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最新刊期
2019
年
第
25
卷
22
期
本期电子书
封面故事
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下一期
药理
加味柴胡疏肝汤调控miRNA-204对癫痫小鼠海马自噬的影响
汪顺贵,玉倩,李华霞,李欢,卢玲,廖现秋,吴琼,李华琼,陈爱玲,刁丽梅,何乾超,蔡伦,梁霜
2019, 25(22): 1-7. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192137
摘要:目的:观察加味柴胡疏肝汤对癫痫小鼠海马微小非编码RNA 204(miRNA-204)的表达影响,探讨其发挥神经保护作用的机制。方法:将60只小鼠随机分为6组:正常组,模型组(盐酸匹罗卡品180 mg·kg
-1
),加味柴胡疏肝汤组(7 g·kg
-1
·d
-1
),加味柴胡疏肝汤+miRNA-204模拟物组(7 g·kg
-1
·d
-1
+2 μL),加味柴胡疏肝汤+miRNA-204抑制物组(7 g·kg
-1
·d
-1
+2 μL),卡马西平组(30 mg·kg
-1
·d
-1
),各灌胃2周;采用匹罗卡品使小鼠致痫,6组分别灌胃给药、抑制及过表达miRNA-204后,处死小鼠,取其海马组织,观察每组的指标情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠海马miRNA-204的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3),自噬相关标志性蛋白7(ATG7)的表达情况,苏木素-伊红(HE)染色观察每组小鼠海马病理学变化;透射电镜观察各组小鼠海马组织自噬情况。结果:与正常组比较,模型组小鼠miRNA-204表达显著降低(P<0.01),海马C1区病理改变最明显,ATG7,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达显著升高(P<0.01),自噬小体数量最多;与模型组比较,加味柴胡疏肝组小鼠海马组织miRNA-204表达明显升高(P<0.05),海马C1区病理改变减轻,ATG7,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达明显降低(P<0.05),自噬小体数量减少;加味柴胡疏肝汤+miRNA-204模拟物组小鼠海马组织miRNA-204表达显著升高(P<0.01),海马C1区病理改变最轻,ATG7,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达显著降低(P<0.01),自噬小体数量最少;与加味柴胡疏肝汤比较,加味柴胡疏肝汤+miRNA-204抑制物组上述指标变化趋势相同,变化幅度明显减少(P<0.05)。结论:加味柴胡疏肝汤可以改善癫痫小鼠海马组织病理改变,其作用机制可能是通过升高癫痫小鼠海马miRNA-204的表达,抑制神经元过度自噬,减少细胞凋亡。
关键词:柴胡疏肝汤;癫痫;miRNA-204;自噬
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发布时间:2021-02-09
黑逍遥散对AD模型小鼠海马区APP,PERK表达的影响
崔淑梅,吴红彦,马春林,曾庆涛,刘佳楠,朱凯敏
2019, 25(22): 8-14. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192101
摘要:目的:研究黑逍遥散对阿尔茨海默症(AD)模型小鼠海马神经元内质网应激的影响,包括行为学、组织病理学及淀粉样前体蛋白(APP),类蛋白激酶内质网激酶(PERK)等因子的表达。方法:使用SPF级的4月龄双转基因(APP/PS1)雄性小鼠42只随机分为黑逍遥散高、低剂量组(6,3 g·kg
-1
),盐酸多奈哌齐组(3.25 mg·kg
-1
)及模型组4组,同种系同月龄C57BL小鼠10只作为正常组。首先适应环境1周,经不同药物干预治疗2个月后,用Morris水迷宫行为学检测每组小鼠的学习和记忆能力;再治疗1个月后,通过光镜来观察每组小鼠海马区组织病理学改变;免疫组化、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠海马区细胞内质网组织中APP,PERK蛋白及mRNA的表达情况。结果:药物干预治疗后,与正常组比较,模型组小鼠的逃避潜伏期显著延长(P<0.01);模型组小鼠海马区内神经元严重损伤;模型组APP,PERK的表达量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠逃逸潜伏期均明显缩短(P<0.05,P<0.01);海马区内神经元损伤程度均减轻;APP,PERK的表达均明显降低(P<0.05)。结论:黑逍遥散能够显著改善AD小鼠的学习记忆能力,可能与减少内质网过度应激反应等方面来减轻AD小鼠认知能力损伤有关。
关键词:阿尔茨海默症;黑逍遥散;内质网应激
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发布时间:2021-02-09
清半夏多糖对过敏性哮喘模型大鼠肺组织MUC5AC mRNA的影响
黄聪,彭伟,魏大能,钟占琼,牟茂婷,魏蜀君,高永翔,吴纯洁
2019, 25(22): 15-21. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192103
摘要:目的:通过观察清半夏多糖对过敏性哮喘模型大鼠气道黏液分泌的作用,研究清半夏多糖为原药材发挥“燥湿化痰”功效“大分子”成分的物质作用基础。方法:SPF级Wistar大鼠60只,除正常组外,鸡卵清蛋白(OVA)与铝镁佐剂腹腔注射诱导致敏,OVA溶液雾化激发,建立过敏性哮喘大鼠模型。造模成功后大鼠随机平均分成5组,为过敏性哮喘模型组,阳性药组(孟鲁司特钠,5 mg·kg
-1
),清半夏多糖高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg
-1
)。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)上清液中白细胞介素-4(IL-4),γ-干扰素(IFN-γ)含量,BALF沉渣进行嗜酸性粒细胞(EOS)的计数检测;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC)mRNA的表达。结果:与正常组比较,过敏性哮喘模型组大鼠血清IL-4含量显著升高(P<0.01),IFN-γ含量显著降低(P<0.01),BALF中EOS计数显著升高(P<0.01);与过敏性哮喘模型组比较,孟鲁司特钠组、清半夏多糖高、中、低剂量组均能显著降低血清中IL-4的含量(P<0.01),清半夏多糖高、中剂量组能显著降低BALF中IL-4的含量(P<0.05,P<0.01),清半夏多糖中剂量组能显著增高血清中IFN-γ的含量(P<0.05),孟鲁司特钠组、清半夏多糖各剂量组均能显著降低BALF中的EOS计数(P<0.01)。HE染色结果显示,过敏性哮喘模型组大鼠肺组织出现明显病理改变,孟鲁司特钠组、清半夏多糖各组具有缓解作用。与正常组比较,过敏性哮喘模型组大鼠肺组织的MUC5AC mRNA表达显著升高(P<0.01);与过敏性哮喘模型组比较,孟鲁司特钠组、清半夏多糖高、中、低剂量组MUC5AC mRNA均显著降低(P<0.01)。结论:清半夏的“大分子”成分清半夏多糖,可能是原药材清半夏发挥“燥湿化痰”功效的物质作用基础。
关键词:清半夏多糖;过敏性哮喘模型大鼠;黏蛋白5AC(MUC5AC)
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发布时间:2021-02-09
糖耐康对自发性2型糖尿病小鼠NE,
α
1
-AT蛋白表达的影响
孙文,许光远,侯丹,吴丽丽
2019, 25(22): 22-27. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191221
摘要:目的:观察中药糖耐康(Tangnaikang,TNK)对2型糖尿病(T2DM)的ob/ob小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE),α
1
-抗胰蛋白酶(α
1
-AT)蛋白表达的调节作用。方法:将32只雄性SPF级ob/ob小鼠按体质量随机分为模型组(生理盐水),TNK高剂量组(TNK溶液16.04 g·kg
-1
),TNK中剂量组(TNK溶液8.02 g·kg
-1
)和TNK低剂量组(TNK溶液4.01 g·kg
-1
