应激;中医药   
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        发布时间：2022-12-21
      • 王金鑫,谢胜,黄茂光,罗峰,陈月莹,李玉玲,黎丽群
        2023, 29(2): 253-259. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222493
        摘要：腹泻型肠易激综合征（IBS-D）是以腹痛、大便含水量增加为主要表现的慢性肠道病变。该病病理机制复杂，由多因素共同促成。其中，肠黏膜屏障功能受损在IBS-D的发病中起重要作用。肠黏膜细胞间紧密连接（TJ）主要由闭合蛋白（Occludin）、紧密连接蛋白（Claudins）及闭锁小带蛋白（ZOs）组成，是机械屏障的重要成分，可显著影响黏膜功能。现代医学认为该病发病机制尚未明确，治疗常以对症处理，疗效往往不尽人意。中医学认为，肠黏膜上皮屏障功能与“脾为之卫”理论相对应，较多研究报道中药活性成分及复方可通过调控TJ蛋白恢复IBS-D大鼠肠上皮屏障功能，降低其通透性，减少肠腔内水和电解质渗出，从而改善症状。该文综述了TJ及其关键靶点蛋白与IBS-D的关系，以明确TJ在IBS-D病理生理的关键作用。同时，对靶向调控TJ从而可能治疗IBS-D的中医药进行总结，以期为IBS-D的治疗及进一步的药物开发提供理论依据。  
        关键词：腹泻型肠易激综合征;紧密连接;中医药;作用机制   
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        发布时间：2022-12-21
      • 王秋苑,刘又文,岳辰,张雪
        2023, 29(2): 260-269. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222136
        摘要：细胞焦亡是近年发现的一种细胞程序性死亡方式，由胱天蛋白酶（Caspase）介导，可导致细胞内炎性物质等释放到细胞外，诱发炎症级联反应。自身免疫性疾病（ADs）是一类机体免疫耐受受损、过量产生自身抗体，导致自身组织损害的疾病，其致病因素复杂，发病机制尚不明确。随着对细胞焦亡研究的深入，越来越多的结果表明细胞焦亡参与类风湿关节炎、溃疡性结肠炎、系统性红斑狼疮和银屑病等多种ADs的发病过程。临床治疗ADs多采用糖皮质激素类药物、抗风湿药物和生物制剂等，但是部分药物的治疗效果有限，且长期用药存在一些不良反应。中药治疗ADs在长期临床实践中证实了其安全性和有效性，具有多靶向性、不良反应小等特点，在控制病程方面有一定的优势。越来越多的研究发现多种中药组方制剂、单味药材和中药活性成分，发挥药效的机制可能是通过干预细胞焦亡从而治疗ADs。因此，该文综述了近年来中药对ADs中细胞焦亡影响的实验研究，以期为临床治疗和科学研究提供参考。  
        关键词：中药;自身免疫性疾病;细胞焦亡;实验研究   
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        发布时间：2022-12-21
      • 王春霞,葛俊李,李芳,赵鲲鹏,邵士俊,杨扶德,冯金梁
        2023, 29(2): 270-282. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20222339
        摘要：溃疡性结肠炎（UC）是以腹痛腹泻和黏液脓血便为主要临床表现、以结直肠黏膜及黏膜下层炎症损伤为主要病理改变的慢性非特异性消化道疾病。随着人们生活习惯和饮食结构的改变，UC的发病率及癌变率在世界范围内呈快速上升趋势，严重降低患者生活质量、造成巨大社会负担。迄今，其发病机制尚未阐明，西医临床中常用氨基水杨酸类、糖皮质激素和免疫抑制剂等药物缓解症状，然而长期使用会导致疗效降低、不良反应增多等问题。基于中医药多环节、多层次、多靶点的整合调节优势，中医药通过抑制炎症反应、缓解氧化应激、保护肠黏膜屏障、调节肠道菌群失衡等作用机制治疗UC的研究越来越多。鉴于此，笔者通过查阅近10年相关文献，综述了中药活性成分、单味中药提取物、中药药对、经典复方、中药联用化学药治疗UC的作用及机制，以期为寻求有效药物提供参考。  
        关键词：溃疡性结肠炎;中药活性成分;单味中药提取物;中药药对;经典复方;中药联用化学药;作用机制   
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        发布时间：2022-12-21
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