摘要:目的:探讨健脾益肠散对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织热休克蛋白70(HSP70)蛋白和mRNA表达的影响。方法:将健康SPF级雄性SD大鼠60只,随机分为2组,正常组和造模组;造模组采用二硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法复制UC大鼠模型;待复制模型成功后将造模组随机分为5组,分别为模型组、柳氮磺吡啶组(0.3 g ·kg-1)以及健脾益肠散高、中、低剂量组(204,136,68 g ·kg-1),每组10只;灌胃相应药物21 d后,观察各组大鼠的一般状态和结肠黏膜组织损伤情况,免疫组化、蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量 PCR(Real-time PCR)分别检测大鼠结肠组织中HSP70的蛋白和mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜损伤评分显著升高(P<0.01),HSP70蛋白和mRNA表达均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组结肠黏膜损伤评分均显著降低(P<0.01),各给药组均可增加结肠组织HSP70的蛋白和mRNA表达(P<0.05,P<0.01),其中以健脾益肠散高剂量组最为明显(P<0.05,P<0.01)。结论:健脾益肠散可能通过促进HSP70的表达而达到对UC大鼠结肠黏膜的免疫保护,从而发挥治疗作用。  
摘要:目的:研究黄芪多糖对结肠癌细胞SW620增殖的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法:体外培养的SW620细胞,分别给予黄芪多糖(0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 g ·L-1),培养48 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测黄芪多糖对人结肠癌细胞SW620增殖的影响;用1.0 g ·L-1黄芪多糖,体外培养SW620细胞48 h后,碘化丙啶(PI)单染检测药物处理后的肿瘤细胞周期,Annexin V/PI双染检测药物处理后的肿瘤细胞凋亡率;分别加入0.25,0.5,1.0 g ·L-1黄芪多糖,体外培养SW620细胞48 h后,通过蛋白免疫印记法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3,Caspase-9和细胞色素C的表达。结果:黄芪多糖能够抑制人结肠癌细胞SW620的增殖(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖效应;与空白组比较,黄芪多糖1.0 g ·L-1处理组G2/M期比例增加,早期凋亡率增加,并且晚期凋亡率和总凋亡率均增加(P<0.05,P<0.01);与空白组比较,黄芪多糖0.25,0.5,1.0 g ·L-1组Caspase-3,Caspase-9,细胞色素C和促凋亡基因Bax表达量增加,Caspase-9前体和抗凋亡基因Bcl-2表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪多糖对结肠癌细胞SW620具有显著的抑制增殖和诱导凋亡作用,其诱导凋亡机制可能是通过线粒体凋亡通路实现的。  
摘要:目的:研究羚贝止咳糖浆止咳平喘效果及通过减轻肺组织病理性凋亡达到止咳平喘作用的实验研究。方法:将48只豚鼠随机分为模型组,阳性药组(川贝雪梨糖浆、氢溴酸右美沙芬组),羚贝止咳糖浆低、中、高剂量(1.27,2.55,5.1 g ·kg-1)组,每组8只,通过豚鼠枸橼酸引咳实验考察羚贝止咳糖浆镇咳作用。将60只豚鼠随机分为模型组,阳性药组(川贝雪梨糖浆、氨茶碱组),羚贝止咳糖浆低、中、高剂量(1.27,2.55,5.1 g ·kg-1)组,每组10只,通过豚鼠氯化乙酰胆碱、磷酸组胺混合引喘实验考察羚贝止咳糖浆平喘作用。取健康小鼠68只,利用烟叶和刨花各50 g早晚各熏蒸1次,1次30 min,连续熏蒸7 d,建立小鼠支气管炎模型,通过苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色法判定模型建立成功,小鼠支气管炎模型建立成功后通过免疫荧光组织化学法(immunofluorescent histochemistry,IHC)比较空白组、模型组、川贝雪梨糖浆组及羚贝止咳糖浆低、中、高剂量(2.14,4.28,8.56 g ·kg-1)组,肺部组织病理性凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(B celllymphoma/lewkmia-2,Bcl-2),自杀相关因子(factorassociatedsuicide,Fas)的积分吸光度,研究羚贝止咳糖浆对小鼠支气管炎模型肺部组织病理性凋亡相关蛋白Bcl-2,Fas蛋白表达量的影响。结果:羚贝止咳糖浆显著延长豚鼠咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数。延长豚鼠引喘潜伏期。HE染色结果显示成功建立小鼠急性支气管炎模型,免疫荧光化学法结果显示,羚贝止咳糖浆可显著增加炎症肺组织Bcl-2蛋白,减少Fas蛋白的表达。结论:羚贝止咳糖浆通过调控肺部组织凋亡相关蛋白Bcl-2,Fas抑制肺部组织病理性凋亡,帮助恢复组织正常结构减轻肺组织炎症发挥止咳平喘作用。  
摘要:目的:探讨左归丸对肾阴虚模型大鼠神经-内分泌-免疫功能的作用机制。方法:按随机数字将60只清洁级健康雄性Wistar大鼠分均为正常组(同体积生理盐水),模型组(同体积生理盐水),预防组(与造模同时,1 g ·kg-1左归丸)及左归丸低剂量组(造模后,0.5 g ·kg-1左归丸),中剂量组(造模后,1 g ·kg-1左归丸),高剂量组(造模后,2 g ·kg-1左归丸),以甲状腺片灌胃制备肾阴虚模型;所有组均连续灌胃21 d。采集脾、胸腺、尿液和血液样本,计算脏器指数;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测促肾上腺皮质素释放激素(CRH),促肾上腺皮质激素 (ACTH),皮质醇 (CORT),三碘甲状腺原氨酸(T3),四碘甲状腺原氨酸(T4),甲状腺刺激激素(TSH),环磷酸腺苷(cAMP),环磷酸鸟苷(cGMP),17-羟皮质类固醇(17-OHCS),白细胞介素-6 (IL-6),干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果:与正常组比较,模型组的T3,T4,cAMP,cGMP,IL-6,IFN-γ明显升高,TSH,cAMP/cGMP,脾指数,胸腺指数降低,差异显著(P<0.05,P<0.01),预防组各指标无明显变化。与模型组比较,左归丸各剂量组的T3,T4,cAMP,cGMP,IL-6,IFN-γ明显降低,TSH,cAMP/cGMP,脾指数、胸腺指数明显升高,差异显著(P<0.05,P<0.01);预防组T3,T4,CRH,ACTH,CORT,cAMP,cGMP,17-OHCS,脾指数,胸腺指数明显升高(P<0.01),TSH,cAMP/cGMP,IL-6,IFN-γ明显降低(P<0.01)。与预防组比较,左归丸各剂量组的T3,CRH,ACTH较高(P<0.05,P<0.01)。结论:左归丸能调节甲亢型肾阴虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴和下丘脑-垂体-甲状腺轴功能,改善免疫功能,这可能是干预甲亢型肾阴虚作用的机制之一。