)。另取8只C57BL/6J小鼠作为正常组(生理盐水)。灌胃4周。每周记录小鼠一般状态和体质量和空腹血糖(FBG),第25天进行口服葡萄糖耐量(OGTT)实验,第27天进行胰岛素耐量(ITT)实验,灌胃结束后,取血清检测空腹胰岛素(Fins),NE,α
1
-AT,取脂肪组织检测NE,α
1
-AT,p-IRS1,葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组ob/ob小鼠体质量显著增大,糖脂代谢指标均呈糖尿病表现,血清和脂肪组织NE显著增加(P<0.01),α
1
-AT显著减少(P<0.01)。与模型组比较,TNK高剂量组体质量,甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),低密度脂蛋白(LDL)指标均显著减少(P<0.01),高密度脂蛋白(HDL)显著增加(P<0.01),FBG,Fins,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),曲线下面积(AUC)
ogtt
,AUC
ITT
均显著减少(P<0.01),血清和脂肪组织NE显著减少(P<0.01),α
1
-AT显著增加(P<0.01),脂肪组织p-IRS1和GLUT4明显增加(P<0.05)。结论:TNK能够降低ob/ob小鼠体质量,改善糖脂代谢,升高α
1
-AT水平,降低NE水平,调节IRS1/GLUT4信号的关键位点,可能是其改善中性粒细胞介导的脂肪组织IR的作用机制之一。
关键词:2型糖尿病;糖耐康;ob/ob小鼠;中性粒细胞弹性蛋白酶;α
1
-抗胰蛋白酶
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发布时间:2021-02-09
臭牡丹含药血清通过PI3K/Akt信号通路对肝癌细胞的影响
胡琦,朱定耀,谭小宁,朱克俭
2019, 25(22): 28-33. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191222
摘要:目的:从磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路角度探讨臭牡丹含药血清对肝癌MHCC97-H细胞的影响及可能的机制。方法:臭牡丹15%含药血清作用于MHCC97-H细胞,细胞增殖/毒性法(CCK-8)观察臭牡丹含药血清对细胞增殖的影响,以筛选最佳作用时间和浓度;Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测臭牡丹含药血清作用于细胞72 h后对PI3K/Akt信号通路中关键蛋白中第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN),磷酸化Akt(p-Akt)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)蛋白表达的影响;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测臭牡丹含药血清作用于细胞72 h后对核转录因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达的影响。结果:CCK-8结果显示,与空白组比较,臭牡丹含药血清对肿瘤细胞的增殖抑制作用呈剂量和时间依赖性。其中高剂量组抑制作用最为明显,在24,48,72 h的最大抑制率分别达到28%,32%,43%;流式细胞术结果显示,与空白组比较,随着臭牡丹含药血清浓度的增加,细胞的生长均受不同程度抑制,细胞的凋亡比例亦相应增加,72 h干预组抑制作用显著(P<0.01),臭牡丹含药血清组各时间段最大凋亡率达19.48%,19.72%(P<0.05);Western blot结果显示,与空白组比较,臭牡丹含药血清干预下各组PTEN表达量均升高(P<0.05),PI3K,p-Akt蛋白表达均减少(P<0.05);Real-time PCR结果显示,与空白组比较,臭牡丹含药血清可以下调NF-κB mRNA表达,上调TNF-α mRNA的表达(P<0.05)。结论:臭牡丹含药血清可以有效抑制MHCC97-H肝癌细胞增殖并促进其凋亡,可能与PI3K/Akt信号通路并影响其关键因子有关。
关键词:臭牡丹;肝癌细胞MHCC97-H;磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt);含药血清
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发布时间:2021-02-09
基于小鼠异食癖模型的常山碱盐呕吐机制
马丽娜,李健,李思迪,代宝强,张广平,侯红平,苏萍,王凤玉,叶祖光
2019, 25(22): 34-41. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191722
摘要:目的:探究常山碱盐(dichroa alkali salt, DAS)诱导呕吐的可能机制。方法:采用小鼠异食癖模型,分别观察3种不同机制的镇吐药,多巴胺受体拮抗剂甲氧氯普胺,5-羟色胺3(5-hydroxytryptamine 3,5-HT
3
)受体拮抗剂昂丹司琼,神经激肽-1受体拮抗剂阿瑞匹坦,对DAS所致小鼠体质量、正常饲料摄食量、高岭土摄食量及腹泻和死亡情况的影响,明确DAS可能的致吐途径;然后采用酶联免疫法针对性的检测DAS干预后不同时间点小鼠回肠和延髓中5-HT和P物质(substance P,SP)的表达情况,以确认DAS是否可影响这2种神经递质的变化。结果:配伍昂丹司琼和阿瑞匹坦后,连续给药第4天和药后第1天均可显著改善DAS诱导的小鼠摄食量降低现象(P<0.01),自连续给药第3天起均可显著改善DAS诱导的小鼠体质量降低现象(P<0.01),降低DAS诱导的小鼠腹泻率和死亡率,同时可有效拮抗DAS诱导的小鼠异食行为,但是甲氧氯普胺对上述指标则无明显改善作用;进一步检测呕吐相关神经递质,发现与空白组比较,给予DAS后4,12 h回肠和延髓中5-HT含量显著增加,48 h时回肠和延髓中SP含量显著升高。结论:小鼠异食模型可有效表征DAS诱导的呕吐现象,其诱导的呕吐行为可能与回肠和延髓中5-HT和SP含量升高有关,配伍昂丹司琼和阿瑞匹坦可有效拮抗DAS诱导的小鼠异食现象。
关键词:常山碱盐;呕吐作用;小鼠异食癖;配伍;镇吐药
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发布时间:2021-02-09
瓜蒌皮提取物基于PI3K/Akt/NO信号通路保护缺氧/复氧损伤心肌细胞的机制
楚冬海,张振秋
2019, 25(22): 42-48. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192104
摘要:目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/一氧化氮(PI3K/Akt/NO)信号通路在瓜蒌皮提取物保护心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用。方法:以2.5 mmol·L
-1
Na
2
S
2
O
4
诱导心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,实验分为正常组、模型组、瓜蒌皮提取物组及抑制剂组。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心肌细胞中一氧化氮(NO)的释放量及内皮型一氧化氮合酶(eNOS),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中Akt,eNOS,iNOS mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定Akt,磷酸化Akt(p-Akt),eNOS,iNOS蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组心肌细胞活力明显下降(P<0.01),心肌细胞NO释放量减少(P<0.01),心肌细胞中p-Akt,Akt及eNOS mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),而iNOS mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,瓜蒌皮提取物预处理24 h后能改善心肌细胞形态,明显提高心肌细胞活力(P<0.01)。瓜蒌皮提取物能促进p-Akt,Akt及eNOS mRNA和蛋白表达(P<0.01),抑制iNOS mRNA和蛋白的表达(P<0.01),增加心肌细胞NO的释放量(P<0.01)。PI3K抑制剂LY294002与瓜蒌皮提取物联合处理后,逆转了瓜蒌皮提取物对心肌细胞的上述作用,导致细胞存活率下降。结论:瓜蒌皮提取物可能通过激活PI3K/Akt信号通路上调eNOS,下调iNOS的表达,增加内源性NO的基础含量水平,发挥抗凋亡作用,从而改善缺氧/复氧损伤诱导的心肌细胞损伤。
关键词:瓜蒌皮提取物;缺氧/复氧损伤;心肌细胞;磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/一氧化氮(PI3K/Akt/NO)
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发布时间:2021-02-09
基于生物电阻抗评价大鼠脾虚水湿内停模型
李伟,陈冉,欧美凤,蒋沙莎,范胜楠,王运来,许钒
2019, 25(22): 49-54. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192138
摘要:目的:通过生物电阻抗法(BIA)与传统指标评价复合因素诱导脾虚水湿内停模型的成模标准。方法:将40只大鼠分为空白组和模型组,每组20只。空白组大鼠给予正常饲料喂养;模型组大鼠采用饮食不节结合劳倦过度法制备大鼠脾虚水湿内停模型14 d。观察大鼠的一般状况,烘干法检测大鼠粪便含水率,称量法检测水负荷指数,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测尿D-木糖排出量,血清总蛋白(TP),白蛋白(Alb)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾髓水通道蛋白1(AQP1)含量,同时运用实验动物体组成测定分析仪检测总含水率(TBW),细胞外含水率(ECF),细胞内含水率(ICF),脂肪量(FM),除脂肪量(FFM)和身体质量指数(BMI)等生物电阻抗指标。结果:与空白组比较,模型组大鼠逐渐消瘦,偶尔稀便,肛温基本不变,体质量,D-木糖排泄量,水负荷指数,TP和Alb含量显著降低(P<0.01),粪便含水率和肾髓AQP1蛋白表达显著升高(P<0.01);TBW,ECF和FFM升高,ICF,FM和BMI显著降低(P<0.01)。结论:饮食不节结合劳倦过度的复合因素诱导脾虚水湿内停模型大鼠会出现体脂率降低和胃肠水液代谢功能的减退,生物电阻抗法可以更直观全面的反映成模情况。
关键词:脾虚水湿内停;生物电阻抗;实验动物体组成测定分析仪;水液代谢
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发布时间:2021-02-09
临床
温肺止流丹治疗肺气虚寒型变应性鼻炎及机制
陈文明,李静波,王慧敏,王俊杰,柴峰
2019, 25(22): 55-59. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191424
摘要:目的:观察温肺止流丹治疗肺气虚寒型变应性鼻炎的疗效及安全性。方法:120例患者随机分为对照组和观察组,各60例。对照组给予枸地氯雷他定+糠酸莫米松,观察组给予温肺止流丹,疗程均为2周。观察治疗前后两组患者的生命质量问卷评分(rhino conjunctivitis quality of life questionnaire,RQLQ),鼻部症状总评分(total nasal symptom score,TNSS)和中医辨证肺气虚寒型评分(中医量表);分别抽取患者空腹静脉血检测血清炎症因子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ),白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)],免疫指标[免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE),嗜酸性粒细胞(eosinophils,EOS),嗜酸粒细胞趋化酞(eotaxin,EOT)]的含量;比较两组总有效率和不良反应发生率。结果:研究期间脱落5例。观察组总有效率91.5%(54/59),高于对照组的82.5%(47/57)(P<0.05);观察组患者RQLQ,TNSS和中医量表评分较对照组明显降低(P<0.05);观察组患者血清炎症因子(TNF-α,IFN-γ,IL-33)含量较对照组明显降低(P<0.05);观察组患者血清免疫指标(IgE,EOS)含量较对照组明显降低(P<0.05),EOT含量较对照组明显升高;观察组不良反应(头痛、口干、乏力、皮疹、心悸、消化不良和肝酶升高)发生率1.7%(1/59),低于对照组的19.3%(11/57)(P<0.05)。结论:温肺止流丹可明显改善肺气寒虚型变应性鼻炎患者的临床症状、血清炎症因子和免疫指标,不良反应发生率低。
关键词:变应性鼻炎;温肺止流丹;肺气虚寒型
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发布时间:2021-02-09
补中益气汤加味联合缩唇呼吸疗法对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者血清TNF-
α
,IL-8,IL-6,IL-1
β
,Cys-C的影响
黄明儒,许忠波,何帆,欧阳天赋,许明亮
2019, 25(22): 60-65. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191625
摘要:目的:观察补中益气汤加味联合缩唇呼吸疗法(pursed-lips breathing,PLB)对稳定期肺脾气虚兼血瘀型慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者血清肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-a,TNF-α),白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8),IL-6,IL-1β,血清胱抑素-C(Serum cystatin C,Cys-C)的影响。方法:2017年9月至2018年3月于江西中医药大学附属医院肺病科就诊的120例符合纳入标准的门诊或住院部COPD患者,采用随机数字表随机分为治疗组和对照组,对照组(60例)予噻托溴铵粉雾剂治疗(18 μg/次,1次/d),治疗组(60例)在前者基础之上予以补中益气汤加味联合PLB疗法,两组均为期6个月的治疗。6个月后观察两组患者治疗前后患者临床有效率,第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV
1
%),第1秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV
1
/FVC),6 min步行距离(six-minute walk distance,6MWD),测定血液中TNF-α,IL-8,IL-6,IL-1β及Cys-C水平。结果:6个月后治疗组的临床有效率为93.33%,对照组的临床有效率为86.67%,治疗组临床有效率高于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,两组治疗后FEV
1
%,FEV
1
/FVC,6MWD均增加(P<0.05);与对照组治疗后比较,治疗组FEV
1
%,FEV
1
/FVC及6MWD均增加(P<0.05)。与本组治疗前比较,两组治疗后血清TNF-α,IL-8,IL-6,IL-1β,Cys-C水平均减少(P<0.05);与对照组治疗后比较,治疗组TNF-α,IL-8,IL-6,IL-1β,Cys-C水平均减少(P<0.05)。结论:补中益气汤加味联合PLB疗法通过减少COPD患者气道中炎症细胞因子TNF-α,IL-8,IL-6,IL-1β水平,降低COPD慢性炎症的标记物Cys-C的水平,减少炎症反应发生,改善气流阻塞状况,提升COPD患者FEV
1
%,FEV
1
/FVC水平,从而达到改善COPD患者肺功能及生活质量的目的。
关键词:慢性阻塞性肺疾病;稳定期;补中益气汤;缩唇呼吸疗法;炎症细胞因子;血清胱抑素C
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发布时间:2021-02-09
丹鹿通督片治疗腰椎间盘突出症肾虚瘀阻证的疗效与机制
颜宾宏,牛乾,符致坚,杨帆,虞道锐,牛坤
2019, 25(22): 66-71. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191634
摘要:目的:观察丹鹿通督片治疗腰椎间盘突出症(LDH)肾虚瘀阻证的近期和远期疗效,及对髓核重吸收和免疫炎症因子的影响。方法:将160例患者随机按数字表法分成对照组和观察组各80例。对照组采用穴位按摩+针刺,1次/d。观察组治疗同对照组,并口服丹鹿通督片,4片/次,3次/d。两组疗程均连续治疗12周,并进行9个月的随访。采用视觉模拟(VAS)评分记录治疗前、治疗后1,2,3个月腰痛、腿痛程度;进行治疗前后日本骨科协会(JOA)评分和症状、体征评分;随访9个月,计算复发率,记录复发的时间和复发时的VAS和JOA评分;评价治疗后髓核吸收情况;检测治疗前后白细胞介素-1(IL-1),IL-17,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),基质金属蛋白酶-3(MMP-3)水平。结果:经秩和检验,观察组临床疗效优于对照组(Z=2.125,P<0.05),观察组JOA评分疗效优于对照组(Z=1.924,P<0.05);观察组治疗后1,2,3个月腰痛、腿痛VAS评分均低于对照组(P<0.01);治疗后观察组腰痛、腿痛VAS评分下降幅度均多于对照组(P<0.01);观察组症状、体征评分均低于对照组(P<0.01),观察组JOA量表各维度评分和JOA总分均高于对照组(P<0.01);观察组髓核完全吸收率为61.11%,高于对照组42.03%(χ
2
=5.138,P<0.05);观察组IL-1,IL-17,TNF-α和MMP-3水平均低于对照组(P<0.01);观察组复发率为23.61%,低于对照组的40.58%(χ
2
=4.668,P<0.05);观察组平均复发时间长于对照组(P<0.05),复发时VAS评分低于对照组(P<0.05),JOA总分高于对照组(P<0.05)。结论:在针刺与按摩治疗的基础上,加服丹鹿通督片治疗LDH(肾虚瘀阻证)近期可减轻疼痛和改善功能,提高临床疗效,远期可降低复发率,减轻复发程度,并可促进髓核重吸收和减轻神经根炎性刺激。
关键词:腰椎间盘突出症;肾虚瘀阻证;丹鹿通督片;复发率;髓核重吸收;免疫炎症因子
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发布时间:2021-02-09
参芪复方对初诊2型糖尿病气阴两虚兼血瘀证患者肠道微生态的影响
张新霞,刘万富,熊冉,杨铂潼,钟敏,刘雪辉,谢春光
2019, 25(22): 72-77. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191635
摘要:目的:观察参芪复方对初诊2型糖尿病(T2DM)气阴两虚兼血瘀证患者糖、脂代谢的影响,及对肠道微生态和血清促炎因子的干预效果。方法:将106例符合要求的患者采用随机按数字表法分为观察组54例及对照组52例,另择同期于该院体检中心40例健康志愿者作为健康对照组。对照组参照《中国2型糖尿病防治指南(2013年版)》,给予合理膳食、控制体质量、适量运动、限盐、控烟、限酒和心理平衡等生活方式干预。观察组在对照组治疗的基础上加用参芪复方内服,2次/d。两组疗程均为连续治疗8周。评价治疗前后空腹血糖(FBG),餐后2 h血糖(PBG),糖化血红蛋白(HbA1c),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),总胆固醇(TC),甘油三脂(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);检测治疗前后肠道菌群结构、数量;进行治疗后中医证候评分;检测治疗前后白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),IL-8,肿瘤坏死因子-α (TNF-α)水平。结果:观察组FBG,PBG,HbA1c,HOMA-IR水平均低于对照组(P<0.05);观察组生成操作分类单元(OTU)高于对照组(P<0.05);观察组拟杆菌属和克雷伯氏杆菌属丰度均高于对照组,放线菌属丰度明显低于对照组(P<0.05);观察组患者TC,TG和LDL-C水平均较对照组低,HDL-C高于对照组(P<0.05);观察组IL-1β,IL-6,IL-8和TNF-α水平均低于对照组(P<0.01);经秩和检验,治疗后观察组疾病疗效优于对照组(Z=2.134,P<0.05)。结论:参芪复方能调节初诊T2DM(气阴两虚兼血瘀证)患者的血糖和血脂,改善IR,并可改善患者肠道微生态失衡状态,减轻非特异性炎症反应,有着较好的临床疗效。
关键词:2型糖尿病;气阴两虚兼血瘀证;参芪复方;肠道微生态;炎症因子
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发布时间:2021-02-09
药物代谢
基于代谢组学分析青蒿琥酯治疗肝癌的作用机制
王惠国,王嗣瑶,韩鑫龙,李雨桐,袁立霞,谭晓梅,汤庆发,邢学锋,陈飞龙,尹雅蕾,唐玲
2019, 25(22): 78-85. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191548
摘要:目的:采用GC-MS联用技术探索青蒿琥酯治疗肝癌的作用机制,为该药物在肝癌治疗中的临床应用提供实验依据。方法:应用发光法细胞活力检测试剂盒(CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay)检测不同浓度青蒿琥酯(0,12.5,25,50,100 μmol·L
-1
)作用于人肝癌Huh7,SMMC-7721细胞24,48,72 h的活性。采用GC-MS联用技术分析青蒿琥酯作用于2种肝癌细胞(Huh7,SMMC-7721)24 h后代谢物的变化,利用Postrun Analysis 4.41工作站对数据进行预处理,采用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对两组差异代谢物进行分析,通过MetaboAnalyst 3.0软件对差异代谢物进行代谢通路分析。结果:与正常组相比,青蒿琥酯作用于2种肝癌细胞后,细胞内相同代谢物共有39种发生了显著变化,主要涉及到氨基酰-转运RNA(tRNA)生物合成,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,谷胱甘肽代谢5条代谢通路。结论:青蒿琥酯(12.5~100 μmol·L
-1
)均能够抑制肝癌细胞(Huh7,SMMC-7721)的生长,主要涉及到5条代谢通路,这可能是青蒿琥酯抗肝癌的作用途径。
关键词:青蒿琥酯;代谢组学;肝癌细胞;Huh7;SMMC-7721;氨基酸代谢;能量代谢
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发布时间:2021-02-09
UPLC-MS/MS分析注射用清开灵(冻干)中5种成分在正常大鼠和脑缺血大鼠体内的药代动力学行为
刘学,苏菊,杜鹏,姚文丽,杨青波,陆煜玫,吴林菁,姜丰,沈祥春,许乾丽,陶玲,茅向军
2019, 25(22): 86-91. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191452
摘要:目的:建立超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-MS/MS)测定注射用清开灵(冻干)中黄芩苷、栀子苷、绿原酸、胆酸和猪去氧胆酸在大鼠血浆中含量的方法,研究该制剂在正常和脑缺血模型大鼠体内的药代动力学行为。方法:大鼠随机分为正常组和脑缺血模型组。采用线栓法制备大鼠脑缺血模型,以生理盐水为溶媒,腹腔注射给药,分别在相应时间点取血,经处理后使用UPLC-MS/MS测定血药浓度,主要检测条件为流动相0.1%甲酸水(A)-乙睛(B)梯度洗脱(0~0.25 min,90%A;0.25~1 min,90%~75%A;1~2 min,75%~50%A;2~2.6 min,50%~45%A;2.6~2.65 min,45%~90%A;2.65~4.0 min,90%A),流速0.4 mL·min
-1
,柱温40 ℃,电喷雾离子源,负离子方式扫描。拟合药动学参数和计算生物利用度,分析注射用清开灵(冻干)中5种成分在正常和脑缺血模型大鼠体内处置过程的差异。结果:大鼠腹腔注射给予注射用清开灵(冻干)后,与正常组比较,栀子苷在脑缺血模型组大鼠体内的药-时曲线下面积(AUC
0-t
)显著降低(P<0.05),脑缺血模型组大鼠体内绿原酸的达峰时间(T
max
)显著提前(P<0.01);黄芩苷、胆酸和猪去氧胆酸在2组大鼠体内的药代动力学参数均无显著性差异。结论:注射用清开灵(冻干)在正常和脑缺血大鼠体内的处置过程存在一定差异,对该制剂临床治疗脑缺血疾病具有一定的指导意义。
关键词:注射用清开灵(冻干);脑缺血模型;药代动力学;芦丁;异鼠李素;内源性胆汁酸;腹腔注射
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发布时间:2021-02-09
药剂与炮制
基于16S rRNA技术分析黄连酒蒸前后对正常及2型糖尿病大鼠肠道微生物的影响
王瑾,冉倩,王琳,胡昌江,黄勤挽,张海
2019, 25(22): 92-102. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192447
摘要:目的:基于16S rRNA技术研究黄连酒蒸前后对正常和2型糖尿病大鼠肠道菌群的影响,从肠道菌群的角度探讨黄连酒蒸炮制“减毒增效”的原理。方法:采用高脂饮食结合链脲佐菌素复制2型糖尿病大鼠模型。正常和模型大鼠分别按0.8 g·kg
-1
(按生药量计)每天灌胃生黄连生品或酒蒸黄连水煎液,阳性药组按0.25 g·kg
-1
每天灌胃二甲双胍溶液,连续给药30 d。每周测1次血糖,于给药第27天进行口服糖耐量的测定。于第30天取粪便后麻醉大鼠,取血进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,解剖取结肠进行苏木精-伊红(HE)染色。基于16S rRNA基因测序技术对各个组大鼠肠道菌群的alpha多样性,beta多样性,菌群丰度及构成,及其与抗炎抗氧化的相关性等进行综合评价。结果:正常大鼠给予黄连生品或酒蒸黄连后,出现了一定的炎性反应,氧化-抗氧化系统失衡,结肠病理性损伤以及肠道菌群改变,表现出了一定的毒副作用,但酒蒸黄连的毒副作用低于生黄连。黄连酒蒸前后均能降低2型糖尿病大鼠的空腹血糖以及提高糖耐量,虽然酒蒸后作用有增强的趋势,但酒蒸前后无显著差异。2型糖尿病大鼠出现轻度的炎症反应和氧化-抗氧化系统失衡,表现为白细胞介素(IL)-6,核转录因子(NF)-κB和丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05,P<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),还原型谷胱甘肽(GSH),超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)活力明显降低(P<0.01),黄连酒蒸前后均能抑制炎症反应以及氧化-抗氧化系统失衡,且酒蒸黄连作用优于黄连生品;2型糖尿病大鼠出现明显的结肠病理性损伤,而黄连酒蒸前后均能减轻这种改变,且酒蒸黄连作用优于生黄连。2型糖尿病大鼠出现明显的肠道菌群紊乱,包括下调拟杆菌门(Bacteroidetes),厚壁菌门(Firmicutes)和Kiritimatiellaeota,上调变形菌门(Proteobacteria),放线菌门(Actinobacteria),酸杆菌门(Acidobacteria),绿弯菌门(Chloroflexi),蓝细菌门(Cyanobacteria)和疣微菌门(Verrucomicrobia),黄连酒蒸前后均能减轻肠道菌群紊乱,且黄连对Kiritimatiellaeota,Cyanobacteria和Verrucomicrobia的调节作用强于酒蒸黄连,酒蒸黄连可以显著降低Chloroflexi水平,而黄连生品无此作用。肠道菌群可能与黄连酒蒸前后的抗氧化能力具有一定的相关性。结论:黄连酒蒸前后可通过调节肠道菌群而对2型糖尿病大鼠起到治疗作用,且酒蒸黄连疗效更佳;黄连酒蒸后对肠道菌群的“毒副作用”降低。黄连酒蒸“减毒增效”的炮制机制与肠道菌群密切相关。
关键词:黄连;生品;酒蒸品;16S rRNA技术;2型糖尿病;肠道微生物;抗氧化活性
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发布时间:2021-02-09
2种根类药材醇沉絮体的分形维数测定方法建立
邵峰,俞梦莹,蒋美林,杨明,尚悦,刘荣华,张学瑜
2019, 25(22): 103-107. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191454
摘要:目的:建立黄芪与板蓝根2种根类药材醇沉絮体的分形维数测定方法。方法:分别以黄芪、板蓝根的水提醇沉絮体为研究对象,采用大津算法对醇沉絮体原始显微图像进行二值化处理,运用周长-面积法分别考察沉淀絮体取样体积、稀释倍数、图像放大倍数及图像采集位点数对分形维数的影响。结果:黄芪与板蓝根醇沉絮体均具有分形特征;确定这2个醇沉絮体取样体积在600~800 μL,样品稀释至5~20倍,显微图像放大200倍或400倍,选取4个图像采集位点时,能够得到稳定可靠的醇沉絮体分形维数。结论:建立的测定方法稳定可行,可为根类药材醇沉絮体的分形理论研究提供参考。
关键词:分形维数;醇沉;絮体;黄芪;板蓝根;显微图像;颗粒剂
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发布时间:2021-02-09
红曲发酵炮制前后对脾虚食积证小鼠的胃肠调节作用
罗佳,孙强,马祖兵,何祖新,李小芳
2019, 25(22): 108-114. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192252
摘要:目的:研究红曲发酵炮制对脾虚食积证小鼠的胃肠调节作用及其作用机制,为曲类中药的健脾消食作用机制探索新思路。方法:采用随机分组法将50只昆明小鼠分为5组,包括空白组、模型组、红曲未发酵组(1.17 g·kg
-1
·d
-1
),红曲发酵组(1.17 g·kg
-1
·d
-1
),多潘立酮组(3.9 mg·kg
-1
·d
-1
),每组10只,连续灌胃给药10 d。对比红曲发酵炮制前后对脾虚食积证小鼠行为学、体质量、进食量、胃内残留率和小肠推进率的影响。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测红曲对脾虚食积证小鼠血清中胃动素(MTL),胃泌素(GAS),5-羟色胺(5-HT)和血管活性肠肽(VIP)水平的影响;采用苏木素-伊红(HE)染色法研究红曲对脾虚食积证小鼠胃肠组织形态学的影响;基于细菌16S rRNA基因序列的V3-V4区,通过高通量测序平台Illumina MiSeq研究红曲对脾虚食积证小鼠肠道菌群结构的调节作用。结果:与模型组比较,红曲发酵后可恢复脾虚食积证小鼠的体质量和进食量,显著降低胃内残留率(P<0.01)和显著升高小肠推进率(P<0.01)。红曲可增加脾虚食积证小鼠胃肠激素MTL和5-HT的水平,降低VIP水平;红曲能改善脾虚食积证小鼠胃肠组织形态,改善脾虚食积证小鼠胃黏膜的轻微充血和局部腺体排列不整齐,显著升高脾虚食积证小鼠小肠绒毛长度、增加小肠黏膜厚度;红曲可以恢复脾虚食积证小鼠肠道菌群结构,增加有益菌双歧杆菌属和乳酸杆菌属的相对丰度,降低有害菌大肠埃希菌-志贺菌的相对丰度。结论:红曲发酵后能调节脾虚食积证小鼠的胃肠功能,其机制可能与调节胃肠激素水平、改善胃肠组织形态、恢复肠道菌群结构有关。
关键词:红曲;发酵炮制;脾虚食积证;胃肠调节作用;胃肠激素;胃肠组织形态;肠道菌群
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发布时间:2021-02-09
基于相对质量常数的姜厚朴饮片等级评价
张权,荆文光,邓哲,杜杰,兰青山
2019, 25(22): 115-120. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191450
摘要:目的:建立传统性状评价和现代内在质量评价相结合的姜厚朴饮片等级评价标准。方法:测定28批姜厚朴饮片的外观性状参数和内在药效指标成分(厚朴酚与和厚朴酚)含量,计算相对质量常数,假设所测样品的平均相对质量常数为100%,其120%以上列为一等,60%~120%列为二等,剩余列为三等。结果:姜厚朴饮片的相对质量常数范围为0.09~1.78。一级姜厚朴饮片相对质量常数≥0.64,二级姜厚朴饮片相对质量常数介于0.32~0.64,三级姜厚朴饮片相对质量常数≤0.32。结论:相对质量常数结合了传统外在性状指标和内在药效成分指标,能够客观、合理、科学的划分姜厚朴饮片等级,可为建立和完善该饮片的等级标准提供参考。
关键词:姜厚朴;饮片;相对质量常数;等级评价;厚朴酚;和厚朴酚;外观性状
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发布时间:2021-02-09
资源与质量评价
大蒜地上部分中1个新的酚苷类化合物
胡斌,匡海学,辛运杰,王秋红
2019, 25(22): 121-125. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192215
摘要:目的:研究大蒜Allium sativum地上部分正丁醇萃取部位的化学成分。方法:大蒜地上部分用70%乙醇加热回流提取,合并提取液减压回收溶剂得总提取物,总提取物稠膏以适量蒸馏水混悬,依次用石油醚、乙酸乙酯及水饱和正丁醇萃取,得石油醚萃取部位、乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位,对正丁醇萃取部位采用正相硅胶柱色谱,ODS柱色谱及制备HPLC等手段进行分离纯化,并根据所得化合物的理化性质和
1
H-NMR,
13
C-NMR,DEPT,HMBC及HR-ESI-MS等波谱数据鉴定其结构。结果:从大蒜地上部分正丁醇萃取部位分离得到7个化合物,分别鉴定为2-甲氧基-苯酚-1-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1),苯乙醇-4-O-β-D-木糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(2),反式白藜芦醇3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),豆甾醇(4),β-谷甾醇(5),豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),胡萝卜苷(7)。结论:化合物1属于酚苷类的新化合物,并将其命名为大蒜新苷J;化合物2~7属于首次从该植物中发现。
关键词:大蒜;地上部分;酚苷类;大蒜新苷J;植物甾醇类
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发布时间:2021-02-09
冬虫夏草内生真菌
Nigrospora oryzae
的化学成分分离鉴定
李小华,曹钰镁,金梦莹,龚雷强,郭大乐,邓赟
2019, 25(22): 126-131. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191514
摘要:目的:研究冬虫夏草内生菌Nigrospora oryzae的化学成分。方法:采用糙米对其进行扩大培养,利用柱色谱、制备色谱等手段进行分离纯化,并利用核磁共振(NMR),电喷雾质谱(ESI-MS)等手段对化合物进行结构鉴定。结果:分离得到15个化合物,分别为蜂蜜曲菌素(mellein,1),亚油酸(linoleic acid,2),2-(2-羟乙基)苯酚[2-(2-hydroxyethyl)phenol,3],(3R)-甲基亮氨酸甲酯[(3R)-mellein methyl ether,4],(3R,4S)-4-hydroxymellein(5),2-羟基苯甲醛(2-hydroxybenzaldehyde,6),3-苯丙-1,2-二醇(3-phenylpropane-1,2-diol,7),苯乙二醇(1-phenyl-1,2-ethanediol,8),恩镰包菌素B(enniatin B,9),(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,9α-三醇-6-酮[(22E,24R)-ergost-7,22-dien-3β,5α,9α-riol-6-one,10],环-(S-脯氨酸-R-缬氨酸)[cyclo-(S-Pro-R-Val),11],4-hydroxy-8-O-methylmellein(12),环-(S-脯氨酸-S-苯丙氨酸)[cyclo-(S-Pro-S-Phe),13],环-(D-脯氨酸-L-异亮氨酸)[cyclo-(D-Pro-L-Ile),14],环-(D-脯氨酸-L-亮氨酸)[cyclo-(D-Pro-L-Leu),15]。结论:化合物1~15为首次从该真菌中分离得到。
关键词:冬虫夏草;Nigrospora oryzae;内生菌;蜂蜜曲菌素
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发布时间:2021-02-09
油茶枯乙酸乙酯部位化学成分及其抗炎活性
焦兵,许承婷,黎青,覃江克,宋云飞
2019, 25(22): 132-137. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191012
摘要:目的:为了深入研究油茶枯化学成分及其药理活性,为其进一步开发利用奠定科学依据。方法:采用各种柱色谱手段对油茶枯醇提取物的乙酸乙酯部位化学成分进行分离,采用现代波谱手段鉴定其结构;并采用脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7建立体外炎症筛选模型,评价其抗炎活性,为其进一步开发利用奠定科学依据。结果:从油茶枯醇提取物的乙酸乙酯部位中分离获得10个化合物,其中8个为酚酸类化合物,2个为黄酮类化合物,分别为对羟基苯甲酸(1),原儿茶酸(2),没食子酸(3),没食子酸甲酯(4),没食子酸乙酯(5),异香草酸(6),3,4-二羟基苯甲酸乙酯(7),2-(3′,4′-二羟苯基)-1,3-胡椒环-5-醛(8),槲皮素(9),芦丁(10),其中化合物4~8为首次从该植物中分离获得。上述化合物对LPS诱导巨噬细胞RAW264.7产生炎症因子NO均具有良好的抑制作用,剂量依赖性明显,其中化合物8的活性最强。结论:油茶枯中的酚酸和黄酮类化合物在抗炎药物的开发、应用上具有良好发展前景。
关键词:油茶;油茶枯;乙酸乙酯部位;2-(3′,4′-二羟苯基)-1;3-胡椒环-5-醛
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发布时间:2021-02-09
基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的红花寄生及其寄主夹竹桃强心苷成分相关性分析
柴子舒,刘人源,李立章,黄蜚颖,苏本伟,朱开昕,李永华
2019, 25(22): 138-146. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192211
摘要:目的:建立超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)的红花寄生及其寄主夹竹桃强心苷成分鉴定方法,以桂花树寄主的红花寄生及其寄主桂花树样品为对照,通过与强心苷对照品或文献报道比对,鉴定其中的强心苷化学成分,分析红花寄生及其寄主夹竹桃强心苷成分的相关性,并且评价寄主对桑寄生药材质量影响。方法:采集红花寄生及其寄主夹竹桃样品,用桂花寄主及其红花寄生为对照样品,样品用70%乙醇超声提取。采用ACQUITY UPLC HSS T3 C
18
色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),以流动相0.1%甲酸水-乙腈梯度洗脱,流速0.6 mL·min
-1
,柱温40 ℃,进样量0.5 μL。以 Masslynx4.1软件分析数据,根据正、负离子模式质谱数据及元素组成分析,结合强心苷对照品和相关文献,对红花寄生及其寄主夹竹桃强心苷成分进行鉴定,并分析各成分之间的相关性。结果:共鉴定出26个强心苷成分,其中夹竹桃寄主鉴定出强心苷成分25个,夹竹桃寄主的红花寄生鉴定出强心苷成分5个,桂花寄主及其红花寄生没有强心苷。结论:UPLC-Q-TOF-MS/MS技术能快速、准确、全面地鉴定夹竹桃及其红花寄生强心苷成分,红花寄生本身不含强心苷,其强心苷为来自其寄主夹竹桃。
关键词:红花寄生;夹竹桃;强心苷;寄主;岩桂
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发布时间:2021-02-09
野三七鲨烯环氧酶基因的克隆及原核表达
王宝婕,朱灵英,周青青,张帅,马晓惠,徐福荣
2019, 25(22): 147-153. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192212
摘要:目的:对野三七中可能参与三萜皂苷合成的关键酶鲨烯环氧酶基因(PvfSE)进行克隆,并对其进行生物信息学分析和原核表达。方法:采用Trizol法提取野三七根的总RNA并反转录为cDNA第一链,基于野三七的转录组数据,设计PvfSE基因序列特异性引物,克隆基因全长,利用相关软件对该基因进行生物信息学分析,构建pMal-c2X-PvfSE原核表达载体,在大肠埃希菌中诱导表达重组蛋白。结果:PvfSE开放阅读框为1 887 bp,编码628个氨基酸,蛋白相对分子质量为68.8 kDa,理论等电点为9.28,脂肪系数为95.18,亲水性系数为-0.060,不稳定指数为40.36,属于不稳定蛋白。生物信息学分析表明,PvfSE具有2个跨膜结构域,无信号肽,可能定位在叶绿体或细胞质膜上,具有FAD/NAD(P)结合域和鲨烯环氧酶结构域,属于混合型蛋白。PvfSE与西葫芦和芒柄花中参与三萜皂苷合成的鲨烯环化酶(CpSE1,CpSE3,OsSE1,OsSE2)亲缘关系较近。此外,在大肠埃希菌BL21(DE3)中成功表达PvfSE的重组蛋白。结论:克隆得到PvfSE基因,并在大肠埃希菌中成功表达其重组蛋白,为进一步研究PvfSE的功能和解析野三七中三萜皂苷生物合成途径奠定了基础。
关键词:野三七;鲨烯环氧酶;基因克隆;生物信息学分析;原核表达
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发布时间:2021-02-09
甘草饮片等级标准
贡济宇,赵凌,赵丽茹,王莎莎,蔡广知
2019, 25(22): 154-158. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191512
摘要:目的:在传统经验鉴别的基础上,通过数理统计学分析方法,结合甘草饮片的外观性状与内在指标成分对其质量进行综合考察,为甘草饮片的品质评价和质量控制提供参考。方法:通过对44批甘草饮片的直径、质量、甘草苷含量、甘草酸铵含量等内容进行考察,结合市场饮片分级情况,依据分析结果合理构建甘草饮片的等级划分方法,制定甘草饮片的等级标准。结果:通过以上数据,主要将甘草饮片划分为4个等级。一等:平均直径>1.66 mm,平均质量>0.54 g,甘草苷质量分数>1.10%,甘草酸质量分数>2.12%。二等:平均直径在1.40~1.66 mm,平均质量在0.42~0.54 g,甘草苷质量分数在0.74%~1.10%,甘草酸质量分数在1.95%~2.12%。三等:平均直径在1.07~1.40 mm,平均质量在0.29~0.42 g,甘草苷质量分数在0.65%~0.74%,甘草酸质量分数在1.88%~1.95%。等外:平均直径<1.07 mm,平均质量<0.29 g,甘草苷质量分数<0.65%,甘草酸质量分数<1.88%。结论:该实验主要将传统经验鉴别和现代分析方法相结合,制定出甘草饮片的等级划分方法,该方法具有科学性、全面性、实用性等特点,适用于甘草饮片的等级评价。
关键词:甘草饮片;直径;质量;苷草苷;甘草酸铵
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发布时间:2021-02-09
基于傅里叶变换红外光谱及化学计量学方法的不同产地锁阳药材分类鉴别
顾志荣,马天翔,孙岚萍,马转霞,许爱霞,孙宇靖,祁梅,葛斌
2019, 25(22): 159-165. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191114
摘要:目的:基于傅里叶变换红外光谱(FTIR)及化学计量学方法实现不同产地锁阳药材的分类鉴别。方法:采集5个省(区)12个市(区/州/旗)的106批锁阳药材,以透射方式采集样品的FTIR光谱数据并进行光谱预处理,建立锁阳FTIR指纹图谱并进行光谱解析,以相关系数法计算不同产地锁阳的FTIR相似度,求取不同产地锁阳FTIR平均光谱的一阶导数(1D)光谱,以预处理后的1D光谱数据建立基于主成分分析(PCA)的软独立建模分类(SIMCA)鉴别模型,以前6个主成分建立正交偏最小二乘法(OPLS)鉴别模型。结果:不同产地锁阳FTIR指纹图谱的走势及主要吸收峰位基本一致,共指认出了16个共有特征吸收峰;不同产地锁阳FTIR指纹图谱的相似度及1D光谱均有显著、唯一的特征;所建SIMCA模型可实现不同省级产区锁阳的分类鉴别,所建OPLS模型可实现不同市级产区锁阳的精确分类鉴别,12个产地锁阳的分类鉴别体现了明显的地域聚集性特点。结论:基于FTIR及化学计量学方法能够实现不同产地锁阳药材的分类鉴别。
关键词:锁阳;傅里叶变换红外光谱;一阶导数光谱;软独立建模分类法;正交偏最小二乘法;产地鉴别
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发布时间:2021-02-09
数据挖掘
基于网络药理学探讨加味桃核承气汤治疗2型糖尿病的作用机制
许强,黄宏羽,郑美思,朱章志
2019, 25(22): 166-174. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192141
摘要:目的:基于网络药理学方法研究加味桃核承气汤干预2型糖尿病的潜在作用靶点。方法:基于TCMSP数据库及Uniprot数据库筛选出加味桃核承气汤有效成分及靶点基因。通过GeneCards数据库及OMIM数据库筛选出2型糖尿病的疾病靶点基因,并用Cytoscape软件构建“活性成分-靶点”相互作用网络图。将有效成分靶标与疾病靶标上传到STRING数据库,构建蛋白互作网络图(PPI),并计算其特征值,使用R语言对得到的PPI进行核心基因的筛选。最后,运用R语言对关键靶点进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:预测得到加味桃核承气汤治疗2型糖尿病的有效成分155个及共作有效靶点106个。有效成分中度值较高的为槲皮素(quercetin),山柰酚(kaempferol)及异鼠李素(isorhamnetin),作用靶点中度值较高的为雌激素受体(ESR1),过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARG)与雄激素受体(AR)。PPI网络中核心基因为表皮生长因子受体(EGFR)及ESR1等;GO富集分析显示会影响基因的转录、核受体活性及激素的受体结合、神经递质等;KEGG通路富集分析显示流体剪切应力和动脉粥样硬化通路为显著性最高的通路,其次为晚期糖基化终末产物及其受体通路。结论:通过网络药理学的方法预测加味桃核承气汤防治2型糖尿病的关键作用靶点及相关通路,结果提示此方剂具有多靶点、多通路等复杂机制,不仅表明加味桃核承气汤具有降糖的作用,而且其还具有抗炎、改善胰岛素抵抗、调节脂代谢等生物学功能。
关键词:加味桃核承气汤;2型糖尿病;网络药理学;潜在靶点
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发布时间:2021-02-09
基于Visual FoxPro和复杂网络分析的《四部医典》方剂数据库构建及其用药规律分析
文成当智,贡保东知,夺机仁青,卓玛措,齐美措,西纳卓玛,供秋措,罗让卓玛,东改措,张艺
2019, 25(22): 175-185. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191360
摘要:目的:构建《四部医典》方剂数据库,挖掘其用药规律,为研究藏族医学(简称藏医)用药规律提供参考。方法:收集《四部医典》中《秘诀医典》和《后续医典》记载的方剂,应用Visual FoxPro 9.0构建方剂数据库,结合藏医疾病的“十五会”及其治疗的“十八实践”双视角,应用Gephi 0.9.2复杂网络等方法进行分析。结果:《四部医典》共收载2 695首藏药方剂,构成每一方剂的药味均数为6.6味,其中≤7的占总方剂的69.2%,总方剂涉及的药物有1 002种,其中诃子、竺黄、红花、荜茇、干姜等节点度≥156,藏医特色药食两用药物酥油、白糖、青稞甜醅、蜂蜜、红糖等节点度≥91,根据十五会(skabs bco lnga)的疾病分类,伤科病会有495首方剂、热病会有323首、毒症会有278首、三因病会有197首等。根据十八实践(lag len bco brgyad)治疗方法,散剂有162首,汤剂有77首,催泻法有84首等。关联规则分析发现冰片、竺黄、红花、檀香等凉性药物的边权重≥59,石榴子、荜茇、肉桂、豆蔻等温性药物的边权重≥45。结论:《四部医典》具有以“凉-温”药性为双核心的椭圆式哲学用药规律,以“消-泻”(zhi-sbyong)二法为用药方法,隆-赤巴-培根的权重为用药辨证思维等特点,其中酥油、青稞甜醅、白糖等藏医特色送服剂的临床应用突出,体现了以整体平衡为重心的藏族文化哲学思想,具有“食疗加药物,药物加治法”的多维立体用药规律,对揭示藏医用药规律的研究具有积极意义。
关键词:《四部医典》;藏族药;方剂;数据库;用药规律;复杂网络;十五会;十八实践
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发布时间:2021-02-09
学术探讨
五方圆运动之自然解读及“五方病机”临证探讨
周海,朱章志,吴晓玲,黄宏羽,江丹,韩蕊,林明欣
2019, 25(22): 186-193. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191726
摘要:“圆运动”一词自《圆运动的古中医学》正式提出以来,近代医家对其多有研究与发挥。“圆运动”理论是中医学对我国古典哲学核心理论阴阳、五行学说的传承与发展,对于当代中医基础理论的研究和临床实践具有一定的指导意义。该文通过对先哲文献所提观点的总结,尝试从四季更迭、节气变化等角度论述五方圆运动的自然规律,阐明天地气机的变化情况,进而结合“天地人相应”的三才医学理念,探究五方圆运动对人体气机周流的影响,并通过经典方剂详细说明它在临证中的运用。邪之所凑,其气必虚。两虚相得,乃克其形。五方圆运动理论指出,疾病出现的原因在于气机的运行出现异常,包括自然气机、人体气机以及二者的相互感应。五方圆运动阐述了天地与人体气机正常情况下的运行规律,以及二者之间的相互联系,提示五方气机常运失司,可以扰乱圆运动的有序运转,影响人体疾病的发生、发展及变化,故临证处方用药亦应根据五方病机而有所侧重。知常达变,了解五方圆运动的变化规律,有助于当代医者从新的角度认识疾病,把握病机,从而达到临证获得更优疗效的目的。笔者通过对五方自然气机圆运动的解读,探讨五方病机与圆运动的关系以及临证运用,旨在探讨中医圆运动理论对疾病防治的指导意义,为当代中医药理论研究及临床实践提供有益参考。
关键词:五方圆运动;五方病机;周易;异法方宜论;气机
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发布时间:2021-02-09
半夏历代炮制方法考证
李瑞,付艳阳,吴萍,贺福元,周逸群,石继连
2019, 25(22): 194-205. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191457
摘要:通过查阅古今本草、文献及相关法典,对半夏的历代炮制方法进行探讨。半夏炮制方法经历了多样化的历史时期,自《黄帝内经》出现治半夏后相继出现净制、切制、熬制、姜制、煮制、药汁制、火炮、焙制、麸制、浆制、半夏曲、灰制、醋制、矾制、米制、炙制、炒制、生用、泔制、油制、酒制、面制、煨制、制炭、胆汁制、盐制等一系列不同的炮制方法和要求。其中生半夏、清半夏、姜半夏和法半夏沿用至今并被广泛使用,但不同时期半夏炮制品的炮制方法、辅料种类及用量等有较大差异,其炮制工艺及质量标准有待于进一步规范化和标准化。
关键词:炮制方法;半夏;法半夏;姜半夏;清半夏;考证;历史沿革
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发布时间:2021-02-09
综述
中药调节慢性荨麻疹免疫机制的研究进展
孙彬,刘文珊,李宏坤,王艳君
2019, 25(22): 206-211. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191430
摘要:慢性荨麻疹(chronic urticaria,CU)是皮肤科常见的疾病之一,具有过敏性、多发性、反复发作、迁延不愈的临床特点,患者临床症状主要以瘙痒、风团为主,或合并血管性水肿,部分患者甚至会出现胸闷、恶心等全身症状。其发病机制尚不明确,一般认为与自身免疫、慢性感染、凝血机制、维生素D缺乏等相关。其中自身免疫可能是引发慢性荨麻疹的重要病因之一。临床研究多以免疫球蛋白E,T细胞亚群CD4
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T细胞,CD8
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T细胞,细胞因子白细胞介素-2,干扰素-γ等,补体C3,C4为主开展机制探索。西药治疗多采用抗组胺药,第一代抗组胺药有明显的中枢神经抑制作用,且有镇静、抗胆碱等副作用,而第二代虽中枢神经抑制作用降低,却易发生心脏毒性,且停药后易复发。故寻找安全有效的中药治疗尤为重要,荨麻疹属于中医“瘾疹”范畴,病因病机为素体禀赋不足,卫外不固或饮食不节,湿热内蕴。应用祛风益气固表的玉屏风散等经典处方和自拟方,临床疗效确切且复发率低。此外通过降低患者体内免疫球蛋白E水平,改善CD4
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T细胞,CD8
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T细胞水平,调节相关细胞因子水平,升高补体C3,C4水平等途径,降低IgE水平或减少过敏毒素的释放,减少对肥大细胞的刺激,降低炎症反应的发生,调节机体免疫功能,获得满意疗效。故笔者将近5年中药调节慢性荨麻疹免疫机制的临床研究进行综述。
关键词:慢性荨麻疹;免疫机制;中药;调节
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发布时间:2021-02-09
生脉散现代药理作用及作用机制的研究进展
曹占鸿,潘建衡,李娜,曲晓波,韩冬
2019, 25(22): 212-218. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192208
摘要:生脉散始见于金代医家张元素的《医学启源》,由人参片、麦冬、五味子组成,方中人参为君药,大补元气,益肺生津止渴;臣药麦冬甘寒养阴、清热生津、且润肺止咳,人参片、麦冬相伍,其益气之功显著。佐以五味子之酸收、敛阴止汗,配人参则补固正气,伍麦冬则收敛阴津,是治疗气阴两虚的经典方。随着现代医家的深入研究,发现生脉散不仅对心血管疾病、中枢神经系统疾病、内分泌系统疾病有显著的治疗效果,而且对消化系统疾病、免疫系统与造血系统、休克的治疗中也有着良好的效果。由于我国人口老龄化、生活饮食不规律等问题日益严重,导致心血管疾病、老年痴呆、脑梗塞、糖尿病、肝功能障碍等疾病的发病率一直居高不下且有年轻化趋势,严重威胁着人类健康。因此,笔者在查阅大量国内文献的基础上,分别阐述生脉散及其加减方对以上疾病的治疗作用及作用机制,旨在揭示该方对以上疾病作用靶点及作用机制,为更好的治疗以上疾病及拓宽该方的临床应用提供理论依据。此外,为其他经典名方的研究提供参考思路。
关键词:生脉散;心肌缺血;脑缺血;糖尿病;保肝;抗休克
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发布时间:2021-02-09
小檗碱治疗2型糖尿病降血糖机制的研究进展
李爱云,杨京,张昕宇,张宁
2019, 25(22): 219-226. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20191806
摘要:近年来,随着人们生活水平的提高,2型糖尿病的发病率全球性增加,严重威胁人类健康。2型糖尿病是一种以高血糖为主要特征的渐进性代谢疾病。常规治疗包括控制饮食、使用口服降血糖药物或皮下注射胰岛素等。目前,除了化学药品如二甲双胍和噻唑烷二酮类以外,研究发现天然药物及传统中药复方具有温和的降糖作用或胰岛素增敏作用,还能够改善糖尿病并发症,在维持血糖稳态方面具有一定优势。小檗碱主要是从药用植物黄连中提取分离的一种具有多种药理活性的异喹啉类生物碱。目前认为小檗碱是治疗2型糖尿病最具前景的天然降糖药物之一。小檗碱降血糖的机制较为引人关注,该文就近年来小檗碱降血糖的药理作用机制研究进展进行综述,其中包括改善胰岛素抵抗、促进胰岛素及胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的分泌、抑制肝脏糖异生、减少肠道细胞对糖的摄取吸收、抑制氧化应激及炎性反应、调控肠道菌群等。阐明小檗碱降血糖作用机制有助于更好地认识小檗碱治疗2型糖尿病的药理作用,并为小檗碱治疗2型糖尿病的合理应用提供依据。
关键词:小檗碱;2型糖尿病;降血糖作用;研究进展
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发布时间:2021-02-09
丹酚酸B抗氧化应激损伤机制的研究进展
安丽平,于琨,耿海波,王伟
2019, 25(22): 227-234. DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.20192005
摘要:丹参始载于《神农本草经》,丹参具有活血祛瘀、凉血消痈的功效,近代药理学研究发现丹参具有强心、改善微循环、抗血栓等作用。临床当中常用丹参的水煎剂,丹参的水煎剂的溶解成分主要为丹酚酸类物质,其中丹酚酸类物质当中的丹酚酸B是丹参水溶性成分之一,具有很强的生理学活性,丹酚酸B是丹酚酸类物质当中抗氧化作用最强的。丹酚酸B在体内具有调节烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶,脱偶联型内皮一氧化氮合酶(eNOS),并通过调节Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3/血管内皮生长因子(JAK2/STAT3/VEGF)和肿瘤阻抑蛋白(p53),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)抗凋亡通路,抑制细胞外信号调节激酶/有丝分裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK),c-Jun氨基末端激酶/有丝分裂原活化蛋白激酶(JNK/MAPK),丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)和雌激素受体α/磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/核转录因子-κB(ERα/PI3K/Akt/NF-κB)抗炎通路,沉默信息调节因子2相关酶1/核因子E2相关因子2/Kelch样ECH联合蛋白1-抗氧化反应元件(SIRT1/Nrf2/Keap1-ARE)和NAD依赖性脱乙酰酶sirtuin-3/β细胞上的叉头转录因子1/超氧化物歧化酶(SIRT3/FOXO1/SOD2)抗氧化通路和促自噬通路抑制氧化应激,保护组织器官免受氧化损伤。本文从丹酚酸B抗氧化应激损伤的通路研究出发,综述近五年发表在国内外期刊的相关研究,为扩大丹酚酸B临床应用范围提供新的思路。
关键词:丹酚酸B;氧化应激;信号通路;研究进展
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发布时间:2021-02-09
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